專利名稱：一種Fe₃O₄納米磁粉淋巴示蹤劑的制備方法及其應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種用微乳液法制備納米Fe304磁粉的方法，特別是利用微乳液作為 微反應器，得到粒徑均勻，可控、具有良好結晶度的、粒徑范圍窄的Fe304納米磁粉。
背景技術：
目前納米Fe304磁粉的制備方法很多，可以分為物理方法和化學方法。物理方法如 機械粉碎法等，工藝復雜，費時耗材。化學方法可以簡單分為干法合成和濕法合成。干法合 成納米Fe304磁粉往往涉及氧化還原反應，設備要求高，工序繁多，耗時費力。因此，制備納 米Fe304磁粉可以用濕法合成。涉及化學液相合成方法可以分為兩種方法共沉淀法和沉淀
氧化法。微乳液是指由熱力學穩(wěn)定分散的互不相溶的兩相液體組成的宏觀上均一而微觀 上不均勻的液體混合物，通常是由表面活性劑、助表面活性劑(醇類)、油(碳氫化合物)和 水(電解質(zhì)水溶液)組成的透明、各相同性的熱力學穩(wěn)定體系。微乳液的分散相質(zhì)點為球 形，半徑通常為10 lOOnm。微乳液有2種基本類型，即水包油型(0/w)和油包水型(w/o， 也叫反相微乳)，前者是以油為分散相，水為分散介質(zhì)，后者反之。該方法優(yōu)點是以水相作為 合成納米級顆粒的“納米微反應器”，且高度分散、大小均一，在納米微粒的制備領域具有潛 在的優(yōu)勢。反相膠束微反應器制備納米微粒的方法，近年來由于納米技術的興起而受重視。 由于它能以油包水(W/0)反相微乳液膠束中的水池或叫微液滴這個納米空間為反應場，使 不同膠束中的反應物進行交換、反應生成納米微粒，且可通過調(diào)節(jié)溶水量及反應物的場所 等以若干數(shù)量級的幅度改變動力學常數(shù)。由于微乳液屬熱力學穩(wěn)定體系，特別是某些微乳 液膠束具有保持穩(wěn)定尺寸的能力即自組裝特性，所制備的納米微粒具有通常直接反應難以 得到的均勻尺寸，所以又將其稱為智能微反應器(Intelligent Microreactors)。該方法的 主要特點是反應物分別以膠束中的微小液滴形式供給，從而抑制了因局部過飽和導致的微 粒團聚現(xiàn)象，并能得到可長期儲存穩(wěn)定的納米微粒微乳液。為了制得四氧化三鐵納米混懸淋巴示蹤劑，需要指定粒徑范圍的四氧化三鐵納米 磁粉。微乳液法可以通過控制微乳的大小得到指定范圍的納米磁粉。因此選用微乳液法制 備四氧化三鐵納米磁粉。納米給藥系統(tǒng)是指納米尺度范圍的膠體給藥系統(tǒng)，一般粒徑介于10 500nm之 間，包括納米脂質(zhì)體、納米球、納米囊、固體脂質(zhì)納米粒、納米膠束、納米乳(微乳)等。由于 自身的特點，這一類給藥系統(tǒng)在靶向給藥，特別是腫瘤的治療應用中具有獨特的優(yōu)勢和潛 在的應用價值。納米給藥系統(tǒng)在淋巴靶向性方面有著良好的優(yōu)勢。但許多問題還有待研究解決， 如總體而言淋巴攝取率不高；某些納米材料在淋巴系統(tǒng)中生物相容性不理想，不良反應不 能徹底避免；由于淋巴靶向機制的基礎研究仍然不夠充分，改善納米給藥系統(tǒng)的淋巴系統(tǒng) 靶向性仍存在一定困難；成熟的給藥途徑還比較單一，還局限于皮下。
widder K J等用雌性BDFI小鼠進行毒理，研究表明磁性藥物微粒無明顯的急性 和慢性毒性。急性實驗中，0/40小鼠死亡，慢性實驗中，0/20小鼠死亡，在給于最高劑量 400mg -kg磁性藥物微粒也得到同樣的結果。Ibrahim A等給小鼠Fe304劑量達1500mg -kg 是無毒性的。陳道達等按H Jhorm移動平均法測得在阿霉素磁性白蛋白微球LD50為 23. 5mg kg，應用的動物未發(fā)現(xiàn)急性、亞急性毒性反應，無過敏及栓塞現(xiàn)象。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種快速，經(jīng)濟，簡單方便，質(zhì)量可控，粒度均勻，具有良好分 散性及均勻性的Fe304納米磁粉，并將其制備成納米混懸劑，作為淋巴示蹤劑應用于藥物性 淋巴清掃術。本發(fā)明還提供了 CTAB/正丁醇/環(huán)己烷/鹽溶液微乳系統(tǒng)的制備方法，并繪出體 系的偽三元相圖。本發(fā)明還提供了制備不同粒徑產(chǎn)物的制備條件及改善其分散性的條件。