專利名稱：hsa-miR-185的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及hsa-miR-185的新用途。
背景技術(shù)：
腫瘤是嚴(yán)重威脅人類生命健康的常見病、多發(fā)病，在許多國家和地區(qū)占疾病死亡 率的前三位，而且其發(fā)病率和病死率仍在逐年增高。目前主要的治療方法包括手術(shù)、放療和 化療。1998年世界衛(wèi)生組織(WHO)的資料顯示，目前腫瘤的總治愈率約45%，其中80%患 者不同程度地接受了放射治療，但腫瘤的輻射抗性嚴(yán)重地影響了放療的治療效果。放射治療是非常重要的腫瘤治療手段之一，但治愈率仍然偏低。另外，目前放射治 療裝置主要有Y射線、X射線等。這些常規(guī)射線與物質(zhì)的作用機(jī)理決定了其對機(jī)體表面的 影響要強(qiáng)于對深層的影響，治療時會對腫瘤周圍正常組織造成嚴(yán)重?fù)p傷。開發(fā)腫瘤組織的 靶向輻射增敏劑，可以降低輻照劑量，在提高放療療效的同時更好地保護(hù)正常組織，因此， 具有極其重要的臨床應(yīng)用價值。同時，腫瘤基因治療作為新興治療手段，引起醫(yī)學(xué)界極大的關(guān)注。miRNA作為一類 新發(fā)現(xiàn)的基因，在腫瘤治療方面受到關(guān)注。miRNA是一類廣泛存在于生物體中、長度約21 25nt的非編碼小分子RNA。它通過與靶基因mRNA序列互補(bǔ)性結(jié)合導(dǎo)致mRNA的降解或抑制 其翻譯，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。最早發(fā)現(xiàn)的miRNA家族成員是Lin_4，是1993年Lee等人在秀麗線蟲 (Caenorhabditis elegans)胚胎發(fā)育時間控制缺陷性遺傳篩選實驗中發(fā)現(xiàn)的(Lee，et al. The C. elegans heterochronic gene lin_4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. Cell，1993，75 (5) :843_854)。在短短幾年內(nèi)，不同的研究小 組相繼在線蟲、果蠅、斑馬魚、擬南芥、水稻和人類細(xì)胞等多種真核模式生物的細(xì)胞中找到 上萬種miRNAs。依據(jù)Sanger miRNA序列數(shù)據(jù)庫(miRBase 14. 0版，2009. 09. 15)，目前共發(fā) 現(xiàn)miRNA發(fā)夾前體序列為10883條，成熟miRNA序列為10581條，涵蓋115個物種，其中人 源miRNA共721條。miRNA基因約占人類基因的1 %，是最大的基因表達(dá)調(diào)控家族之一，卻調(diào)控接近 30% 基因的表達(dá)(Lewis, et al. Prediction of mammalian microRNA targets. Cell, 2003，115 (7) =787-798) 0 miRNA表達(dá)的時空特性，調(diào)控方式的多樣性、靈活性，使其成為信 使RNA強(qiáng)有力的調(diào)節(jié)子。miRNA與其靶分子組成一個復(fù)雜的精細(xì)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，參與調(diào)控生物 體的生長、發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡等一系列重要的生命進(jìn)程。miRNA與腫瘤發(fā)生也密切 相關(guān)，有些miRNA基因具有抑癌基因的功能，例如，let-7參與乳腺癌干細(xì)胞的調(diào)控，調(diào)節(jié) 原癌基因 ras 的表達(dá)(Yu, et al. let-7 regulates self-renewal and tumorigenicity of breast cancer cells. Cell，2007，131 :1109_1123)，有些 miRNA 又類似于原癌基因 (EsqueIa-Kerscher and Slack. Oncomirs-microRNAs with a role in cancer[J]. Nat Rev Cancer，2006，6 (4) :259_269)，例如 miR-21 參與調(diào)節(jié)抑癌基因 PTEN 的表達(dá)(Meng， et al. MicroRNA-21 regulates expression of the PTEN tumor suppressor gene inhuman hepatocellular cancer. Gastroenterology, 2007,133 :647_58)。