專利名稱：1-氮雜呫噸酮-3-甲酰胺類化合物及制備方法和抗腫瘤用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體而言，本發(fā)明涉及一類1-氮雜咕噸酮-3-甲酰 胺類化合物，本發(fā)明還涉及該類化合物的制備方法及其在制備抗腫瘤藥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類生命和生活質(zhì)量的主要疾病之一。據(jù)2007年底衛(wèi)生部 公布的數(shù)據(jù)，惡性腫瘤已經(jīng)成為我國城鄉(xiāng)居民的第一死因。近年來，腫瘤化療取得了相當(dāng) 大的進(jìn)步，腫瘤患者生存時(shí)間明顯延長，特別是對白血病、惡性淋巴瘤等的治療有了較大突 破，但對危害人類生命健康最嚴(yán)重的、占惡性腫瘤90%以上的實(shí)體瘤(包括肺癌、肝癌、膀 胱癌及結(jié)腸癌等)的治療依然未能達(dá)到滿意效果。隨著生命科學(xué)研究的飛速進(jìn)展，腫瘤機(jī)制被逐步闡明，相繼出現(xiàn)了抑制腫瘤生長 因子、干預(yù)腫瘤信號傳導(dǎo)、抑制腫瘤血管生成以及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等新方向；但是，由于 惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，近年的臨床實(shí)踐表明它們只有和細(xì)胞毒藥物聯(lián)合應(yīng)用才能 取得較好的臨床療效。因此，以腫瘤細(xì)胞中與分化增殖相關(guān)的關(guān)鍵酶作為藥物篩選靶標(biāo)，發(fā) 現(xiàn)選擇性作用于特定靶點(diǎn)的高效、低毒、特異性強(qiáng)的新型抗癌藥物具有重要意義。近年來拓?fù)洚悩?gòu)酶I (Topl)已成為設(shè)計(jì)新型抗癌藥物的關(guān)鍵靶酶之一。它是細(xì) 胞生存的必需酶，參與DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、重組、修復(fù)的全過程；而且多種腫瘤細(xì)胞中尤其是肺 癌、胃癌、結(jié)腸癌、卵巢癌等Topl的含量明顯高于正常細(xì)胞。這些都使得Topl抑制劑類藥 物不僅療效高、抗瘤譜廣，而且對腫瘤細(xì)胞還具有很好的選擇性，現(xiàn)已被美國國家癌癥研究 所列為重點(diǎn)研究的六大類抗腫瘤藥物之一。在各類Topl抑制劑中，喜樹堿(CPT)類衍生物研究最為深入，也是最經(jīng)典的Topl 特異性的抑制劑。該類化合物中，伊諾替康(CPT-Il)和拓?fù)涮婵狄殉晒ι鲜校挥糜谵D(zhuǎn)移 性的結(jié)直腸癌和頑固性的卵巢癌等的治療，取得了良好的療效。然而，該類化合物還存在 如下突出問題1)體內(nèi)代謝不穩(wěn)定，活性必需的E環(huán)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)在人體內(nèi)過快地水解成羧酸 鹽形式，羧酸鹽形式不僅對Topl無效，而且更易與人血清白蛋白結(jié)合；2) Topl切割復(fù)合物 (Toplcc)需要維持一定長的時(shí)間才能轉(zhuǎn)化為DNA損傷，然而喜樹堿易于從Toplcc解離，因 此臨床上使用喜樹堿類藥物時(shí)必須延長靜滴時(shí)間；3)水溶性差，喜樹堿獨(dú)特的五環(huán)共軛 平面結(jié)構(gòu)具有較強(qiáng)的疏水性，導(dǎo)致其水溶性較差；4)喜樹堿類藥物存在一定的毒副作用， 比如自細(xì)胞減少、惡心、嘔吐等，限制了安全劑量并進(jìn)而限制了藥物療效；5)耐藥性，現(xiàn)在 已有數(shù)個(gè)Topl的喜樹堿耐受突變株報(bào)道，最常見的有ASn722，Arg364等的突變均可導(dǎo)致喜 樹堿耐藥性的產(chǎn)生。非喜樹堿類Topl抑制劑已經(jīng)成為近年來抗癌藥研究熱點(diǎn)。Indolocarbazole類 化合物是目前研究較為深入的一類，該類化合物中的J-107088 (Edotecarin)已進(jìn)入臨床 研究，然而有研究表明該類化合物并不是Topl特異性的抑制劑，還有抑制蛋白激酶C或檢 查點(diǎn)激酶Chk-I的活性。此外，LuotonineAlamellarinD也是近年來從自然界分離得到的
Topl抑制劑，但它們大都存在結(jié)構(gòu)復(fù)雜、特異性差、毒副作用較大等問題，目前臨床廣為使 用的仍然只有喜樹堿類抗腫瘤藥物。為了發(fā)現(xiàn)全新結(jié)構(gòu)類型的Topl抑制劑，我們前期開展了 Topl抑制劑的虛擬高通 量篩選研究，成功地發(fā)現(xiàn)了數(shù)個(gè)類藥性好、無潛在致癌性的先導(dǎo)化合物?；诨钚?、新穎性 并結(jié)合分子圖形學(xué)考察，我們最終選定購買得到部分化合物進(jìn)行抑酶和細(xì)胞毒活性測試， 結(jié)果表明我們首次發(fā)現(xiàn)1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物具有很強(qiáng)的抑制Topl的活性， 顯著優(yōu)于上市藥物拓?fù)涮婵?，?xì)胞毒活性測試結(jié)果表明對數(shù)種腫瘤細(xì)胞顯示了一定的抗腫 瘤活性。分子對接研究表明該類先導(dǎo)化合物可以與我們前期識別發(fā)現(xiàn)的Topo I靶酶的關(guān) 鍵活性位點(diǎn)殘基Arg364形成兩個(gè)氫鍵作用，側(cè)鏈上的酰胺基團(tuán)可以與靶酶上DNA切割位點(diǎn) 下游+1位的胞嘧啶形成選擇性的作用，這使得該類化合物與已有的Topl抑制劑相比具有 更大優(yōu)勢，可望很好地克服現(xiàn)有抗腫瘤藥物的耐藥性問題。需要說明的，雖然個(gè)別該類化合物化合物已經(jīng)可以購買得到，但是文獻(xiàn)里面沒有 公布該類化合物的理化性質(zhì)、制備方法，更沒有該類化合物可以用于抗腫瘤的報(bào)道。因此， 我們首次發(fā)現(xiàn)的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物代表了一類全新結(jié)構(gòu)的抗腫瘤活性化 合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是為了提供一類1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，或其藥學(xué)上可接 受的鹽。本發(fā)明同時(shí)公開了該類化合物的制備方法、醫(yī)療用途和組合物。本發(fā)明根據(jù)我們前期虛擬高通量篩選得到的先導(dǎo)物結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步設(shè)計(jì)、合成了該 類化合物的衍生物，對多種腫瘤細(xì)胞的活性測試表明，該類化合物具有一定的抗腫瘤活性， 特別值得指出的是，該類化合物對轉(zhuǎn)移性的乳腺癌細(xì)胞顯示了良好的選擇性毒性，為開發(fā) 為高效、低毒、特異性強(qiáng)的抗腫瘤藥物奠定了基礎(chǔ)。本發(fā)明的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物結(jié)構(gòu)如通式(I )所示或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R1的取代位置可位于6至9位，可以是單、雙或多取 代，R1為下列基團(tuán)中的任一類a)氫；b)Cl-8的直鏈或支鏈烷氧基；c)Cl-8的直鏈或支鏈 烷基；d)鹵素；m)亞甲二氧基；R2, R3獨(dú)立地表示下列基團(tuán)氫、C1-8的直鏈或支鏈的烷基、取代或未取代的芳基 亞甲基，所述的取代為氫、鹵素、C1-8的直鏈或支鏈的烷基、C1-8的直鏈或支鏈的烷氧基、 硝基、氨基、羥基；或R2、R3 一起形成由3到7個(gè)CH2單元連接組成的鏈；R4為氫、C1-8的直鏈或支鏈烷基。