專利名稱：用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠。
背景技術：
用于皮下腫瘤治療的植入劑目前通常情況下呈固態(tài)，需要小手術將其植入皮下發(fā) 揮療效或者是可局部注射的微球混懸液。前一種植入劑病人的順應性差，后一種病人順應 性高，但其制備工藝較復雜，制備過程可能要用到有毒的有機溶劑而造成有機溶劑殘留，而 且其只是將原形藥物釋放到靶部位發(fā)揮作用。但是由于乳腺癌等皮下腫瘤通常都需要長期 用藥，容易產(chǎn)生耐藥性；有些抗癌藥物毒性較大，在產(chǎn)生局部較高濃度的同時也會造成較高 血藥濃度，從而藥物分布全身而造成毒性；有些抗癌藥物的細胞作用靶點在細胞內(nèi)，對于這 些抗癌藥物，制備成上述兩種植入劑，藥效或毒性難以保證。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種用做可注射皮 下植入劑的納米粒水凝膠，可有效解決局部注射到皮下腫瘤旁邊，變成凝膠，在體內(nèi)緩慢釋 放納米粒，實現(xiàn)治療腫瘤之目的的問題。本發(fā)明解決的技術方案是，由水凝膠溶液和2-甲氧基雌二醇(簡稱2ME，以下 同)脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末制成，所說的水凝膠溶液是由質(zhì)量百分比 計的溫度敏感型PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物10-40%、水60-90 %，在0_25°C低溫下混合 在一起，靜置使溫度敏感型PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物充分溶脹至溶液狀態(tài)，成水凝膠溶 液，備用；所說的2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末是由油相物 和水相物及凍干保護劑制成，油相物、水相物混合成為2ME脂質(zhì)體混懸液或者固體脂質(zhì)納 米?；鞈乙海偌尤雰龈杀Ｗo劑混勻，經(jīng)冷凍干燥，得納米粒粉末，凍干保護劑加入量為2ME 脂質(zhì)體混懸液或者固體脂質(zhì)納米?；鞈乙褐亓康?-10% ；將2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米 粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末加入水凝膠溶液中，混合均勻成為用做可注射皮下植入劑 的納米粒水凝膠，2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末加入量為每Iml水凝膠溶液中加入 IOOmg ；所說的溫度敏感型PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物為市售產(chǎn)品，如濟南岱罡生物科技 有限公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，分子量為4000-5000，PLGA為乳酸-乙醇酸共聚物，乳酸(LA)乙醇 酸(GA)的摩爾比為1-20 1 ；所說的凍干保護劑為甘露醇、海藻糖的一種，或二者的混合；所說的油相物為，將大豆卵磷脂240mg、膽固醇24mg、2_甲氧基雌二醇10mg，加入 4ml乙醚溶解而成的油相物，或單硬脂酸甘油酯480mg和2-甲氧基雌二醇16mg混合后，放 置在80°C的水浴中使其完全熔融，熔融后以IOOOrpm速度攪拌IOmin成的油相物；所說的水相物為泊洛沙姆1885mg，加入5ml PH7. 4PBS緩沖液溶解而成；或是將吐 溫80180mg、泊洛沙姆18860mg和超純水8ml，混合后，放置在同一水浴中，混勻成溶液水相