miRNA 基因多位 于腫瘤細(xì)胞染色體發(fā)生缺失、擴(kuò)增、轉(zhuǎn)位的高發(fā)區(qū)(Calin et a 1. Human microRNA genesare frequently located at fragile sites and genomic regions involved in cancers. PNAS, 2004，101 (9) =2999-3004)，表明miRNA在人類癌癥的發(fā)病機(jī)理中發(fā)揮著十分重要的作用。腫瘤放療中，輻射抗性問題是腫瘤放療成敗的關(guān)鍵。細(xì)胞受到輻照后，將啟動復(fù)雜 的應(yīng)激網(wǎng)絡(luò)，將細(xì)胞周期阻滯在檢測點上，啟動DNA損傷修復(fù)。如損傷無法修復(fù)，細(xì)胞將進(jìn) 入凋亡程序。ATR基因也是細(xì)胞DNA復(fù)制的關(guān)鍵監(jiān)控蛋白。人源的ATR基因的核苷酸序列 如 SEQ ID NO 3 所示。miR-185家族僅存在于8種高等哺乳動物中(牛、狗、人、獼猴、藍(lán)鯨、黑猩猩、鼠、 豬)，其前體堿基序列存在一定差異性，但成熟堿基序列完全一致，表明miR-185在進(jìn)化上 高度保守。miR-185的成熟核苷酸序列為UGGAGAGAAAGGCA⑶UCCUGA (SEQ ID NO :1)。人類 的miR-185位于人類染色體組的22號染色體20，018，662-20，022，743區(qū)域。miR-185的功 能尚未明了。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供如下1)、2)、3)、4)或5)所示的物質(zhì)的新用途。本發(fā)明所提供的如下1)、2)、3)、4)或5)所示的物質(zhì)的新用途為其在如下I、II或 III中的應(yīng)用 1) SEQ ID NO 1 所示的 RNA 分子；2) SEQ ID NO 2 所示的 RNA 分子；3)編碼1)所示分子的DNA或表達(dá)1)所示分子的載體；4)編碼2)所示分子的DNA或表達(dá)2)所示分子的載體；5)由 Ambion 公司制造的產(chǎn)品，產(chǎn)品名稱為 Pre-miR miRNAPrecursorhsa-miR-18 5，產(chǎn)品 Cat# :AM17100，產(chǎn)品 ID :PM12486，產(chǎn)品規(guī)格5nmol ；I、制備具有增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性功能的產(chǎn)品；II、制備具有治療和/或預(yù)防腫瘤功能產(chǎn)品；III、制備抑制ATR基因激活或介導(dǎo)的信號通路的產(chǎn)品、制備抑制ATR蛋白激活或 介導(dǎo)的信號通路的產(chǎn)品、制備抑制ATR基因的產(chǎn)品、和/或制備抑制ATR蛋白的產(chǎn)品。ATR基因作為靶點在如下IV或V中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。ATR蛋白作為靶點在如下IV或V中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。ATR基因激活或介導(dǎo)的信號通路作為靶點在如下IV或V中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的 保護(hù)范圍。ATR蛋白激活或介導(dǎo)的信號通路作為靶點在如下IV或V中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的 保護(hù)范圍。IV、設(shè)計和/或篩選和/或制備具有治療和/或預(yù)防腫瘤功能產(chǎn)品；V、設(shè)計和/或篩選和/或制備具有增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性 功能的產(chǎn)品。上述任一所述應(yīng)用中，所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性功能為促進(jìn)輻射后的細(xì)胞的凋亡；上述任一所述應(yīng)用中，所述治療和/或預(yù)防腫瘤為如下1)或2)或3)或4)所示 1)抑制腫瘤的生長；2)抑制腫瘤的成瘤能力；3)抑制腫瘤細(xì)胞的生長；4)輔助增強(qiáng)腫瘤的
