專利名稱：：7-O-β-D-乙?；?香豆素類化合物治療慢性神經(jīng)源性疼痛的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥衛(wèi)生和化學(xué)領(lǐng)域的藥物化合物，具體涉及7-0-0-D-乙?；莀香豆素類化合物及其可藥用鹽、酯及其溶劑化物用于治療慢性神經(jīng)源性疼痛的用途。
背景技術(shù)：
：按照疼痛持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)短，臨床將疼痛分類為急性疼痛和慢性疼痛兩種，這兩種疼痛，在發(fā)生機(jī)理上有本質(zhì)區(qū)別。急性疼痛稱為傷害性疼痛，即由組織創(chuàng)傷引起的疼痛，隨著組織創(chuàng)傷的修復(fù)，疼痛自然停止，在發(fā)病期間可使用止痛劑，如麻醉鎮(zhèn)痛劑與非留體類解熱鎮(zhèn)痛劑來緩解疼痛；慢性疼痛則以神經(jīng)源性疼痛為主，其發(fā)病機(jī)理復(fù)雜，且很難根治，是疼痛醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)與臨床研究和藥物研發(fā)的新領(lǐng)域。國(guó)外興起約30年，在中國(guó)約有15-20年的研究歷史。一、神經(jīng)源性疼痛基本概念神經(jīng)源性疼痛是由外傷、炎癥或其他疾病引起神經(jīng)損傷或病變所致的慢性疼痛。其典型例子包括脊柱疾患?jí)浩燃顾杌蛏窠?jīng)引起的腰背痛、中樞和外周損傷引起的慢性疼痛，帶狀皰疹神經(jīng)痛、糖尿病的多發(fā)神經(jīng)炎性疼痛、腦中風(fēng)后疼痛綜合癥、截肢后的假肢痛以及頑固性癌痛等。神經(jīng)源性疼痛被認(rèn)為是漸進(jìn)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，與急性疼痛的區(qū)別在于痛覺的持續(xù)狀態(tài)、神經(jīng)可塑性的適應(yīng)性改變及繼發(fā)的生化反應(yīng)等。神經(jīng)源性疼痛病理生理學(xué)特點(diǎn)是痛覺高反應(yīng)性，主要表現(xiàn)為痛覺過敏(hyperalgesia)，對(duì)傷害性刺激反應(yīng)增強(qiáng)或敏化；痛覺超敏(allodynia)，對(duì)非傷害性刺激產(chǎn)生傷害性刺激反應(yīng)；自發(fā)痛(spontaneouspain)，在無刺激條件下出現(xiàn)疼痛。由于其復(fù)雜多樣的發(fā)病機(jī)理與缺乏有效的針對(duì)性藥物(經(jīng)典止痛藥物如阿片類與非留體類解熱鎮(zhèn)痛藥對(duì)該類疼痛效果不佳)，神經(jīng)源性疼痛成為臨床治療上較為棘手的問題。二、神經(jīng)源性疼痛發(fā)病機(jī)理神經(jīng)源性疼痛的痛覺高反應(yīng)性在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜕媳憩F(xiàn)為痛覺閾值下降，初級(jí)感覺神經(jīng)元電活性增強(qiáng)，出現(xiàn)異位放電等。近5年來，對(duì)這些現(xiàn)象的發(fā)生機(jī)制的研究取得顯著進(jìn)展。目前，提出的發(fā)病機(jī)制既涉及外周性神經(jīng)途徑，也涉及中樞性神經(jīng)途徑。目前主流的神經(jīng)痛機(jī)理主要有以下幾種，詳細(xì)可參考Long-SunRo，Kuo_HsuanChangNeuropathicpainMechanismsandTreatments[J].ChangGungMedJ28(9):597_604,艮[11.痛覺傳導(dǎo)神經(jīng)沉寂纖維活化與痛覺過敏；2.離子通道假說(Na+，Ca2+)認(rèn)為在受傷部位神經(jīng)的末梢軸突中存在數(shù)種離子通道，這些離子通道是特異性的疼痛傳導(dǎo)器。加巴噴丁被認(rèn)為是Ca2+離子的離子通道阻斷劑；3.神經(jīng)因子假說；4.