4物；所說的PBS緩沖液為含質(zhì)量濃度為0. 05%吐溫-20的PH7. 4的磷酸鹽緩沖液，是由磷 酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、氯化鈉、氯化鉀、吐溫-20，加水混合在一起制成(公知技術)；上述配比的油相物和水相物直接混合在一起，再加入油相物和水相物重量和 4-6%的凍干保護劑，構成2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末。本發(fā)明可注射水凝膠植入劑用于治療乳腺癌等皮下腫瘤，其可避免常規(guī)固態(tài)植入 劑需要小手術的痛苦，病人給藥順應性大大提高，而且直接在靶部位釋放藥物，可保持較高 的局部靶部位較高的有效的藥物濃度，保證了抗癌藥物的療效。由于是局部給藥，避免全 身的分布，給藥劑量特別低。同時可緩釋長效，水凝膠在體內(nèi)緩慢的降解，緩慢的釋放納米 粒，根據(jù)水凝膠量的多少可持續(xù)釋藥至少1個月，避免口服制劑或靜注等其他途徑的頻繁 給藥，特適合長期用藥的疾病治療。更重要的是從水凝膠中釋放出來的納米粒，可直接將藥 物轉(zhuǎn)運到細胞內(nèi)，可避免長期用藥的耐藥性，同時可提高療效降低劑量，減少全身的毒副作 用，還可以阻止乳腺癌等腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移。
具體實施例方式以下結合實施例對本發(fā)明的具體實施方式
作詳細說明。實施例1 本發(fā)明在具體實施中，可由以下的實施例給出將23%聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸共聚物(其中聚乳酸乙醇酸共聚物材料的乳酸/ 乙醇酸的摩爾比是3 1)和77%的水混合，放置在冰箱中充分溶脹，成溶液狀的水凝膠溶 液；制備穩(wěn)定的2-甲氧基雌二醇(2ME)脂質(zhì)體，乙醚注入法稱取大豆卵磷脂240mg， 膽固醇24mg，2ME IOmg置入西林瓶中，加入4ml乙醚溶解成油相；稱取泊洛沙姆1885mg，加 入5mlPH 7. 4PBS緩沖液溶解成水相；在40°C，lOOOr/min磁力攪拌下將油相(吸入Iml注 射器)緩慢勻速滴入水相中，持續(xù)半小時揮發(fā)乙醚后再繼續(xù)攪拌30min得乳白色混懸液， 將上述粗混懸液水浴超聲30min后，探頭超聲，功率400W，超3s，停3s，10次，水浴超聲和 探頭超聲共3個循環(huán)，即得2ME脂質(zhì)體溶液(含2ME 2mg/ml)，2ME脂質(zhì)體溶液中加入其重 量的凍干保護劑甘露醇4%、海藻糖6% (或每Iml 2ME脂質(zhì)體溶液中加入甘露醇4mg，海 藻糖6mg)，-80°C預凍12h后冷凍干燥24h，凍干保護劑復溶后粒徑約150nm，Zeta電位約 為-21mV的粉末，與凍干前無顯著差異，稱取粉末200mg，20°C低溫下均勻混懸在2ml水凝膠 的溶液中即可。實施例2:將23%聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸共聚物(其中聚乳酸乙醇酸共聚物材料的乳酸/ 乙醇酸的摩爾比是3 1)和77%的水混合，放置在冰箱中充分溶脹，成溶液狀的水凝膠溶 液；制備2-甲氧基雌二醇固體脂質(zhì)納米粒，稱取0.48g單硬脂酸甘油酯和 0.016g2-甲氧基雌二醇混合后放置在80°C的水浴中使其完全熔融，熔融后以IOOOrpm速 度攪拌lOmin，作為油相；稱取0. 18g吐溫80，0. 06g波洛沙姆188和8ml的超純水混合后 放置在同一水浴中使成溶液，此為水相；在80°C，IOOOrpm的條件下先將此水相在以IOml/ min速度滴加到同溫度保溫的油相中，再繼續(xù)攪拌IOmin ；在80°C，用分散機以IOOOOrpm分散3min，之后以400w的功率探頭超聲8min，即得2-甲氧基雌二醇的固體脂質(zhì)納米粒混懸 液，再在2-甲氧基雌二醇的固體脂質(zhì)納米粒混懸液中加入其重量6%的海藻糖，-80°C預凍 12h后，冷凍干燥24h，凍干粉復溶后粒徑約280nm，Zeta電位約為_18mV的粉末，稱取粉末 200mg，20°C低溫下均勻混懸在2ml水凝膠的溶液中即可。本發(fā)明可有效用于乳腺癌等皮下腫瘤，病人痛苦小，可保持較高的局部靶部位有 效的藥物濃度，治療效果好，并經(jīng)動物試驗取得了另人非常滿意的效果，有關試驗資料如 下1.