專利名稱：：氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：氨基酸是重要的生理活性物質(zhì)，是生物體內(nèi)合成蛋白質(zhì)、激素、酶及抗體的原料，在生物體內(nèi)參與多種生物化學(xué)過(guò)程活動(dòng)。氨基酸及其衍生物因其具有化學(xué)穩(wěn)定性和低毒性的特點(diǎn)而備受人們的關(guān)注，其結(jié)構(gòu)與性質(zhì)的特殊性，使得氨基酸在生物、醫(yī)藥、微生物學(xué)方面得到了廣泛的應(yīng)用，其衍生物可作為新型的抗貧血、抗腫瘤及殺菌藥物等。除作為肽及蛋白質(zhì)的合成原料外，氨基酸及其衍生物如氮取代或碳取代的酸、酯、酰胺、酰胼、鹽以及金屬配合物等大多也具有生物及生理活性，其中某些天然或人造氨基酸有抗腫瘤活性。當(dāng)氨基酸或多肽與生物分子連接后，可改變活性分子的性質(zhì)，增強(qiáng)對(duì)靶細(xì)胞的作用和選擇性，還可增強(qiáng)藥物對(duì)細(xì)胞膜的透過(guò)性，提高生物利用度。氨基酸在醫(yī)藥上目前主要用來(lái)制備復(fù)方氨基酸輸液，也用作治療藥物和用于合成多肽藥物。氨基二硫代甲酸酯類化合物廣泛的應(yīng)用于治療多種疾病，在醫(yī)藥行業(yè)有很大的用途，如用于治療慢性的酒精中毒、治療重金屬中毒、抗菌、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤等等。氨基二硫代甲酸酯類化合物不僅具有很好的藥物活性，同時(shí)也是一類很好的含硫配體，可以和多種金屬絡(luò)合，形成M-S鍵，含硫配體因其具有蛋白質(zhì)中M-S鍵的類似作用，能夠很有效地解釋酶的作用機(jī)制，因此對(duì)該類化合物的研究越來(lái)越多的受到了人們的重視，結(jié)構(gòu)新穎的氨基二硫代甲酸酯類化合物已經(jīng)開始進(jìn)行臨床前研究。一直以來(lái)，人們對(duì)于氨基酸及其衍生物的研究給予了很大的關(guān)注，但截至目前，將氨基酸及其衍生物引入到氨基二硫代甲酸酯的分子中進(jìn)行生物活性的研究，尤其是抗乙肝病毒活性的研究在國(guó)內(nèi)外還鮮見報(bào)導(dǎo)。本發(fā)明用簡(jiǎn)單易行的合成方法，將氨基酸酯通過(guò)二硫代酯鍵和多種鹵代烴鏈接，合成了一系列氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，所用試劑普通易得，反應(yīng)條件溫和，實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)捷。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于，提供一種氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物及其制備方法和用途，該化合物以氨基酸和氯化亞砜為原料，合成中間體氨基酸甲酯鹽酸鹽，或直接采用市售的氨基酸甲酯鹽酸鹽，然后在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物。該方法所用試劑普通易得，反應(yīng)條件溫和，實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)捷。合成的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物對(duì)乙肝病毒具有很好的抑制作用，對(duì)Hela人宮頸癌細(xì)胞、MCF-7人乳腺癌細(xì)胞、HepG2人肝癌細(xì)胞、HL-60人白血病細(xì)胞也具有較好的抑制作用。本發(fā)明所述的一種氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，該化合物的結(jié)構(gòu)式為通式I<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>通式I其中*為氨基酸的光學(xué)中心；隊(duì)為甘氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、丙氨酸、亮氨酸或纈氨酸的側(cè)鏈；R2為甲基、3-丙烯基或芐基。所述化合物的制備方法，按下列步驟進(jìn)行a、將氨基酸加入到甲醇中，室溫?cái)嚢柘碌渭勇然瘉嗧?，攪拌回?-8小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，剩余物用二氯甲烷洗滌后得白色固體；b、將步驟a所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體氨基酸甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；c、將步驟b氨基酸甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物加入到甲醇中，再加入氫氧化鈉，冰水浴冷卻下滴加二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入鹵代烴，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3-4小時(shí)，過(guò)濾，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，得到的粘稠物再溶于乙酸乙酯，水洗后，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑后用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶或柱層析純化即可得到氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物；或直接采用市售氨基酸甲酯鹽酸鹽加入到甲醇中，再加入氫氧化鈉，冰水浴冷卻下滴加二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入鹵代烴，繼續(xù)室溫?cái)嚢璺磻?yīng)3-4小時(shí)，過(guò)濾，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，得到的粘稠物再溶于乙酸乙酯，水洗后，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑后用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶或柱層析純化即可得到氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物。步驟c所述柱層析純化中的洗脫劑為體積比石油醚乙酸乙酯=51，其中石油醚沸程為60-90°C。所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，該化合物的任意一種化合物作為活性成分，單獨(dú)或結(jié)合一種或幾種藥學(xué)上可接受的、惰性的、無(wú)毒的賦形劑或載體組成藥物組合物。所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，作為制備抗乙肝病毒藥物中的用途。所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，作為制備治療宮頸癌、乳腺癌、肝癌和白血病的藥物的用途。本發(fā)明所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物及其制備方法和用途，是將氨基酸酯基引入到二硫代甲酸酯類化合物中，合成了一系列氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，反應(yīng)通式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>在制備方法中，以氨基酸和氯化亞砜為原料，合成中間體氨基酸甲酯鹽酸鹽，然后在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，或采用市售氨基酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物。本發(fā)明所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物及其制備方法和用途，具有用獨(dú)特的合成方法，合成了一系列新的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，所用試劑普通易得，反應(yīng)條件溫和，實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)捷，合成的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物對(duì)乙肝病毒具有很好的抑制作用，對(duì)Hela人宮頸癌細(xì)胞、MCF-7人乳腺癌細(xì)胞、HepG2人肝癌細(xì)胞、HL-60人白血病細(xì)胞也具有較好的抑制作用。