專利名稱：用于兒科應(yīng)用的含益生菌的油性懸浮液的制作方法
用于兒科應(yīng)用的含益生菌的油性懸浮液本發(fā)明涉及一種特別適于兒科應(yīng)用的含有益生菌的油性懸浮液。眾所周知，市場上存在含有油和乳酸菌的液體組合物，其用于治療例如兒科患者的腸絞痛等許多種腸道紊亂。然而，所述組合物具有許多限制其應(yīng)用的缺點(diǎn)。第一個(gè)缺點(diǎn)涉及組合物中的細(xì)菌的不穩(wěn)定性。實(shí)踐中，浸入油中的乳酸菌存在穩(wěn)定性不足的問題，會(huì)導(dǎo)致菌量隨時(shí)間推移而衰減。給定組合物的最初宣稱的菌量由于其中菌穩(wěn)定性不足而隨時(shí)間的推移衰減。因此，存在于初始產(chǎn)品中的最初菌量，在制造時(shí)間后經(jīng)過某一較短的時(shí)間之后，就不會(huì)對(duì)應(yīng)于標(biāo)簽上說明中所宣稱的量，因?yàn)榫堪l(fā)生了衰減。第二個(gè)缺點(diǎn)涉及油的性質(zhì)，一旦施用至生物體內(nèi)，其不僅影響細(xì)菌的活力狀態(tài)，還會(huì)左右其功效(體內(nèi)活力和功能性)。最后，關(guān)于組合物自身的穩(wěn)定性也存在一些需要考慮的事項(xiàng)。實(shí)踐中，在一定時(shí)間間隔之后，浸入油中的乳酸菌會(huì)發(fā)生沉淀或聚集，之后形成沉積物。這些現(xiàn)象會(huì)改變組合物的“保存期”。因此，仍存在如下需求，即可獲取與目前市場上可獲得的組合物相比具有改進(jìn)的穩(wěn)定性的含有油和益生菌的液體組合物。實(shí)際上，制備含有油和益生菌的組合物很重要，所述組合物中最初存在的益生菌量不會(huì)隨時(shí)間推移而過度衰減從而導(dǎo)致所述菌量的急劇降低。最后，必要的是，將含有油和益生乳酸菌的組合物制備來使得保持細(xì)菌處于良好的活力和功能狀態(tài)。本申請(qǐng)人針對(duì)上述需求做出了發(fā)明，方式是完善包含至少一種可食用并在人類營養(yǎng)方面可利用的油和至少一種益生微生物的懸浮液，如所附獨(dú)立權(quán)利要求所述。作為本發(fā)明的主題的懸浮液可應(yīng)用于兒童患者，如所附獨(dú)立權(quán)利要求所述。特別地，本申請(qǐng)人已經(jīng)完善了具有包含食品基質(zhì)和益生微生物的組合物的補(bǔ)充劑。本發(fā)明的實(shí)施方式在將在以下詳細(xì)描述中以示例性形式闡釋，因而不限制本發(fā)明的范圍。益生微生物是經(jīng)充分時(shí)間的足量攝取后能夠?qū)οM(fèi)者產(chǎn)生有益效果的活細(xì)菌。益生菌通常屬于乳桿菌、雙歧桿菌、鏈球菌、乳球菌、小球菌、丙酸桿菌、明串珠菌和酵母菌這些菌屬。在乳桿菌屬的乳酸菌的范圍內(nèi)，具有益生活性的種為嗜酸乳桿菌、卷曲乳桿菌、格氏乳桿菌、德氏乳桿菌群、唾液乳桿菌、干酪乳桿菌、副干酪乳桿菌、植物乳桿菌群、鼠李糖乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、短乳桿菌、布氏乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、食果糖乳桿菌、瘤胃乳桿菌、清酒乳桿菌和陰道乳桿菌。在其他乳酸菌中，可提及嗜熱鏈球菌、戊糖片球菌、阿根廷明串珠菌和腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)，而下面這些則屬于雙歧桿菌屬青春雙歧桿菌、角雙歧桿菌、雙叉雙歧桿菌、短雙歧桿菌、鏈狀雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌和假鏈狀雙歧桿菌。用于制備本發(fā)明的油性懸浮液的益生菌選自包含以下種的組嗜酸乳桿菌、卷曲乳桿菌、格氏乳桿菌、德氏乳桿菌群、唾液乳桿菌、干酪乳桿菌、副干酪乳桿菌、植物乳桿菌群、鼠李糖乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、短乳桿菌、布氏乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、青春雙歧桿菌、角雙歧桿菌、雙叉雙歧桿菌、短雙歧桿菌、鏈狀雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌、假鏈狀雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，懸浮液包含1 6種菌株，優(yōu)選為2 4種菌株， 更優(yōu)選選自上述益生種中的3種菌株。