本發(fā)明的目的是如此實現(xiàn)的以氯化亞鐵和氯化鐵溶液為原料，配制成一定濃度的Fe3+和Fe2+水溶液作為水相， 以環(huán)己烷作為油相，十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)作為表面活性劑，正丁醇為助表面活性 劑，自發(fā)形成CTAB/正丁醇/環(huán)己烷/鹽溶液微乳系統(tǒng)。將過量的三乙醇胺(達到飽和狀 態(tài))與微乳系統(tǒng)混合后，攪拌，放入高壓釜中，160°C燒制14h。產(chǎn)物經(jīng)冷卻，磁分離或離心 后，分別經(jīng)乙醇、水洗滌，或鹽酸和PEG洗滌，經(jīng)磁分離或離心或微孔濾膜過濾后，分別得到 人為可控、具有良好結晶度的、粒徑范圍在窄的Fe304納米磁粉。此方法具有工藝簡單，反應 條件可控，原料廉價易得等優(yōu)點。通過制備CTAB/正丁醇/環(huán)己烷/鹽溶液微乳，得到粒徑 均勻的Fe304納米磁粉，為Fe304納米磁粉的工業(yè)化生產(chǎn)提供了一條有效、可行的途徑。稱取一定量的Fe304納米磁粉于生理鹽水中，超聲波分散lOmin，然后用生理鹽水 稀釋，并用質(zhì)量分數(shù)為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 9，最后以PVP為分散劑配成濃度 為30mg/mL的混懸液。本發(fā)明中，制備Fe304納米磁粉的方法，在于制備CTAB/正丁醇/環(huán)己烷/鹽溶液 微乳系統(tǒng)。本發(fā)明中n(Fe3+) n(Fe2+) =3 2, c (Fe3+/Fe2+) < 0. 42，a(表面活性劑 / 助表 面活性劑)=2 1 (w/w)在本發(fā)明中，所說的Fe3+’和Fe2+是氯化鐵和氯化亞鐵。本發(fā)明中制備Fe304納米磁粉的方法，是在超聲，恒溫35°C的條件下進行的。在本發(fā)明中，淋巴示蹤劑的制備方法，稱取一定量的Fe304納米磁粉于生理鹽水 中，超聲波分散lOmin，然后用生理鹽水稀釋，并用質(zhì)量分數(shù)為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值 為6. 9，最后以PVP為分散劑，配成濃度為30mg/mL的混懸液。在本發(fā)明中，制備Fe304納米混懸液作為淋巴示蹤劑的方法，以生理鹽水作為分散 介質(zhì)。在本發(fā)明中，制備Fe304納米混懸液作為淋巴示蹤劑的方法，以PVP為分散劑。本發(fā)明的積極效果是，提供了新的用于淋巴靶向制劑的原料，它無毒、無過敏、無 栓塞，為癌癥患者帶來福音。


圖1.為表示CTAB/正丁醇/環(huán)己烷/鹽溶液微乳區(qū)域的偽三元相圖
具體實施例方式以下實例用于說明本發(fā)明。實施例1.分別配制c (Fe3+) = 0. 18mol/L, c (Fe2+) = 0. 12mol/L,混合后作為水相，以十六烷 基三甲基溴化銨(CTAB) 73. 02g，正丁醇49. 57g，環(huán)己烷347. Olg混合作為油相，以水相滴定 油相，超聲分散，得W/0型微乳液。以較慢的速度逐滴加入一定量的過量的三乙醇胺，以控 制微乳液的PH值。待反應完全后破乳，用超高速離心機分離沉淀。所得沉淀依次用乙醇、 蒸餾水各洗滌三次。自然揮干，得納米Fe3O4粉末。產(chǎn)物粒徑為200nm。實施例2.分別配制c (Fe3+) = 0. 18mol/L, c (Fe2+) = 0. 12mol/L,混合后作為水相，以十六烷 基三甲基溴化銨(CTAB) 72. 92g，正丁醇49. 24g，環(huán)己烷346. Olg混合作為油相，以水相滴定 油相，超聲分散，得W/0型微乳液。以較慢的速度逐滴加入一定量的過量的三乙醇胺，以控 制微乳液的PH值。待反應完全后破乳，用超高速離心機分離沉淀。所得沉淀依次用蒸餾水、 鹽酸和PEG混合液各洗滌三次。自然揮干，得納米Fe3O4粉末。產(chǎn)物粒徑為90nm。實施例3.3. 1處方藥藥用納米Fe3O4粉末30g聚乙烯吡咯烷酮K-30 (PVP) 12g生理鹽水(0.9%)IOOOml_得納米混懸注射液制劑1000瓶3. 