專利名稱：芪參益氣滴丸在制備改善心肌纖維化和心肌肥厚的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及芪參益氣滴丸在制備改善心肌纖維化和心肌肥厚的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
芪參益氣滴丸(縮寫為QSYQ)是天士力集團(tuán)獨(dú)家研制的治療心血管疾病的現(xiàn)代中藥，目前已經(jīng)上市。芪參益氣滴丸是以現(xiàn)代科技提取黃芪、丹參、三七、降香中的有效成分精制而成的滴丸制劑，是中醫(yī)傳統(tǒng)理論和現(xiàn)在制劑技術(shù)結(jié)合的結(jié)晶。芪參益氣滴丸能夠顯著改善心肌損傷、心功能減退的各種癥狀，具有劑量小、服用方便、溶出速度快、可直接經(jīng)粘膜吸收入血、生物利用度高、療效高及無胃腸刺激、無明顯毒副作用的特點(diǎn)，適用于慢性心功能不全、心肌炎及后遺癥、心肌梗塞恢復(fù)期、心肌纖維化。臨床前藥效學(xué)試驗(yàn)表明，芪參益氣滴丸可以使心肌梗塞犬的梗塞范圍縮小，缺血性心電圖改善，血清酶CK和LDH活性降低，血漿ET和TXB2水平降低，6-Keto-PGFl α活性和6-Keto-PGFl α /ΤΧΒ2比值升高；可使心肌缺血再灌注損傷大鼠的梗塞范圍縮小，SOD活性增加。本品可使大鼠體外血栓長度縮短，重量減輕，并可使血漿及全血粘度降低；可使高脂血癥家兔的TC、TG、LDL-C、VLDL-C水平降低，HDL-C水平升高，使主動(dòng)脈TC含量和肝臟 TG及MDA含量降低；并可使花生四烯酸和膠原誘導(dǎo)的血小板聚集率降低；犬血流動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)表明，本品可通過擴(kuò)張冠脈血管使冠脈流量增加，使心肌耗氧指數(shù)降低；在不增加左室做功情況下，使心搏出量和心輸出量增加等。心肌肥厚是心肌細(xì)胞對持續(xù)性負(fù)荷增加的一種適應(yīng)性反應(yīng)。初期的心肌肥大有一定代償意義，但心肌肥大引起的心肌肥厚及心肌重構(gòu)最終可導(dǎo)致心力衰竭，并已成為引起心血管疾病發(fā)病率和死亡率顯著升高的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。心肌纖維化是心肌重構(gòu)的主要表現(xiàn)之一。心肌組織由心肌細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞構(gòu)成， 而間質(zhì)細(xì)胞主要是成纖維細(xì)胞，它能夠合成膠原，可以重新進(jìn)入細(xì)胞周期，進(jìn)行有絲分裂。 心肌內(nèi)膠原主要由心臟成纖維細(xì)胞合成，成纖維細(xì)胞同時(shí)分泌膠原酶，心臟組織中膠原代謝非?；钴S。因而，膠原合成和分解代謝的失衡會(huì)造成心臟結(jié)構(gòu)和功能的異常。心肌重塑的關(guān)鍵是與心肌過載和損傷相關(guān)分子的激活，以往證據(jù)證明轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor beta, TGF-β )是與組織修復(fù)和心肌纖維化發(fā)展有關(guān)的一個(gè)重要的細(xì)胞因子，在哺乳動(dòng)物體內(nèi)，它有3種亞型，TGF-β 1，TGF-β 2，andTGF-β 3。 TGF-β 1可被血管緊張素II上調(diào)，TGF-β 1誘導(dǎo)產(chǎn)生心肌纖維化。在心肌纖維化發(fā)生、發(fā)展過程中具有促進(jìn)肌性成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，促進(jìn)膠原基因表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成與沉積等作用。此外，在心肌肥厚和心衰的心肌內(nèi)TGF-βΙ的表達(dá)是增強(qiáng)的。因此，TGF-βΙ有可能直接參與了導(dǎo)致心衰的心臟重塑過程。小鼠心臟在壓力過負(fù)荷的情況下發(fā)生了一過性炎癥反應(yīng)，伴隨有細(xì)胞因子與趨化因子的上調(diào)和巨噬細(xì)胞的聚集。炎性因子的上調(diào)刺激了 TGF-β上調(diào)，而TGF-β 1可促進(jìn)心肌纖維化的形成。以往的研究表明，黃芪的有效成分對心肌纖維化還具有一定抑制作用，其作用可能與抑制TGF-β 1表達(dá)相關(guān)。而丹參主要活性成分對心肌肥厚具有顯著的改善作用。另外， 還有研究顯示，丹參和三七都能夠抑制大鼠肝纖維化。在左心室肥厚發(fā)生后，芪參益氣滴丸是否可以改善心肌纖維化等尚不清楚。本研究用壓力超負(fù)荷建立大鼠心肌肥厚模型，觀察QSYQ后給藥對心肌纖維化的改善作用。在縮窄大鼠升主動(dòng)脈(Ascending aortic stenosis, AAS)后第4周末，用超聲心動(dòng)圖檢測左心室壁厚度，取左心室壁厚度超過假手術(shù)組20%的大鼠，分別灌胃給予生理鹽水(AAS+NS， 4ml/kg/d)或 QSYQ (AAS+QSYQ，4ml/kg/d,含 QSYQ 0. 8g/kg/d)，連續(xù)給藥 4 周。