表1以實(shí)例的方式顯示了在本發(fā)明的背景下具有有效應(yīng)用的微生物組。所有菌株都已根據(jù)《布達(dá)佩斯條約》保藏，并且可應(yīng)公眾要求而從適當(dāng)?shù)谋２毓芾頇C(jī)構(gòu)獲取。益生菌可以為固體形式，特別是粉末、脫水粉末或凍干粉末的形式。本發(fā)明的油性懸浮液根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的技術(shù)制備。實(shí)踐中，將確定量的油引入配有攪拌裝置和加熱裝置的容器中。然后，在攪拌下逐漸添加固體形式的益生菌，要避免團(tuán)塊和聚集體形成。當(dāng)完成菌添加后，可能借助于溫和加熱至25°C 40°C (優(yōu)選30°C 35°C )而保持?jǐn)嚢栌托詰腋∫?分鐘 30分鐘。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，益生菌可以以微膠囊化形式使用，即涂布有含有至少一種脂質(zhì)(優(yōu)選植物來源的脂質(zhì))的組合物。然后將所述微膠囊化菌添加至油中， 操作步驟與上述相同。在本發(fā)明的另一實(shí)施方式中，添加至油中的細(xì)菌可以是微膠囊化菌和未經(jīng)微膠囊化的“裸”菌的形式。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，益生菌涂布有植物來源的單一涂層。在另一優(yōu)選實(shí)施方式中，益生微生物涂布有植物來源的第一和第二涂層。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，植物性脂質(zhì)選自包含下述飽和植物油脂的組，所述植物油脂具有35°C 75°C、優(yōu)選45°C 65°C、有利的是50°C 60°C的熔點(diǎn)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，可以使用具有一定程度親水性的飽和植物油脂，所述植物油脂可選自飽和脂肪酸的單甘油酯和二甘油酯、飽和脂肪酸的酯化聚甘油和游離飽和脂肪酸。飽和脂肪酸可以選自包含8 32個(gè)碳原子、優(yōu)選12 28個(gè)碳原子、更優(yōu)選16 24個(gè)碳原子的組。有利的是，涂層脂質(zhì)選自包含聚甘油二硬脂酸酯(商品名Plurol Stearique WL1009)、棕櫚酸硬脂酸甘油酯(商品名I^recirol Ato 5)、飽和脂肪酸(商品名Revel C)、 非月桂酸來源的氫化植物油脂和氫化棕櫚油脂或硬脂酸甘油酯(stearin)。在第一實(shí)施方式中，益生菌涂布有單一涂層(經(jīng)單一涂布)。實(shí)踐中，單一涂層使用同一脂質(zhì)來進(jìn)行。有利的是，單一涂層由聚甘油二硬脂酸酯或植物來源的聚甘油酯或聚甘油-6-二硬脂酸酯 CAS 61725-93-7(商品名 Plurol Stearique WL1009)構(gòu)成。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，凍干微生物與涂布它的脂質(zhì)涂布物之間的重量比為 50 50 或 40 60。
在第二優(yōu)選實(shí)施方式中，益生菌被雙層涂布。實(shí)踐中，雙涂層使用兩種彼此不同的脂質(zhì)連續(xù)進(jìn)行(雙涂層第一和第二涂層彼此獨(dú)立)。有利的是，兩種脂質(zhì)選自包含氫化棕櫚油脂(Tm = 600C )和二棕櫚酸硬脂酸甘油酯(Tm = 57°C 60°C )的組。兩種脂質(zhì)被連續(xù)噴涂至凍干菌上，即，對(duì)凍干物施加雙重覆蓋使用氫化棕櫚油脂進(jìn)行第一覆蓋，使用二硬脂酸棕櫚酸甘油酯進(jìn)行第二覆蓋，二者之間的比例為3 1。細(xì)菌(優(yōu)選為微膠囊化形式)可以利用本領(lǐng)域人員所知的普通技術(shù)來微膠囊化。 