專利名稱：人胎盤肽在制備治療干眼癥等眼表疾病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，具體涉及人胎盤肽在制備治療干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜 上皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
干眼又稱干眼癥，是一種常見的慢性眼科疾病，該病可導(dǎo)致結(jié)膜和角膜上皮的糜 爛和炎癥，治療較為棘手，很難治愈，嚴(yán)重影響人們的視力和生存質(zhì)量。局部應(yīng)用人工淚液 和生長因子是治療對(duì)干眼癥的主要方法，常用的滴眼液有透明質(zhì)酸鈉滴眼液、羥丙基甲基 纖維素滴眼液、甲基纖維素滴眼液、聚乙烯醇滴眼液、聚丙烯酸滴眼液、右旋糖酐-70滴眼 液、表皮生長因子滴眼液、堿性成纖維細(xì)胞生長因子滴眼液、素高捷療眼用凝膠等，以上滴 眼液(或凝膠)對(duì)促進(jìn)角結(jié)膜上皮損傷的愈合，潤滑眼表，治療干眼癥等眼表疾病有一定的 輔助作用，但是療效不高。因此，研制治療干眼癥療效高、副作用小的滴眼液仍是目前研究 的重點(diǎn)。人胎盤又稱紫河車，為祖國醫(yī)學(xué)傳統(tǒng)中藥，具有溫腎補(bǔ)精、益氣養(yǎng)血的功能，民間 常用紫河車煮爛食用，以增加機(jī)體抵抗力，治療體虛、喘咳等多種病癥。人胎盤肽是從人胎盤中分離出的一種不耐熱的不含蛋白質(zhì)的小分子多肽類物質(zhì)， 由劉月新等于1985年首次報(bào)道，并先后應(yīng)用胎盤轉(zhuǎn)移因子、胎盤免疫調(diào)節(jié)因子、胎盤多肽 等名稱。它具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能作用，臨床上常用于惡性腫瘤和病毒性肝炎等疾病的輔 助治療。胎盤肽分子量小于10000道爾頓，含有人體必需的17種氨基酸和23種微量元素， 并含有核糖和多糖等，胎盤肽的理化性質(zhì)表明胎盤肽是一種營養(yǎng)豐富的多肽制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供人胎盤肽在制備治療干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜上皮缺損、 角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明人經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，人胎盤肽能增加新西蘭白兔干眼模型的淚液分泌量，促進(jìn) 其角膜上皮細(xì)胞損傷的修復(fù)和增加結(jié)膜杯狀細(xì)胞的數(shù)量，且對(duì)眼無刺激性，對(duì)新西蘭白兔 干眼模型具有治療作用，且療效顯著。所以人胎盤肽可用于干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜上 皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病治療，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目 的。所述的治療干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜上皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角 膜激光術(shù)后等眼表疾病藥物為人胎盤肽眼用制劑，優(yōu)選由有效劑量的人胎盤肽和眼用基質(zhì) 組成。有效劑量的人胎盤肽可根據(jù)給藥對(duì)象具體進(jìn)行選擇，本發(fā)明人經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，單純從 療效來說，人胎盤肽原液的治療效果最好，考慮到成本、人胎盤肽在眼表的治療時(shí)間和滲透 壓，可以用生理鹽水將其稀釋成各種濃度的人胎盤肽眼用制劑，這些眼用制劑都對(duì)干眼癥、 角膜上皮糜爛、角膜上皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病都具有 治療效果，優(yōu)選與眼用基質(zhì)，如增稠劑混合使用，該增稠劑選自但不限于透明質(zhì)酸鈉、羥丙甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯醇、右旋糖酐70、卡波姆、硫酸軟骨素、殼聚糖。加入 增稠劑簡單方便，可直接作用于眼表，延長藥物在眼表的滯留時(shí)間，減少了用藥量，增強(qiáng)了 藥物作用。優(yōu)選劑量為人胎盤肽原液占眼用制劑的25 100% (體積分?jǐn)?shù))，余量為眼用 輔劑。所述的眼用制劑可制成眼用滴眼液或者眼用凝膠，眼用滴眼液或眼用凝膠均可以 直接滴入眼結(jié)膜囊內(nèi)。本發(fā)明的人胎盤肽屬于現(xiàn)有技術(shù)的物質(zhì)，可通過現(xiàn)有技術(shù)的方法制備。為了更好的理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面用人胎盤肽的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)及結(jié)果來說明該人 胎盤肽具有治療干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜上皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激 光術(shù)后等眼表疾病的藥理效果。一、人胎盤肽對(duì)新西蘭白兔干眼模型的影響1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察局部滴用人胎盤肽滴眼液對(duì)新西蘭白兔干眼模型的治療效果，探索治療干眼 癥的一種新的藥物。2、實(shí)驗(yàn)方法將20只健康雌性新西蘭白兔隨機(jī)分為4組，(1)正常對(duì)照組；(2)人胎盤肽組 50% (體積分?jǐn)?shù))人胎盤肽原液+1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))羥丙基甲基纖維素鈉(Hydroxypropyl methyl cellulose,HPMC)混合滴眼液治療組，其配置方法為在0.8% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))的無菌 鹽水(pH為7. 