2制備工藝稱取一定量的Fe3O4納米磁粉于生理鹽水中，超聲波分散10mm，然后用生理鹽水稀 釋，并用質(zhì)量分數(shù)為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值為6. 9，最后以PVP為分散劑配成濃度為 30mg/mL的藥用Fe3O4納米混懸注射液。實施例4.藥用Fe3O4納米混懸注射液的淋巴示蹤檢查0 10分代表淋巴結染色情況，根據(jù)標準進行打分0代表顏色無改變；5代表淋巴結竇部染灰或部分染黑；10代表真?zhèn)€淋巴結或邊緣竇染黑。根據(jù)藥效學試驗，染色只要達到4分以上，可以起到淋巴結示蹤的作用。因此確定 3級淋巴結染色分數(shù)在4分以上(含4分，即8分鐘內(nèi)80%的小鼠達到三級淋巴結)，即可 判定受試品為合格。取小鼠3組，每組10只小鼠。從小鼠右后肢足墊皮下注射藥用納米Fe3O4納米混懸注射溶液，注射量給0. 001ml/g，注射后的Smin引頸處死，立即解剖出第一級，第二級各 第三級流域的即淋巴結、骼淋巴結和腹主動脈淋巴結，在立體顯微鏡進行打分，每組的10 只小鼠的1，2，3級淋巴結染色分數(shù)均達到4分以上，即3組的供試品均為合格。
權利要求
一種Fe3O4納米磁粉的制備方法，其特征為以Fe3+/Fe2+水溶液作為水相，以環(huán)己烷作為油相，十六烷基三甲基溴化銨作為表面活性劑，正丁醇為助表面活性劑，自發(fā)形成CTAB/正丁醇/環(huán)己烷/鹽溶液微乳系統(tǒng)，將過量的三乙醇胺與微乳系統(tǒng)混合后，攪拌，放入高壓釜中，160℃燒制14h，產(chǎn)物經(jīng)冷卻，磁分離或離心后，分別經(jīng)乙醇洗、水洗，或同時加入鹽酸和PEG洗滌，經(jīng)磁分離或離心，得到Fe3O4納米磁流體，自然揮干，得Fe3O4納米磁粉。
2.按權利要求1所述的Fe3O4納米磁粉的制備方法，其特征在于，所制備的CTAB/正丁 醇/環(huán)己烷/鹽溶液微乳系統(tǒng)中n(fe3-):n(fe3+)=3:2a (表面活性劑/助表面活性劑)=2 1 (w/w) 0
3.按權利要求1所述的Fe3O4納米磁粉的制備方法，其特征在于，所說的Fe3+和Fe2+是 氯化鐵和氯化亞鐵。
4.按權利要求1所述的Fe3O4納米磁粉的制備方法，其特征在于，形成微乳系統(tǒng)的條件 是在超聲的條件下，恒溫35 °C下完成。
5.按權利要求1所述的Fe3O4納米磁粉混懸液的制備方法，其特征在于，所制備的Fe3O4 納米磁粉可以通過如下方法制備成混懸液將Fe3O4納米磁粉分散于分散介質(zhì)中，超聲分散 lOmin，然后用生理鹽水稀釋，并用質(zhì)量分數(shù)為10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 9，最后用 分散劑，配成濃度為30mg/mL的混懸液。
6.按權利要求5所述的Fe3O4納米磁粉混懸液的制備方法，其特征在于，所述的分散介 質(zhì)為生理鹽水。
7.按權利要求5所述的Fe3O4納米磁粉混懸液的制備方法，其特征在于，所述的分散劑 為 PVP。
8.按權利要求5所述的Fe3O4納米磁粉混懸液的制備方法，其特征在于，所制備的Fe3O4 納米磁粉混懸液用于制備腫瘤手術的淋巴示蹤劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用微乳液法制備納米Fe3O4磁粉的方法，并將其制備成納米混懸劑，作為淋巴示蹤劑應用于藥物性淋巴清掃術。以氯化亞鐵和氯化鐵溶液為原料，配制成一定濃度的Fe3+和Fe2+水溶液作為水相，以環(huán)己烷作為油相，十六烷基三甲基溴化銨作為表面活性劑，正丁醇為助表面活性劑，自發(fā)形成CTAB/正丁醇/環(huán)己烷/鹽溶液微乳系統(tǒng)。將過量的三乙醇胺與微乳系統(tǒng)混合后，攪拌，放入高壓釜中，160℃燒制14h。產(chǎn)物經(jīng)冷卻，磁分離或離心后，分別經(jīng)乙醇、水洗滌，或鹽酸和PEG洗滌，經(jīng)磁分離或離心或微孔濾膜過濾后，分別得到Fe3O4納米磁粉。本發(fā)明具有工藝簡單，反應條件可控，原料廉價易得等優(yōu)點。
文檔編號A61K49/00GK101875508SQ20101018677
公開日2010年11月3日 申請日期2010年5月31日 優(yōu)先權日2010年5月31日
發(fā)明者支壯志, 王淑君, 葛貝爾, 蔣艷霞 申請人:沈陽藥科大學