本發(fā)明的進(jìn)一步較佳實(shí)施例中，上述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，當(dāng)R1 為單取代且7位為氟、氯時(shí)，R2和R3的組合不能為二乙基、叔丁基、芐基、對氯芐基；當(dāng)R1為單取代且7位為氫時(shí)，R2和R3的組合不能為芐基、對氯芐基；當(dāng)R1為單取代且7位為甲基 時(shí)，R2和R3的組合不能為叔丁基、芐基、對氯芐基。更進(jìn)一步地，上述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，R1取代為單取代，優(yōu)選為 7位單取代。本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，上述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，&和民 的組合為取代或未取代的芳基亞甲基，所述的取代為氫、鹵素、C1-8的直鏈或支鏈的烷基、 C1-8的直鏈或支鏈的烷氧基、硝基、氨基、羥基；或R2、R3 —起形成由3到7個(gè)CH2單元連接 組成的鏈。所述的芳基亞甲基，優(yōu)選為芐基，更進(jìn)一步芳基亞甲基上的取代優(yōu)選為氫或鹵 本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，R4優(yōu)選為甲基。本發(fā)明所述的芳基是芳香烴分子中去掉一個(gè)氫原子后所剩下的原子團(tuán)稱為芳基。 芳香烴是一類具有芳香性的化合物，其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不易加成，不易氧化，容易取代和碳 環(huán)異常穩(wěn)定的特性，不同于一般的飽和化合物的性質(zhì)，包括1)單環(huán)芳烴，分子中只含有一 個(gè)苯環(huán)，如苯、甲苯、乙苯、苯乙烯等；2)多環(huán)芳烴，分子中含有2個(gè)或2個(gè)以上的苯環(huán)，如 聯(lián)苯、萘、蒽、菲等；3)非苯芳烴，分子中不含苯環(huán)，但含有結(jié)構(gòu)及性質(zhì)與苯環(huán)相似的芳烴， 并具有芳香族化合物的特性，如環(huán)戊二烯負(fù)離子等。所述的取代芳基是指芳基上的氫原子被其它取代基所取代得到的基團(tuán)。在本發(fā)明的實(shí)施例中，所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，各取代基團(tuán)組 合包含并不限于下表 本發(fā)明的另一目的是提供了上述1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類的制備方法，包括下
列步驟
IVν(1)制備3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )先將DMF和三氯氧磷在0°C反應(yīng)半小時(shí)，再加入取代的羥基苯乙酮(I )，室溫?cái)?拌反應(yīng)4h后再加入鹽酸羥胺繼續(xù)反應(yīng)6h，生成3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )；(2)制備5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III)將3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )、乙酰乙酸乙酯和哌啶在乙醇中回流，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)；(3)制備5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV )將5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶 _3_ 羧酸乙酯(III)在 50% H2S04_Ac0H 混合酸中回流，生成2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV )；(4)制備5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶_3_甲酰胺(V )將5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV)溶于DMF中，在0°C下 分別加入DCC和HOBt的二氯甲烷溶液，攪拌數(shù)分鐘后加入胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24h，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V )。本發(fā)明的某些1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物可按照常規(guī)方法制備為其藥學(xué) 接受的鹽的形式。包括其無機(jī)酸鹽和有機(jī)酸鹽無機(jī)酸包括(但不限于)鹽酸、硫酸、磷酸、 二磷酸、氫溴酸、硝酸等；有機(jī)酸包括(但不限于)乙酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、琥珀酸、乳 酸、對甲苯磺酸、水楊酸、草酸等。本發(fā)明的化合物具有良好的抗腫瘤活性，它們可以用于治療腫瘤，包括食道、胃、 腸、直腸、口腔、咽、喉、肺、結(jié)腸、乳腺、子宮、子宮內(nèi)膜、卵巢、前列腺、睪丸、膀胱、腎、肝、胰 腺、骨、結(jié)締組織、皮膚、眼、腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等部位發(fā)生的癌癥，以及甲狀腺癌、白血病、 霍杰金式病、淋巴瘤和骨髓瘤等。優(yōu)選地，所治療的腫瘤為乳腺癌，更優(yōu)選地，為轉(zhuǎn)移性的乳 腺癌。本發(fā)明的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物的藥理活性使其可以用于制備抗腫 瘤、抗真菌及抗病毒藥物，因此本發(fā)明還包括以這些化合物或其藥學(xué)可接受的鹽作為活性 成分的藥物組合物，該藥物組合物中還含有藥學(xué)上接受的載體，可以是固體形式或是液體 形式，所述的藥物劑型可以是片劑、膠囊、粉末劑、顆粒劑、混懸劑、或注射劑。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做具體描述，但下列實(shí)施例不應(yīng)看作是對本發(fā)明范圍的 限制。實(shí)施例1 :3_氰基-4-苯并吡喃酮(II )的制備
