專利名稱：一種治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥領(lǐng)域，具體涉及一種含中藥材月腺大戟的治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人乳頭瘤病毒感染癥是指人乳頭瘤病毒(Human papillomavirus, HPV)感染皮膚以及粘膜的上皮組織細(xì)胞后使棘細(xì)胞增生形成乳頭瘤損害，從而引起的人類多種良性與惡性增殖性疾病的統(tǒng)稱。有發(fā)生于皮膚的疣狀損害皮膚疣、皮膚腫瘤；發(fā)生于粘膜部位的尖銳濕疣、肛門直腸疣、宮頸癌、外陰癌，呼吸道乳頭瘤病、口腔灶性上皮增生(FEH)，口腔腫瘤、 食道癌等。近年來的研究發(fā)現(xiàn)越來越多的人類皮膚、粘膜疾患與HPV存在相關(guān)性，到目前為止，根據(jù)DNA堿基排列的不同，確定的HPV基因型已達(dá)到120多種，不同型別的HPV在基因組結(jié)構(gòu)、組織親嗜性與致病譜上存在一定的差異，根據(jù)其致癌性的高低分為高危型與低危型； 根據(jù)其易感染的部位不同可分為皮膚型與粘膜型。其中皮膚型常見的疣狀損害皮膚疣，如掌跖疣主要由HPV 1，2，4，7，26，27，40，41，49，57，63，65等型引起；粘膜型常見的發(fā)生于粘膜部位的損害，如近年來位居性傳播疾病前列的尖銳濕疣，主要由HPV6、11、40、42等型感染所致；女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一子宮頸癌，大量流行病學(xué)和分子生物學(xué)研究已經(jīng)肯定了 HPV16、18、31、33等型HPV感染在子宮頸癌發(fā)生中具有重要作用，證實了 HPV是子宮頸癌發(fā)生的主要和必需致病因子。目前，國內(nèi)外主要采用(1)液氮冷凍，C02激光，電燒灼等物理療法；(2)外科手術(shù)切除；(3)5-氟尿嘧啶，硫酸博萊霉素，平陽霉素等抗腫瘤類藥物外用或疣損害內(nèi)注射；(4) 酞丁胺，干擾素，聚肌胞等抗病毒類藥物外用或疣損害內(nèi)注射；( 水楊酸或乳酸、苛性鉀， 福爾馬林，鴉膽子，斑蟊等腐蝕性藥物，角質(zhì)剝脫劑的外用；(6) BCG或卡介菌素免疫刺激療法，DNCB致敏療法等免疫治療；(7)維甲酸，鬼臼毒素，咪喹莫特等方法。雖然治療手段繁多，但目前臨床上仍無公認(rèn)的確切的治愈療法，尤其是有效的抗HPVs病毒感染的藥物。且皮損局部的物理或化學(xué)治療后會出現(xiàn)局部疼痛、水腫、化膿、過敏反應(yīng)及色素沉著等副作用；激光，外科手術(shù)療法雖對單個的疣體有效，但易留疤痕，復(fù)發(fā)率高；全身性的免疫療法療效并不明確。因此皮膚科常見的多發(fā)性頑固性掌跖疣、鑲嵌疣、多發(fā)性甲周疣，仍是臨床治療困難的疾病。醫(yī)藥界一直在致力于開發(fā)較理想的治療人乳頭瘤病毒感染癥的藥物，尋找安全有效、使用簡便、價格適度的中藥新藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題之一是提供一種月腺大戟提取物。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題之二是提供一種安全有效、使用簡便、價格適度的治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題之三是提供一種上述中藥制劑的制備方法。
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題之四是提供上述月腺大戟提取物在制備治療人乳頭瘤病毒感染癥的藥物中的應(yīng)用。中醫(yī)學(xué)對人乳頭瘤病毒感染癥早有認(rèn)識“千日瘡”、“枯筋箭”即是指掌跖疣；“臊瘊”、“尿瘊”即是指尖銳濕疣。祖國醫(yī)學(xué)古籍中雖無子宮頸癌病名的記載，但依據(jù)其發(fā)病特征及臨床表現(xiàn)，可將其歸屬為中醫(yī)的帶下病。中藥月腺大戟為多年生草本植物，是傳統(tǒng)的中醫(yī)外科藥，生命力強，繁殖迅速，其根入藥，有毒，功用逐水祛痰，破積殺蟲；主治結(jié)核，水氣腫脹；外用治疥癬，頑固性皮炎，痔瘺等；性味苦辛，平，有毒?！队李愨j方》中記載，“治久年干疥干癬及一切癩瘡”；其在難治性皮膚病治療中有重要作用。大量實驗研究表明其具有抗腫瘤，抗菌，抗炎，抗驚厥、抗癲癇等方面作用，但目前尚未有其治療人乳頭瘤感染癥方面的實驗研究的報道。在本發(fā)明的一方面，提供一種月腺大戟提取物，，該月腺大戟提取物含有月腺大戟甲素、月腺大戟乙素、月腺大戟素A、月腺大戟素B、24-亞甲基環(huán)阿爾廷醇、月腺大戟素C、 β -香樹脂醇乙酸酯、三萜酸、大戟素Α、3_乙酰-α -香樹脂醇、巖大戟內(nèi)酯B月腺大戟苷 B、月腺大戟苷C、異槲皮苷、狼毒甲素[雙(5-甲?