專利名稱::苯丁?;S素衍生物及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本發(fā)明屬制藥領(lǐng)域,尤其涉及苯丁?;S素衍生物及其制備方法,以及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
:姜黃素(Curcumin,簡(jiǎn)稱Cur)是從姜科姜黃屬植物姜黃、莪術(shù)、郁金等的根莖中提取的有效成分,具有抗腫瘤、抗炎、抗人類免疫缺陷病毒、抗膽固醇、抗氧化等多種藥理作用,具有良好的臨床應(yīng)用潛力。但Cur不穩(wěn)定,在體內(nèi)代謝迅速,生物利用度低,體內(nèi)難以達(dá)到有效濃度,嚴(yán)重制約了姜黃素開發(fā)成有效的抗癌藥。通過(guò)結(jié)構(gòu)改造合成姜黃素衍生物,提高生物利用度、延長(zhǎng)生物消除半衰期t1/2有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的之一在于提供4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酰基姜黃素和4,4’_[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁酰基姜黃素及其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的目的之二在于提供4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁?;S素和4,4’_[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁酰基姜黃素及其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法。為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的采用的技術(shù)方案如下本發(fā)明所述的4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁?;S素其結(jié)構(gòu)式如下列化合物1所示;4,4’_[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁?;S素其結(jié)構(gòu)式如下列化合物2所示,以及本發(fā)明所述的姜黃素衍生物的鹽類是下式結(jié)構(gòu)的化合物1和化合物2在藥學(xué)上可接受的鹽類<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>在藥學(xué)上可接受鹽包括堿金屬鹽、堿土金屬鹽、含有機(jī)堿的鹽、含有機(jī)堿的鹽。該可接受鹽包括鈣鹽、鎂鹽、銨鹽、三乙基胺鹽、乙醇胺鹽。本發(fā)明所述的姜黃素衍生物和鹽類的制備方法,具體步驟如下將姜黃素溶于干燥過(guò)的二氯甲烷,加入催化量DMAP(N,N-4-二甲基氨基吡啶),而后加入已溶解于二氯甲烷的4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酸進(jìn)行酯化反應(yīng),而后將產(chǎn)物經(jīng)過(guò)柱層析分離純化。在上述本發(fā)明的方法中可以先加脫水劑DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)或EDCI(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽),再加化學(xué)領(lǐng)域的通用催化量的DMAP。本發(fā)明所合成的化合物1和化合物2結(jié)構(gòu)的姜黃素衍生物,均獲得核磁共振光譜(NMR)、紅外線光譜(IR)、紫外線光譜(UV)、液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-Mass)鑒定,在鑒定后的化合物1和化合物2,依據(jù)需要而制成合適的藥物學(xué)上的劑型。本發(fā)明是保護(hù)化合物1或化合物2的藥物或其藥學(xué)上可接受的鹽,或含有化合物1或化合物2的藥物或其藥學(xué)上可接受的鹽組成的藥物組合物或制劑。在制備藥物學(xué)上的劑型中,其載體為藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體,例如稀釋劑、賦形齊U、填充劑、粘合劑、崩解劑、表面活性劑、潤(rùn)滑劑等;其可以制成口服和其他給藥方式的各種劑型,如口服液、混懸液、膠囊、片劑、丸劑、顆粒劑、及粉針注射液等;按藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備,其選用含有重量百分比為0.-99.5%活性成分的化合物1或化合物2。也可含有0.-99.5%的化合物1或化合物2的藥物組合物;為同領(lǐng)域一般技術(shù)人員能實(shí)現(xiàn)的技術(shù)。本發(fā)明的使用量可根據(jù)用藥途徑,患者的年齡、體重、所治療的疾病的類型和嚴(yán)重程度等變化,其服用量可以是0.001-10g/kg體重,可以一次或多次給藥。本發(fā)明目的之三在于4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酰基姜黃素和4,4’-[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁酰基姜黃素,用于制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。