在園底燒瓶中加入DMF(20mL)和POCl3 (12mL，0125mol)，在0°C下攪拌反應(yīng)0. 5h。 于0°C下加入鄰羥基苯乙酮(4. 25g，0.031mol)，室溫反應(yīng)4h。反應(yīng)結(jié)束后加CH2Cl245mL稀 釋，冷至0°C，再加入鹽酸羥胺的DMF溶液(6. 5g H2NOH · HCl溶于20mL DMF中)，室溫?cái)嚢?反應(yīng)24h。反應(yīng)結(jié)束后加水35mL稀釋，用二氯甲烷提取(3X25mL)，有機(jī)層再依次用10% NaHCO3溶液和飽和氯化鈉溶液洗滌。無水Na2SO4干燥，過濾，濾液蒸干，得黃色固體。甲醇 重結(jié)晶，得無色針狀晶3. 2g，收率60. 4。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ 7. 53 (1Η, t，6-Η)，7. 55 (1Η，d，8-H)，7. 78 (1H，t，7_H)， 8. 25 (1H, d,5-H) ,8. 40 (1H, s，2_H) ；ESI-MS (m/z) 210 (M++H+Na) ；IR(KBr) cm-1 -.2241,1662 ； m. p. 176-178°C (lit. 177_178°C )。實(shí)施例2 2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III)的 制備取3-氰基-4-苯并吡喃酮(II ) (3. 42g，0. 02mol)、乙酰乙酸乙酯(2. 60g， 0. 02mol)和哌啶4mL，在80mL乙醇中回流。反應(yīng)結(jié)束后停止回流，冷卻，加水250mL稀釋， 過濾析出的固體，水洗至中性，抽干，得紅色粗品。在硅膠色譜柱上純化(洗脫劑石油醚 乙酸乙酯=20 1)，得白色晶體2. 65g，收率46.8%。1H-NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 45 (3Η, t，2，-CH3)，2· 91 (3H，s，2_CH3)，4· 42 (2Η，q, 1，-CH2-)，7. 52 (1H, t, 7-H)，7. 65 (1H, d, 9-H)，7. 85 (1H, t，8-H)，8. 28 (1H, d, 6-H)，9. 16 (1H, s，4-H)。ESI-MS(m/z) :282 (M++Na_K) ；IR(KBr) cnT1 :1715，1655 ;m. p. 151_152°C實(shí)施例3 2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV )的制備將2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III ) (1. 5g, 0. 0053mol)加入 50 % H2SO4-AcOHd 2)混合酸 27mL，130 °C 回流攪拌 3h。將反應(yīng) 液倒入200mL水中，析出固體，過濾，水洗，抽干得到灰白色固體，用DMF-H2O重結(jié)晶 得白色固體 1. 21g,收率 91.3 V0o 1H-NMR (300MHz, d6_DMS0) δ 2. 85 (3Η, s，2_CH3)，
7.51(1H, t, 7-H)，7. 71 (1H, d, 9-H)，7. 90 (1H, t，8_H)，8. 15 (1H, d, 6-H)，8. 90 (1H, s，4_H)， 13. 56 (1H, br, -C00H)。ESI-MS (m/z) :256(M+H+) ； IR (KBr) cnT1 :3103，3066，1732，1644 ; m. p. 290-295 °C。實(shí)施例4 2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_芐酰胺(V )的制 備將2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶 _3_ 羧酸(IV) (lg，0.004mOl)溶 于20mL DMF中，冰水冷卻至0°C。另稱取DCC(0. 87g，0. 0042mol)和H0Bt(0. 57g，0. 0042mol) 分別溶于50mLCH2Cl2中，在0°C下依次加入反應(yīng)液中，攪拌。于0°C下加入芐胺(0. 5mL， 0. 004mol)，室溫?cái)嚢柽^夜。反應(yīng)液依次用5%檸檬酸、飽和NaHCO3和水洗滌，有機(jī)層用無水 Na2SO4干燥，過濾，濃縮至干。用乙醇重結(jié)晶，得白色晶體0. 72g，收率53. 1 %。1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 85 (3Η, s，2_CH3)，4. 70 (2Η，d，2，-CH2-) ,6. 50 (1H, br, -NH-)，7· 34 7· 46 (6Η, m，3， 一O 禾口 7_H), 7· 64 (1Η, d，9_H)，7· 80 (1Η, t，8_H)，
8.24 (1Η, d，6-H)，8· 65(1Η，s，4_H)。ESI-MS (m/z) :345 (M+H+)，711 (2M+Na+) ；IR(KBr) cm-1 3270，1673，1638 ；m. p.215_216°C其余的目標(biāo)化合物分別以不同基團(tuán)取代的鄰羥基苯乙酮和不同的胺為原料，重復(fù) 實(shí)施例1、2、3、4中的步驟，得到不同的2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_酰胺類化合物。實(shí)施例中所用試劑均為市售分析純。本發(fā)明部分已合成的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和表征數(shù)據(jù)如下。
2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-甲基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-methyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 83 (3Η, s,2-CH3) ,3. 09 (3Η, d,2' -CH3) ,6. 21 (1H, br, -NH-)，7. 45 (1H, t, 7_H)，7. 60 (1H, d, 9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)，8. 25 (1H, d, 6_H)，8. 62 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) :269(M+H+) ；IR(KBr) cnT1 :3275，1673，1642 ；m. p. 277_278°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_乙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-ethyl-3-amide IH NMR(300MHz, CDC13) δ :1. 32 (3H, t，3，-CH3)，2. 84 (3H，s，2_CH3)，3. 55 (2H， m，2，-CH2)，6. 05 (1H, br, -NH-)，7. 46 (1H, t，7_H)，7. 63 (1H, d，9_H)，7. 82 (1H, t，8_H)， 8. 30 (1H, d，6-H)，8· 65(1H，s，4_H). ESI—MS (m/z) :283(M+H+) ； IR (KBr) cnf1 :3274，1670， 1637 ；m. p. 252-254V2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-n-propyl-3-amide IH NMR (300MHz, CDC13) δ 1. 04 (3H, t，4，-CH3)，1. 68 (2H，m，3，-CH2)，2. 80 (3H， s，2-CH3)，3. 48 (2H, m，2，-CH2)，6. 22 (1H, br, -NH-)，7. 48 (1H, t，7_H)，7. 61 (1H, d，9_H)， 7. 81(1H, t，8-H)，8. 