中樞神經(jīng)增敏和可塑性改變導(dǎo)致的中樞神經(jīng)對(duì)刺激超敏，修復(fù)異常；5.中樞傳導(dǎo)抑制缺乏癥。三、神經(jīng)源性疼痛治療藥物目前，治療神經(jīng)源性疼痛沒有特定針對(duì)性的藥物，阿片類與非留體類解熱鎮(zhèn)痛藥對(duì)這類疼痛效果不佳；主要藥物都屬于老藥新用。這些藥物大致可分為四類抗癲癇劑、抗抑郁劑、局部麻醉藥物及其它。1.抗癲癇藥1942年，Bergonignan首次報(bào)道苯妥英鈉能有效治療三叉神經(jīng)痛；1962年Blom首次報(bào)導(dǎo)卡馬西平也能有效治療三叉神經(jīng)痛。但一直到上個(gè)世紀(jì)80年代，相關(guān)的臨床研究才系統(tǒng)展開。目前臨床研究已經(jīng)證實(shí)卡馬西平和加巴噴丁(gabapetin)能有效抑制神經(jīng)痛。研究表明，卡馬西平阻斷Na+通道，抑制Na+跨膜傳導(dǎo)，阻止動(dòng)作電位形成，減弱不良刺激的向心傳導(dǎo)，抑制異位放電；并抑制緩激肽引起的兔三叉神經(jīng)痛。美國(guó)FDA已批準(zhǔn)卡馬西平用于三叉神經(jīng)痛的治療。加巴噴丁鎮(zhèn)痛機(jī)制研究報(bào)道表明，該藥物對(duì)Na+無影響，可能與阻斷Ca2+通道有關(guān)，因?yàn)樗梢院蚇型Ca2+通道的a與S2亞單位結(jié)合。其他在動(dòng)物模型上體現(xiàn)陽性結(jié)果，但還需進(jìn)一步臨床實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的藥物有苯巴比妥、氯硝安定、丙戊酸、托吡酯(Topiramate)、豆腐果昔、Pregabalin禾口Tiagabine等。2.抗抑郁劑臨床研究已證實(shí)，三環(huán)類抗抑郁劑對(duì)帶狀皰疹神經(jīng)痛、慢性腰背痛、慢性緊張性頭痛、糖尿病性和非糖尿病性多發(fā)神經(jīng)炎痛等神經(jīng)源性疼痛具有鎮(zhèn)痛作用。但總的說來，三環(huán)抗抑郁劑的不良反應(yīng)較多，臨床使用受到限制。目前，國(guó)外對(duì)該類化合物的研究主要集中在對(duì)不良反應(yīng)較小的第二代第三代抗抑郁劑的鎮(zhèn)痛研究。類型主要有5-HT重?cái)z取抑制劑、去甲腎上腺素和5-HT雙重吸收抑制劑[如帕羅西丁(Paroxetine)、西地蘭(citaloprane)、文拉法新(venlafaxine)等。3.局部麻醉劑局部麻醉藥物在該領(lǐng)域應(yīng)用最多的是利多卡因。該化合物是典型的Ca2+通道阻斷劑。1982年，Boas等報(bào)道用利多卡因靜脈灌注可以緩解中樞和外周神經(jīng)痛。目前給藥方式主要集中在靜脈、皮下灌注和錐管灌注。上世紀(jì)90年代末，美國(guó)FDA批準(zhǔn)了利多卡因貼片，主要用于局部貼敷治療帶狀皰疹的神經(jīng)源性疼痛。四、小分子酚性糖苷治療神經(jīng)痛的相關(guān)研究本發(fā)明中涉及的化合物7-0-0-D-?；莀香豆素類是以小分子酚性糖苷天麻素和豆腐果苷為母體的類似物。天麻為蘭科植物天麻(Gastrodiaelata)的干燥塊莖，《中國(guó)藥典》記載，天麻昧甘、性微溫，入肝經(jīng)，具有平肝熄風(fēng)鎮(zhèn)驚的功效，主治頭痛暈眩、肢體麻木、小兒驚風(fēng)、癲癇、高血壓和耳源性眩暈等。天麻主要有效成分為小分子酚性糖苷天麻素(gastrodin，GAS)，近年來對(duì)天麻及其成分的藥理作用進(jìn)行了大量研究，在治療以神經(jīng)系統(tǒng)為主的多種疾病方面取得了新的進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)天麻素具有以下效果腦保護(hù)作用、改善腦循環(huán)、抗驚厥、抗眩暈、抗焦慮、益智、延緩衰老。特別是，實(shí)驗(yàn)表明，乙酰天麻素有鎮(zhèn)痛作用；復(fù)方天麻制劑可較快提高疼痛模型大鼠的基礎(chǔ)痛閾、降低炎癥局部皮溫、減輕踝關(guān)節(jié)的腫脹程度、降低疼痛級(jí)別。