輻射敏感性。上述任一所述應(yīng)用中，所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性功能的 產(chǎn)品為輻射增敏劑。上述任一所述應(yīng)用中，所述輻射為非電離輻射或電離輻射；所述非電離輻射為紫 外線，所述電離輻射為X射線；所述紫外線為UVA或UVB。上述任一所述應(yīng)用中，所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性是通過 1)、2)、3)、4)或5)所示的物質(zhì)抑制ATR基因激活或介導(dǎo)的信號通路、抑制ATR蛋白激活或 介導(dǎo)的信號通路、抑制ATR基因的表達(dá)或抑制ATR蛋白的表達(dá)實現(xiàn)的；上述任一所述應(yīng)用中，所述治療和/或預(yù)防腫瘤是通過1)、2)、3)、4)或5)所示的 物質(zhì)抑制ATR基因激活或介導(dǎo)的信號通路、抑制ATR蛋白激活或介導(dǎo)的信號通路、抑制ATR 基因的表達(dá)或抑制ATR蛋白的表達(dá)實現(xiàn)的。 上述任一所述應(yīng)用中，所述抑制ATR基因激活或介導(dǎo)的信號通路、抑制ATR蛋白激 活或介導(dǎo)的信號通路、抑制ATR基因的表達(dá)或抑制ATR蛋白的表達(dá)是通過如下方式實現(xiàn)的 所述1)、2)、3)、4)或5)所示的物質(zhì)與所述ATR基因3’端非轉(zhuǎn)錄區(qū)域靶位點結(jié)合。上述任一所述應(yīng)用中，所述與所述ATR基因3’端非轉(zhuǎn)錄區(qū)域靶位點結(jié)合為與 NM_001184. 3所示序列中第8165-8186位核苷酸結(jié)合或與SEQ ID NO :3所示序列中第 8165-8186位核苷酸結(jié)合。上述任一所述應(yīng)用中，所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性中，所述 細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞；所述腫瘤為腎癌、黑色素瘤、宮頸癌或胃癌。上述任一所述應(yīng)用中，所述治療和/或預(yù)防腫瘤中，所述腫瘤為腎癌、黑色素瘤、
宮頸癌或胃癌。上述任一所述應(yīng)用中，所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性中，所述 腎癌的細(xì)胞為人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞786-0 ；所述黑色素瘤為小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞；所述 宮頸癌的細(xì)胞為HeLa ；所述胃癌的細(xì)胞為BGC-823或MGC-803。上述任一所述應(yīng)用中，所述治療和/或預(yù)防腫瘤中，所述腎癌的細(xì)胞為人腎透明 細(xì)胞腺癌細(xì)胞786-0 ；所述黑色素瘤為小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞；所述宮頸癌的細(xì)胞為HeLa ； 所述胃癌的細(xì)胞為BGC-823或MGC-803。實驗證明，hsa-miR-185 (簡稱miR_185)可以直接抑制腫瘤生長和增強(qiáng)細(xì)胞對輻 射的敏感性。進(jìn)一步實驗證明，miR-185的上述功能是通過抑制細(xì)胞內(nèi)ATR基因的表達(dá)實 現(xiàn)的。因此，將miR-185用于制備治療腫瘤的藥物及輻射增敏劑，將對腫瘤的治療具有重要 意義，有廣闊的應(yīng)用前景。


圖1 :miR-185試劑的轉(zhuǎn)染效率檢測及試劑功能有效性檢測。圖2 輻照后，miR-185在腎癌組織隨著輻照劑量的增加，其表達(dá)量逐漸降低。圖3 輻照后，miR-185在不同的組織、細(xì)胞系中的表達(dá)普遍下調(diào)。
圖4 :miR-185促進(jìn)輻照后細(xì)胞的凋亡。圖5 :miR-185抑制輻照后細(xì)胞的克隆形成率。圖6 :miR-185抑制小鼠體內(nèi)移植瘤的生長。圖7 :miR-185抑制ATR基因的表達(dá)。圖8 :miR-185與ATR mRNA的3，UTR區(qū)域相結(jié)合的實驗驗證。
具體實施例方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所使用的試劑如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑購買得到。前體發(fā)卡型miR-185的序列如SEQ ID NO 2所示。http//www, mirbase. otr/CRi-bin/mirna entry, pi ？ acc = MI0000482 ；http//mirnamap. mbc. nctu. edu. tw/php/mirna entry.php？ acc = MI0000482ohsa-miR-185類似物、抑制劑及hsa-miRNA類似物、抑制劑的陰性對照試劑均購自 美國Ambion(ABI)公司，由上海吉泰生物科技有限公司代理出售，具體產(chǎn)品信息如下hsa-miR-185類似物試劑(即miR-185類似物)，在ABI的產(chǎn)品名稱為 Pre-miR miRNAPrecursor hsa-miR-185，產(chǎn)品 Cat# :AM17100，產(chǎn)品 ID :PM12486，產(chǎn)品規(guī)格 5nmo1。