專利名稱：巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑及其制備方法，屬醫(yī)藥技術(shù) 領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蘇木為豆科植物蘇木Caesalpinia sappan L.的干燥心材，主要用于行血祛瘀，消 腫止痛。現(xiàn)有報(bào)道，蘇木具有抗動(dòng)脈粥樣硬化，抑制誘導(dǎo)型氮氧化物合酶，抗驚厥的作用。同 時(shí)，蘇木還具有抗補(bǔ)體活性，抗氧化活性及抗菌活性。巴西蘇木紅素(Brazilein)是蘇木中 的主要化學(xué)成分。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，巴西蘇木紅素可以用來治療體內(nèi)血壓升高所引起的病癥， 如各種類型的高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、腦血栓和腦出血等。經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究表明，巴西蘇 木紅素具有抗氧化，保護(hù)腦神經(jīng)原，增加腦血流，抑制Na-K-ATP酶活性的作用。對(duì)于腦缺血 再灌注引起的腦組織損傷有明顯的作用。巴西蘇木紅素水溶性差，其飽和水溶液濃度不能 滿足注射劑的要求。因此有必要對(duì)巴西蘇木紅素的溶解性進(jìn)行改善，以達(dá)到注射劑所需濃 度要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑及其制備方法，以 克服巴西蘇木紅素水溶性差的缺陷，從而滿足臨床用注射劑所需濃度要求；同時(shí)便于運(yùn)輸 和儲(chǔ)存。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑，其特征在于所述的凍干粉針注射劑 含有巴西蘇木紅素和羥丙基- β _環(huán)糊精，巴西蘇木紅素與羥丙基- β _環(huán)糊精的重量比為 1 150 300。上述技術(shù)方案中，巴西蘇木紅素與羥丙基-β-環(huán)糊精的優(yōu)選重量比為1 200。本發(fā)明還提供了一種巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑的制備方法，其特征在 于該方法按如下步驟進(jìn)行1)將羥丙基-β-環(huán)糊精溶解到蒸餾水中，控制質(zhì)量濃度為15 30% ；然后將巴 西蘇木紅素加入到羥丙基-β -環(huán)糊精溶液中，溶液的PH值為6. 0 7. 5，在30°C 50°C條 件下攪伴包合1 3小時(shí)，采用微孔濾膜過濾；2)加入活性炭，加熱攪拌，再用微孔濾膜過濾，然后在濾液中加注射用水至全量， 分裝于西林瓶中；3)將西林瓶置于冷凍干燥箱中，將西林瓶置于冷凍干燥箱中，冷凍干燥。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)采用本發(fā)明可有效克服巴西蘇木紅素水溶性差，其飽和水 溶液濃度因含藥量較低而不能滿足注射劑要求的缺陷，不僅具有便于運(yùn)輸和儲(chǔ)存的優(yōu)點(diǎn)， 還具有復(fù)溶性和穩(wěn)定性好以及安全性高的特點(diǎn)，完全可以滿足臨床用注射劑的要求。


圖1巴西蘇木紅素結(jié)構(gòu)圖。圖2大鼠靜脈注射巴西蘇木紅素后的血藥濃度_時(shí)間曲線圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)驗(yàn)例1巴西蘇木紅素粉針劑處方前研究以蘇木為原料提取的巴西蘇木紅素(brasilein或brazilein) (C16H12O5)的結(jié)構(gòu)式 如附圖1。物理化學(xué)特征如下棕黑色粉末(MeOH)。mp 260-265 °C (dec.)。TLC檢查紫外燈365nm下顯亮白色熒光。EI-MSm/z :284(M+)，242，174。UV (MeOH) nm 205，276，446。1H NMR(DMSO-Cl6) δ 7. 81 (1Η, d, J = 8. 5Hz) ,6. 57 (1H, dd, J = 8. 5,2. OHz), 6. 36 (1H, d, J = 2. 0Hz) ,6. 33 (1H, s)，7. 