姜黃素衍生物,可用于但不局限于制備治療白血病、皮膚癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、乳腺癌或前列腺癌藥物。白血病優(yōu)選人慢性粒細(xì)胞白血病。本發(fā)明的有益效果本發(fā)明所述的化合物1姜黃素4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酸酯在體內(nèi)對(duì)多種動(dòng)物腫瘤細(xì)胞移植模型均有明顯抑制,尤其是對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制作用可高達(dá)60%,而且給藥組裸鼠體重?zé)o明顯下降,無(wú)動(dòng)物發(fā)生死亡?;衔?對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞株接種NOD-SCID小鼠構(gòu)建人慢性粒細(xì)胞白血病模型,生命延長(zhǎng)率也提高了,且未見有對(duì)小鼠的嚴(yán)重毒性。對(duì)小鼠肝癌H22在體抑瘤率為40-75%,同樣化合物2由于結(jié)構(gòu)相似,實(shí)驗(yàn)證明也有同樣的效果。因此,該類化合物具有比姜黃素更強(qiáng)的抑瘤作用。圖1是化合物1靜脈給藥對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤的抑制作用2是化合物1口服給藥對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤的抑制作用3是化合物1對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線4是化合物1對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞裸鼠移植瘤的作用5和圖6是化合物1對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病小鼠模型的小鼠大體解剖和小鼠骨髓bcr-abl基因表達(dá)7和圖8是NS組和化合物1給藥對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病模型小鼠外周血象9是化合物2對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤的抑制作用如圖1所示,建立H22小鼠移植瘤,分別靜脈給予小鼠生理鹽(對(duì)照組),化合物1:50、70mg/kg(給藥組)。抑瘤率高達(dá)60%。如圖2所示,建立H22小鼠移植瘤,分別口服給予小鼠生理鹽(對(duì)照組),化合物1:50、75、100mg/kg(給藥組),姜黃素50mg/kg(姜黃素對(duì)照組)。給藥組抑瘤率分別為41.21%、52.93%、75.06%。姜黃素對(duì)照組(與化合物100mg/kg等摩爾)抑瘤率僅為16.58%,可見化合物抑瘤作用明顯比姜黃素要強(qiáng)。如圖3所示,建立人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞裸鼠移植瘤模型,分別口服給予裸鼠生理鹽(對(duì)照組),化合物1:40、60mg/kg(給藥組)。于第0、4、8、11天用游標(biāo)卡尺測(cè)小鼠瘤的長(zhǎng)、寬、高,計(jì)算瘤體積=長(zhǎng)X寬X高X1/2,增長(zhǎng)百分率(%)=(實(shí)驗(yàn)組平均瘤體積_對(duì)照組平均瘤體積)/對(duì)照組平均瘤體積X100%。從圖3可見,給藥組腫瘤的生長(zhǎng)受到明顯抑制。如圖4所示,建立K562細(xì)胞裸鼠移植瘤模型,分別口服給予裸鼠生理鹽(對(duì)照組),化合物1:40、60mg/kg(給藥組)。抑瘤率分別為66.6%、56.7%。如圖5、圖6所示,用NOD-SCID小鼠構(gòu)建人慢性粒細(xì)胞白血病模型,對(duì)照組小鼠大體解剖,腹腔內(nèi)見大量血性腹水,并出現(xiàn)實(shí)體瘤。小鼠骨髓細(xì)胞RT-PCR均檢到人人慢性粒細(xì)胞白血病的特征基因bcr-abl,說(shuō)明人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞K562歸巢至NOD-SCID小鼠骨髓。如圖7、圖8所示,NOD-SCID小鼠人慢性粒細(xì)胞白血病模型,分別口服給予小鼠生理鹽水(對(duì)照組),化合物1:60mg/kg(給藥組),給藥組外周血象幼稚細(xì)胞亦明顯少于對(duì)照組。如圖9所示,分別口服給予小鼠生理鹽(對(duì)照組),化合物2:35、50、75、115mg/kg(給藥組),姜黃素50mg/kg(姜黃素對(duì)照組)。給藥組抑瘤率分別為27.43%,32.25%,62.60%,58.39%。姜黃素對(duì)照組(與化合物100mg/kg等摩爾)抑瘤率僅為13.42%,可見化合物2的抑瘤作用明顯比姜黃素要強(qiáng)。