miR-185類似物是前體發(fā)卡型miR-185，是化學(xué)修飾的雙鏈RNA分子，其 模仿體內(nèi)成熟的miR-185mRNA，在體內(nèi)可被加工為成熟的miR-185序列發(fā)揮作用 (5' -uggagagaaaggcaguuccuga-3', SEQ ID NO 1) ( Ambion Pre-miR miRNA Precursor Molecules are small,chemically modified double-stranded RNA molecules designed to mimic endogenous mature miRNAs)。miR-185類似物陰性對照是核苷酸序列隨機(jī)的類miRNA前體序列，在細(xì) 胞系和組織中的廣泛實驗驗證，其成熟序列沒有miRNA功能，僅起到陰性對照作用 (Pre-miRNegative Controls are random sequence Pre-miR molecules that have been extensively tested in human cell lines and tissues and validated to not produce identifiable effects on known miRNA function)。hsa-miRNA 類似物陰性對照試劑， 在 ABI 的產(chǎn)品名稱為Anti-miR miRNA inhibitors-Netativecontrol#l,產(chǎn)品 Cat# AM17010，產(chǎn)品規(guī)格5nmol。miR-185抑制劑是小單鏈核酸分子，用于結(jié)合、抑制內(nèi)生的成熟miR-185的表達(dá) (Ambion Anti-miR miRNA Inhibitors are chemically modified, single stranded nucleic acids designed to specifically bind to and inhibit endogenous microRNA (miRNA)molecules)。hsa-miR-185 抑制劑試劑，在 ABI 的產(chǎn)品名稱為Anti-miR miRNA inhibitor hsa-miR-185，產(chǎn)品 Cat# :AM17000，產(chǎn)品 ID :AM12486 ；產(chǎn)品規(guī)格5nmol。miR-185抑制劑陰性對照是隨機(jī)的單鏈核酸序列分子，經(jīng)廣泛的細(xì)胞和組織實驗 驗證，該序列不和miR-185結(jié)合及抑制其功能，僅起到陰性對照功能。(Anti-miR Negative Control #1 is a random sequence Anti-miR molecule that has been extensively tested in human cell lines and tissues and validated to not produce identifiable effects on known miRNA function)。
Cy3標(biāo)記的miRNA抑制劑陰性對照，無任何miRNA抑制劑的功能，僅起到陰性對 照功能，因該分子標(biāo)記有Cy3熒光染料，可以在熒光顯微鏡下觀察期miRNA試劑在特定細(xì) 胞中的轉(zhuǎn)染效率，細(xì)胞內(nèi)的定位情況。Cy 3 dye-labeled Anti-miR Negative Controls are also available for monitoring transfection efficiency in transfection experiments using Anti-miR miRNA Inhibitors.The fluorescent label enables direct observation ofthe cellular uptake,distribution, and localization of the control. These dye-labeled controls are labeled at their 5' end and have the same oligonucleotide sequence as unlabeled Negative Control#l.焚光染料 Cy3 標(biāo) 記的hsa-miRNA抑制劑陰性對照試劑，在ABI的產(chǎn)品名稱Cy 3 dye-labeled Anti-miR Negative Control#l ；產(chǎn)品 Cat# :AM17011，產(chǎn)品規(guī)格5nmol。人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞786-0，購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫；小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞購 自購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫。采用Irwitrogen公司的lipo2000轉(zhuǎn)染試劑。實施例1、細(xì)胞轉(zhuǎn)染一、轉(zhuǎn)染miR-185類似物、抑制劑及陰性對照于786_0細(xì)胞的制備和驗證1、鋪細(xì)胞將對數(shù)生長期的786-0細(xì)胞接種于12孔板，數(shù)目8X 105/well，第二天 轉(zhuǎn)染。2、轉(zhuǎn)染按照每孔1 μ L miR-185類似物(或miR-185抑制劑或miR-185類似物陰 性對照或miR-185抑制劑陰性對照)(濃度30 μ Μ)混于100 μ L不含血清的opti-ΜΕΜ培養(yǎng) 基，2 μ L Lipo2000混于100 μ L不含血清的opti-MEM培養(yǎng)基，室溫孵育IOmin ；把上述預(yù)混 液混勻后于室溫孵育15min ；棄孔板中細(xì)胞培養(yǎng)液，加入不含血清的Opti-MEM(GibiCO)培 養(yǎng)基，每孔加800 μ L，加入200 μ L的轉(zhuǎn)染混合物，37°C、5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)；4小時后 換1640培養(yǎng)液(10%血清)培養(yǎng)，于不同時間點觀察細(xì)胞、提取蛋白或RNA樣品。3、轉(zhuǎn)染效率檢測(Cy3熒光素標(biāo)記、熒光顯微鏡檢測)轉(zhuǎn)染Cy3熒光素標(biāo)記miRNA抑制劑陰性對照后24小時，熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞中 Cy3熒光染料的情況(圖1A)。4、檢測細(xì)胞內(nèi)miR-185的表達(dá)量(qRT_PCR檢測)Trizol 試劑購 自 Invitrogen ；TaqMan Gene Expression Master Mix、 TaqManMicroRNA Reverse Transcription Kit、hsa—miR-185 RT primer、hsa-miR-185 real-time pcrprimer、RNU6B RT primer、RNU6B real-time per primer 購自 ABI01)總RNA提取、檢測分別向786-0細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染miR-185類似物或miR-185抑 制劑及陰性對照后24小時，收集樣品，用Trizol法提取總RNA并用分光光度計檢測RNA樣 的質(zhì)量和濃度。2)miR_185表達(dá)量的檢測(I)RT-PCR(a)試劑置于冰上溶解15-20min。振蕩混勻后輕微離心；(b)按下表配制反轉(zhuǎn)錄混合液(RT-Mix)，充分混勻，置于冰上
權(quán)利要求
1.如下1)、2)、3)或4)或5)所示的物質(zhì)在如下I、II或III中的應(yīng)用1)SEQ ID NO 1所示的RNA分子；2)SEQ ID NO 2所示的RNA分子；3)編碼1)所示分子的DNA或表達(dá)1)所示分子的載體；4)編碼2)所示分子的DNA或表達(dá)2)所示分子的載體；5)由Ambion 公司制造的產(chǎn)品，產(chǎn)品名稱為 Pre-miR miRNA Precursorhsa-miR-185, 產(chǎn)品 Cat# :AM17100，產(chǎn)品 ID :PM12486，產(chǎn)品規(guī)格:5nmol ；1.制備具有增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性功能的產(chǎn)品；II、制備具有治療和/或預(yù)防腫瘤功能產(chǎn)品；III、制備抑制基因ATR激活或介導(dǎo)的信號通路的產(chǎn)品、制備抑制蛋白ATR激活或介導(dǎo) 的信號通路的產(chǎn)品、制備抑制基因ATR的產(chǎn)品、和/或制備抑制蛋白ATR的產(chǎn)品。
2.基因ATR作為靶點在如下IV或V中的應(yīng)用；蛋白ATR作為靶點在如下IV或V中的 應(yīng)用；基因ATR激活或介導(dǎo)的信號通路作為靶點在如下IV或V中的應(yīng)用；蛋白ATR激活或 介導(dǎo)的信號通路作為靶點在如下IV或V中的應(yīng)用；IV、設(shè)計和/或篩選和/或制備具有治療和/或預(yù)防腫瘤功能產(chǎn)品；V、設(shè)計和/或篩選和/或制備具有增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性功能 的產(chǎn)品。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī) 體對輻射敏感性功能為促進(jìn)輻射后的細(xì)胞的凋亡；所述治療和/或預(yù)防腫瘤為如下1)或2)或3)或4)所示1)抑制腫瘤的生長；2)抑 制腫瘤的成瘤能力；3)抑制腫瘤細(xì)胞的生長；4)輔助增強(qiáng)腫瘤的輻射敏感性。