2士0. 2)加入羥丙基甲基纖維素鈉，然后等體積再加入人胎盤肽原液，羥丙基 甲基纖維素鈉的終質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%，然后混合均勻，無菌分裝待用；(3)素高捷療眼凝膠治 療組，按照素高捷療眼凝膠的使用說明書操作；(4)1% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))HPMC賦形劑對(duì)照組，溶 劑為0.8% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))的無菌鹽水。正常對(duì)照組的白兔不做任何處理，其余3組白兔摘除 左眼的淚腺、第3眼瞼及Harder’s腺，并用50% (體積分?jǐn)?shù))三氯醋酸灼燒上下穹窿部結(jié) 膜制作干眼模型，右眼不做任何處理，造模后第56d左眼開始滴用上述不同藥物進(jìn)行治療， 每日4次，連續(xù)用藥28d。分別于造模前，造模后第7d、28d和56d，及用藥后第14d、28d進(jìn) 行Shirmer I試驗(yàn)、熒光素染色及結(jié)膜印跡細(xì)胞學(xué)檢查，用藥后第28d取角膜、結(jié)膜行病 理學(xué)檢查。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1、表2、表3和表4所示，造模后第56d，新西蘭白兔的Shirmer I試驗(yàn)值和結(jié) 膜杯狀細(xì)胞數(shù)量計(jì)數(shù)結(jié)果顯示，見于表1和表2，各處理組明顯低于正常組，P < 0. 01 ；角膜 熒光素染色積分和Nelson積分，見于表3和表4，各處理組明顯高于正常組，P < 0. 01，由此 說明各處理組的新西蘭白兔干眼模型造模成功。用藥后第14d和28d，人胎盤肽組和素高捷 療組的Shirmer I試驗(yàn)值和杯狀細(xì)胞數(shù)量較用藥前明顯增長或增加，P < 0. 01，見于表1和 表2 ；角膜熒光素染色積分和Nelson積分較用藥前明顯降低，P < 0. 05或P < 0. 01，見于 表3和表4 ；兩治療組的各種檢查指標(biāo)與HPMC組相比均有明顯差異，P < 0. 05或P < 0. 01。 病理檢查顯示，見

圖1和圖2，圖IA是正常兔角膜病理切片，可見5層角膜上皮細(xì)胞，形態(tài) 清晰、排列緊密(HE染色，X400)，圖IB是人胎盤肽組用藥后第28天兔角膜病理切片，可 見角膜上皮層變薄，僅為3層(HE染色，X 400)，圖IC是素高捷療組用藥后第28天兔角膜 病理切片，可見角膜上皮層變薄，2 3層，部分上皮細(xì)胞變性，部分基底細(xì)胞水腫(HE染色，X400)，圖ID是HPMC組用藥后第28天兔角膜病理切片，可見角膜上皮層變薄，部分區(qū) 域缺失，未見基底層細(xì)胞(HE染色，X 400)。圖2A是正常兔結(jié)膜病理切片，可見結(jié)膜上皮和 柱狀上皮排列整齊，杯狀細(xì)胞密集，富含分泌顆粒(HE染色，X 400)；圖2B人胎盤肽組用藥 后第28天兔結(jié)膜病理切片，可見結(jié)膜上皮細(xì)胞層變薄，杯狀細(xì)胞較密集，富含分泌顆粒(HE 染色，X 400)；圖2C素高捷療組用藥后第28天結(jié)膜病理切片，可見結(jié)膜上皮細(xì)胞層變薄，少 量杯狀細(xì)胞(HE染色，X400)；圖2D HPMC組用藥后第28天結(jié)膜病理切片，可見結(jié)膜上皮細(xì) 胞層變薄，杯狀細(xì)胞數(shù)量極少(HE染色，X400)。由此可見，人胎盤肽滴眼液和素高捷療凝 膠用藥第28d后，角結(jié)膜上皮較HPMC組增厚，形態(tài)較規(guī)則，結(jié)膜杯狀細(xì)胞較HPMC組增加。表1白兔干眼模型治療前后SIt檢查值結(jié)果(η = 5，士s)
權(quán)利要求
人胎盤肽在制備治療干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜上皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的治療干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜 上皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病藥物為人胎盤肽眼用制劑， 其包含有效劑量的人胎盤肽和眼用輔劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的眼用輔劑包括增稠劑，該增稠劑選 自但不限于透明質(zhì)酸鈉、羥丙甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯醇、右旋糖酐70、卡波 姆、硫酸軟骨素或殼聚糖。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種人胎盤肽在制備治療單純性角膜炎、干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜堿燒傷、各種角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明經(jīng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，人胎盤肽能增加新西蘭白兔干眼模型的淚液分泌量，促進(jìn)其角膜上皮細(xì)胞損傷的修復(fù)和增加結(jié)膜杯狀細(xì)胞的數(shù)量，且對(duì)眼無刺激性，對(duì)新西蘭白兔干眼模型具有治療作用，療效顯著。因此人胎盤肽可用于治療干眼癥、角膜上皮糜爛、角膜上皮缺損、角膜堿燒傷、角膜炎、LASIK角膜激光術(shù)后等眼表疾病治療。
文檔編號(hào)A61K35/50GK101947307SQ20101025893
公開日2011年1月19日 申請(qǐng)日期2010年8月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月19日
發(fā)明者何梅風(fēng), 孫倩娜, 李娜, 鄧新國, 高楊 申請(qǐng)人:中山大學(xué)中山眼科中心