專利名稱：辛夷揮發(fā)油高效活性部位納米乳的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從辛夷揮發(fā)油中分離出高效活性部位并制備成納米乳的方法，屬 于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著經(jīng)濟的全球化、信息物流的全球化，加之生態(tài)環(huán)境的惡化，瘟疫即傳染性疾病 的全球化也隨即產(chǎn)生。瘟疫的產(chǎn)生與傳播主要是由于人體感染病原微生物包括細菌和病 毒，因此，對于傳染性疾病的治療主要就是利用抗生素與抗病毒藥物。目前，市場上的抗生 素與抗病毒藥物均為結(jié)構(gòu)清楚、成分單一的化學合成或半合成藥物，其問世之初確實對于 傳染性疾病的預防和治療起到了顯著的作用。但是，由于化學藥物的成分單一，其易于被病 原微生物識別而使病原微生物產(chǎn)生抗藥性，由此導致目前用于產(chǎn)然性疾病的新藥的研發(fā)明 顯滯后于病原微生物的抗藥性；同時其在治療過程中產(chǎn)生的對人體的毒副作用也日益突出 和嚴重，例如四環(huán)素類、鏈霉素類與氨基糖甙類的毒副作用已經(jīng)總所周知。因此，開發(fā)新型 高效安全的抗傳染性疾病的藥物迫在眉睫。中藥具有多成分、多靶點、多功效的綜合作用特點，有著顯著的廣譜抗菌、抗病毒 作用，且其對人體無毒或毒性與不良反應(yīng)極低。由于其活性成分為復雜的多成分，所以細菌 和病毒對于中藥不易產(chǎn)生抗藥性；人體也不易產(chǎn)生耐受性。揮發(fā)油是一大類中藥活性成分。揮發(fā)油的成分復雜，且結(jié)構(gòu)相似；具有廣泛的藥理 作用如抗菌、抗病毒與抗炎作用，但具有一定的刺激性，特別是口服刺激性更大。長期以來， 沒有對辛夷揮發(fā)油深入的研究。本發(fā)明從辛夷揮發(fā)油中分離篩選其高活性部位，然后制備 成納米乳，以降低其刺激性而提高活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種分離辛夷揮發(fā)油的高效活性部位并制備納米乳的方 法，該方法不僅提高了辛夷揮發(fā)油的活性，同時降低了其刺激性。本發(fā)明實現(xiàn)過程如下—種辛夷揮發(fā)油高效活性部位納米乳的制備方法，包括以下步驟(1)辛夷揮發(fā)油高效活性部位的分離通過硅膠柱層析法或低壓減壓分餾法分離得到辛夷揮發(fā)油不同活性部位，然后將 不同活性部位通過抗菌或抗病毒試驗篩選得到高效活性部位；(2)納米乳的制備稱取1.0% 2.0%的辛夷揮發(fā)油高效活性部位、2% 3%甘油、10% 30%吐 溫-80混合均勻，然后緩緩加入到余量的注射用水中，攪拌均勻，1 4°C放置2 5天，用 0. 45 μ m、0. 22 μ m的微孔濾膜依次過濾，即得辛夷揮發(fā)油高效活性部位的納米乳。上述辛夷揮發(fā)油的活性部位分離方法可以有兩種(1)硅膠柱層析法按照極性大小不同將辛夷揮發(fā)油分離為多個極性不同的部位，具體是將辛夷揮發(fā)油于硅膠柱上樣，用有機溶劑進行洗脫，分段收集不同的洗脫液，真 空條件下去除有機溶劑，得到極性大小不同的活性部位。(2)低壓減壓分餾法按沸點不同進行分離，分離沸點不同的部位。真空條件下， 在不同溫度下使不同沸點的成分在精餾塔中分離，冷凝，收集得到沸點不同的活性部位。上述辛夷揮發(fā)油的高活性部位的篩選方法為將分離得到的不同部位進行抗菌或 抗病毒試驗，篩選出活性較好的不同部位；然后將不同部位進行優(yōu)化組合，再進行篩選試 驗，從而得出活性最高的部位。上述辛夷揮發(fā)油的高活性部位納米乳的組成為揮發(fā)油1. 0% 2. 0%，甘油2% 3%，吐溫-8010% 30%，注射用水加至100%。本發(fā)明從辛夷揮發(fā)油中分離篩選其高活性部位，然后制備成納米乳，不僅提高了 揮發(fā)油的藥理作用，還降低辛夷揮發(fā)油的刺激性并提高其活性，可以通過口服給藥而取得 較好的治療效果。
具體實施例方式實施例1 硅膠柱層析法分離不同部位用濕法裝柱，加200mL石油醚到70克硅膠中，除區(qū)氣泡，裝柱，上樣1克揮發(fā)油， 分別加石油醚乙酸乙酯=15 1 ；13 1 ；11 1 ；9 1 ；7 1 ；5 1 ；3 1 ；1 1 ； 1 3；1 5洗脫，每個洗脫液200mL，分管回收每管10mL，點樣，用硫酸乙醇顯色?；厥諛O 性大致相同的部位，即可。實施例2 低壓減壓分餾法分離不同部位2. 1.用無水乙醇對塔進行洗滌，打開冷凝水，在常壓全回流的狀態(tài)下洗塔3個小 時，然后用真空泵將塔內(nèi)乙醇蒸汽抽干。2. 2.量取適量辛夷揮發(fā)油，將其和沸石一并加入已洗凈的塔釜中；密封精餾塔并 保證其密閉性；打開真空泵控制塔頂壓力為-0. 