專利名稱：一種乙型肝炎病毒親和吸附柱及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種血液灌流技術(shù)，尤其涉及一種乙型肝炎病毒親和吸附柱及其制備 方法。
背景技術(shù)：
血液凈化技術(shù)包括血液透析、血液濾過、血液透析濾過、血液灌流、血漿分離和治 療分離，以及血液成分吸附治療等。自1979年，Terman首先報(bào)道了使用DNA免疫吸附柱， 采用血液灌流技術(shù)來治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)，從此邁入了用免疫吸附療法治療免疫性 疾病的新階段。近年來，血液凈化技術(shù)在疾病的體外治療方面引起了人們越來越多的重視， 人們不斷開拓血液凈化技術(shù)治療疑難疾病的新領(lǐng)域。乙型肝炎是目前困擾人們的一種常見的病毒感染性疾病，在我國流行甚廣。人群 總感染率高達(dá)60%，構(gòu)成乙型肝炎傳染源的表面抗原攜帶者約為10%。全國乙型肝炎表面 抗原攜帶者至少有1. 2億，其中約10%最終轉(zhuǎn)化為各種慢性肝炎，包括慢性肝炎肝硬化和 肝癌?，F(xiàn)在我國慢性肝炎病人約為1200萬，每年肝病死亡人數(shù)約為30萬，其中16萬人死 于肝癌，可見病毒性肝炎給社會(huì)帶來了巨大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)以及對人類健康帶來的巨大影響。目前治療乙型肝炎的抗病毒療法，成本高、療程長、副作用大，不能達(dá)到較好的治 療效果，患者用藥后乙型肝炎病毒容易變異，影響后續(xù)的治療效果，給患者帶來了巨大的經(jīng) 濟(jì)壓力和心理負(fù)擔(dān)。研究發(fā)現(xiàn)乙肝患者的血液中含有大量的乙型肝炎表面抗原的Dana顆粒(HBsAg)， 形成病毒血癥，為了治療這種病毒血癥，我們發(fā)現(xiàn)可以通過血液灌流的方法把血液從患者 動(dòng)脈引出，血液中的乙型肝炎病毒表面蛋白抗原與親和微球上的乙型肝炎人免疫球蛋白特 異性結(jié)合，來吸附血漿中的乙型肝炎病毒，達(dá)到清除病毒和治療的目的。在親和微球上固定 針對其它病毒的抗體，可以對多種疾病有很好的治療效果，如艾滋病等。將清除了病毒的血液重新輸入體內(nèi)。這種方法在人體外對血液進(jìn)行處理，沒有化 學(xué)物質(zhì)的刺激，毒副作用小，且無需輸入新鮮血漿或置換液，具有廣闊的臨床意義和市場前
旦
ο

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有乙型肝炎治療和吸附柱的缺點(diǎn)和不足，提供一種乙型 肝炎病毒親和吸附柱及其制備方法。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的我們選用殼聚糖作為原料，來源廣泛，價(jià)格便宜，血液相容性好。親和微球制作過 程與其他方法相比簡單易行，且制備的吸附微球粒徑分布均勻。本吸附柱毒副性小，特異性高，能夠大量清除血液中的乙肝病毒，可輔助或替代傳 統(tǒng)的治療方法。一、一種乙型肝炎病毒親和吸附柱(簡稱吸附柱)
本吸附柱包括親和微球、聚酯柱、分離膜；在聚酯柱內(nèi)裝入親和微球，在聚酯柱兩端通過分離膜封閉。本吸附柱的工作原理親和吸附作為一種生物分離技術(shù)，可用于血液凈化治療免疫性疾病。親和吸附柱 是利用抗原和抗體之間特異性結(jié)合的原理，將乙型肝炎人免疫球蛋白固定在吸附微球上形 成親和微球。將乙肝患者血液從動(dòng)脈輸出，流經(jīng)親和吸附柱，血漿中的病毒表面蛋白抗原和 乙型肝炎人免疫球蛋白結(jié)合，從而將乙肝病毒從血液中吸附掉，將清除過病毒的血液回輸 到人體內(nèi)。二、一種乙型肝炎病毒親和吸附柱的制備方法(簡稱方法)本方法包括下列步驟①制備吸附微球；②將吸附微球活化，得活化微球；③固定抗體，得親和微球；④進(jìn)行未反應(yīng)完醛基和環(huán)氧基的封閉；⑤裝柱；⑥封膜。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)和積極效果1、特異性強(qiáng)，乙型肝炎人免疫球蛋白只與乙肝病毒結(jié)合；2、治療效果顯著，通過1 2個(gè)小時(shí)的血液灌流可將血液內(nèi)的乙肝病毒大量清除， 療效顯著；3、毒副性小，由于選用血液相容性良好的殼聚糖作為原材料來制備吸附微球，因 而對機(jī)體的傷害小；4、安全，在聚酯柱的兩端封有孔徑適宜的分離膜，能夠允許血細(xì)胞通過，卻阻止親 和微球的通過，防止親和微球進(jìn)入血液；5、成本較低，除去了病毒的血液回輸?shù)襟w內(nèi)，不需要補(bǔ)充新鮮的血漿置換液?？傊?，本發(fā)明可以輔助或代替乙型肝炎的抗病毒治療法，效果顯著；適用于乙肝病 毒攜帶者、慢性乙型肝炎患者、乙肝重癥患者、肝癌患者血液中乙肝病毒的清除，達(dá)到緩解、 治療和挽救患者生命的目的。在親和微球上固定針對其它病毒的抗體，可以對多種疾病有 很好的治療效果，如艾滋病等。