25 (1H, d，6_H)，8. 61(1H，s，4_H) · ESI-MS(m/z) 295(M-H+) ； IR(KBr) cm-1 :3281,1671，1634 ；m.p.211_212°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_異丙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3-b]pyridine-N-isopropyl-3-amide 1H 匪R(300MHz，CDCl3) δ 1· 29 (6Η，dd，3，-CH3X 2)，2· 84 (3Η，s，2_CH3)，4· 33 (1Η， m，2，-CH), 5. 85 (1H, br, -NH-)，7· 47 (1Η，t，7_H)，7· 64 (1H，d，9_H)，7· 82 (1H, t，8_H)， 8. 32 (1H, d，6-H)，8· 63(1H，s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :297(M+H+) ；IR(KBr) cm-1 :3274,1671, 1636 ；m. p. 240-2410C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 01 (3H, t，5，-CH3)，1. 48 (2H，m，4，-CH2-)，1. 66 (2H， m，3，-CH2-)，2. 83 (3H, s，2_CH3)，3. 52 (2H, q，2，-CH2-) ,6. 10 (1H，br, -NH-), 7. 46 (1H, t, 7-H)，7. 63 (1H, d, 9_H)，7. 81 (1H, t，8_H)，8. 28 (1H, d, 6_H)，8. 63 (1H, s，4_H) ； ESI-MS (m/z) 311(M+H+) ； IR (KBr)cnT1 :3285，1671，1634 ；m. p. 193-195°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_芐基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3~b]pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 85 (3H, s，2_CH3)，4. 70 (2H，d，2，-CH2-) ,6. 50 (1H, br, -NH-)，7. 34 7. 46 (6H, m, Ar-H)，7. 64 (1H, d, 9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)，8. 24 (1H, d, 6_H)， 8. 65 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) :345 (M+H)+，711 (2M+Na)+; IR (KBr) cnf1 :3270，1673，1638. m. p. 215-216°C2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯芐基)_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorobenzyl)_3_ amide 1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 84 (3H, s，2_CH3)，4. 65 (2H，d，2，-CH2-) ,6. 49 (1H, br, -NH-) , 7. 34 (4H, m, Ar-H) ,7. 45 (1H, t，7_H)，7. 61 (1H, d，9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)， 8. 24(1H, d,6-H) ,8. 64(1H, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :379 (M+H)+，779 (2M+Na)+;IR(KBr) cnT1 : 3308，1672，1637 ；m. p.240-241°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_哌啶基酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-3-piperidyl amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 55 (2Η, m，4，-CH2-)，1. 73 (4H, m，3，，5，-CH2-X 2)， 2. 71 (3H, s, 2-CH3)，3. 26 (2H, t，6，-CH2-)，3. 81 (2H, t，2，-CH2-)，7. 46 (1H, t, 7_H) 7. 62 (1H, d，9-H)，7· 81 (1H，t，8_H)，8· 32 (1H，d，6_H)，8. 50 (1H，s，4_H) ； ESI-MS (m/z) :323(M+H)+; IR(KBr)CnT1 :1651，1635 ；m. p. 194_195°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_吡咯基酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3-b]pyridine-3-pyrrolidinyl amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 99 (4H, m，3，，4，-CH2-X 2) , 2. 72 (3H, s，2_CH3)， 3. 28 (2H, t，2，-CH2-) , 3. 72 (2H, t，5，-CH2-) , 7. 48 (1H, t，7_H) , 7. 62 (1H, d，9_H)， 7. 80 (1H, t，8-H)，8. 30 (1H, d，6_H)，8. 56 (1H, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :309 (M+H+)，348 (M+K)+， 639 (2M+Na+) ；IR(KBr) cm-1 :1664,1629 ；m. p. 159_160°C2-甲基-7-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-甲基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-methyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 50 (3Η, s，7_CH3)，2· 84 (3Η，s,2-CH3) ,3. 08 (3Η, d，2，-CH3) ,6. 11 (1H, br, -NH-) , 7. 52 (1H, d，9_H) , 7. 60 (1H, d，8_H) ,8. 07 (1H, s, 6-H) ,8. 65 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) 283 (M+H)+ ；IR(KBr)CnT1 :3277，1664，1643 ； m. p. 279-2810C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-乙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-ethyl-3-amide 1H-MR (300MHz, CDCl3) δ 1. 32 (3Η, t, CH3)，2· 50 (3Η，s, CH3)，2· 83 (3H，s, CH3), 3. 55 (2Η, q, CH2), 6. 04 (1Η, br, NH) ,7. 52 (1Η, d, Ar-H) ,7. 61 (1Η, d, Ar-H) ,8. 08 (1Η, s, Ar-H) ,8. 64 (1Η, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) 297. 46 (M+H)+ ；IR (KBr) cm_13274, 1672, 1637 ； m. ρ· 258-260 °C2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ]