；?糖基)-醚]、狼毒乙素[2，4_ 二羥基-6-甲氧基-3-甲基-1-苯乙酮]、2-羥基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮2-4-β-葡萄糖苷；該月腺大戟提取物的制備方法，包括如下步驟將月腺大戟浸泡于乙醇中7天，取浸出液備用。在本發(fā)明的另一方面，提供一種治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑，它是由有效成分與藥物載體制成，所述有效成分是月腺大戟提取物，所述月腺大戟提取物占該中藥制劑的重量百分比為15-100%。所述藥物載體指常規(guī)的可接受的藥物載體，例如乙醇。本發(fā)明的中藥制劑，由下列重量份的原料藥與藥用載體制成月腺大戟1-2份，乙醇1-5份。優(yōu)選月腺大戟1份，乙醇1份。所述乙醇優(yōu)選75%的乙醇水溶液。本發(fā)明所涉及的原料藥材為中華人民共和國藥典1977年版一部所收載中藥，并符合藥典質(zhì)量要求。在本發(fā)明的另一方面，提供一種上述中藥制劑的制備方法，其通過下述步驟制備取月腺大戟1-2份，加乙醇1-5份，浸泡7天后，取浸出液，即得本發(fā)明中藥溶液制劑。所述的中藥溶液制劑中月腺大戟提取物的有效作用濃度為0. 01 μ g/ml-100 μ g/ ml，該有效作用濃度是指能夠抑制HPV和/或HPV感染細(xì)胞的濃度。在本發(fā)明的另一方面，提供一種上述月腺大戟提取物在制備治療人乳頭瘤病毒感染癥的藥物中的應(yīng)用。所述的人乳頭瘤病毒感染癥是人乳頭瘤病毒感染皮膚以及粘膜的上皮組織細(xì)胞后使棘細(xì)胞增生形成乳頭瘤損害，從而引起的人類多種良性與惡性增殖性疾病。所述的人乳頭瘤病毒感染癥包括疣狀損害皮膚疣、皮膚腫瘤、尖銳濕疣、肛門直腸疣、宮頸癌、外陰癌，呼吸道乳頭瘤病、口腔灶性上皮增生，口腔腫瘤和食道癌等。優(yōu)選地，本發(fā)明的月腺大戟提取物在制備治療掌跖疣或?qū)m頸癌的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明中藥制劑的用量和療程可根據(jù)劑型、患者的年齡、疾病的輕重程度作適當(dāng)調(diào)整，但一般為每日3次涂于患處，每次20ml (中藥溶液制劑中月腺大戟提取物的有效作用濃度為0. 01 μ g/ml-100 μ g/ml)，以1個月為一個療程，可連續(xù)使用6個療程或更長時間。
本發(fā)明中藥制劑經(jīng)細(xì)胞實驗，結(jié)果表明，其能明顯抑制細(xì)胞的增殖、抗HPV作用及引起細(xì)胞凋亡的作用，能持續(xù)改善人乳頭瘤病毒感染癥的癥狀和體征，臨床研究采用臨床綜合療效指標(biāo)觀察，結(jié)果顯示，本發(fā)明中藥制劑使用3周后能使人乳頭瘤病毒感染癥(掌跖多發(fā)性疣)病人的皮損明顯好轉(zhuǎn)。本發(fā)明制劑能較好治療人乳頭瘤病毒感染癥，使用方便， 用量少，外用無毒副作用，病人評價好。


圖1是試驗例3中相差顯微鏡下形態(tài)學(xué)改變示意圖；圖IA表示對照組(X200)， 圖IB表示藥物組(X200)；圖2是試驗例3中熒光顯微鏡下形態(tài)學(xué)改變示意圖；圖2A表示對照組(X400)， 圖2B表示藥物組(X400)；圖3-6是試驗例4中本發(fā)明制劑用藥前后對比圖；圖3為腳背治療前，圖4為腳背治療6個月后，圖5為腳底治療前，圖6為腳底治療3個月后。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明作進一步詳細(xì)說明，但不對本發(fā)明進行限制。實施例1月腺大戟提取物的制備(即本發(fā)明中藥制劑的制備)取月腺大戟15g，加75 %乙醇75g，浸泡7天后，取浸出液，備用。實施例2月腺大戟提取物的制備(即本發(fā)明中藥制劑的制備)取月腺大戟50g，加75 %乙醇100g，浸泡7天后，取浸出液，備用。實施例3月腺大戟提取物的制備(即本發(fā)明中藥制劑的制備)取月腺大戟IOOgJn 75%乙醇100g，浸泡7天后，取浸出液，備用。實施例4月腺大戟提取物的制備(即本發(fā)明中藥制劑的制備)取月腺大戟100g，W 75%乙醇50g，浸泡7天后，取浸出液，備用。以下通過試驗例對本發(fā)明的有益效果作進一步的闡述試驗例1增殖抑制作用研究試驗1、藥物本發(fā)明中藥制劑(月腺大戟提取物)(由實施例1制得)