11 (1H, s) ,4. 01 (1H, d, J = 11. 5Hz) ,4. 47 (1H, d, J =11. 5Hz) ,2. 85 (2H, s)。13C NMR (DMS0-d6) δ :39· 7 (C_7)，72. 9 (C_6)，74. 2 (C_6a)，102. 8 (C_4)， 104. 1 (C-Il) ,110. 8 (C-Ia) ,110. 8，(C_2) ,117. 5 (C-8)，126. O(C-Ila)，130. 5 (C-I)， 151. 5 (C-12)，152. 3 (C-10)，157. 7 (C_4a)，158. 9 (C_7a)，162. 2 (C-3)，179. 3 (C-9)。1.含量測定方法1. 1最大吸收波長的選擇取巴西蘇木紅素適量，精密稱定，以甲醇為溶劑制備成每ImL中含1 μ g藥物的溶 液，以相應(yīng)溶劑為空白，照分光光度法(中國藥典2005年版二部附錄VB)測定，于190 850nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。巴西蘇木紅素在甲醇中的最大吸收波長為446nm。1. 2HPLC分析方法的建立1. 2. 1色譜條件色譜柱HypersilODS (4. 6mmX 150mm, 5 μ m,伊利特公司)；流動(dòng)相乙 腈0. 25%三乙胺水溶液(磷酸調(diào)pH3) (2 8)；流速lmL/分鐘；柱溫30°C ；檢測波長 446nm ；進(jìn)樣量20μ L。1.2. 2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取巴西蘇木紅素對(duì)照品適量，甲醇溶解制成濃度為140μ g/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯 備液備用。取巴西蘇木紅素儲(chǔ)備液分別用甲醇稀釋成濃度為0. 105,0. 140,0. 280,0. 700、 1. 050、1. 400 μ g/mL的系列溶液，取20 μ L進(jìn)樣，記錄色譜圖。以峰面積A對(duì)濃度C進(jìn)行線性 回歸，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y = 27086X+231. 64，相關(guān)系數(shù)r2 = 0. 9999，表明該方法在0. 105 1. 400 μ g/mL范圍有良好的線性關(guān)系。1.2. 3精密度與準(zhǔn)確度分別取0. 140,0. 700、1. 400 μ g/mL3個(gè)濃度的巴西蘇木紅素對(duì)照品溶液，于1日內(nèi) 重復(fù)測定6次，考察日內(nèi)精密度，連續(xù)測定6日，考察日間精密度。取巴西蘇木紅素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ) 備液9份，每份lmL，3份一組，分別加入0. 14mg、0. 42mg、1. 26mg巴西蘇木紅素對(duì)照品，稀釋配制成相應(yīng)濃度的溶液，計(jì)算高，中，低3個(gè)濃度的加樣回收率。結(jié)果均符合要求。2.理化性質(zhì)研究2. 1穩(wěn)定性研究2. 1. 1光穩(wěn)定性研究按照藥典規(guī)定方法考察光照對(duì)巴西蘇木紅素穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明，巴西蘇木 紅素在實(shí)驗(yàn)光照強(qiáng)度下10天內(nèi)穩(wěn)定。2. 1.2濕穩(wěn)定性研究按照藥典規(guī)定方法考察濕度對(duì)巴西蘇木紅素穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明，巴西蘇木 紅素在實(shí)驗(yàn)濕度條件下10天內(nèi)穩(wěn)定。2. 1.3熱穩(wěn)定性研究將巴西蘇木紅素樣品置于培養(yǎng)皿中，分別放置于60°C和100°C烘箱內(nèi)，分別于第 0、1、2、3、4、5、6小時(shí)取樣，精密稱取適量，甲醇溶解后檢測巴西蘇木紅素的含量，考察溫度 對(duì)巴西蘇木紅素穩(wěn)定性的影響。結(jié)果顯示，巴西蘇木紅素在60°C條件下，含量在6小時(shí)內(nèi)未 發(fā)生顯著變化；而在100°C條件下，藥物逐漸降解，6小時(shí)降解超過50%。