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 05 (3Η, t，4，-CH3)，1· 71 (2H，m，3，-CH2)，2· 50 (3H， s，7-CH3)，2· 82(3Η，s,2-CH3) ,3. 49 (2Η, m，2，-CH2), 6. 11 (1Η, br, -ΝΗ-)，7· 51 (1Η，d，9_H)， 7. 61 (1H, d，8-H)，8· 07(1H，s，6_H)，8. 63 (1H，s，4_H) ；EI-MS (m/z) :351 (M+K+)，311 (M+H+)； IR(KBr)CnT1 :3284，1669，1635 ；m. p. 221-222V2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_異丙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-isopropyl-3-amide1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 33 (6Η, d，3，-CH3 X 2) ,2. 51 (3Η, s，7_CH3)，2· 83 (3Η， s，2-CH3)，4· 32(1H，m，2，-CH) ,5. 85 (1H, br, -NH-), 7. 52 (1H, d，9_H)，7. 61 (1H，d，8_H)， 8. 09 (1H, s，6-H)，8. 61 (1H，s, 4-H). ESI-MS (m/z) :311 (M+H+). IR (KBr) cnf1 :3298，1674， 1633. m. p. 254-256 °C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 01 (3Η, t，5，-CH3)，1· 48 (2Η，m，4，-CH2-)，1· 69 (2H，m， 3'-CH2-) ,2. 49(3H，s，7-CH3)，2· 77 (3H，s，2_CH3)，3· 51 (2H，q，2，-CH2-)，6· 32 (1Η, br,-ΝΗ-)， 7. 48 (1Η, d，9-H)，7· 60(1Η，d，8_Η)，8. 01 (1Η，s，6_H)，8· 57 (1H，s, 4-H). ESI-MS (m/z) 365 (Μ+Ζ +Κ+) · IR(KBr)CnT1 :3298，1674，1633. m. p. 220-221 °C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_芐基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR (300MHz，CDCl3) δ 2. 47 (3Η, s，7_CH3)，2. 83 (3H, s，2_CH3)，4. 69 (2H, d, 2，-CH2)，6. 51 (1H, br, -NH-)，7. 32 7. 41 (5H, m, Ar-H)，7. 51 (1H, d, 9-H)，7. 61 (1H, d, 8-H)， 8. 01 (1H, s,6-H) ,8. 64 (1H, s, 4-H). ESI-MS (m/z) :739 (2M+Na+)，399 (M+K+)，359 (M+H+) ·IR(KBr)CnT1 :3270，1673，1633. m. ρ· 248-249°C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯芐基)_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorob enzyl)-3-amide 1H NMR (300MHz，CDCl3) δ 2. 49 (3H, s，7_CH3)，2. 84 (3H, s，2_CH3)，4. 65 (2H, d, 2，-CH2)，6. 53 (1H, br, NH)，7. 35 (4H, d, Ar-H)，7. 51 (1H, d, 9-H)，7. 61 (1H, d, 8-H)，8. 01 (1H, s,6-H) ,8. 65 (1H, s,4-H). ESI-MS (m/z) :393 (M+H+). IR(KBr)CnT1 -.3277, 1671, 1635. m. p. 245-246 °C2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-propyl-3-amide 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 0. 93(t,3H, CH3)，1. 56 (sext，2H，CH2)，2. 66 (s，3H， CH3)，3. 24 (m, 2H, CH2)，7. 77 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 94 (dd, IHjJ1 = 8. 7Hz，J2 = 2. 4Hz， Ar-H) ,8. 07 (s, 1Η, Ar-H) ,8. 46 (s, 1Η, Ar-H), 8. 71(br,lH, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) 329. 63(M-H_). IR(KBr) cm-1 :3283，1635，1671 ；m. p. 256-258 °C2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_異丙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-isopropyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 33 (6Η, d，2CH3)，2· 85 (3Η, s，2_CH3)，4· 32 (1Η, m, CH)， 5. 80(1Η, br, NH)，7. 60 (1H, d,9-H)，7. 76 (1H, d, 8-H)，8. 28 (1H, s，6-H)，8. 62 (1H, s，4_H). ESI-MS (m/z) :331(M+H+). IR(KBr) cm-1 :3282，1672，1637. m. p. 280-281 °C ·2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H 匪R(300MHz，DMS0_d6) δ 0. 92 (t,3H, CH3)，1. 36 (m, 2H, CH2)，1. 51 (m, 2H, CH2)，2. 67(s，3H，CH3)，3. 27 (m, 2H, CH2)，7. 81 (d, 1H, J = 9. OHz, Ar-H), 8. 11 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 48 (s，1H, Ar-H) ,8. 