本發(fā)明制劑用量為0. 01 μ g/ml-ΙΟΟμ g/ml。2、細(xì)胞人宮頸癌細(xì)胞株Hela，中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所提供。3、方法取對數(shù)處于生長期，生長狀況良好的Hela細(xì)胞，接種96孔板，待細(xì)胞貼壁24h后， 選取 0.01 μ g/ml, 0. 1 μ g/ml, 1 μ g/ml, 10 μ g/ml, 100 μ g/ml 五個藥物濃度干預(yù) 6h，12h， 24h, 48h，72h后吸光度值的變化。4、結(jié)果顯示，用藥后，對Hela細(xì)胞的增殖有抑制作用，Hela細(xì)胞生長均有不同程度的減慢，并呈時間、濃度相關(guān)性。表1本發(fā)明中藥制劑作用Hela細(xì)胞不同時間后吸光度㈧值(Mean士SD)
權(quán)利要求
1.一種月腺大戟提取物，其特征在于，該月腺大戟提取物含有月腺大戟甲素、月腺大戟乙素、月腺大戟素A、月腺大戟素B、24-亞甲基環(huán)阿爾廷醇、月腺大戟素C、β-香樹脂醇乙酸酯、三萜酸、大戟素Α、3-乙酰-α-香樹脂醇、巖大戟內(nèi)酯B、月腺大戟苷B、月腺大戟苷 C、異槲皮苷、狼毒甲素、狼毒乙素、2-羥基-6-甲氧基-3-甲基苯乙酮2-4-β -葡萄糖苷； 該月腺大戟提取物采用如下方法制得將月腺大戟浸泡于乙醇中7天，取浸出液備用。
2.一種治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑，它是由有效成分與藥物載體制成，其特征在于，所述有效成分是權(quán)利要求1所述的月腺大戟提取物，所述月腺大戟提取物占該中藥制劑的重量百分比為15-100%。
3.如權(quán)利要求2所述的治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑，其特征在于，由下列重量份的原料藥與藥用載體制成月腺大戟1-2份，乙醇1-5份。
4.如權(quán)利要求3所述的治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑，其特征在于，由下列重量份的原料藥與藥用載體制成月腺大戟1份，乙醇1份。
5.如權(quán)利要求3或4所述的治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑，其特征在于，所述乙醇為75%的乙醇水溶液。
6.如權(quán)利要求3所述的治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑的制備方法，其特征在于，包括下述步驟取月腺大戟1-2份，加乙醇1-5份，浸泡7天后，取浸出液，即得中藥溶液制劑。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述的中藥溶液制劑中月腺大戟提取物的有效作用濃度為0. 01 μ g/ml-100 μ g/ml，該有效作用濃度是指能夠抑制HPV和/或HPV感染細(xì)胞的濃度。
8.如權(quán)利要求1所述的月腺大戟提取物在制備治療人乳頭瘤病毒感染癥的藥物中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的人乳頭瘤病毒感染癥是人乳頭瘤病毒感染皮膚以及粘膜的上皮組織細(xì)胞后使棘細(xì)胞增生形成乳頭瘤損害，從而引起的人類多種良性與惡性增殖性疾??；所述的人乳頭瘤病毒感染癥包括疣狀損害皮膚疣、皮膚腫瘤、尖銳濕疣、肛門直腸疣、宮頸癌、外陰癌，呼吸道乳頭瘤病、口腔灶性上皮增生，口腔腫瘤和食道癌。
10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的人乳頭瘤病毒感染癥為掌跖疣或?qū)m頸癌。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種月腺大戟提取物和其在制備治療人乳頭瘤病毒感染癥的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還公開了含有該月腺大戟提取物的治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑及其制備方法。本發(fā)明的中藥制劑由月腺大戟提取物和藥物載體制成，月腺大戟提取物占該中藥制劑的重量百分比為15-100％。本發(fā)明采用中藥材月腺大戟為主藥，配以輔料，制成治療人乳頭瘤病毒感染癥的中藥制劑。實驗表明本發(fā)明中藥制劑有明確的抑制細(xì)胞增殖、抗病毒、促進細(xì)胞凋亡作用，能持續(xù)改善人乳頭瘤病毒感染癥的癥狀和體征，本發(fā)明制劑能較好治療人乳頭瘤病毒感染癥，使用方便，用量少，外用無毒副作用，病人評價好。
文檔編號A61P17/12GK102335223SQ201010239740
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月29日
發(fā)明者丁佩軍, 何翔, 張慧敏, 徐平, 曾秋妹, 樊梅鳳, 潘祥龍, 邊風(fēng)華 申請人:上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院