其機(jī)制可能與減少疼痛物質(zhì)的傳遞、減少神經(jīng)沖動(dòng)傳入、激活鎮(zhèn)痛系統(tǒng)釋放鎮(zhèn)痛物質(zhì)以及抑制疼痛基因表達(dá)有關(guān)，目前和天麻素相關(guān)的鎮(zhèn)痛研究主要集中在抗急性疼痛方面。豆腐果為山龍眼屬(HeliciaLour.)系山龍眼科植物，具有收斂解毒、活血祛瘀之功效，用于治療腸炎、食物中毒、風(fēng)濕腫痛等癥。由其制成的產(chǎn)品神衰果素片已臨床使用多年。豆腐果中主要有效成分豆腐果苷(helicid，HEL)的化學(xué)結(jié)構(gòu)類似于天麻苷。臨床、藥理研究表明，豆腐果苷對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用與天麻苷相似，但其鎮(zhèn)靜、止痛作用較天麻苷強(qiáng)，對(duì)神經(jīng)官能癥引起的頭痛、頭昏、睡眠障礙的治療作用顯效快。見參考文獻(xiàn)劉桂艷，王鋼力，馬雙成，林瑞超的山龍眼屬藥用植物有效成分研究概況[J].中醫(yī)藥，2004，35(5):593-595。有研究發(fā)現(xiàn)豆腐果苷具有對(duì)抗炎癥性疼痛和神經(jīng)病理性疼痛的作用。其鎮(zhèn)痛特點(diǎn)為起效慢、鎮(zhèn)痛劑量小、作用時(shí)間長(zhǎng)、在鎮(zhèn)痛劑量下無明顯毒副作用。用電阻絲熱輻射器給鼠尾熱傷害性刺激，觀察豆腐果苷對(duì)大鼠甩尾痛反應(yīng)時(shí)間閾值的影響，豆腐果苷(2%，1.5X10_2mL/g，ip.)，閾值明顯升高并持續(xù)30min以上；同時(shí)施予電針和豆腐果苷(2%，715X10_3mL/g，ip.)后，閾值顯著升高并可持續(xù)到停針后50min，顯示豆腐果苷具有鎮(zhèn)痛和延長(zhǎng)針麻效果的作用，見參考文獻(xiàn)ChenZX,LouZC.ApreliminarystudyoftheanalgesicactionofD-fornyl-phenyl-3_Dallosupranoside[J].AcadJFirstMedColl.PLA(第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào))，1985，5(3):186_187。由豆腐果苷制成的口服片劑，用“扭體法”和“熱板法”證明本品有鎮(zhèn)痛作用，見參考文獻(xiàn)ShaJM，MaoHK.Helicid[J].ChinPharmBull(藥學(xué)通報(bào))，1987，22(1):27。趙楠于2005年首次報(bào)道豆腐果苷具有對(duì)抗神經(jīng)病理性疼痛的作用，中國(guó)藥理通訊，2005，223839。該研究認(rèn)為，口服豆腐果苷(6.2550mg/kg)能劑量依賴性提高CCI大鼠損傷側(cè)腳掌壓力痛閾值，其鎮(zhèn)痛作用2小時(shí)起效，給藥后3小時(shí)、4小時(shí)鎮(zhèn)痛效果逐漸增加，給藥24小時(shí)后鎮(zhèn)痛效果有所下降，48小時(shí)仍然有效。見參考文獻(xiàn)趙楠，楊紅菊，王艷華等.豆腐果苷抗神經(jīng)病理性疼痛藥效學(xué)評(píng)價(jià)[J].中國(guó)藥理通訊，2005，223839.。天麻素和豆腐果苷安全有效，連續(xù)服用未發(fā)現(xiàn)中毒或其它副反應(yīng)，且藥效恒定。其缺點(diǎn)是起效緩慢、作用強(qiáng)度較弱、給藥量較大、生物利用度較低等。該二化合物有類似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，都為0"型吡喃糖苷，區(qū)別在于官能團(tuán)和糖基的不同。天麻素(Gastrodin)豆腐果苷(Helicid)藥物的結(jié)構(gòu)修飾是提高療效，增強(qiáng)吸收利用，降低副作用的有效方法，見參考文獻(xiàn)WeiguoShi,HeLiu,YanpingZhang,BohuaZhong,HongjuYang.Design,synthesis,andpreliminaryEvaluationofgabapentin-pregabalinmutualprodrugsinrelievingneuropathicpain[J].Arch.Pharm.Chem.LifeSci.2005，338:358_364。