70 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). IR(KBr) cm-1 :3279，1698，1673. m. p. 242-244°C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_羥乙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3_b]pyridine-N-hydroxylet hyl-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 1. 24(m,2H, CH2) ,2. 67(s,3H, CH3) ,3. 54(m,2H, J =5. 7Hz, CH2) ,4. 84 (t, 1H, J = 5. 7Hz，OH)，7. 81 (d，1H，J = 9. OHz, Ar-H), 7. 99 (dd, 1H, J1 = 9. OHz, J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. ll(d，lH，J = 2. 7Hz, Ar-H) ,8. 56 (s, 1H, Ar-H), 8. 72 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) :333. 27 (M+H+) · IR(KBr) cnT1 :3274，1681，1636. m. p. 249-2510C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-芐基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3) ,4. 45(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2),
7.28 (dd, 1H, Jl = 8. 4Hz，J2 = 4. 2Hz，Ar-H)，7. 37 (d, 4H, J = 5. 2Hz，Ar-H)，7. 78 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 94 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. 07 (d, 1H, J = 2. 7Hz，Ar-H)，
8.54 (s，1H, Ar-H), 9. 27 (t, 1H, J = 5. 7Hz, NH). ESI-MS (m/z) :377· 35 (M-H)IR(KBr) cm-1 3269，1675，1634. m. p. 268-270 °C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氟芐基)_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-flurobe nzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3) ,4. 48(d,2H, J2 = 6. OHz, CH2), 7. 16-7. 22 (m, 2H, Ar-H)，7. 39-7. 44 (m, 2H, Ar-H)，7. 80 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 96 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz, Ar-H), 8. 10 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 56 (s, 1H, Ar-H)， 9. 25 (t, 1H, J = 6. OHz，NH). ESI-MS (m/z) :395. 62 (Μ-ΗΓ. IR(KBr) cnT1 :3270，1677，1635. m. p. 269°C (dec).2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯芐基)_3_酰胺
2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorob enzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 86(s,3H, CH3) ,4. 64(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2) ,6. 28 (br, 1H, NH)，7. 32-7. 39 (m, 4H, Ar-H)，7. 59 (d, 1H, J = 8. 7Hz，Ar-H)，7. 75 (dd, 1H, J1 = 9. OHz， J2 = 2. 4Hz, Ar-H) ,8. 25 (d, 1H, J = 2. 7Hz, Ar-H), 8. 65 (s, 1H, Ar-H). ESI-MS (m/z) 411. 64(M-H)IR(KBr)CnT1 3273,1674,1634. m. p. 248°C (dec).2-甲基-7-氯-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N_(4_甲基芐基)_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-methylb enzyl)-3-amide 1H NMR (300MHz, DMS0_d6) δ 2. 29(s,3H, CH3)，2. 68 (s，3H，CH3)，4. 44 (d，2H，J = 5. 7Hz, CH2)，7. 17 (d, 2H, J = 8. IHz, Ar-H)，7. 26 (d, 2H, J = 8. IHz, Ar-H)，7. 81 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 97 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. 11 (d，1H，J = 2. 7Hz，Ar-H)， 8. 54 (s，1H, Ar-H), 9. 23 (br, 1H，NH). ESI-MS (m/z) 391. 74 (M-H) IR(KBr) cm-1 :3277，1675， 1635. m. p. 2610C (dec). 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_正丁基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H - [1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-(4-n-butyl)-3-amide1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 0. 92(t,3H, CH3)，1. 40 (m，2H，CH2)，1. 52 (m，2H，CH2), 2. 67 (s，3H, CH3)，3. 26 (m, 2H, CH2)，3. 95 (s, 3H, OCH3)，7. 10 (dd, 1H, J1 = 8. 7Hz, J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 26 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 09 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H), 8. 45 (s, 1H, Ar-H)， 8. 68 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) :341. 66 (M+H)+· IR(KBr) cnT1 :3280，1694，1634. m. p. 248-250 °C ·2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_芐基_3_酰胺2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[l]benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-(4-benzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3)，3· 94 (s，3H，OCH3) ,4. 50(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2)，7. 09 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 24 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H)，