具體實(shí)施例方式下列結(jié)合附圖和實(shí)例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明實(shí)施例14-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁?;S素(化合物1)的合成EDCI1.92g(10mmOl)溶于無(wú)水二氯甲烷200ml中,在冰浴下攪拌并加入姜黃素7.36g(20mmol),DMAP0.244g(2mmol),再緩慢滴加溶有4_[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酸3.04g(IOmmol)的二氯甲烷200ml,室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)6小時(shí)。用蒸餾水洗滌,有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥后,過(guò)濾濃縮得粗品,粗品用中壓制備色譜分離,反向C18柱,流動(dòng)相甲醇水50%—100%(體積百分比)梯度洗脫,得到4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酰基姜黃素純品1.30g,產(chǎn)率20%,化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>2.58(m,2H,-COCH2CH2CH2Ph),3.62(t,4H,-NCH2CH2Cl),3.71(t,4H,-NCH2CH2Cl),3.85(s,6H,2Ar-0CH3),6.14(s,1H,-COCH=C(OH)-),6.70(d,2H,2-CH=CH-Ar),6.78-6.99(m,2H),7.13-7.19(m,2H),7.33(m,2H),7.51(d,2H),7.58(d,2H),7.62(d,2H,2Ar-CH=),9.72(s,1H,Ar-OH);HPLC-MSm/z654.2(M+1)實(shí)施例24,4'-[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁?;S素(化合物2)的合成EDCI1.92g(10mmOl)溶于無(wú)水二氯甲烷IOOml中,在冰浴下攪拌并加入姜黃素1.84g(5mmol),DMAP0.122g(Immol),再緩慢滴加溶有4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酸3.04g(IOmmol)的二氯甲烷200ml,室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)6小時(shí)。用蒸餾水洗滌,有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥后,過(guò)濾濃縮得粗品,粗品用中壓制備色譜分離,反向C18柱,流動(dòng)相甲醇水50%—100%(體積百分比)梯度洗脫,得到4,4'_[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁?;S素純品(化合物2)1.88g,產(chǎn)率40%,化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下OOH、jx^。1,1^v^cln"1N化合物2VNClClC49H54C14N2O8,mp58-60"C,1H匪R(CDCl3)δ2.04(m,4H,-COCH2CH2CH2Ph),2.29(t,4H,-COCH2CH2CH2Ph),2.60(m,4H,-COCH2CH2CH2Ph),3.63(t,4H,-NCH2CH2Cl),3.70(t,4H,-NCH2CH2Cl),3.87(s,6H,2Ar-0CH3),6.58(d,2H,J=16Hz,2—CH=CH-Ar),6.63(d,4H,J=8Hz),6.66(s,1H,-COCH=C(OH)-),7.03(s,2H),7.05(m,2H),7.08(m,2H),7.12(d,4H,J=8Hz),7.17(m,2H),7.51(d,2H),7.53(d,2H),7.62(d,2H,J=16Hz,2Ar-CH=);HPLC-MSm/z941.3(M+1)實(shí)施例3化合物1對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤模型的作用3.1材料812周齡昆明種健康小鼠,雌性,體重為(20士2)g;小鼠由福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào)SCXK(閩)200420002)。小鼠肝癌細(xì)胞株H22?;衔?使用前用配成所需濃度。3.2方法3.2.1荷瘤小鼠模型的建立H22腫瘤細(xì)胞傳兩代以上,調(diào)整細(xì)胞數(shù)至107ml,0.2mL/只接種于小鼠右前肢皮下,接種2只,待約兩周,剝瘤,勻漿,再接種80只。3.2.2分組A共分為3組接種瘤株24h后的小鼠隨機(jī)分成3組1組為生理鹽水對(duì)照組,化合物1采用上述實(shí)施例方法制得的,以下同,II組為化合物1低劑量組(化合物150mg/kg),III組為化合物1高劑量組(70mg/kg),給藥方法為尾靜脈注射,0.lml/10goB共分為5組接種瘤株24h后的小鼠隨機(jī)分成5組1組為生理鹽水組(即腫瘤對(duì)照組),II組為化合物1低劑量組(劑量為50mg/kg),III組為化合物1中劑量組(劑量為75mg/kg),IV組為化合物1高劑量組(劑量為100mg/kg),V組為Cur組(劑量為50mg/kg,與高劑量IV組等摩爾),給藥方法為灌胃,0.lml/10go3.2.3抑瘤率處死小鼠后剝瘤稱瘤質(zhì)量,計(jì)算抑瘤率.腫瘤抑制率(%)=對(duì)照組平均瘤質(zhì)量-實(shí)驗(yàn)組平均瘤質(zhì)量/對(duì)照組平均瘤質(zhì)量X100%。