本發(fā)明以天麻素和豆腐果苷為參照，對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，并對(duì)該類類似物的神經(jīng)藥理活性進(jìn)行篩選，獲得了治療病理性疼痛的潛在新型化合物XH011。五、常見慢性神經(jīng)痛藥物評(píng)價(jià)模型見參考文獻(xiàn)楊紅菊，蔣中偉，羅質(zhì)璞.神經(jīng)源性疼痛動(dòng)物模型的差異比較[J].中國(guó)臨床康復(fù)，2003，7(31):4272-4273和楊蓉.以豆腐果苷為代表的小分子單糖苷化合物的神經(jīng)藥理活性篩選研究[M].2007，云南大學(xué)化學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院。熱板、甩尾、扭體是常用的篩選急性疼痛鎮(zhèn)痛藥的經(jīng)典動(dòng)物模型，但不適合用來篩選神經(jīng)痛治療藥物。近年來NP動(dòng)物模型的建立發(fā)展，對(duì)NP的作用機(jī)制與藥物研究起到極大的推動(dòng)作用。這些在一定程度上模擬了臨床上NP患者的癥狀的幾種常用動(dòng)物模型包括①外周神經(jīng)橫切模型(thesciaticnerveaxotomymodel)；②坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷模型(thechronicconstrictioninjurymodel,CCI)，此法先暴露大鼠坐骨神經(jīng)干，再用鉻腸線松結(jié)扎4個(gè)環(huán)，動(dòng)物術(shù)后57d出現(xiàn)對(duì)機(jī)械，冷、熱刺激反應(yīng)加強(qiáng)，1014d達(dá)到高峰，并可持續(xù)一兩個(gè)月，是常用的神經(jīng)源性疼痛動(dòng)物模型；③坐骨神經(jīng)部分切斷模型(thepartialsciaticnerveligationmodel，PSL)；④脊神經(jīng)結(jié)扎模型(theL5/L6spinalnerveligationmodel,SNL)；⑤坐骨神經(jīng)分支選擇損傷模型(thesparednerveinjurymodel)。除此以外，還有興奮性氨基酸損傷、強(qiáng)啡肽模型、微管損傷模型及糖尿病性神經(jīng)痛模型等等。近年來，人們廣泛應(yīng)用Bermette等人建立的CCI模型來模擬臨床中的慢性神經(jīng)病理性疼痛，探討痛覺過敏的機(jī)理及開發(fā)NP治療藥。CCI模型見參考文獻(xiàn)BennettGJ,XieYK.Aperipheralmononeuropathyinratthatproducesdisordersofpainsensationlikethoseseeninman[J],Pain1988;33:87-107。此模型的特點(diǎn)是用鉻制羊腸線輕度結(jié)扎神經(jīng)，使粗的有髓鞘纖維選擇性的損傷，但仍保留大部分傳遞疼痛的C類纖維。接受這一手術(shù)的動(dòng)物隨后產(chǎn)生對(duì)機(jī)械及熱刺激產(chǎn)生的痛覺過敏與痛覺超敏，從行為學(xué)的測(cè)定發(fā)現(xiàn)，這種狀態(tài)與人體的外周神經(jīng)損傷，如腫瘤壓迫、重金屬離子中毒、缺氧或代謝異常等誘發(fā)的神經(jīng)病性慢性痛的癥狀和行為表現(xiàn)極為相似。同時(shí)，CCI疼痛大鼠模型正是神經(jīng)病性疼痛和炎癥性疼痛的巧妙結(jié)合，因?yàn)樘弁词怯捎谳S突損傷引起的異位放電和結(jié)扎線處炎癥細(xì)胞釋放的炎癥介質(zhì)分子刺激產(chǎn)生異位敏感性提高所致。