7.28 (d, 1H, J = 4. 5Hz，Ar-H)，7. 37 (d, 4H, J = 4. 5Hz，Ar-H)，8. 08 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，
8.53 (s，1H, Ar-H), 9. 23 (br, 1H，NH). ESI-MS (m/z) :373· 72 (M-H) IR(KBr) cm-1 :3270，1663， 1634. m. p. 268-270 °C . 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氟芐基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[l]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-flurob enzyl)-3—amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 67(s,3H, CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)，4. 47 (d，2H，J = 6. OHz, CH2)，7. 08-7. 26 (m, 4H, Ar-H)，7. 39-7. 43 (m, 2H, Ar-H)，8. 09 (d, 1H, J = 9. OHz, Ar-H), 8. 53 (s，lH，Ar_H)，9. 23 (br, 1Η，J = 6. 0Hz，NH). EI-MS (m/z) :393. 72(Μ+Η)+. IR(KBr) cnT1 :3292,1716，1662. m. ρ. 295-297°C · 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5Η_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯芐基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chloro benzyl)-3—amide1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 67(s,3H, CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)，4. 48 (d，2H，J =
6.OHz，CH2)，7. 10 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H)，7. 25 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H)，
7.38-7. 45(m，4H，Ar-H)，8· 09 (d, 1H, J = 8. 7Hz，Ar_H)，8· 54 (s，lH，Ar_H)，9. 24 (br, 1H, J = 6. OHz, NH). ESI-MS (m/z) :407· 56Μ-ΗΓ. IR(KBr) cm-1 :3294，1716，1662. m. p. 270°C (dec).2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N_(4_甲基芐基)_3_酰 胺2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-methyl benzyl)-3—amide 1H NMR (300MHz，DMS0-d6) δ 2. 29 (s，3H，CH3)，2. 67 (s，3H，CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)， 4. 44(d，2H，J = 5. 7Hz, CH2), 7. 10 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 17(d，2H，J = 7. 8Ηζ，Ar-H)，7. 25 (d, 2H, J = 3. 9Hz，Ar-H)，7. 26 (d, 1H, J = 3. 9Hz，Ar-H)，8. 09 (d, 1H, J =9.0Hz，Ar-H) ,8. 50 (s, 1H, Ar-H), 9. 19 (br, 1H, NH). EI-MS (m/z) :389. 61 (M+H)+. IR(KBr) cnT1 3257,1662，1637. m. p. 275_277°C ·實(shí)施例5 本發(fā)明的化合物的細(xì)胞毒作用(一)實(shí)驗(yàn)材料和方法1.實(shí)驗(yàn)材料(一)實(shí)驗(yàn)菌株本實(shí)驗(yàn)采用了 3種人癌細(xì)胞株作為篩選對象，此癌細(xì)胞株均由上海醫(yī)藥工業(yè)研究 院藥理研究室提供。1)人肺癌細(xì)胞A5492)人結(jié)腸癌細(xì)胞Colo2053)人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435(二)培養(yǎng)液為RPMI1640+15 % NBS+雙抗。所用全自動酶標(biāo)儀型號為 WellscanMK-2，生產(chǎn)廠商Labsystems。進(jìn)口 96孔培養(yǎng)板等。2.實(shí)驗(yàn)方法體外抗腫瘤瘤活性采用MTT法。樣品配制用DMSO(Merck)溶解后，加入PBS(-)配成1000 μ g/ml的溶液或均勻的 混懸液，然后用含DMSO的PBS (-)稀釋。培養(yǎng)液RPMI640+15%NBS+ 雙抗陽性對照藥物羥基喜樹堿實(shí)驗(yàn)步驟如下在96孔培養(yǎng)板中每孔加入濃度為4 5 X IO4個(gè)/ml的細(xì)胞懸液1000 μ 1，置37°C， 5% CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。24h后，加入樣品液，10μ 1/孔，設(shè)雙復(fù)孔，37°C，5% CO2作用72h。每孔 加入5m g/ml的MTT溶液20 μ 1，作用4h后加入溶解液，100 μ 1/孔，置培養(yǎng)箱內(nèi)，溶解后用 ΜΚ-2全自動酶標(biāo)儀測570nm0D值。(二)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表2. 29個(gè)化合物對人體腫瘤細(xì)胞的體外增殖抑制作用
