專利名稱：一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑及其制備方法
專利說明本發(fā)明涉及一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，OP)是一種代謝性骨病，它是以骨量減少和骨的微觀 結(jié)構(gòu)退化為特征，導(dǎo)致骨的脆性增加以致于易發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。目前，雌激素替代療法(HRT) —直是絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的首選方法，但它在誘發(fā) 生殖系統(tǒng)的癌癥、引起深靜脈血栓等方面的副作用，使HRT的應(yīng)用有了廣泛爭議。急需一種 能夠替代雌激素療法的藥物。中藥，是我國的一大資源寶庫，許多疑難雜癥都能夠從中藥中找到治療藥方，因 此，從中藥中尋找治療骨質(zhì)疏松癥的藥方是一種行之有效的方法。淫羊藿——味性辛、甘，溫。歸經(jīng)歸肝、腎經(jīng)。主治補(bǔ)腎陽，強(qiáng)筋骨，祛風(fēng)濕。 應(yīng)用(1)用于腎虛陽痿、遺精早泄、腰膝痿軟、肢冷畏寒。治陽痿遺泄，可配仙茅、山萸肉、 肉蓯蓉等品；治腰膝痿軟，可配杜仲，巴戟天、狗脊等品。(2)用于寒濕痹痛或四肢拘攣麻 木。治風(fēng)濕痹痛偏于寒濕者，以及四肢麻木不仁或筋骨拘攣等，可與威靈仙、巴戟天、肉桂、 當(dāng)歸、川芎等配伍。葛藤——薔薇目、豆科、葛屬的多年生草質(zhì)藤本植物，又名野葛，塊根肥厚，富含淀 粉，全株有黃色長硬毛。莖長10余米，常鋪于地面或纏于它物而向上生長?？偁罨ㄐ蛞干?， 長20厘米；花藍(lán)紫色或紫色；花萼鐘狀，莢果條形，扁平；種子長橢圓形，紅褐色。飼用價(jià)值 對多數(shù)牲畜的適口性中等，以馬較為喜吃；舍飼時(shí)，用葛葉與其它粗料混合，有增進(jìn)食欲之 效。四川盆地山區(qū)，廣泛葉曬干，作為冬季飼料，豬很喜吃。福建曾推薦葛葉作為兔的飼料。 分布于東南亞和澳大利亞，生境為山地疏、密林中。異黃酮類化合物又稱為“植物源雌激 素”，具有與雌激素相類似的作用，發(fā)明人推測葛根異黃酮可能有改善骨質(zhì)疏松癥的生物學(xué) 活性?，F(xiàn)有技術(shù)中，沒有利用淫羊藿提取物和葛藤提取物治療骨質(zhì)疏松的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑，并提供了其制備 方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑，是由以下重量份的原料藥制成的淫羊藿提取物 1 2份，葛藤提取物1 2份。所述抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑，還包括常規(guī)的藥用輔料，原料藥經(jīng)處理后，加入藥用 輔料，制成顆粒劑、片劑或膠囊劑。所述抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑的制備方法，包括以下步驟(1)取淫羊藿，加5 6倍量的(按重量倍數(shù)計(jì)，下同)50 70%乙醇(按體積百分濃度，下同)，回流提取兩次，每次2 3小時(shí)，濾過，合并提取液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱上，先用水快速?zèng)_洗，然后用50 70%乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，進(jìn)行噴霧干燥，即得淫羊藿提取物；或洗脫 液回收乙醇后，濃縮成稠膏，真空減壓干燥，粉碎，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加6 7倍量的60 70%乙醇，加熱回流提取2 3次，每 次2 3小時(shí)，合并提取液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好 的大孔吸附樹脂柱上，先用水快速?zèng)_洗，然后用50 70%乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回 收乙醇，進(jìn)行噴霧干燥，即得葛藤提取物；或洗脫液回收乙醇后，濃縮成稠膏，真空減壓干 燥，粉碎，即得葛藤提取物；(3)將淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，即得抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑；或?qū)⒁蜣教崛∥锖透鹛偬崛∥锘旌希尤脒m量的常規(guī)藥用輔料，制成顆粒劑、 片劑或膠囊劑。所述步驟(1)中，大孔吸附樹脂柱的填充劑為DM130、HPD100或D312，預(yù)處理方法