本發(fā)明即利用CCI疼痛大鼠模型對(duì)代表化合物XH011進(jìn)行抗慢性神經(jīng)痛活性的篩選，用Von-FreyFilament測(cè)定機(jī)械痛覺超敏和痛覺過敏作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提出一種7-0-β-D-乙?；?香豆素類化合物治療慢性神經(jīng)源性疼痛的用途，所說的7-0-β-D-乙?；?香豆素類化合物包括其可藥用鹽、酯或溶劑化物，它們?cè)谥苽溆糜谥委熉陨窠?jīng)源性疼痛的藥物中的用途；其中，糖基部分為羥基被全乙酰化的任意吡喃糖或者呋喃糖，代表化合物為7-0-β-D-乙?；咸烟?香豆素，結(jié)構(gòu)式如下HOAc該化合物為黃色至土黃色粉末，無特殊氣味。在乙醇或二甲亞砜中完全溶解，甲醇中部分溶解。乙醚中不溶。目前，沒有查到該化合物應(yīng)用于神經(jīng)痛研究的報(bào)導(dǎo)。本申請(qǐng)的發(fā)明人通過研究發(fā)現(xiàn)，上述化合物可用于治療神經(jīng)源性疼痛。本發(fā)明的目的在于提出一種上述化合物的新用途；即本發(fā)明提供了將該化合物用于制備治療神經(jīng)源性疼痛疾病的藥物的用途。發(fā)明所述的神經(jīng)源性疼痛指因外周神經(jīng)損傷、壓迫、神經(jīng)毒性、感染、免疫、代謝性疾病、腫瘤、維生素缺乏或其他原因引起的復(fù)雜的神經(jīng)性疼痛。本發(fā)明針對(duì)的神經(jīng)源性疼痛主要是帶狀皰疹神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛、代謝損傷性神經(jīng)源性疼痛、腦中風(fēng)后疼痛綜合癥、截肢后的假肢痛、中樞性疼痛、幻肢痛、殘端痛、交感神經(jīng)相關(guān)性疼痛、復(fù)雜的局部疼痛綜合癥、脊柱疾患導(dǎo)致的脊髓或者神經(jīng)根壓迫疼痛、中樞和外周創(chuàng)傷引起的慢性疼痛以及頑固性癌痛。其中所述的坐骨神經(jīng)痛特指坐骨神經(jīng)慢性壓迫性神經(jīng)源性疼痛；所述代謝損傷性疼痛特指糖尿病性神經(jīng)痛。該發(fā)明涉及的7-0-β-D-乙?；莀香豆素化合物或其類似物的可藥用鹽、酯或溶劑化物與速效性抗神經(jīng)源性疼痛藥物，特別是加巴噴丁組合形成組合藥物，同時(shí)加入任選的可藥用賦形劑、稀釋劑、載體或輔助劑以成藥并上市。本發(fā)明在經(jīng)典的坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷模型(CCI)上，單次灌胃與連續(xù)7天灌胃給予該化合物均顯示了明確的抗神經(jīng)痛治療作用。在該模型上，單次給藥與連續(xù)7天給藥有效劑量為45mg/kgBW。在此劑量點(diǎn)上，化合物XHOll能顯著升高機(jī)械性刺激痛閾，抗神經(jīng)痛效能與等量對(duì)照藥物加巴噴丁相比，略強(qiáng)或基本相當(dāng)，而藥效持續(xù)時(shí)間優(yōu)于加巴噴丁。圖1是CCI手術(shù)后不同時(shí)間大鼠壓力痛閾變化曲線；圖2是CCI大鼠單次灌胃加巴噴丁、天麻素、7-0-β-D-乙?；咸烟?香豆素后24小時(shí)內(nèi)時(shí)效曲線；圖3是CCI大鼠七天灌胃加巴噴丁、天麻素、7-0-β-D-乙?；咸烟?香豆素后140小時(shí)內(nèi)時(shí)效曲線。具體實(shí)施例方式具體的藥理實(shí)驗(yàn)如下一、受試藥物名稱7-0_β-D-乙?；咸烟?香豆素(XHOll)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>性狀白色結(jié)晶來源云南大學(xué)自然資源藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室生化藥理組自行合成。藥物配制、給藥體積、及給藥途徑臨用前加0.2%羧甲基纖維素鈉的純凈水溶液研磨混懸至所需濃度。大鼠每天灌胃給藥一次，給藥體積為45mg/Kg，10mL/Kgo二、對(duì)照藥物1.