假手術(shù)組分別灌胃給予等量的生理鹽水(Sham+NS)或QSYQ (Sham+QSYQ)，連續(xù)給藥4周。在第8周末， 用激光多普勒血流量掃描儀測量心臟表面血流量；測量心臟體重指數(shù)；測量心肌組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)的變化；用天狼猩紅膠原染色法測量膠原含量；進(jìn)行CD68和心肌細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長因子-1 (Transforming growth factor beta 1,TGF-β 1)的免疫組化染色。在壓力負(fù)荷引起的大鼠左心室肥厚發(fā)生后(第4周)，QSYQ可以顯著地抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數(shù)的增加，增加左心室射血分?jǐn)?shù)和縮短分?jǐn)?shù)，減少心肌纖維化范圍。同時(shí)，QSYQ 還可以抑制大鼠心肌組織中⑶68和TGF-β 1的表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)，在壓力負(fù)荷引起的大鼠左心室肥厚發(fā)生后，QSYQ的后給藥可以抑制心肌的進(jìn)一步肥大，改善心肌纖維化。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供芪參益氣滴丸在制備改善心肌纖維化的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供芪參益氣滴丸在制備抑制心肌的進(jìn)一步肥大的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述應(yīng)用是在左心室肥厚發(fā)生后，芪參益氣滴丸可以改善心肌纖維化。本發(fā)明所述應(yīng)用是在左心室肥厚發(fā)生后，可以顯著地抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數(shù)的增加，增加左心室射血分?jǐn)?shù)和縮短分?jǐn)?shù)，減少心肌纖維化范圍。本發(fā)明所述應(yīng)用是芪參益氣滴丸可以抑制大鼠心肌組織中⑶68和TGF-β 1的表達(dá)。本發(fā)明所述應(yīng)用是在壓力負(fù)荷引起的左心室肥厚發(fā)生后，芪參益氣滴丸的后給藥可以抑制心肌的進(jìn)一步肥大，改善心肌纖維化。本發(fā)明所述芪參益氣滴丸，可以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)制備，也可以從市場上購買，符合藥用標(biāo)準(zhǔn)即可。本發(fā)明的應(yīng)用，可以通過口服芪參益氣滴丸應(yīng)用，口服時(shí)可以日服三次，每次1-20 粒。本發(fā)明的應(yīng)用，對于慢性心功能不全、心肌炎及后遺癥、心肌梗塞恢復(fù)期、心肌纖維化的病人，可以改善癥狀，延緩病情的進(jìn)一步發(fā)展，通過體質(zhì)的恢復(fù)逐漸緩解和改善病情，從而使疾病得到有效的治療。本發(fā)明的應(yīng)用，可以通過口服芪參益氣滴丸應(yīng)用，口服時(shí)一個(gè)療程可以是20 天-30天，優(yōu)選4周為一療程，通過每天服用1. 5g完成。本發(fā)明提供了以下試驗(yàn)，用以說明芪參益氣滴丸的應(yīng)用。
材料與方法1.藥品和試劑QSYQ (天津天士力制藥股份有限公司提供，批號090108)，常溫下保存。于試驗(yàn)前用生理鹽水配成適當(dāng)濃度(200mg/ml)，用于灌胃給藥。QSYQ的生產(chǎn)嚴(yán)格按照現(xiàn)代化的標(biāo)準(zhǔn)，有標(biāo)準(zhǔn)化的質(zhì)量控質(zhì)體系控制產(chǎn)品的質(zhì)量。復(fù)合麻醉劑配制水合氯醛4. 25g(北京東方龍順化學(xué)合成技術(shù)開發(fā)中心， XKB-OO1-0101-002 II )，硫酸鎂2. 12g(科密歐試劑，分析純，XKB-201-00129)，溶于 51. 95ml 蒸餾水中，備用。再將886mg戊巴比妥鈉(北京鼎國生物技術(shù)有限責(zé)任公司，Lot :77A10201) 溶于14. 25ml無水乙醇(北京化工廠，批號20090826)之中，然后加入前溶液，充分混勻， 再加入33.8ml 1，2-丙二醇(北京化工廠，批號20080629)，混勻制成復(fù)合麻醉劑。用量 3ml/kg。2.實(shí)驗(yàn)儀器超聲心動(dòng)圖檢測儀VEV0770，多倫多，加拿大；激光多普勒血流量灌注成像系統(tǒng)激光多普勒血流量儀，PeriScan, PERIMED，瑞士 ；顯示器，LXM-LI508，聯(lián)想，中國；小動(dòng)物呼吸機(jī):ALC_V8，上海奧利特生物科技有限公司，中國；