例如，可以采用流化床技術(shù)(例如頂噴或底噴)，其中使用脂質(zhì)性質(zhì)的涂層材料。在第一實(shí)施方式中，將選自氫化棕櫚油脂(Tm = 600C )和二棕櫚酸硬脂酸甘油酯 (Tm = 57°C 60°C )的兩種脂質(zhì)連續(xù)噴涂至凍干物上，即對(duì)凍干物施加雙重覆蓋使用氫化棕櫚油脂進(jìn)行第一覆蓋，使用二棕櫚酸硬脂酸甘油酯進(jìn)行第二覆蓋，二者比例為3 1。 單元的雙涂層確保細(xì)菌被更好地密封于環(huán)境外，產(chǎn)生了沒有與外界連通的孔的連續(xù)膜。然而，該包裝材料在腸道需打開，以釋放細(xì)菌并允許它們定殖。所選擇的脂質(zhì)實(shí)際上對(duì)酸性PH 具有抗性，這使涂層在胃內(nèi)保持完好，但其對(duì)于即使較輕微的堿性PH也會(huì)敏感，以致在其通過腸道的過程中能夠形成孔。相對(duì)于懸浮液總重，油性懸浮液含有小于或等于30重量％、0. 05重量％ 20重量％的量的細(xì)菌；優(yōu)選為0. 5% 10%的量；更優(yōu)選為相對(duì)于懸浮液總重為1. 5重量％ 5
重量％的量。油性懸浮液包含至少一種可食用的適于對(duì)兒童患者施用的油，所述油選自包含以下油的組橄欖油、玉米油、豆油、亞麻籽油、花生油、芝麻油、魚油和米糠油。有利的是，所述油為生物級(jí)，并且可以在其制備中包含精煉階段和/或冷榨階段。油性懸浮液包含至少一種油，其量相對(duì)于懸浮液總重為大于或等于70重量％，優(yōu)選為75重量％ 95重量％的量，有利的是至少90重量％的量。有利的是，油性懸浮液僅含橄欖油或者與玉米油和/或豆油和/或亞麻籽油混合的橄欖油。有利的是，橄欖油是生物級(jí)的特級(jí)初榨油(extravirgin)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，油性懸浮液還包含至少一種選自包含以下化合物的組的細(xì)分的食品化合物硅石、二氧化硅、二氧化硅凝膠、膠體二氧化硅、沉淀二氧化硅、syloid M4、滑石、硅酸鎂、氧化鎂、碳酸鎂、硅酸鈣、卵磷脂、單甘油酯或二甘油酯(如單硬脂酸甘油酯、單油酸甘油酯)、聚甘油油酸(plurol-oleic acid)、淀粉、改性淀粉、魔芋膠、黃原膠、 結(jié)冷膠、角叉菜膠。所述材料以相對(duì)于懸浮液總重為0. 1重量％ 15重量％的量存在，優(yōu)選以相對(duì)于懸浮液總重為5重量％ 10重量％的量存在。在此情況下，制備步驟如下，在攪拌和將油加熱至約60°C后將確定量的油添加至食品材料粉末(例如二氧化硅)中，直至其完全溶解為止。作為另外一種選擇，可以將二氧化硅冷添加；但溶解將需要更長時(shí)間。然后，將懸浮液由60°C冷卻至室溫。接下來，稱量凍干物的重量，并將其在攪拌下添加至懸浮液，直至獲得完全的均質(zhì)分散體。包含油、益生菌和材料粉末的懸浮液的一個(gè)實(shí)例如表2中所示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，油性懸浮液還可以包含至少一種益生纖維和/或至少一
7種具有雙歧作用的碳水化合物。該益生纖維和碳水化合物具有雙重功能。首先其符合益生目的。其次可作為增稠劑和穩(wěn)定劑符合技術(shù)目的。所述益生纖維和碳水化合物例如選自菊粉、低聚果糖(F0Q、低聚半乳糖和低聚反式半乳糖(G0S和TOQ、低聚葡萄糖(G0S α )、低聚木糖()(0 、低聚殼聚糖(⑶幻、大豆低聚糖(SOS)、低聚異麥芽糖(IMOS)、麥芽糖糊精、抗性淀粉、果膠、歐車前、阿拉伯半乳聚糖、葡萄糖-甘露聚糖、半乳糖甘露聚糖、木聚糖、乳糖蔗糖、乳果糖、乳糖醇和各種其他類型的樹膠、金合歡纖維、卡魯巴纖維、燕麥纖維、竹纖維、柑桔纖維，以及通常而言含有彼此比例不同的可溶部分和不溶部分的纖維。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述益生纖維和碳水化合物選自低聚葡萄糖 (G0S α )、低聚果糖(F0Q、菊粉和/或麥芽糖糊精。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，組合物包含至少一種選自上述益生纖維中的益生纖維和/或相互以任意相對(duì)百分比構(gòu)成的適當(dāng)混合物。如果存在，則益生纖維和/或具有雙歧作用的碳水化合物的量相對(duì)于懸浮液總重