加巴噴丁，購自Sigma公司，CASNumber:60142-96_3。2.天麻素，昆明制藥廠提供，批號(hào)200610036。臨用前0.2%羧甲基纖維素鈉的純凈水溶液研磨混懸至45mg/mL濃度。三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Sprague-Dawley大鼠普通級(jí)，雄性，手術(shù)時(shí)體重180220g，由昆明醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科提供，許可證號(hào)SCXK(滇)20082011。四、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理數(shù)據(jù)結(jié)果以平均值士標(biāo)準(zhǔn)差(無士s)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包作為統(tǒng)計(jì)工具，不同組與正常組之間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)中的多個(gè)獨(dú)立樣本Kruskal-WallisH檢驗(yàn)，以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。五、實(shí)驗(yàn)方法1.大鼠CCI模型的建立參考資料見:BennettGJ,XieYK.Aperipheralmononeuropathyinratthatproducesdisordersofpainsensationlikethoseseeninman[J].Pain1988；3387-107。大鼠以40mg/KgBW戊巴比妥鈉ip.給藥麻醉，取俯臥位固定四肢于大鼠手術(shù)臺(tái)；右后肢大腿中段外側(cè)以彎形手術(shù)剪去毛，70%酒精消毒皮膚；切開皮層，止血鉗鈍性分離大腿肌肉，暴露坐骨神經(jīng)干；在坐骨神經(jīng)分叉的前端約3毫米起處，用無菌玻璃鉤將坐骨神經(jīng)與周圍組織分離；用4號(hào)無菌鉻制羊腸線(直徑0.15mm)在坐骨神經(jīng)干上松結(jié)扎4個(gè)環(huán)，每個(gè)環(huán)間距約為1mm，結(jié)扎強(qiáng)度以引起小腿肌肉輕度顫動(dòng)但環(huán)節(jié)可以在神經(jīng)上移動(dòng)為宜；用絲線逐層縫合肌肉組織與皮膚，手術(shù)側(cè)腹腔注射40mg/Kg青霉素鈉生理鹽水溶液后，置于鋪有軟木屑的籠中。假手術(shù)組大鼠僅暴露坐骨神經(jīng)，其余的處理與模型組相同。2.大鼠機(jī)械性痛覺異常測(cè)定參考資料見TaboE,JinksSL,EiseleJrJH,CarstensE.Behavioralmanifestationsofneuropathicpainandmechanicalallodynia,andchangesinspinaldorsalhornneurons,followingL4-L6dorsalrootconstrictioninrats[J].Pain1999；80:503_20。機(jī)械刺激的反應(yīng)閾值用TouchTest觸覺測(cè)試包(V0N-FREYFILAMENT)，58011型，NorthCoastMedicalInc.產(chǎn)品來測(cè)定，痛閾級(jí)別與壓重克數(shù)對(duì)照見表1。實(shí)驗(yàn)選擇術(shù)后1431d的動(dòng)物，在給藥前測(cè)定基礎(chǔ)壓力痛閾，淘汰基礎(chǔ)痛閾大于5.88或小于1.65的動(dòng)物，其余動(dòng)物隨機(jī)分組；單次或者連續(xù)7天給予特定藥物。最后一次給藥后連續(xù)測(cè)定動(dòng)物的機(jī)械性痛覺異常，測(cè)痛前先將實(shí)驗(yàn)大鼠分別置于幾個(gè)金屬網(wǎng)籠內(nèi)靜息至少30min，使之熟悉環(huán)境并處于靜息狀態(tài)，測(cè)痛過程在安靜無干擾的環(huán)境下進(jìn)行。