動物:SPF級KM小鼠，雌性，42 士 2日齡，體重19 士 2g，由鄭州大學實驗動物中 心提供。合格證編號SCXK(豫)2009-0001。每組動物數(shù)陰性對照組20只，給藥組10只。2.移植瘤小鼠肉瘤S-180，由KM小鼠腹水傳代保存。3.體內(nèi)抗瘤活性取生長良好的7-11天的S-180瘤種，將瘤組織制成1_2X 10_7 ml細胞懸液，KM小鼠右側(cè)腋部皮下接種0. 2ml/只。接種IOd后隨機分籠，按照分組不同給 藥。陰性對照組每天1次連續(xù)靜脈注射生理鹽水，連續(xù)注射21天；陽性對照組5-氟脲嘧啶 (5-FU)0、3、6、9、12、15、18天靜脈給藥(i. ν)共7次。原料藥水凝膠植入劑，于0天皮下注 射空白載體或藥液于腫瘤旁邊。脂質(zhì)體空白載體組和脂質(zhì)體水凝膠植入劑給藥組，分別于0 天皮下注射空白載體或藥液于腫瘤旁邊。固體脂質(zhì)納米?？瞻纵d體組和固體脂質(zhì)納米粒水 凝膠植入劑給藥組，分別于0天皮下注射空白載體或藥液于腫瘤旁邊。第21天處死動物， 稱體重、瘤重，計算各組平均瘤重，求出腫瘤抑制率并進行t檢驗，優(yōu)選出最佳治療組，結果 下表。
空白對照組平均瘤重一抑瘤組平均瘤重
腫瘤抑制率(％) 二-χ 100%
空白對照組平均瘤重2-甲氧基雌二醇可注射植入劑的體內(nèi)抗腫瘤效應
權利要求
一種用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠，其特征在于，由水凝膠溶液和2 甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末制成，所說的水凝膠溶液是由質(zhì)量百分比計的溫度敏感型PLGA PEG PLGA嵌段共聚物10 40％、水60 90％，在0 25℃低溫下混合在一起，靜置使溫度敏感型PLGA PEG PLGA嵌段共聚物充分溶脹至溶液狀態(tài)，成水凝膠溶液，備用；所說的2 甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末是由油相物和水相物及凍干保護劑制成，油相物、水相物混合成為2ME脂質(zhì)體混懸液或者固體脂質(zhì)納米粒混懸液，再加入凍干保護劑混勻，經(jīng)冷凍干燥，得納米粒粉末，凍干保護劑加入量為2ME脂質(zhì)體混懸液或者固體脂質(zhì)納米?；鞈乙褐亓康? 10％；將2 甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末加入水凝膠溶液中，混合均勻成為用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠，2 甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末加入量為每1ml水凝膠溶液中加入100mg；所說的溫度敏感型PLGA PEG PLGA嵌段共聚物分子量為4000 5000，PLGA為乳酸 乙醇酸共聚物，乳酸(LA)∶乙醇酸(GA)的摩爾比為1 20∶1；所說的凍干保護劑為甘露醇、海藻糖的一種，或二者的混合；所說的油相物為，將大豆卵磷脂240mg、膽固醇24mg、2 甲氧基雌二醇10mg，加入4ml乙醚溶解而成的油相物，或單硬脂酸甘油酯480mg和2 甲氧基雌二醇16mg混合后，放置在80℃的水浴中使其完全熔融，熔融后以1000rpm速度攪拌10min成的油相物；水相物為泊洛沙姆1885mg，加入5ml PH7.4PBS緩沖液溶解而成；或是將吐溫80180mg、泊洛沙姆18860mg和超純水8ml，混合后，放置在同一水浴中，混勻成溶液水相物；上述配比的油相物和水相物直接混合在一起，再加入油相物和水相物重量和4 6％的凍干保護劑，構成2 甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末。