及使用方法為常規(guī)方法，在此不再贅述。所述步驟(2)中，大孔吸附樹脂柱的填充劑為DM130、HPD100或D312，預(yù)處理方法
及使用方法為常規(guī)方法，在此不再贅述。所述常規(guī)藥用輔料為淀粉環(huán)糊精等。本發(fā)明的中藥制劑，經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)(以去卵巢大鼠模型來模擬絕經(jīng)后0P，觀察制劑 對由雌激素缺乏引起OP的作用)證明，對骨質(zhì)疏松癥具有治療作用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1制備一種抗骨質(zhì)疏松癥的中藥制劑制備方法如下(1)取淫羊藿，加5倍量的60%乙醇，回流提取兩次，每次2小時(shí)，濾過，合并提 取液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱 (DM130)上，先用水快速?zèng)_洗，然后用60%乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，進(jìn)行噴 霧干燥，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加6倍量的70 %乙醇，加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，合并 提取液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱 (DM130)上，先用水快速?zèng)_洗，然后用70%乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，進(jìn)行噴 霧干燥，即得葛藤提取物；(3)將等量的淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，加入適量的常規(guī)藥用輔料，制成片 劑。實(shí)施例2制備一種抗骨質(zhì)疏松癥的中藥制劑制備方法如下(1)取淫羊藿，加6倍量的50%乙醇，回流提取兩次，每次3小時(shí)，濾過，合并提 取液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱 (HPD100)上，先用水快速?zèng)_洗，然后用50%乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，濃縮成稠膏，真空減壓干燥，粉碎，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加7倍量的60 %乙醇，加熱回流提取2次，每次3小時(shí)，合并提取液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱 (HPD100)上，先用水快速?zèng)_洗，然后用50%乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，濃縮 成稠膏，真空減壓干燥，粉碎，即得葛藤提取物；(3)將淫羊藿提取物和葛藤提取物混合(二者質(zhì)量比為1 2)，加入適量的常規(guī) 藥用輔料，制成顆粒劑。實(shí)施例3制備一種抗骨質(zhì)疏松癥的中藥制劑制備方法如下(1)取淫羊藿，加5倍量的70%乙醇，回流提取兩次，每次2小時(shí)，濾過，合并提取 液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱(D312) 上，先用水快速?zèng)_洗，然后用70%乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，進(jìn)行噴霧干燥， 即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加6倍量的70 %乙醇，加熱回流提取3次，每次3小時(shí)，合并 提取液，回收乙醇并濃縮至適量，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱 (D312)上，先用水快速?zèng)_洗，然后用60 %乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，進(jìn)行噴 霧干燥，即得葛藤提取物；(3)將淫羊藿提取物和葛藤提取物混合(二者質(zhì)量比為2 1)，加入適量的常規(guī) 藥用輔料，制成膠囊劑。動(dòng)物試驗(yàn)1 材料1. 1 藥物受試品為片劑(實(shí)施例1制備，葛藤提取物和淫羊藿提取物的比例為1 1)含 總黃酮> 60%，批號:090411o 三個(gè)劑量組分別定為200mg/kg、100mg/k g、50mg/kg，使用前分別配制成2 %、1 %、