機(jī)械性痛覺異常測(cè)定方法將大鼠置于金屬籠中，采用一系列能產(chǎn)生不同壓力的測(cè)痛針從小到大依次由下向上垂直刺激其手術(shù)側(cè)足底足心部位，使其毛輕度彎曲并保持5s，每次刺激間隔5s。找到10次此刺激中引起46次大鼠抬足反應(yīng)的纖維絲，記錄此纖維絲的數(shù)值為大鼠縮足反應(yīng)閾值(pawwithdrawalthreshold,PffT)0最大痛閾值設(shè)定為6.95。規(guī)定當(dāng)6.65量值纖維絲刺激足心超過12s，大鼠在8次刺激中均完全沒有反應(yīng)為6.95。表1:TouchTest觸覺測(cè)試包壓力與痛閾數(shù)值對(duì)照表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.CCI手術(shù)后不同天數(shù)大鼠壓力痛閾變化測(cè)量空白組，假手術(shù)組，CCI組在手術(shù)后3天至31天壓力痛閾。根據(jù)假手術(shù)組痛感變化對(duì)照得知，CCI模型組大鼠，在手術(shù)8天以后，手術(shù)損傷可忽略不計(jì)，其疼痛視為神經(jīng)結(jié)扎導(dǎo)致的痛覺超敏，表現(xiàn)為手術(shù)側(cè)壓力痛閾明顯低于非手術(shù)側(cè)及空白組及假手術(shù)組。以壓力痛閾作為指標(biāo)，CCI模型組大鼠疼痛超敏現(xiàn)象呈現(xiàn)小弧度倒U型變化，在手術(shù)后11天至28天呈現(xiàn)小波動(dòng)，并在28天之后逐漸升高，提示神經(jīng)結(jié)扎用鉻腸線逐漸吸收，壓迫現(xiàn)象逐漸減輕，結(jié)果見附圖1。2.單次灌胃給藥對(duì)CCI大鼠壓力痛閾的影響單次灌胃給藥空白溶劑、天麻素、7-0-β-D-乙?；咸烟莀香豆素、加巴噴丁45mg/Kgl小時(shí)后，測(cè)定藥物24小時(shí)內(nèi)時(shí)效曲線，見附圖2。結(jié)果提示，各給藥組給藥1小時(shí)至23小時(shí)，均不同程度緩解CCI引起的痛覺超敏。其中，7-0-β-D-乙?；咸烟?香豆素、加巴噴丁45mg/Kg可顯著提高機(jī)械痛覺過敏壓力痛閾值，鎮(zhèn)痛時(shí)間持續(xù)23小時(shí)；起效時(shí)間、持續(xù)時(shí)間優(yōu)于天麻素。說明在該模型上，天麻素、7-0-β-D-乙?；咸烟莀香豆素、加巴噴丁均能體現(xiàn)出抗慢性神經(jīng)源性疼痛活性。提示對(duì)7-0-β-D-乙?；咸烟?香豆素可能成為有效的抗神經(jīng)痛前藥。3.CCI手術(shù)后7天連續(xù)給藥時(shí)效情況連續(xù)7天灌胃給藥空白溶劑、天麻素、7-0-β-D-乙酰化葡萄糖_香豆素、加巴噴丁45mg/Kg后，自最后一次給藥1小時(shí)起，連續(xù)測(cè)定140小時(shí)內(nèi)時(shí)效曲線，結(jié)果見附圖3。結(jié)果提示，各給藥組給藥1小時(shí)至96小時(shí)后，均不同程度緩解CCI引起的痛覺超敏。其中，7-0-β-D-乙酰化葡萄糖-香豆素給藥45mg/Kg可顯著提高機(jī)械痛覺過敏壓力痛閾值，鎮(zhèn)痛時(shí)間持續(xù)60小時(shí)以上(與假手術(shù)組對(duì)照)，持續(xù)時(shí)間優(yōu)于加巴噴?。患影蛧姸〗o藥鎮(zhèn)痛持續(xù)時(shí)間為1小時(shí)至43小時(shí)；天麻素持續(xù)時(shí)間132小時(shí)。天麻素、7-0-β-D-乙酰化葡萄糖_香豆素、加巴噴丁均能體現(xiàn)出抗慢性神經(jīng)源性疼痛活性。七、結(jié)論1.7-0-β-D-乙酰化葡萄糖-香豆素在單次給藥、連續(xù)7天給藥情況下均能體現(xiàn)出抗慢性神經(jīng)源疼痛活性；2.7-0-β-D-乙?；咸烟?香豆素的持續(xù)時(shí)間優(yōu)于對(duì)照藥品加巴噴丁和天麻素，有長(zhǎng)效鎮(zhèn)痛效果。由此說明，該化合物可以制備成用于之類神經(jīng)源性疼痛疾病的各種劑型的藥物。