具體實(shí)施例方式依據(jù)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明不僅限于這些實(shí)施例實(shí)施例1甘氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯(1)的制備將1.0g(13.33mmol)甘氨酸加入100ml甲醇溶劑中，室溫?cái)嚢柘?，滴?.97ml(13.13mmol)氯化亞砜，滴加完畢，反應(yīng)液攪拌回流8小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，剩余物用二氯甲烷洗滌，得到1.6g白色的甘氨酸甲酯鹽酸鹽固體；將所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體甘氨酸甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；將粗產(chǎn)物甘氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(3.9mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.15g(3.9mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.8ml(12mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.2ml(3.9mmol)碘甲烷，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物再溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑后用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶即可得到甘氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯。實(shí)施例2:L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯⑵的制備所用原料為市售L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯；將L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽1.0g(4.6mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.18g(4.6mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.83ml(13.8mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.23ml(4.6mmol)碘甲烷，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3.5小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶即可得到L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯。實(shí)施例3:L_谷氨酸二甲酯氨基二硫代甲酸甲酯(3)的制備將1.0g(6.8mmOl)L-谷氨酸加入100ml甲醇中，室溫?cái)嚢柘?，滴?.99ml(6.8mmol)氯化亞砜，滴加完畢，反應(yīng)液攪拌回流6小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，剩余物用二氯甲烷洗滌，得到白色的L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽固體；將所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；將粗產(chǎn)物L(fēng)-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽1.4g(6.8mmol)溶于30ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.3g(6.8mmol)，冰水浴冷卻下，滴加1.2ml(20mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.41ml(6.8mmol)碘甲烷，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，過(guò)濾，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于30ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為60°C)柱層析分離得L-谷氨酸二甲酯氨基二硫代甲酸甲實(shí)施例4:L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯⑷的制備所用原料為市售L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯；將L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(3.6mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.14g(3.6mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.65ml(10.8mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.22ml(3.6mmol)碘甲烷，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為75°C)柱層析分離即可得到L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯。實(shí)施例5:L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯(5)的制備所用原料為市售L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯；將L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(2.8mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.llg(2.8mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.5ml(8.4mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.18ml(2.8mmol)碘甲烷，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚51(石油醚沸程為90°C)柱層析分離即可得到L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯。實(shí)施例6:L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯(6)的制備所用原料為市售L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯；將L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(2.9mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.12g(2.9mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.52ml(8.7mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.19ml(2.9mmol)碘甲烷，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為65°C)柱層析分離即可得到L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸甲酯。實(shí)施例7甘氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯(7)的制備將1.0g(13.33mmol)甘氨酸加入100ml甲醇溶劑中，室溫?cái)嚢柘?