專利名稱：烏司他丁用于制備治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的用途及其藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥 物，特別涉及烏司他丁作為治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的一種應(yīng)用。
背景技術(shù)：
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一種以慢性對(duì)稱性多關(guān)節(jié)炎及骨 和軟骨破壞為主要臨床表現(xiàn)的自身免疫性疾病。其最顯著的病理特點(diǎn)是滑膜增生、炎性細(xì) 胞浸潤(rùn)、關(guān)節(jié)軟骨及骨破壞、功能喪失甚至殘疾，是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一。在我國(guó) RA的患病率為0. 5%左右，雖然低于歐美國(guó)家的 3%，但仍是造成我國(guó)人群?jiǎn)适趧?dòng) 力和致殘的主要疾病之一(每年有1500 2000萬(wàn)人致殘)。迄今尚無(wú)特異有效的治療方 法，傳統(tǒng)治療雖可暫時(shí)緩解RA患者的臨床癥狀和改善關(guān)節(jié)功能，但不能阻止疾病的進(jìn)展， 且臨床不良反應(yīng)非常嚴(yán)重。目前，對(duì)RA發(fā)病機(jī)制尚不清楚，但已經(jīng)證實(shí)的是引起RA關(guān)節(jié)炎癥及骨和軟骨損傷 的原因主要是兩方面的因素炎癥反應(yīng)和自身免疫。多數(shù)RA治療都是以減輕關(guān)節(jié)的慢性炎 癥、抑制依賴炎性細(xì)胞因子和趨化因子的多因子反應(yīng)為目標(biāo)。目前認(rèn)為，較傳統(tǒng)藥物，抑制 炎性介質(zhì)尤其是TNF-α分泌或阻斷其受體結(jié)合的制劑更具特效。眾多研究表明，TNF-α在 RA發(fā)病過(guò)程中具有重要的作用。TNF-α是一種重要的炎性細(xì)胞因子，可引起IL-I β、IL-6、 IL-8及白細(xì)胞抑制因子等其它炎性細(xì)胞因子釋放的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)中性粒細(xì)胞、成纖維細(xì) 胞及軟骨細(xì)胞釋放蛋白酶。所釋放的這些蛋白酶，包括膠原酶及中性的金屬蛋白酶等，可直 接參與RA的病理?yè)p傷。烏司他丁，又名人尿胰蛋白酶抑制劑(Human Urinary Trypsin Inhibitor,UTI, Urinastatin ；或Ulinastatin)，是從人體尿液中分離純化的由143個(gè)氨基酸組成的酸性糖 蛋白，它不僅是一種廣譜蛋白酶抑制劑，還有抗炎、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種作用，可以抑 制免疫細(xì)胞的活化增殖，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。既往的多項(xiàng)研究表明，烏司他丁可以抑制炎性 因子TNF-α等的釋放，因此烏司他丁可以從多方面抑制RA的病理過(guò)程。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎提供一種高效、安全且副作用少的方法。本發(fā)明的烏司他丁對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有明顯的治療作用，一般以藥物組合物的形 式使用，這種組合物含有治療有效量的作為活性成分的烏司他丁和可藥用輔料，主要?jiǎng)┬?包括凍干粉針劑和注射液劑，通常以靜脈注射途徑給藥。經(jīng)靜脈注射給藥的烏司他丁組合物，一般是固體的滅菌組合物形式。這些組合物 還可以含有添加劑，特別是甘露醇、右旋糖苷、水解明膠、檸檬酸鈉、甘氨酸等。在使用時(shí)溶 解于滅菌注射用水或其它注射用滅菌介質(zhì)中。經(jīng)靜脈注射給藥的烏司他丁組合物也可以是水溶液形式，組合物還可以含有添加劑，特別是甘露醇、氯化鈉、葡萄糖等。烏司他丁的劑量根據(jù)病情的嚴(yán)重程度、治療時(shí)間而定，一般靜脈注射給藥量是每 天給藥1-4次，每次給藥10萬(wàn) 100單位/支(瓶)，優(yōu)選20-60萬(wàn)單位。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1制備烏司他丁干粉針取過(guò)濾滅菌烏司他丁水溶液10000萬(wàn)單位，加20克甘露醇溶解，調(diào)節(jié)PH到中性， 加注射用水至2000毫升，加氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，無(wú)菌過(guò)濾，分裝于1000個(gè)西林瓶中，無(wú)菌條件 下冷凍干燥，即得。實(shí)施例2制備烏司他丁注射液取過(guò)濾滅菌的烏司他丁水溶液10000萬(wàn)單位，調(diào)節(jié)PH到中性，加注射用水至2000 毫升，加氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，無(wú)菌過(guò)濾，分裝1000個(gè)西林瓶中，即得。實(shí)施例3烏司他丁對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的治療作用第一部份膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎(CIA)動(dòng)物模型的建立及評(píng)分將牛II型膠原(C II)溶于0. IM醋酸制成2mg/ml的溶液，與等體積的完全弗氏 佐劑混合，磁珠攪拌乳化，配成終濃度lmg/ml的乳劑。取0.5ml(含C II 0. 5mg)分別于 Wistar大鼠背部5個(gè)部位皮內(nèi)注射，10天后同樣劑量在大鼠尾根部皮內(nèi)注射加強(qiáng)免疫一 次。觀察大鼠關(guān)節(jié)炎的發(fā)病情況，并根據(jù)關(guān)節(jié)炎發(fā)病大鼠的腿部和趾尖部位的紅腫程度，按 (0 4級(jí))進(jìn)行評(píng)分。0分無(wú)關(guān)節(jié)炎；1分有紅色斑點(diǎn)或輕度腫脹；2分關(guān)節(jié)部位中度 腫脹；3分關(guān)節(jié)嚴(yán)重紅腫；4分嚴(yán)重紅腫，嚴(yán)重功能障礙，無(wú)法負(fù)重。每只爪的評(píng)分相加即 得到大鼠關(guān)節(jié)炎癥的總評(píng)分。