專利名稱：醋制柴胡提取物、其制備方法及其在制備降血脂藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體說，涉及一種醋制柴胡提取物、其制備方法及其在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifolium Wild.的干燥根，味苦，微寒，歸肝、膽經(jīng)，具有疏散退熱，舒肝、升陽的作用，在本草中被列為上品。歷代本草和現(xiàn)代中醫(yī)的肝病用藥中多以柴胡為君藥。但柴胡的不同炮制品治療病癥側(cè)重點(diǎn)不一，在用于治療肝病時(shí)，常用其醋制品，與柴胡生品多用于解表退熱相比，醋制品能緩和升散之性，有助于引藥入肝，增強(qiáng)疏肝止痛的作用，適用于肝郁氣滯的脅痛、腹痛及月經(jīng)不調(diào)等證。其藥理作用的改變要從成分轉(zhuǎn)化進(jìn)行分析，柴胡主要成分為揮發(fā)油、三萜皂苷，此藥在醋制過程中，部分揮發(fā)油因受熱而揮發(fā)，而柴胡其解表退熱功能的主要成分就是揮發(fā)油，所以柴胡用醋制就是為達(dá)到舒肝、理氣、散瘀止痛的目的。目前，前人在柴胡中已經(jīng)大量分到的柴胡皂苷類化合物為其疏肝解郁的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。柴胡皂苷主要有柴胡皂苷a、c、d、e、f和h，其中最具促進(jìn)膽汁分泌作用的活性成分是柴胡皂苷
3- Λ C、do中國專利200710039351. 3公開了一種醋制柴胡活性部位傳統(tǒng)的提取方法如下 醋制柴胡用醇滲漉，將醇蒸干，得流浸膏；將所得流浸膏用乙醇或水稀釋成懸濁液，所述懸濁液依次分別用有機(jī)溶劑石油醚、氯仿和乙酸乙酯提取，將乙酸乙酯層蒸干，得到柴胡乙酸乙酯提取物；或所述懸濁液依次分別用有機(jī)溶劑石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇提取，將正丁醇層蒸干，得到柴胡正丁醇提取物。如此提取得到的醋制柴胡提取物也被證實(shí)具有一定的分泌膽汁的效果。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明人改良了傳統(tǒng)的醋制柴胡活性部位的提取方法，從而得到了在降血脂方面有明顯作用的醋制柴胡提取物。一方面，本發(fā)明提供新穎的醋制柴胡提取物的制備方法，所述醋制柴胡溶劑提取物由醇提后樹脂法或水提醇沉法精制。所謂醇提后樹脂法的具體操作步驟如下醋制柴胡用50% -100%濃度的甲醇或乙醇溶液加熱回流提取，提取液合并濃縮至低濃度，濃縮液上大孔樹脂，用水和不同濃度的乙醇依次洗脫，得醋制柴胡溶劑提取物。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式，將加熱回流提取得到的提取液濃縮至濃度為 20-40 %，優(yōu)選將提取液濃縮至濃度為30 %。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述大孔樹脂優(yōu)選為860021型。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述不同濃度的乙醇優(yōu)選為30-95%的乙醇，更優(yōu)選為30%、50%、70%或95%的乙醇。所謂水提醇沉法的具體操作步驟如下醋制柴胡用水加熱提取，提取液合并濃縮至低密度，加乙醇使產(chǎn)生沉淀，并使混合液濃縮至高濃度，充分超聲后靜置，得醋制柴胡提取物。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式，將用水加熱提取后的提取液合并濃縮至密度為1. 1-1. 2 ；加乙醇使產(chǎn)生沉淀，其中乙醇的濃度為70% "100% ；混合液濃縮至濃度為 60-80%，優(yōu)選為 70%。水提醇沉法的一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，上述步驟得到的醋制柴胡提取物可以進(jìn)一步精制再次過濾所得醋制柴胡提取物，濃縮濾液，濃縮液上大孔樹脂，用水和不同濃度的乙醇依次洗脫，得精制醋制柴胡溶劑提取物。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述大孔樹脂優(yōu)選為860021型。根據(jù)本發(fā)明的一種優(yōu)選的實(shí)施方式，所述不同濃度的乙醇優(yōu)選為30-95%的乙醇， 更優(yōu)選為30%、50%、70%或95%的乙醇。另一方面，本發(fā)明提供根據(jù)所述方法制備得到的醋制柴胡提取物。再一方面，本發(fā)明提供由本發(fā)明所述方法制備得到的醋制柴胡提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明從醋制柴胡中獲得提取物的方法簡單易行，并且該提取物在降血脂方面有明顯作用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1醋制柴胡lOOOg，用8倍量75%乙醇溶液加熱回流提取數(shù)次2次，提取液合并濃縮至30%濃度，濃縮液上860021型大孔樹脂，依次用水洗液、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇和95%乙醇洗脫，分別得到30%乙醇洗脫液G號(hào)提取物)、50%乙醇洗脫液(3號(hào)提取物)、 70%乙醇洗脫液O號(hào)提取物)和95%乙醇洗脫液(1號(hào)提取物)。實(shí)施例2醋制柴胡500g，用水加熱至微沸提取2次，提取液合并濃縮至密度為1. 1，加3倍量95%乙醇使產(chǎn)生沉淀，并使最終混合液濃度至70%左右，充分超聲靜置一段時(shí)間，過濾， 分為沉淀(5號(hào)提取物)和濾液(6號(hào)提取物)。實(shí)施例3醋制柴胡500g，用水加熱至微沸提取2次，提取液合并濃縮至密度為1. 1，加3倍量95%乙醇使產(chǎn)生沉淀，并使最終混合液濃度至70%左右，充分超聲靜置一段時(shí)間，過濾， 分為沉淀和濾液，濾液濃縮加適量水產(chǎn)生沉淀，過濾，分為沉淀和濾液，濾液濃縮，上860021 型大孔樹脂，依次用水和70%乙醇洗脫，得到水洗液和70%乙醇洗脫液(7號(hào)提取物)。實(shí)施例1中所用的醋制柴胡為上海雷允上中藥飲片廠生產(chǎn)；批號(hào)批3 ；生產(chǎn)日期2006. 12. 7 ；實(shí)施例2、3中所用的醋制柴胡為上海雷允上中藥飲片廠生產(chǎn)；批號(hào)批2 ；生產(chǎn)日期2006. 