21 實(shí)例6 拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制活性試驗(yàn)運(yùn)用文獻(xiàn)方法(KingsburyWD, Boehm JC, Jakas DR, et al. J Med Chem，1991，34， 98-107)，對部分化合物進(jìn)行了拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制活性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)它們在0. Ol-IOOuM范圍內(nèi)具有良好的抑制Topl的活性。 綜上，本發(fā)明化合物具有一定的抗腫瘤作用，特別值得指出的是，該類化合物對轉(zhuǎn) 移性的乳腺癌細(xì)胞顯示了良好的選擇性毒性，為開發(fā)為高效、低毒、特異性強(qiáng)的抗腫瘤藥物 奠定了基礎(chǔ)，具有很好的開發(fā)價(jià)值。本發(fā)明的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物代表著 一類全新結(jié)構(gòu)的具有抗腫瘤活性的化合物，這為深入研究和開發(fā)新的抗腫瘤藥物開辟了新 的途徑和方向。
權(quán)利要求
一類如通式(I)所示的1 氮雜呫噸酮 3 甲酰胺類化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R1的取代位置可位于6至9位，可以是單、雙或多取代，R1為下列基團(tuán)中的任一類a)氫；b)C1 8的直鏈或支鏈烷氧基；c)C1 8的直鏈或支鏈烷基；d)鹵素；m)亞甲二氧基；R2、R3獨(dú)立地表示下列基團(tuán)氫、C1 8的直鏈或支鏈的烷基、取代或未取代的芳基亞甲基，所述的取代為氫、鹵素、C1 8的直鏈或支鏈的烷基、C1 8的直鏈或支鏈的烷氧基、硝基、氨基、羥基；或R2、R3一起形成由3到7個(gè)CH2單元連接組成的鏈；R4為氫、C1 8的直鏈或支鏈烷基。FSA00000119853000011.tif
2.按權(quán)利要求1所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，其特征在于，當(dāng)R1為單取代且7位為氟、氯時(shí)，R2和R3的組合不能為二乙基、叔丁基、芐基、對氯芐基；當(dāng)R1為單取代且7位為氫時(shí)，R2和R3的組合不能為芐基、對氯芐基； 當(dāng)R1為單取代且7位為甲基時(shí)，R2和R3的組合不能為叔丁基、芐基、對氯芐基。
3.按權(quán)利要求1至2所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，其特征在于，R1取代 為單取代。
4.按權(quán)利要求1至3所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，其特征在于，R1取代 位于7位。
5.按權(quán)利要求1至4所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，其特征在于，所述的芳基亞甲基為芐基。
6.按權(quán)利要求1至5所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，其特征在于，所述的 R2、R3為取代或未取代的芳基亞甲基時(shí)，所述的取代為氫或鹵素。
7.按權(quán)利要求1至6所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，其特征在于R4為甲基。
8.按權(quán)利要求1所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物，包含
9.權(quán)利要求1至8中所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物的制備方法，包括以下 步驟 (1)制備3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)先將DMF和三氯氧磷在0°C反應(yīng)半小時(shí)，再加入取代的羥基苯乙酮(I)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng) 4h后再加入鹽酸羥胺繼續(xù)反應(yīng)6h，生成3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)；(2)制備5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)將3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)、乙酰乙酸乙酯和哌啶在乙醇中回流，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)；(3)制備5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)將5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)在50% H2SCM-AcOH混合 酸中回流，生成2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)；(4)制備5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V)將5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)溶于DMF中，在0°C下分別加入 DCC和HOBt的二氯甲烷溶液，攪拌數(shù)分鐘后加入胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24h，生成5-氧_5H_[1] 苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V)。
10.按照權(quán)利要求1至8所述的1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物在制備抗腫瘤藥物 中的應(yīng)用。
11.按照權(quán)利要求1至8所述的該類化合物在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用，其特征在于腫瘤 為乳腺癌。
12.按照權(quán)利要求1至8所述的該類化合物在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用，其特征在于腫瘤 為轉(zhuǎn)移性乳腺癌。
13.—種組合物，含有權(quán)利要求1-8所述的任一 1-氮雜咕噸酮-3-甲酰胺類化合物或 其藥學(xué)上可接受的鹽及藥學(xué)上接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，公開了一類如通式(I)所示的1-氮雜呫噸酮-3-甲酰胺類化合物及其制備方法和用途。該類化合物具有一定的抗腫瘤作用，特別值得指出的是，該類化合物對轉(zhuǎn)移性的乳腺癌細(xì)胞顯示了良好的選擇性毒性，為開發(fā)為高效、低毒、特異性強(qiáng)的抗腫瘤藥物奠定了基礎(chǔ)。
文檔編號A61P35/04GK101899051SQ201010176290
公開日2010年12月1日 申請日期2010年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月17日
發(fā)明者亓云鵬, 付小旦, 呂加國, 周有駿, 宋云龍, 張萬年, 朱駒, 章玲 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)