3.3結(jié)果3.3.1化合物1靜脈給藥的抑瘤作用觀察不同給藥劑量的抑瘤作用,可見化合物1對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤率具有明顯的抑制作用(見表1,說(shuō)明書附圖的圖1)。表1化合物1靜脈給藥對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤抑制作用M~~鼠數(shù)瘤重(g)抑瘤率組別mg/kgxday前/后(%)NS0x1010/101.01士0.470低劑量組50x710/90.40±0.1560.84**高劑量組70x510/60.335±0.1666.83**注=NS(生理鹽水對(duì)照組),與NS組相比,*P<0.05廣P<0.01.3.3.2化合物1口服給藥的抑瘤作用觀察口服給藥6天的抑瘤作用??梢婋S劑量的增加抑瘤率逐漸提高,呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系。給藥組(100mg/kg)比等摩爾的對(duì)照藥姜黃素(50mg/kg)抑瘤率有顯著提高,而且大劑量未見有小鼠死亡,可見化合物1較安全。(見表2及說(shuō)明書附圖的圖2)表2口服給藥對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與NS組相比,*P<0.05廣P<0.01.Cur為姜黃素實(shí)施例4化合物1對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞裸鼠移植瘤模型的作用4.1材料4-6周齡SPF級(jí)裸鼠,雄性,購(gòu)自由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供(許可證號(hào)SCXX(滬)2007-0005),在SPF實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)。人類慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所細(xì)胞庫(kù)?;衔?使用前配成所需濃度。4.2方法4.2.1荷瘤小鼠模型的建立K562細(xì)胞傳兩代以上,調(diào)整細(xì)胞數(shù)至5X107ml,0.2mL/只接種于裸鼠右前肢皮下,接種30只。4.2.2分組共分為3組接種瘤株6天后,根據(jù)小鼠腫瘤大小,將小鼠分層隨機(jī)隨機(jī)分成3組I組為生理鹽水對(duì)照組,II組為化合物1低劑量組(40mg/kg),III組為化合物1高劑量組(60mg/kg),給藥方法為灌胃給藥,0.lml/10go4.2.3瘤增長(zhǎng)百分率分別于第0、4、8、11天用游標(biāo)卡尺測(cè)小鼠瘤的長(zhǎng)、寬、高,計(jì)算瘤體積=長(zhǎng)X寬X高X1/2,增長(zhǎng)百分率(%)=(實(shí)驗(yàn)組平均瘤體積一對(duì)照組平均瘤體積)/對(duì)照組平均瘤體積X100%。4.2.4抑瘤率處死小鼠后剝瘤稱瘤質(zhì)量,計(jì)算抑瘤率.腫瘤抑制率(%)=(對(duì)照組平均瘤質(zhì)量一實(shí)驗(yàn)組平均瘤質(zhì)量)/對(duì)照組平均瘤質(zhì)量X100%。4.3結(jié)果4.3.1瘤增長(zhǎng)百分率各組荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)的動(dòng)態(tài)變化見說(shuō)明書附圖的圖3,可見給藥組的腫瘤增長(zhǎng)速率明顯比NS對(duì)照組要低。4.3.2口服給藥的抑瘤作用觀察口服給藥11天的抑瘤作用。結(jié)果顯示化合物1能明顯抑制K562細(xì)胞裸鼠移植瘤的生長(zhǎng),其抑瘤率分別為66.6%、56.7%,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))具有顯著性差異,具有一定的量效關(guān)系(見表3,說(shuō)明書附圖的圖4)。與生理鹽水組比較,給藥組裸鼠體重?zé)o明顯下降,無(wú)動(dòng)物發(fā)生死亡,提示化合物在提高藥物抗癌作用的同時(shí)并沒(méi)有增加藥物的毒性。試驗(yàn)表明化合物1對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞裸鼠移植瘤模型具有顯著的抑瘤作用。表3口服給藥對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</table注與NS組相比,*P<0.05;**P<0.01.實(shí)施例5化合物1對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病小鼠模型的作用5.1材料5.1.1N0D-SCID小鼠雌性和雄性兼用,46周齡,體重1822g,中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供,許可證編號(hào)SCXK(京)2005-0013。NOD-SCID小鼠在SPF實(shí)驗(yàn)室層流架內(nèi)帶蓋鼠盒中飼養(yǎng)(符合SPF標(biāo)準(zhǔn))。標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料,飲水,墊料及一切與鼠接觸物品均經(jīng)滅菌處理。