該類化合物作用時(shí)間長(zhǎng)，毒性低，適合長(zhǎng)期服用，有良好的新藥研發(fā)前景。權(quán)利要求一種7-O-β-D-乙?；?香豆素類化合物治療慢性神經(jīng)源性疼痛的用途，所說的7-O-β-D-乙酰化糖-香豆素類化合物包括其可藥用鹽、酯或溶劑化物，它們?cè)谥苽溆糜谥委熉陨窠?jīng)源性疼痛的藥物中的用途；其中，糖基部分為羥基被全乙?；娜我膺拎腔蛘哌秽?，代表化合物為7-O-β-D-乙?；咸烟?香豆素，結(jié)構(gòu)式如下FSA00000127383200011.tif2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征是所述神經(jīng)源性疼痛是外周神經(jīng)損傷、壓迫、神經(jīng)毒性、感染、免疫、代謝性疾病、腫瘤、維生素缺乏或其他原因引起的復(fù)雜的神經(jīng)性疼痛。3.如權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征是所述神經(jīng)源性疼痛是帶狀皰疹神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛、代謝損傷性神經(jīng)源性疼痛、腦中風(fēng)后疼痛綜合癥、截肢后的假肢痛、中樞性疼痛、幻肢痛、殘端痛、交感神經(jīng)相關(guān)性疼痛、復(fù)雜的局部疼痛綜合癥、脊柱疾患導(dǎo)致的脊髓或者神經(jīng)根壓迫疼痛、中樞和外周創(chuàng)傷引起的慢性疼痛以及頑固性癌痛。4.如權(quán)利要求3所述的用途，其特征是所述神經(jīng)源性疼痛是坐骨神經(jīng)痛。5.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征是所述坐骨神經(jīng)痛是坐骨神經(jīng)慢性壓迫性神經(jīng)源性疼痛。6.如權(quán)利要求3所述的用途，其特征是所述代謝損傷性神經(jīng)源性疼痛是糖尿病性神經(jīng)痛。7.如以上權(quán)利要求2-6中任一項(xiàng)所述的用于治療神經(jīng)源性疼痛的7-0-0-D-乙酰化糖_香豆素類化合物或其類似物的可藥用鹽、酯或溶劑化物與速效性抗神經(jīng)源性疼痛藥物的組合用途。8.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征是所述速效性抗神經(jīng)源性疼痛藥物是加巴噴丁。9.如權(quán)利要求7所述的用途，其特征是用于治療神經(jīng)源性疼痛的藥物組合物，包括7-0-^-D-乙酰化糖-香豆素類或其可藥用鹽、酯或溶劑化物與速效型抗神經(jīng)源性疼痛藥物，以及任選可藥用的賦形劑、稀釋劑、載體或輔助劑。全文摘要一種7-O-β-D-乙?；?香豆素類化合物治療慢性神經(jīng)源性疼痛的用途，所說的7-O-β-D-乙酰化糖-香豆素類化合物包括其可藥用鹽、酯或溶劑化物，它們?cè)谥苽溆糜谥委熉陨窠?jīng)源性疼痛的藥物中的用途；其中，糖基部分為羥基被全乙?；娜我膺拎腔蛘哌秽?，代表化合物為7-O-β-D-乙?；咸烟?香豆素，結(jié)構(gòu)式如下，本發(fā)明在經(jīng)典的坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷模型(CCI)上，單次灌胃與連續(xù)7天灌胃給予該化合物均顯示了明確的抗神經(jīng)痛治療作用，在實(shí)驗(yàn)指定的劑量點(diǎn)上，該化合物能顯著升高機(jī)械性刺激痛閾，抗神經(jīng)痛效能與對(duì)照藥物加巴噴丁相比略強(qiáng)或相當(dāng)，而持續(xù)時(shí)間優(yōu)于加巴噴丁，研究結(jié)果提示，該化合物可以用于治療慢性神經(jīng)源性疼痛。文檔編號(hào)A61K31/195GK101829132SQ201010175439公開日2010年9月15日申請(qǐng)日期2010年5月18日優(yōu)先權(quán)日2010年5月18日發(fā)明者戴曉暢,肖涵申請(qǐng)人:云南大學(xué)