，滴?.97ml(13.13mmol)氯化亞砜，滴加完畢，反應(yīng)液攪拌回流5小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，剩余物用二氯甲烷洗滌，得到1.6g白色的甘氨酸甲酯鹽酸鹽固體；將所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體甘氨酸甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；將粗產(chǎn)物甘氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(3.9mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.15g(3.9mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.8ml(12mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.36ml(4.3mmol)的3-溴丙烯，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3.5小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶即可得到甘氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯。實(shí)施例8:L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯(8)的制備所用原料為市售L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯；將L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(2.3mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.lg(2.3mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.42ml(6.9mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.2ml(2.3mmol)的3-溴丙烯，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶即可得到L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯。實(shí)施例9:L-谷氨酸二甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯(9)的制備將1.0g(6.8mmol)L_谷氨酸加入100ml甲醇溶劑中，室溫?cái)嚢柘?，滴?.99ml(6.8mmol)氯化亞砜，滴加完畢，反應(yīng)液回流7小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，剩余物用二氯甲烷洗滌，得到白色的L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽固體；將所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；將L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽0.5g(2.4mmol)溶于30ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.lg(2.4mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.43ml(7.lmmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.2ml(2.4mmol)的3-溴丙烯，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于30ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為80°C)柱層析分離即可得到L-谷氨酸二甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯。實(shí)施例10:L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯(10)的制備所用原料為市售L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯；將L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽0.3g(2.2mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.09g(2.2mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.4ml(6.6mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.18ml(2.2mmol)的3-溴丙烯，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為75°C)柱層析分離即可得到L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯實(shí)施例11:L_亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯(11)的制備所用原料為市售L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯；將L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽0.3g(1.66mm0l)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.07g(l.66mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.3ml(5.Ommol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.14ml(1.66mmol)的3-溴丙烯，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為85°C)柱層析分離即可得到L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯實(shí)施例12:L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯(12)的制備所用原料為市售L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯基酯；將L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽0.3g(l.8mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.07g(l.8mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.33ml(5.4mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.15ml(1.8mmol)的3-溴丙烯，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為68°C)柱層析分離即可得到L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸-3-丙烯實(shí)施例13甘氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯(13)的制備。將1.0g(13.33mmol)甘氨酸加入100ml甲醇溶劑中，室溫?cái)嚢柘?