0. 5%的水溶液，以10ml/kg灌胃給藥，每日一次。對照品尼爾雌醇片2mg/片，上海醫(yī)藥集團(tuán)有限公司華聯(lián)制藥廠產(chǎn)品，批號 060901。以1. 5mg/kg劑量給藥，給藥前配制成0. 015 %的水溶液以10ml/kg灌胃，每周兩次 (每周一、四)。1. 2 動(dòng)物Wistar雌性大鼠，280_300g，山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號 SCXK (魯)20030004，合格證編號0001387。1.3環(huán)境、飼料環(huán)境山東省中醫(yī)藥研究院藥理實(shí)驗(yàn)中心，許可證號SYXK(魯)20050052。飼料全價(jià)營養(yǎng)鼠飼料，山東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理中心提供，合格證號 SCXK (魯)20040014。1. 4儀器梅特勒-托利多GB-303電子天平，梅特勒中國公司；DDL-5低速冷凍離 心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；KNOE PRO型全自動(dòng)生化分析儀，芬蘭康藝儀器公司；YB-6LF生 物組織石蠟包埋機(jī)、YT-7F型生物組織攤烤片機(jī)、ZT-12P生物組織自動(dòng)脫水機(jī)，湖北孝感亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司；LEICA-RM2135切片機(jī)、LEICA-DM/LS顯微鏡，德國LEICA公司； SX-5-12箱式電阻爐、KSW電爐溫度控制器，北京永光明醫(yī)療儀器廠；PV-9100X射線能譜儀， 日本飛利浦；S-520掃描電鏡，日本日立；GMJ型全自動(dòng)放射免疫γ計(jì)數(shù)器，江蘇醫(yī)療電子 研究所；YLS-7A足趾容積測量儀、YLS-16A小動(dòng)物骨骼強(qiáng)度測定儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備
站廣品。
1. 5試劑碘[1251]骨鈣素放射免疫分析藥盒北京市普爾偉業(yè)生物科技有限公司 產(chǎn)品，批號20070804，20070824;碘[1251]雌二醇放射免疫分析藥盒，北京科美東雅生物 技術(shù)有限公司，批號20070925。堿性磷酸酶(ALP)試劑盒，批號070251，磷(P)試劑盒，批 號070061，鈣(Ca)試劑盒，批號070113，北京中生北控生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品。2 方法2. 1造模雌性wistar大鼠，80只，10%硫化鈉水溶液下腹部正中脫毛約1. 5cm2左 右，40mg/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉后仰位固定，分層剝離，暴露兩側(cè)卵巢，結(jié)扎后完整切除兩 側(cè)卵巢，止血后分層縫合。假手術(shù)組(10只)做相同的手術(shù)操作，但不切除卵巢。術(shù)后連續(xù) 3天硫酸慶大霉素抗感染，自由飲水、攝食。2. 2分組與給藥手術(shù)3日后剔除狀態(tài)較差大鼠，按照體重隨機(jī)分為6組假手術(shù) 組，去卵巢模型組，陽性對照組，制劑200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg組。分組后各給藥組給 與相應(yīng)藥物，假手術(shù)組和模型組給以同體積涼開水，尼爾雌醇組每周給藥兩次(1. 5mg/kg, 周一、四給藥)，連續(xù)灌胃6個(gè)月。每周稱取體重，并按新體重調(diào)整灌胃劑量。各組大鼠自由 飲水、攝食。2. 3測定指標(biāo)血生化指標(biāo)給藥6個(gè)月后，仰臥位固定大鼠，頸外靜脈采血，3000r/min離心 15min，分離血清，分別測定血清鈣、磷、堿性磷酸酶含量及血清雌二醇、骨鈣素、降鈣素含量。骨骼標(biāo)本采血后脫頸處死大鼠，完整分離大鼠的左右兩側(cè)股骨，剔除所有附著的 肌肉和結(jié)締組織，一只以10%甲醛溶液固定，行病理學(xué)檢查；一只用生理鹽水浸泡的濕紗 布包裹，密封-20°c保存，分別測定股骨的濕重、體積，生物力學(xué)性能。力學(xué)測定后收集殘骨 200°C烘干8h，稱取干重，馬氟爐800°C灰化后稱取灰重，灰化后標(biāo)本測定骨中鈣、磷、氯的