5.1.2人白血病細(xì)胞株(K562)購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所細(xì)胞庫(kù),本室常規(guī)傳代培養(yǎng),采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞做動(dòng)物體內(nèi)移植。5.1.3化合物1使用前配成所需濃度。5.2方法5.2.1小鼠慢性粒細(xì)胞白血病模型的建立NOD-SCID小鼠接受2.OGyX射線全身照射,次日取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期K562細(xì)胞用于移植,尾靜脈一次性注射IXlO7ceIl/鼠。5.2.2化合物1對(duì)NOD-SCID小鼠慢性粒細(xì)胞白血病模型作用NOD-SCID小鼠移植K562細(xì)胞后,隨機(jī)分組,分設(shè)生理鹽水對(duì)照組及給藥治療組,每組四只??瞻讓?duì)照組給予生理鹽水0.2ml/只灌胃,給藥治療組給予化合物160mg/kg灌胃,于移植后兩周開始給藥,連續(xù)給藥5天,給藥治療組停藥5天后再連續(xù)用藥8天。給藥期間密切觀察小鼠一般情況、體重及食量,評(píng)估藥物毒性及動(dòng)物對(duì)藥物的耐受程度以調(diào)整給藥方案。記錄各實(shí)驗(yàn)組小鼠生存時(shí)間,觀察時(shí)間為三個(gè)月,K562細(xì)胞移植后存活兩個(gè)月以上者為長(zhǎng)期生存。5.2.3外周血涂片及白細(xì)胞計(jì)數(shù)各實(shí)驗(yàn)組小鼠分別于接種前和接種后1周、2周、3周、4周、5周,取尾靜脈血計(jì)數(shù)白細(xì)胞總數(shù),并制備血涂片,經(jīng)瑞氏_吉姆薩染色,油鏡下分類、計(jì)數(shù)。5.3結(jié)果5.3.1N0D-SCID小鼠人慢性粒細(xì)胞白血病模型構(gòu)建生理鹽水對(duì)照組小鼠移植人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞K562后,自然存活時(shí)間為32.5士9.0天。動(dòng)物皮毛起皺、萎糜少動(dòng)、步態(tài)不穩(wěn),體重逐漸減輕。移植后三周外周血白細(xì)胞明顯升高,可達(dá)移植前2-10倍,外周血涂片見大量幼稚細(xì)胞。死亡小鼠大體解剖,腹腔內(nèi)見大量血性腹水,并出現(xiàn)實(shí)體瘤,脾大不明顯(見說(shuō)明書附圖5)。生理鹽水對(duì)照組NOD-SCID小鼠骨髓細(xì)胞RT-PCR均檢到人bcr-abl基因(見說(shuō)明書附圖6),說(shuō)明人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞K562歸巢至NOD-SCID小鼠骨髓。證明人慢性粒細(xì)胞白血模型構(gòu)建成功。5.3.2口服給藥對(duì)小鼠慢性粒細(xì)胞白血病作用給藥治療組截至結(jié)束為止4只小鼠中有2只尚存活,生存時(shí)間已達(dá)85天,實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期生存,其余小鼠生存時(shí)間較生理鹽水對(duì)照組明顯延長(zhǎng),外周血白細(xì)胞數(shù)明顯低于生理鹽水對(duì)照組,外周血象幼稚細(xì)胞亦明顯少于對(duì)照組。(見表4、5,及說(shuō)明書附圖7、8),試驗(yàn)表明實(shí)施例1所合成的化合物1對(duì)小鼠慢性粒細(xì)胞白血病有作用。表4口服給藥對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病小鼠生存時(shí)間影響<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*:P<0.05,VSNS組。表5各實(shí)驗(yàn)組小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)(X109/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例6化合物2對(duì)小鼠肝癌H22移植腫瘤的抑制作用化合物2為上述實(shí)施例方法制得的,本實(shí)例的測(cè)試方法同化合物1。將化合物2使用前配成所需濃度。取腫瘤生長(zhǎng)良好的種鼠脫頸處死,無(wú)菌條件下剝?nèi)×鰤K,取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的腫瘤組織,勻漿過(guò)濾制成單細(xì)胞懸液,調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1.OXIOVml,每只接種0.2ml于小鼠右腋下,建立H22小鼠移植瘤模型。接種次日,將小鼠按體重隨機(jī)分組,每組9只小鼠,并且記錄給藥前體重。按0.2ml/10g體重給藥,每天一次,共8次口服給藥。于末次給藥后24h脫頸處死,剝瘤拍照并稱重(見表6和說(shuō)明書附圖9),計(jì)算腫瘤平均重量及腫瘤抑制率。腫瘤抑制率(%)=[對(duì)照組平均瘤質(zhì)量一實(shí)驗(yàn)組平均瘤質(zhì)量]/對(duì)照組平均瘤質(zhì)量X100%。表6化合物2口服給對(duì)小鼠肝癌H22移植瘤的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注與NS組相比,*P<0.05;**P<0.01。