，滴?.97ml(13.13mmol)氯化亞砜，滴加完畢，反應(yīng)液攪拌回流8小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，剩余物用二氯甲烷洗滌，得到1.6g白色的甘氨酸甲酯鹽酸鹽固體；將所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體甘氨酸甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；將粗產(chǎn)物甘氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(3.9mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.15g(3.9mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.8ml(12mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.47ml(3.9mmol)的溴芐，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶即8可得到甘氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯。實(shí)施例14:L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯(14)的制備所用原料為市售L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯；將L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽0.5g(2.3mmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.lg(2.3mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.42ml(6.9mmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.27ml(2.3mmol)的溴芐，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為83°C)柱層析分離即可得到L-苯丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯。實(shí)施例15:L_谷氨酸二甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯(15)的制備滴加完畢，反應(yīng)液攪拌回流6小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，將1.0g(6.8mmol)L-谷氨酸加入100ml甲醇溶劑中，室溫?cái)嚢柘?，滴?.99ml(6.8mmol)氯化亞砜，剩余物用二氯甲烷洗滌，得到白色的L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽固體；將步驟a所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體L-谷氨基酸二甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；將粗產(chǎn)物L(fēng)-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽0.5g(2.4mmol)溶于30ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.lg(2.4mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.43ml(7.lmmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.29ml(2.4mmol)溴芐，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于30ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為72°C)柱層析分離即可得到L-谷氨酸二甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯。實(shí)施例16:L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯(16)的制備所用原料為市售L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基將L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽0.33g(l.lmmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.lg(2.4mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.43ml(7.lmmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.29ml(2.4mmol)溴芐，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為83°C)柱層析分離即可得到L-丙氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯。實(shí)施例17:L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯(17)的制備所用原料為市售L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基將L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽0.43g(l.lmmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.lg(2.4mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.43ml(7.lmmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.29ml(2.4mmol)溴芐，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3.5小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲9醇洗滌，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為88°C)柱層析分離即可得到L-亮氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯。實(shí)施例18:L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯(18)的制備所用原料為市售L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽，采用將L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽直接在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯；將L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽0.4g(l.lmmol)溶于20ml甲醇溶劑中，加入研細(xì)的氫氧化鈉0.lg(2.4mmol)，冰水浴冷卻下，滴加0.43ml(7.lmmol)二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入0.29ml(2.4mmol)溴芐，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)4小時(shí)，由TLC檢測(cè)，直至反應(yīng)結(jié)束，過(guò)濾，用甲醇洗，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，剩余物溶于20ml的乙酸乙酯中，水洗(15mlX2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/石油醚=51(石油醚沸程為90°C)柱層析分離即可得到L-纈氨酸甲酯氨基二硫代甲酸芐基酯。實(shí)施例19本發(fā)明所述化合物作為制備抗乙肝病毒藥物的生物活性測(cè)定試驗(yàn)方法MTT法，ELISA.實(shí)驗(yàn)步驟H印G2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期，消化后稀釋成3X104個(gè)/ml，每孔接入細(xì)胞200ul；細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)后，加入50ul含化合物的培養(yǎng)基，化合物溶解在DMS0中；加樣時(shí)用相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋；使化合物終濃度為1.6mM,0.8mM,0.4mM,0.2mM,0.lmM,0.05mM,0.025mM和0.0125mM,以不含化合物的DMSO培養(yǎng)液為對(duì)照，每個(gè)濃度設(shè)三個(gè)復(fù)孔；每三天換一次含藥培養(yǎng)液，第九天收集上清液。