百分含量。臟器標(biāo)本充分暴露并剝離取出子宮，電子天平稱重，計(jì)算子宮的臟器指數(shù)。臟器指數(shù)=(子宮+體重)X 100%2. 4數(shù)據(jù)分析所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 11. 0進(jìn)行t檢驗(yàn)分 析。3 結(jié)果3. 1對去卵巢大鼠體重及臟器系數(shù)的影響連續(xù)給藥六個(gè)月后，分別觀察各組大鼠體重，結(jié)果提示本發(fā)明的中藥制劑(以下 簡稱制劑)對造模引起的大鼠體重增加具有明顯的降低作用，其中高劑量組與模型組比較 具有非常顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，中、低劑量作用也較明顯；對子宮系數(shù)的影響三個(gè)劑量均具有 明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)查異，其中高劑量組影響最為明顯，三個(gè)劑量呈現(xiàn)較好的量效關(guān)系趨勢，但作 用總體而言較尼爾雌醇組較差，如表1所示。
表1制劑對去卵巢大鼠體重及臟器系數(shù)的影響(X 土S，η=10)
權(quán)利要求
一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑，其特征在于，是由以下重量份的原料藥制成的淫羊藿提取物1～2份，葛藤提取物1～2份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑，其特征在于還包括常規(guī)的藥 用輔料，原料藥經(jīng)處理后，加入藥用輔料，制成顆粒劑、片劑或膠囊劑。
3.權(quán)利要求1或2所述的一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑的制備方法，其特征在于，包括以 下步驟(1)制備淫羊藿提取物取淫羊藿，加5 6倍量的50 70%乙醇，回流提取兩次，每 次2 3小時(shí)，濾過，合并提取液，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹脂柱 上，先用水快速?zèng)_洗，然后用50 70 %乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，進(jìn)行噴霧 干燥，即得淫羊藿提取物；或洗脫液回收乙醇后，濃縮成稠膏，真空減壓干燥，粉碎，即得 淫羊藿提取物；(2)制備葛藤提取物取葛藤，切厚片，加6 7倍量的60 70%乙醇，加熱回流提取 2 3次，每次2 3小時(shí)，合并提取液，離心，取上清液加于已事先預(yù)處理好的大孔吸附樹 脂柱上，先用水快速?zèng)_洗，然后用50 70 %乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，進(jìn)行 噴霧干燥，即得葛藤提取物；或洗脫液回收乙醇后，濃縮成稠膏，真空減壓干燥，粉碎，即 得葛藤提取物；(3)將淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，即得抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑；或?qū)⒁蜣教崛∥锖透鹛偬崛∥锘旌?，加入常?guī)藥用輔料，制成顆粒劑、片劑或膠囊劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中，大孔吸附樹脂柱的 填充劑為 DM130、HPD100 或 D312。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中，大孔吸附樹脂柱的 填充劑為 DM130、HPD100 或 D312。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中，所述常規(guī)藥用輔料 為淀粉或環(huán)糊精。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑，是由以下重量份的原料藥制成的淫羊藿提取物1～2份，葛藤提取物1～2份。制備方法為(1)取淫羊藿，加乙醇回流提取兩次，合并提取液，回收乙醇并濃縮，離心，取上清液上大孔吸附樹脂柱上，用乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，噴霧干燥，即得淫羊藿提取物；(2)取葛藤，切厚片，加乙醇加熱回流提取2～3次，合并提取液，回收乙醇并濃縮，離心，取上清液上大孔吸附樹脂柱上，用乙醇洗脫，收集相應(yīng)的洗脫液，回收乙醇，噴霧干燥，即得葛藤提取物；(3)將淫羊藿提取物和葛藤提取物混合，即得抗骨質(zhì)疏松的中藥制劑。本發(fā)明的中藥制劑，經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)證明，對骨質(zhì)疏松癥具有治療作用。
文檔編號A61K9/20GK101953881SQ201010509858
公開日2011年1月26日 申請日期2010年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月18日
發(fā)明者孫付軍, 李貴海, 陸永輝 申請人:山東省中醫(yī)藥研究院