關(guān)節(jié)總評(píng)分大于1的大鼠為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型建立成功。第二部分烏司他丁治療CIA動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究首次免疫后21天，選取造模成功的大鼠模型72只，隨機(jī)分為六組空白對(duì)照組、溶 劑對(duì)照組、甲氨蝶呤治療組、烏司他丁治療I組、烏司他丁治療II組、烏司他丁治療III組， 另外選用12只正常大鼠作為正常對(duì)照組?？瞻讓?duì)照組不予治療；溶劑對(duì)照組為等容積的含 有選自甘露醇、氯化鈉或葡萄糖的添加劑組成的緩沖液，其成份比與烏司他丁注射液內(nèi)添 加劑相同；甲氨蝶呤治療組劑量1. 75mg/kg ；烏司他丁 I組劑量為30，000單位/kg，II組劑 量為80，000單位/kg，III組劑量為200，000單位/kg，均為每日一次，持續(xù)14天，給藥途 徑為腹腔注射。主要檢測(cè)項(xiàng)目為一般情況觀察，關(guān)節(jié)腫脹度測(cè)量，治療結(jié)束后大鼠關(guān)節(jié)腔滑液及 血清TNF α、IL-I β水平檢測(cè)，關(guān)節(jié)組織病理檢查。結(jié)果1.各治療組間一般情況的比較大鼠于初次免疫次日背部及尾根部開(kāi)始出現(xiàn)輕度紅腫，并逐漸加重，甚至破潰結(jié) 痂。10天內(nèi)大鼠無(wú)任何關(guān)節(jié)炎癥表現(xiàn)，再次免疫后，第13 15天起部分大鼠即出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅 腫，而后相繼出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀，并于15 20天基本全部發(fā)病。正常對(duì)照組大鼠無(wú)任何體征 改變。與正常大鼠比較，CIA組大鼠行動(dòng)不便，后爪明顯腫脹，關(guān)節(jié)呈屈曲狀態(tài)，CIA大鼠前 爪、尾部關(guān)節(jié)無(wú)改變，未出現(xiàn)結(jié)節(jié)、紅斑和關(guān)節(jié)強(qiáng)直。CIA大鼠造模后，平均體重減輕，后期可見(jiàn)毛發(fā)枯燥，大鼠踝關(guān)節(jié)和趾關(guān)節(jié)紅腫，病變呈對(duì)稱性，經(jīng)過(guò)烏司他丁及MTX治療的各組 大鼠總體狀態(tài)較各對(duì)照組好，關(guān)節(jié)炎癥狀顯著減輕。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)MTX治療組大鼠第7 天后毛色發(fā)黃，狀態(tài)不佳，判定為MTX副作用的結(jié)果，而烏司他丁各劑量組未見(jiàn)此現(xiàn)象。2.對(duì)關(guān)節(jié)腫脹的影響在給藥后不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)定踝關(guān)節(jié)的周長(zhǎng)，與正常對(duì)照組相比，相它各組關(guān)節(jié)明顯 腫脹(*，P<0. 05)，不同治療方案均可改善造模大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度，而溶劑對(duì)照組對(duì)關(guān)節(jié) 腫脹程度沒(méi)有改善。其中烏司他丁 II組和III組與空白對(duì)照組在第4天時(shí)出現(xiàn)顯著性差 異(#P < 0. 05)，治療第7天后各治療組改變均明顯(#P < 0. 05)，到14天時(shí)，MTX組，烏司 他丁 II組及III組基本恢復(fù)正常。關(guān)節(jié)腫脹程度，空白對(duì)照組>溶劑對(duì)照組>烏司他丁治 療I組> MTX治療組>烏司他丁治療II組>烏司他丁治療III組>正常對(duì)照組。表1各組大鼠關(guān)節(jié)腫脹的改變(mm)
權(quán)利要求
烏司他丁用于制備治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的用途，所述藥物含有治療有效量的烏司他丁以及藥學(xué)上可接受的載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述藥物的給藥量是每天給藥1-4次，每次給藥10 萬(wàn) 100單位/支(瓶)，優(yōu)選20-60萬(wàn)單位。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述藥物為凍干粉針劑，載體可選用葡萄糖、氯化鈉、 甘露醇、乳糖或水解明膠中的一種或其任意混合物。
4.據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述藥物為注射液，載體可選用注射用水、葡萄糖、氯化 鈉或甘露醇的一種或其任意混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其中所述的藥物還含有選自甘露醇、右旋糖苷、水解明 膠、檸檬酸鈉或甘氨酸的添加劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其中所述的藥物還含有選自甘露醇、氯化鈉或葡萄糖 的添加劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及烏司他丁作為制備治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的一種應(yīng)用。本發(fā)明涉及藥物來(lái)源于人尿提純的天然蛋白藥物，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，不良反應(yīng)少，克服了傳統(tǒng)藥物治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎存在的副作用較多等缺點(diǎn)。通過(guò)對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型的療效對(duì)比研究，發(fā)現(xiàn)烏司他丁療效優(yōu)于氨甲蝶呤組，且副作用少。
文檔編號(hào)A61P19/02GK101954072SQ201010299510
公開(kāi)日2011年1月26日 申請(qǐng)日期2010年10月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月8日
發(fā)明者傅和亮, 華明娟, 吳蓉蓉, 鄒春芽, 陳穎 申請(qǐng)人:廣東天普生化醫(yī)藥股份有限公司