ELISA法測(cè)HBsAg和HBeAg，在酶標(biāo)儀上450波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值；96孔板內(nèi)繼續(xù)加入200ul培養(yǎng)液和5mg/ml的MTT10uL,繼續(xù)培養(yǎng)2小時(shí)后，倒掉培養(yǎng)液；加入lOOul的DMS0，在酶標(biāo)儀上570波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值；抑制率=(1-加藥吸收值A(chǔ)570/對(duì)照吸收值A(chǔ)570)X100%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次；在SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件上進(jìn)行probit過(guò)程計(jì)算樣品的TC50和IC50值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1表1表1化合物1-18的抗乙肝病毒的生物活性測(cè)定化合物名稱TC50(mM)HBsAgHBeAgIC50(mM)srIC50(mM)cSI111.80一—一一20.780.900.9一一30.411.580.3一一42.560.823.1一一50.371.690.21.870.261.020.402.6一—7>100.35>28.6一一81.320.0719.91.341.090.740.145.4一一102.190.0543.9一一110.720.203.6一一120.661.300.5一一098]130.060.051.11.850.03140.030.300.14.160.01150.690.262.70.106.916>100.28>35.70.10>100170.020.090.2一一180.070.023.80.032.53TC0.040.022.40.022.6注aTC50為H印G2.2.15細(xì)胞的半數(shù)細(xì)胞毒濃度；bIC50為半數(shù)抑制濃度；cSI為選擇性系數(shù)(SI:TC50/IC50)；3TC為拉米呋啶。實(shí)施例20本發(fā)明所述化合物作為制備抗腫瘤藥物的生物活性測(cè)定試驗(yàn)方法MTT法實(shí)驗(yàn)步驟細(xì)胞培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期，消化后稀釋成2X104個(gè)/ml，每孔接入細(xì)胞180ul，細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)后，加入20ul化合物，不含化合物的培養(yǎng)液為對(duì)照；每個(gè)濃度重復(fù)三個(gè)孔；48小時(shí)后，加入10mg/ml的MTT，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)后，倒掉培養(yǎng)液；加入lOOul的DMS0，在酶標(biāo)儀上570波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值；抑制率=(1-加藥吸收值A(chǔ)570/對(duì)照吸收值A(chǔ)570)X100%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2表2:10iiM時(shí)化合物的抗腫瘤細(xì)胞活性11<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注-:無(wú)抑制活性。權(quán)利要求一種氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，其特征在于該化合物的結(jié)構(gòu)式為通式I通式I其中*為氨基酸的光學(xué)中心；R1為甘氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、丙氨酸、亮氨酸或纈氨酸的側(cè)鏈；R2為甲基、3-丙烯基或芐基。FSA00000112641700011.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1所述化合物的制備方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行a、將氨基酸加入到甲醇中，室溫?cái)嚢柘碌渭勇然瘉嗧浚瑪嚢杌亓?-8小時(shí)，冷卻，減壓蒸除溶劑，剩余物用二氯甲烷洗滌后得白色固體；b、將步驟a所得固體用甲醇重結(jié)晶，得到中間體氨基酸甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物；C、將步驟b氨基酸甲酯鹽酸鹽粗產(chǎn)物加入到甲醇中，再加入氫氧化鈉，冰水浴冷卻下滴加二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入鹵代烴，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3-4小時(shí)，過(guò)濾，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，得到的粘稠物再溶于乙酸乙酯，水洗后，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥劑，濾液蒸除溶劑后用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶或柱層析純化即可得到氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物；或直接采用市售氨基酸甲酯鹽酸鹽加入到甲醇中，再加入氫氧化鈉，冰水浴冷卻下滴加二硫化碳，反應(yīng)30min后，加入鹵代烴，室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)3-4小時(shí)，過(guò)濾，濾液經(jīng)減壓蒸除溶劑，得到的粘稠物再溶于乙酸乙酯，水洗后，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾除去干燥齊U，濾液蒸除溶劑后用乙酸乙酯/石油醚重結(jié)晶或柱層析純化即可得到氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于步驟c所述柱層析純化中的洗脫劑為體積比石油醚乙酸乙酯=51，其中石油醚沸程為60-90°C。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，其特征在于該化合物的任意一種化合物作為活性成分，單獨(dú)或結(jié)合一種或幾種藥學(xué)上可接受的、惰性的、無(wú)毒的賦形劑或載體組成藥物組合物。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，作為制備抗乙肝病毒藥物中的用途。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物，作為制備治療宮頸癌、乳腺癌、肝癌和白血病的藥物的用途。全文摘要本發(fā)明涉及一種氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物及其制備方法和用途，該化合物以氨基酸和二氯亞砜為原料合成中間體氨基酸甲酯鹽酸鹽，或直接采用市售的氨基酸甲酯鹽酸鹽，然后在氫氧化鈉和甲醇體系中，與二硫化碳和鹵代烴反應(yīng)，生成氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物。該方法所用試劑普通易得，反應(yīng)條件溫和，實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)捷。合成的氨基酸酯基二硫代甲酸酯類化合物對(duì)乙肝病毒具有很好的抑制作用，對(duì)Hela人宮頸癌細(xì)胞、MCF-7人乳腺癌細(xì)胞、HepG2人肝癌細(xì)胞、HL-60人白血病細(xì)胞也具有較好的抑制作用。文檔編號(hào)A61P1/16GK101823990SQ20101015408公開日2010年9月8日申請(qǐng)日期2010年4月23日優(yōu)先權(quán)日2010年4月23日發(fā)明者侯雪玲,李曉波,阿吉艾克拜爾·艾薩申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所