冷光源SJ8038HA2，SANJUN,中國；電子分析天平CP64，Startorius，德國；透射電鏡JEM-1230，JEOLLtd.，日本；體視顯微鏡XTL_500，南京盛光光電醫(yī)療儀器有限責(zé)任公司，中國；Digitalsight :DS-5M_U1，NIKON,日本；手術(shù)器械及消耗品大直剪、小直剪、彎鑷、直鑷、3-0絲線、銀夾、擴(kuò)胸器、3/8彎針、一次性注射器。3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中所有動(dòng)物研究均經(jīng)北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部倫理委員會(huì)同意并依據(jù)有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。選擇雄性SD大鼠，體重95-105g，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號 SCXK (京)2006-0001。置于相對清潔、22°C恒溫環(huán)境中，通風(fēng)、通光良好，分籠飼養(yǎng)，給予標(biāo)準(zhǔn)飼料，實(shí)驗(yàn)前禁食12小時(shí)，自由飲用水。4.心肌肥厚模型的建立SD大鼠，復(fù)合麻醉劑(3ml/kg)腹腔注射麻醉，仰臥固定于手術(shù)臺(tái)，行氣管插管。插管另一端連于小動(dòng)物呼吸機(jī)行加壓呼吸(呼吸比1 1，呼吸頻率75次/min，潮氣量12mL/ kg)。電推剪胸部去毛，皮膚消毒，胸正中切口，打開胸腔。在胸腺下方分離升主動(dòng)脈，將升主動(dòng)脈用內(nèi)徑為0. 9mm的銀夾使該部位動(dòng)脈形成環(huán)形狹窄，然后逐層縫合胸部切口，縫合皮部。假手術(shù)組除不用銀夾狹窄升主動(dòng)脈外，其余操作步驟相同[81]。術(shù)后大鼠飼養(yǎng)于清潔級動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，連續(xù)3日腹腔內(nèi)注射20萬單位青霉素。5.分組及給藥方法5. 1 分組手術(shù)后第4周末，手術(shù)組和假手術(shù)組大鼠經(jīng)超聲心動(dòng)圖檢測，左心室室壁厚度與同期假手術(shù)組相比厚度增加20%以上視為造模成功，隨后將造模成功的31只大鼠隨機(jī)分
5為手術(shù)+生理鹽水組(AAS+NS，η = 16)，手術(shù)+QSYQ組(AAS+QSYQ，η = 15)。假手術(shù)組隨機(jī)分為假手術(shù)+生理鹽水組(Sham+NS, η = 10)，假手術(shù)+QSYQ組(Sham+QSYQ, η = 10)。 8周后，在存活的大鼠中各組隨機(jī)選取9只動(dòng)物用于其他參數(shù)的測量。見表1。
表1各組參數(shù)檢測中使用動(dòng)物數(shù)目
權(quán)利要求
1.芪參益氣滴丸在制備改善心肌纖維化的藥物中的應(yīng)用。
2.芪參益氣滴丸在制備抑制心肌的進(jìn)一步肥大的藥物中的應(yīng)用。
3.芪參益氣滴丸在制備改善心肌纖維化同時(shí)抑制心肌的進(jìn)一步肥大的藥物中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用是在左心室肥厚發(fā)生后，改善心肌纖維化。
5.權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用是在左心室肥厚發(fā)生后，抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數(shù)的增加，
6.權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用是在左心室肥厚發(fā)生后，增加左心室射血分?jǐn)?shù)和縮短分?jǐn)?shù)。
7.權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用是芪參益氣滴丸通過抑制心肌組織中⑶68和TGF-β 1的表達(dá)進(jìn)行的。
8.權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用是在壓力負(fù)荷引起的左心室肥厚發(fā)生后，芪參益氣滴丸的后給藥抑制心肌的進(jìn)一步肥大，改善心肌纖維化。
全文摘要
本發(fā)明涉及芪參益氣滴丸在制備改善心肌纖維化和心肌肥厚的藥物中的應(yīng)用，芪參益氣滴丸是以現(xiàn)代科技提取黃芪、丹參、三七、降香中的有效成分精制而成的滴丸制劑，本發(fā)明的目的在于提供芪參益氣滴丸在制備改善心肌纖維化，抑制心肌的進(jìn)一步肥大的藥物中的應(yīng)用的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明所述應(yīng)用是在左心室肥厚發(fā)生后，芪參益氣滴丸可以改善心肌纖維化，本發(fā)明所述應(yīng)用是在左心室肥厚發(fā)生后，可以顯著地抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數(shù)的增加，增加左心室射血分?jǐn)?shù)和縮短分?jǐn)?shù)，減少心肌纖維化范圍。
文檔編號A61K36/537GK102370699SQ20101025062
公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月11日
發(fā)明者劉育英, 常昕, 李彥川, 胡白和, 韓晶巖 申請人:天津天士力制藥股份有限公司