圖1是本吸附柱的結(jié)構(gòu)示意圖。其中1-親和微球；2-聚酯柱；3-分離膜。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例詳細(xì)說明
一、一種乙型肝炎病毒親和吸附柱(簡稱吸附柱)1、總體如圖1，本吸附柱包括親和微球1、聚酯柱2和分離膜；在聚酯柱2內(nèi)裝入親和微球1，在聚酯柱2兩端通過分離膜3封閉。2、功能塊1)親和微球1用分子量為5 10萬的殼聚糖制成直徑為150 5000 μ m的深棕色球形顆粒，得 到一種吸附微球；在吸附微球中加入活化劑得到活化微球；在活化微球中加入乙型肝炎人免疫球蛋白進(jìn)行抗體固定得到親和微球。在活化微球中加入針對其它病毒的抗體，可得針對其它病毒的親和微球。本發(fā)明選用環(huán)氧氯丙烷作為活化劑，其能與吸附微球上的羥基反應(yīng)，在堿性條件 下在吸附微球上引入大量的環(huán)氧基，得到活化微球?；罨⑶蛏虾写罅康沫h(huán)氧基能與乙 型肝炎人免疫球蛋白上的氨基反應(yīng)，將乙型肝炎人免疫球固定在活化微球上，形成親和微 球。本實(shí)驗(yàn)選用綠十字(中國)生物制品有限公司生產(chǎn)的乙型肝炎人免疫球蛋白。制備得到的親和微球通過其上的乙型肝炎人免疫球蛋白與乙肝患者血液中的乙 肝病毒表面蛋白抗原結(jié)合，而將乙肝病毒吸附掉，達(dá)到清除血液中乙肝病毒的目的。其制備原理如下式①微球交聯(lián)
權(quán)利要求
一種乙型肝炎病毒親和吸附柱，其特征在于包括親和微球(1)、聚酯柱(2)和分離膜(3)；在聚酯柱(2)內(nèi)裝入親和微球(1)，在聚酯柱(2)兩端通過分離膜(3)封閉。
2.按權(quán)利要求所述的一種乙型肝炎病毒親和吸附柱，其特征在于 所述的親和微球(1)是用分子量為5 10萬的殼聚糖制成直徑為150 5000 μ m的深棕色球形顆粒，得到一 種吸附微球；在吸附微球中加入活化劑得到活化微球；在活化微球中加入乙型肝炎人免疫球蛋白進(jìn)行抗體固定得到親和微球； 在活化微球中加入針對其它病毒的抗體，可得針對其它病毒的親和微球。
3.按權(quán)利要求所述的一種乙型肝炎病毒親和吸附柱，其特征在于 所述的聚酯柱⑵是一種塑料筒，高H 直徑D為1 100。
4.按權(quán)利要求所述的一種乙型肝炎病毒親和吸附柱，其特征在于所述的分離膜(3) 是一種過濾膜，孔徑d為30 μ m 150 μ m。
5.按權(quán)利要求1所述的一種乙型肝炎病毒親和吸附柱的制備方法，其特征在于包括下 列步驟①制備吸附微球；②將吸附微球活化，得活化微球；③固定抗體，得親和微球；④進(jìn)行未反應(yīng)完醛基和環(huán)氧基的封閉；⑤裝柱；⑥封膜。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種乙型肝炎病毒親和吸附柱及其制備方法，涉及一種血液灌流技術(shù)。本吸附柱包括親和微球(1)、聚酯柱(2)和分離膜(3)；在聚酯柱(2)內(nèi)裝入親和微球(1)，在聚酯柱(2)兩端通過分離膜(3)封閉。本方法包括①制備吸附微球；②將吸附微球活化，得活化微球；③固定抗體，得親和微球；④進(jìn)行未反應(yīng)完醛基和環(huán)氧基的封閉；⑤裝柱；⑥封膜。本發(fā)明可以輔助或代替乙型肝炎的抗病毒療法，效果顯著；適用于乙肝病毒攜帶者、慢性乙型肝炎患者、乙肝重癥患者、肝癌患者血液中乙肝病毒的清除，達(dá)到緩解、治療和挽救患者生命的目的。在親和微球(1)上固定針對其它病毒的抗體，可以對多種疾病有很好的治療效果，如艾滋病等。
文檔編號A61M1/38GK101961512SQ20101027114
公開日2011年2月2日 申請日期2010年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月7日
發(fā)明者李慧, 王業(yè)富 申請人:武漢百泰生物技術(shù)有限公司