07MPa，開始加熱至揮發(fā)油達到微沸狀態(tài) (150°C 154°C )。2. 3.調(diào)整精餾塔保溫儀使溫度梯度升溫即25°C 30°C— 58°C 6264°C 7285°C 116°C— 120°C 130°C ；分別收集各個溫度下相應(yīng)的精餾部位即B1、B2、B3、 B4、B5與精餾塔內(nèi)殘留成分B6。附注精餾塔的設(shè)備參數(shù)為內(nèi)徑為cp32mm,塔高1000mm， 內(nèi)裝2. 5X2. 5mm θ玻璃絲網(wǎng)填料，填料裝填高度約為900mm ；塔身由內(nèi)到外采用電保溫帶 加熱、玻璃保溫層及石棉聯(lián)合保溫，電保溫帶加熱功率由調(diào)壓器控制，以補償塔身的熱損 失。實施例3 不同活性部位抑菌實驗(1)菌種的活化受試菌種(標準菌株)接種于固體瓊脂培養(yǎng)基，37°C活化24h，金 黃色葡萄球菌活化48h。(2)菌懸液的制備將活化后的受試菌種用接種環(huán)挑取菌苔于生理鹽水中，制成 含菌數(shù)濁度約為0. 5Mcf的菌懸液備用。(3)各活性部位溶液的配制將各被試各活性部位溶解于1. 0%的HAc溶液，辛夷 揮發(fā)油濃度設(shè)置為2%U. 5%U. 0%,0. 5%,0. 25%。(4)抑菌測試方法(瓊脂擴散紙片法)
紙片擴散法是將含有定量抗生素的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上，紙 片中的藥物在瓊脂中擴散，隨著擴散距離的增加抗生素的濃度呈對數(shù)減少，在藥物濃度到 達的范圍內(nèi)對此藥敏感的細菌不能生長而形成透明的抑菌圈，不同細菌形成的抑菌圈各不 相同，抑菌圈的大小反映了測試菌對該藥的敏感程度。如果抑菌劑能殺死或抑制皿中供試 菌的生長，則在濾紙片的周圍會出現(xiàn)一個無菌生長的透明圈，即抑菌圈。以抑菌圈的直徑作 為評定指標，抑菌圈直徑越大，說明該抑菌劑對此種供試菌的抑制效果越好，反之則抑制效 果越差。實驗發(fā)現(xiàn)石油醚乙酸乙酯為15 1 11 1洗脫的活性部位的抑菌圈最大， 達到25mm，說明該部位是活性成分最集中的部位。脫除有機溶劑后即得辛夷揮發(fā)油高效活 性部位。實施例4:納米乳的制備準確量取辛夷揮發(fā)油高效活性部位1. 5ml，甘油2. 5ml，吐溫_8012ml混合均勻；然 后緩緩加入到84ml注射用水中，攪拌均勻；4°C放置96小時，用0. 45 μ m、0. 22 μ m的微孔濾 膜依次過濾，即得。
權(quán)利要求
辛夷揮發(fā)油高效活性部位納米乳的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)辛夷揮發(fā)油高效活性部位的分離通過硅膠柱層析法或低壓減壓分餾法分離得到辛夷揮發(fā)油不同活性部位，然后將不同活性部位通過抗菌或抗病毒試驗篩選得到高效活性部位；(2)納米乳的制備稱取1.0％～2.0％的辛夷揮發(fā)油高效活性部位、2％～3％甘油、10％～30％吐溫 80混合均勻，然后緩緩加入到余量的注射用水中，攪拌均勻，1～4℃放置2～5天，用0.45μm、0.22μm的微孔濾膜依次過濾，即得辛夷揮發(fā)油高效活性部位的納米乳。
2.根據(jù)辛夷揮發(fā)油高效活性部位納米乳的制備方法，其特征在于將辛夷揮發(fā)油于硅 膠柱上樣，用有機溶劑進行洗脫，分段收集不同的洗脫液，真空條件下去除有機溶劑，得到 極性大小不同的活性部位。
3.根據(jù)辛夷揮發(fā)油高效活性部位納米乳的制備方法，其特征在于真空條件下，在不 同溫度下使不同沸點的成分在精餾塔中分離，冷凝，收集得到沸點不同的活性部位。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從辛夷揮發(fā)油中分離出高效抗病原微生物活性部位并制備成納米乳的方法，該方法涉及辛夷揮發(fā)油高效活性部位的分離和納米乳的制備，具體如下通過硅膠柱層析法或低壓減壓分餾法分離得到辛夷揮發(fā)油不同活性部位，然后將不同活性部位通過抗菌或抗病毒試驗篩選得到高效活性部位；稱取1.0％～2.0％的辛夷揮發(fā)油高效活性部位、2％～3％甘油、10％～30％吐溫-80混合均勻，然后緩緩加入到余量的注射用水中，攪拌均勻，1～4℃放置2～5天，用0.45μm、0.22μm的微孔濾膜依次過濾，即得辛夷揮發(fā)油高效活性部位的納米乳。本發(fā)明提高了揮發(fā)油的藥理作用，還降低了辛夷揮發(fā)油的刺激性并提高其活性，可以通過口服給藥而取得較好的治療效果。
文檔編號A61P31/12GK101933975SQ201010275220
公開日2011年1月5日 申請日期2010年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月8日
發(fā)明者李偉澤, 郝保華 申請人:西北大學