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或 機(jī)體對輻射敏感性功能的產(chǎn)品為輻射增敏劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述輻射為非電離輻射或電離 輻射；所述非電離輻射為紫外線，所述電離輻射為X射線；所述紫外線為UVA或UVB。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或 機(jī)體對輻射敏感性是通過1)、2)、3)、4)或5)所示的物質(zhì)抑制基因ATR激活或介導(dǎo)的信號 通路、抑制蛋白ATR激活或介導(dǎo)的信號通路、抑制基因ATR的表達(dá)或抑制蛋白ATR的表達(dá)實 現(xiàn)的；所述治療和/或預(yù)防腫瘤是通過1)、2)、3)、4)或5)所示的物質(zhì)抑制基因ATR激活或介 導(dǎo)的信號通路、抑制蛋白ATR激活或介導(dǎo)的信號通路、抑制基因ATR的表達(dá)或抑制蛋白ATR 的表達(dá)實現(xiàn)的。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述抑制基因ATR激活或介導(dǎo) 的信號通路、抑制蛋白ATR激活或介導(dǎo)的信號通路、抑制基因ATR的表達(dá)或抑制蛋白ATR的 表達(dá)是通過如下方式實現(xiàn)的所述1)、2)、3)、4)或5)所示的物質(zhì)與所述ATR基因3’端非 轉(zhuǎn)錄區(qū)域靶位點結(jié)合。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述與所述ATR基因3’端非轉(zhuǎn) 錄區(qū)域靶位點結(jié)合為與NM_001184. 3所示序列中第8165-8186位核苷酸結(jié)合或與SEQ ID NO 3所示序列中第8165-8186位核苷酸結(jié)合。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或 機(jī)體對輻射敏感性中，所述細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞；所述腫瘤為腎癌、黑色素瘤、宮頸癌或胃癌；所述治療和/或預(yù)防腫瘤中，所述腫瘤為腎癌、黑色素瘤、宮頸癌或胃癌。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一所述的應(yīng)用，其特征在于所述增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性中，所述腎癌的細(xì)胞為人腎透明細(xì) 胞腺癌細(xì)胞786-0 ；所述黑色素瘤為小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞；所述宮頸癌的細(xì)胞為HeLa ；所 述胃癌的細(xì)胞為BGC-823或MGC-803 ；所述治療和/或預(yù)防腫瘤中，所述腎癌的細(xì)胞為人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞786-0 ；所述 黑色素瘤為小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞；所述宮頸癌細(xì)胞為HeLa ；所述胃癌細(xì)胞為BGC-823或 MGC-803。
全文摘要
本發(fā)明涉及hsa-miR-185的新用途。該新用途為miR-185在如下I、II或III中的應(yīng)用I、制備具有增強(qiáng)細(xì)胞和/或組織和/或機(jī)體對輻射敏感性功能的產(chǎn)品；II、制備具有治療和/或預(yù)防腫瘤功能產(chǎn)品；III、制備抑制ATR基因激活或介導(dǎo)的信號通路的產(chǎn)品、制備抑制ATR蛋白激活或介導(dǎo)的信號通路的產(chǎn)品、制備抑制ATR基因的產(chǎn)品、和/或制備抑制ATR蛋白的產(chǎn)品。實驗證明，miR-185可以直接抑制腫瘤生長和增強(qiáng)細(xì)胞對輻射的敏感性。進(jìn)一步實驗證明，miR-185的上述功能是通過抑制細(xì)胞內(nèi)的ATR基因的表達(dá)實現(xiàn)的。因此，將miR-185用于制備治療腫瘤的藥物及輻射增敏劑，將對腫瘤的治療具有重要意義和廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號A61K48/00GK102102102SQ20101057785
公開日2011年6月22日 申請日期2010年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月12日
發(fā)明者丁楠, 何進(jìn)鵬, 周光明, 徐瑚珊, 朱佳贇, 胡文濤, 蘇鋒濤 申請人:中國科學(xué)院近代物理研究所