本發(fā)明以上述實(shí)施例同樣的方式也可驗(yàn)證包括化合物1或化合物2或其在藥學(xué)上可接受鹽以及含有化合物1或化合物2或其在藥學(xué)上可接受鹽形式的藥物組合物具有類似的特性;藥學(xué)上可接受鹽的例子包括堿金屬鹽如鈉鹽或鉀鹽,堿土金屬鹽如鈣鹽或鎂鹽,含有機(jī)堿的鹽如銨鹽,或舍有機(jī)堿的鹽如三乙基胺鹽或乙醇胺鹽。權(quán)利要求結(jié)構(gòu)式為下述化合物1的4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁?;S素和結(jié)構(gòu)式為下述化合物2的4,4’-[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁?;S素及其藥學(xué)上可接受的鹽FSA00000135574800011.tif2.權(quán)利要求1所述的化合物1或化合物2的制備方法,其特征在于將姜黃素溶于干燥過(guò)的二氯甲燒,加入催化量DMAP,而后加入已溶解于二氯甲烷的4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酸進(jìn)行酯化反應(yīng)獲得化合物1或化合物2產(chǎn)物,而后將化合物1或化合物2產(chǎn)物經(jīng)過(guò)柱層析分離純化得到純化的化合物1或化合物2產(chǎn)物。3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物1或化合物2的制備方法,其特征在于所述的二氯甲烷溶解脫水劑DCC或EDCI后再溶解姜黃素,而后加入催化量的DMAP。4.權(quán)利要求1所述的化合物1或化合物2的姜黃素衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。5.含有權(quán)利要求1所述的化合物1或化合物2姜黃素衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽組合成的藥學(xué)上可接受的藥物組合物或制劑在制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的應(yīng)用,其特征在于所述的抗腫瘤藥物用于制備治療白血病、淋巴瘤、皮膚癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌或其他惡性腫瘤的藥物。7.一種含有權(quán)利要求1所述的藥物或其藥學(xué)上可接受的鹽,或含有權(quán)利要求1所述的藥物或其藥學(xué)上可接受的鹽組成的藥物組合物或制劑。8.權(quán)利要求1所述的4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酰基姜黃素的單酯或雙酯或其藥學(xué)上可接受的鹽或含有4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁?;S素的單酯或雙酯及其藥學(xué)上可接受的鹽組合成的藥物組合物或制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。9.根據(jù)權(quán)利要求4或5或8所述的應(yīng)用,其特征在于所述的腫瘤為白血病、皮膚癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、乳腺癌或前列腺癌藥物。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的的應(yīng)用,其特征在于白血病為人慢性粒細(xì)胞白血病。全文摘要本發(fā)明公開苯丁?;S素衍生物及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用;具體為本發(fā)明包括4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁?;S素和4,4’-[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁酰基姜黃素及其藥學(xué)上可接受的鹽以及制備方法。包括4-[雙(2-氯乙基)氨基]苯丁酰基姜黃素和4,4’-[雙(2-氯乙基)氨基]雙苯丁?;S素用于制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。本發(fā)明的丁酰基姜黃素衍生物用于但不局限于制備治療白血病、皮膚癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、乳腺癌或前列腺癌藥物。在體內(nèi)對(duì)多種動(dòng)物腫瘤細(xì)胞移植模型均有明顯抑制,尤其是對(duì)人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞株接種NOD-SCID小鼠構(gòu)建的人慢性粒細(xì)胞白血病模型,生命延長(zhǎng)率顯著提高,且未見有對(duì)小鼠有嚴(yán)重毒性。文檔編號(hào)A61P35/00GK101830819SQ201010183509公開日2010年9月15日申請(qǐng)日期2010年5月26日優(yōu)先權(quán)日2010年5月26日發(fā)明者劉洋,吳麗賢,吳敏,吳枝娟,林燕芳,許建華,郭曉丹,黃秀旺申請(qǐng)人:福建醫(yī)科大學(xué)