2. 2溶解度實(shí)驗(yàn)稱取巴西蘇木紅素適量分別于IOmL的容量瓶中，用蒸餾水配制成一系列濃度的 巴西蘇木紅素溶液，37°C恒溫振蕩24小時(shí)，吸取溶液lmL，0. 45 μ m濾膜過濾，HPLC測定含 量。結(jié)果顯示，在37°C條件下，巴西蘇木紅素在水中的溶解度為24. 96μ g/mL。2. 3油/水分配系數(shù)采用正辛醇飽和的pH7. 4的緩沖液配制適宜濃度的巴西蘇木紅素溶液，取該溶液 IOmL于50mL茄形瓶中，加入經(jīng)水飽和的正辛醇10mL，密塞，渦旋10分鐘，將該混合溶液置 25°C恒溫水浴中，IOOrpm振蕩24小時(shí)，靜置分離兩相，HPLC測定平衡前后水相藥物的濃度， 計(jì)算得到巴西蘇木紅素的油水分配系數(shù)Papp為7. 06，IogP = 0. 85，表明巴西蘇木紅素具 有較好的脂溶性。實(shí)驗(yàn)例2巴西蘇木紅素_羥丙基_ β _環(huán)糊精包合物的制備實(shí)驗(yàn)1.包合穩(wěn)定常數(shù)的測定配制1 %，5 %，10 %，15 %，20 %五個(gè)濃度的HP- β -⑶水溶液，分別加入過量的巴 西蘇木紅素，超聲10分鐘。分別于25°C，37°C，50°C恒溫震蕩24小時(shí)，使其達(dá)到溶解平衡， 靜置。取上清液，HPLC測定巴西蘇木紅素的濃度。以巴西蘇木紅素的濃度(mmol/L)對(duì) ΗΡ-β-CD濃度(mmol/L)作圖，繪制平衡相溶解度圖。對(duì)平衡相溶解度圖中直線部分進(jìn)行線 形回歸，根據(jù)回歸方程，計(jì)算各溫度條件下的表觀穩(wěn)定常數(shù)Kc，如表1所示。表1不同溫度條件下包合穩(wěn)定常數(shù)
權(quán)利要求
一種巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑，其特征在于所述的凍干粉針注射劑含有巴西蘇木紅素和羥丙基 β 環(huán)糊精，巴西蘇木紅素與羥丙基 β 環(huán)糊精的重量比為1∶150～300。
2.按照權(quán)利要求1所述的巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑，其特征在于巴西蘇 木紅素與羥丙基-β-環(huán)糊精的重量比為1 200。
3.如權(quán)利要求1所述巴西蘇木紅素注射用凍干粉針注射劑的制備方法，其特征在于該 方法按如下步驟進(jìn)行1)將羥丙基-β-環(huán)糊精溶解到蒸餾水中，控制質(zhì)量濃度為15 30%；然后將巴西蘇 木紅素加入到羥丙基_ β _環(huán)糊精溶液中，溶液的PH值為6. 0 7. 5，在30°C 50°C條件下 攪伴包合1 3小時(shí)，采用微孔濾膜過濾；2)加入活性炭，加熱攪拌，再用微孔濾膜過濾，然后在濾液中加注射用水至全量，分裝 于西林瓶中；3)將西林瓶置于冷凍干燥箱中，冷凍干燥。
全文摘要
巴西蘇木紅素凍干粉針注射劑及其制備方法，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的巴西蘇木紅素凍干粉針注射劑，含有巴西蘇木紅素和羥丙基-β-環(huán)糊精，巴西蘇木紅素與羥丙基-β-環(huán)糊精的重量比為1∶150～300。其制備方法是先將羥丙基-β-環(huán)糊精溶解到蒸餾水中，將巴西蘇木紅素加入到羥丙基-β-環(huán)糊精溶液中，溶液的PH值為6.0～7.5，在30℃～50℃條件下攪伴包合1～3小時(shí)，微孔濾膜過濾；再加入活性炭過濾，然后在濾液中加注射用水至全量，分裝于西林瓶中，冷凍干燥即得。本發(fā)明克服了巴西蘇木紅素水溶性差，其飽和水溶液濃度不能滿足注射劑要求的缺陷，具有復(fù)溶性好、穩(wěn)定性好、安全性高以及便于儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)忍攸c(diǎn)。
文檔編號(hào)A61P9/10GK101984959SQ201010536960
公開日2011年3月16日 申請(qǐng)日期2010年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月9日
發(fā)明者安琳娜, 朱春燕, 李伯男, 杜力軍, 柴玉爽, 王玉剛, 胡珺, 詹宏磊, 邢東明, 雷帆 申請(qǐng)人:清華大學(xué)