12. 7 ；以上實(shí)施例中所用的大孔樹脂為山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司樹脂分廠生產(chǎn)的860021 型；以上實(shí)施例中所用的超聲為昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)的KQ2200型超聲波清洗器。試驗(yàn)例本發(fā)明制得的醋制柴胡提取物對(duì)高血脂大鼠模型抗血脂作用研究1. 1實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察實(shí)施例1制得的4號(hào)提取物和實(shí)施例2制得的6號(hào)提取物對(duì)高血脂大鼠模型血液中CHO、TG、HDL、LDL的影響。1. 2受試藥物藥物名稱醋制柴胡提取物藥物提供單位上海醫(yī)工院中藥室藥物批號(hào)4號(hào)提取物和6號(hào)提取物1. 3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物名稱SD大鼠來源上海斯萊克動(dòng)物責(zé)任有限公司合格證SCXK(滬)2003-0003體重I8Og左右性別雄性1. 4實(shí)驗(yàn)劑量本實(shí)驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)為300mg/kg。1. 5給藥途徑及容量口服、lml/kg。1. 6高脂飼料配方將大鼠飼料作基礎(chǔ)飼料按2%膽固醇、10%豬油、0. 25%硫氧嘧啶添加到飼料中。1. 7實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分組，為4、6號(hào)提取物組、模型組和空白對(duì)照組。除空白對(duì)照組飼喂正常飼料外，其余各組飼喂配制的高脂飼料，同時(shí)灌服4、6號(hào)提取物，連續(xù)4周，頸動(dòng)脈采血、 離心取血清，測定血清中CHO、TG、HDL、LDL的含量。1. 8實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)可知4號(hào)提取物具有較好的抗血脂作用(見下表1)表1 :4、6號(hào)提取物對(duì)高血脂大鼠血清CHO、TG、HDL、LDL的影響
權(quán)利要求
1.醋制柴胡提取物的制備方法，包括以下步驟醋制柴胡用50%-100%濃度的甲醇或乙醇溶液加熱回流提取，提取液合并濃縮至低濃度，濃縮液上大孔樹脂，用水和不同濃度的乙醇依次洗脫，得醋制柴胡溶劑提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述低濃度為20-40%。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述低濃度為30%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述大孔樹脂為860021型。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述不同濃度的乙醇為30-95%的乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述不同濃度的乙醇為30%、50%、 70%或95%的乙醇。
7.醋制柴胡提取物的制備方法，包括以下步驟醋制柴胡用水加熱提取，提取液合并濃縮至低密度，加乙醇使產(chǎn)生沉淀，并使混合液濃縮至高濃度，充分超聲后靜置，得醋制柴胡提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述低密度為1.1-1. 2。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述乙醇的濃度為70%-100%。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述高濃度為60-80%。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述高濃度為70%。
12.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，進(jìn)一步過濾所述醋制柴胡提取物， 濃縮濾液，濃縮液上大孔樹脂，用水和不同濃度的乙醇依次洗脫，得精制醋制柴胡提取物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制備方法，其特征在于，所述大孔樹脂為860021型。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制備方法，其特征在于，所述不同濃度的乙醇為30-95%的乙醇。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的制備方法，其特征在于，所述不同濃度的乙醇為30%、 50%、70%或95%的乙醇。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-6或7-15所述方法制備得到的醋制柴胡提取物。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-6或7-15所述方法制備得到的醋制柴胡提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了醋制柴胡提取物的制備方法，包括以下步驟醋制柴胡用50％-100％濃度的甲醇或乙醇溶液加熱回流提取，提取液合并濃縮至低濃度，濃縮液上大孔樹脂，用水和不同濃度的乙醇依次洗脫，得醋制柴胡溶劑提取物。本發(fā)明同時(shí)公開了由所述方法制備得到的醋制柴胡提取物以及所述醋制柴胡提取物在制備降血脂藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K36/233GK102526144SQ20101058996
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2010年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月14日
發(fā)明者吳彤, 周海鳳, 莊昌龍, 張樂樂, 李燕, 楊方, 樊曉, 沈龍海, 王鑫杰, 繆劉萍 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院