2.根據(jù)權利要求1所述的用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠，其特征在于，將 23%聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸共聚物和77%的水混合，放置在冰箱中充分溶脹，成溶液狀 的水凝膠溶液；制備穩(wěn)定的2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體，乙醚注入法稱取大豆卵磷脂240mg， 膽固醇24mg，2ME IOmg置入西林瓶中，加入4ml乙醚溶解成油相；稱取泊洛沙姆1885mg， 加入5mlPH 7. 4PBS緩沖液溶解成水相；在40°C，lOOOr/min磁力攪拌下將油相緩慢勻速滴 入水相中，持續(xù)半小時揮發(fā)乙醚后再繼續(xù)攪拌30min得乳白色混懸液，將上述粗混懸液水 浴超聲30min后，探頭超聲，功率400W，超3s，停3s，10次，水浴超聲和探頭超聲共3個循 環(huán)，即得2ME脂質(zhì)體溶液，2ME脂質(zhì)體溶液中加入其重量的凍干保護劑甘露醇4%、海藻糖 6%，-80°C預凍12h后，冷凍干燥24h，凍干保護劑復溶后粒徑為150nm，Zeta電位為-21mV 的粉末，稱取粉末200mg，20°C低溫下均勻混懸在2ml水凝膠的溶液中即可。
3.根據(jù)權利要求1所述的用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠，其特征在于，將 23%聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸共聚物和77%的水混合，放置在冰箱中充分溶脹，成溶液 狀的水凝膠溶液；制備2-甲氧基雌二醇固體脂質(zhì)納米粒，稱取0. 48g單硬脂酸甘油酯和 0.016g2-甲氧基雌二醇混合后放置在80°C的水浴中使其完全熔融，熔融后以IOOOrpm速 度攪拌lOmin，作為油相；稱取0. 18g吐溫80，0. 06g波洛沙姆188和8ml的超純水混合后 放置在同一水浴中使成溶液，此為水相；在80°C，IOOOrpm的條件下先將此水相在以IOml/ min速度滴加到同溫度保溫的油相中，再繼續(xù)攪拌IOmin ；在80°C，用分散機以IOOOOrpm分 散3min，之后以400w的功率探頭超聲8min，即得2-甲氧基雌二醇的固體脂質(zhì)納米粒混懸2液，再在2-甲氧基雌二醇的固體脂質(zhì)納米?；鞈乙褐屑尤肫渲亓?%的海藻糖，_80°C預凍 12h后，冷凍干燥24h，凍干粉復溶后粒徑約280nm，Zeta電位約為_18mV的粉末，稱取粉末 200mg，20°C低溫下均勻混懸在2ml水凝膠的溶液中即可。
全文摘要
本發(fā)明涉及用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠，可有效解決局部注射到皮下腫瘤旁邊，變成凝膠，在體內(nèi)緩慢釋放納米粒，實現(xiàn)治療腫瘤之目的的問題，方法是，由水凝膠溶液和2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末制成，將2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末或者固體脂質(zhì)納米粒粉末加入水凝膠溶液中，混合均勻成為用做可注射皮下植入劑的納米粒水凝膠，2-甲氧基雌二醇脂質(zhì)體納米粒粉末加入量為每1ml水凝膠溶液中加入100mg；本發(fā)明可注射水凝膠植入劑用于治療乳腺癌等皮下腫瘤，保持局部靶部位有效的藥物濃度，可緩釋長效，可避免長期用藥的耐藥性，同時可提高療效降低劑量，減少全身的毒副作用，還可以阻止乳腺癌等腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移。
文檔編號A61K47/34GK101953775SQ20101028472
公開日2011年1月26日 申請日期2010年9月17日 優(yōu)先權日2010年9月17日
發(fā)明者張振中, 張正全, 梅芊, 胡海英, 邢亞兵, 郭新紅 申請人:鄭州大學