為0.5重量％ 25重量％，優(yōu)選為1重量％ 20重量％，更優(yōu)選為5重量％ 10重量％。 在此情況下，將獲得具有共生活性的懸浮液。此外，懸浮液也可以包含其他活性成分和/或組分，如維生素、礦物質(zhì)、生物活性肽、具有抗氧化作用的物質(zhì)、降血膽固醇制劑、降血糖制劑、抗炎劑和抗甜劑 (anti-sweetening agent)，其量通常為懸浮液總重的0. 001重量％ 10重量％，優(yōu)選為 0. 5重量％ 5重量％，其始終取決于活性組分的種類及其推薦的每日劑量(如果存在)。本發(fā)明的一個(gè)目的是將所述油性懸浮液用作治療例如兒科患者的腸絞痛等腸道紊亂的藥物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是將所述微生物菌株用于制備治療例如兒科患者的腸絞痛等某些腸道紊亂的藥物或補(bǔ)充劑。本申請(qǐng)人已經(jīng)檢測了在以下油中菌量的衰減橄欖油、玉米油、冷榨豆油和冷榨亞麻籽油。所使用的菌株是最初菌量為400MLD/g的凍干形式的LMG P-21380 (副干酪乳桿菌 LPC 00)。在油中的純凍干物混合物被制備為具有1MLD/I0ml的油(在IOml油中為2. 5mg)。 結(jié)果如表3中所示。表3顯示的是1)生物橄欖油，2)玉米油，3)葵花油，4)冷榨豆油，5) 冷榨亞麻籽油。TO =起始時(shí)間，E-05 = 1Χ1(Γ5，Ε-09 = 1Χ1(Γ9，Ε_14 = IXlO-14, Bn = 10 億表 權(quán)利要求
1.一種油性懸浮液，其特別用于兒科應(yīng)用，其包含，-至少一種選自包含以下油的組中的食物油橄欖油、玉米油、豆油、亞麻籽油、花生油、芝麻油、魚油和米糠油，所述至少一種油以相對(duì)于所述懸浮液總重大于或等于70重量％的量存在，和-至少一種選自由以下物種組成的組中的微生物的菌株嗜酸乳桿菌、卷曲乳桿菌、格氏乳桿菌、德氏乳桿菌群、唾液乳桿菌、干酪乳桿菌、副干酪乳桿菌、植物乳桿菌群、鼠李糖乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、短乳桿菌、布氏乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、青春雙歧桿菌、角雙歧桿菌、雙叉雙歧桿菌、短雙歧桿菌、鏈狀雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、乳雙歧桿菌、長雙歧桿菌、假鏈狀雙歧桿菌和嗜熱鏈球菌，其中所述菌株以相對(duì)于所述懸浮液總重小于或等于30重量％的量存在，并且其中所述微生物涂布有至少一個(gè)涂層，所述涂層包含至少一種熔點(diǎn)為35°C 75°C的植物性脂質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的懸浮液，其中所述油僅由橄欖油構(gòu)成；優(yōu)選的是，其為與玉米油和/或豆油和/或亞麻籽油混合的橄欖油。
3.如權(quán)利要求1或2所述的懸浮液，其中所述油性懸浮液還包含至少一種選自包含以下化合物的組的細(xì)分的食品化合物硅石、二氧化硅、二氧化硅凝膠、膠體二氧化硅、沉淀二氧化硅、滑石、硅酸鎂、氧化鎂、碳酸鎂、硅酸鈣、卵磷脂、如單硬脂酸甘油酯、單油酸甘油酯等單甘油酯或二甘油酯、聚甘油油酸、淀粉、改性淀粉、魔芋膠、黃原膠、結(jié)冷膠和角叉菜膠， 所述細(xì)分的食品化合物的含量相對(duì)于所述懸浮液的總重為0. 1重量％ 15重量％。
4.如權(quán)利要求1 3中任一項(xiàng)所述的懸浮液，其中所述油性懸浮液還包含至少一種益生纖維和/或至少一種雙歧碳水化合物，所述益生纖維和/或雙歧碳水化合物的含量相對(duì)于所述懸浮液總重為0. 5重量％ 25重量％，且所述益生纖維和/或雙歧碳水化合物選自菊粉、低聚果糖(FOS)、低聚半乳糖和低聚反式半乳糖(G0S和TOQ、低聚葡萄糖(G0S α)、低聚木糖0(0 、低聚殼聚糖(COQ、大豆低聚糖(S0Q、低聚異麥芽糖(IM0Q、麥芽糖糊精、抗性淀粉、果膠、歐車前、阿拉伯半乳聚糖、葡萄糖-甘露聚糖、半乳糖甘露聚糖、木聚糖、乳糖蔗糖、乳果糖、乳糖醇、金合歡纖維、卡魯巴纖維、燕麥纖維、竹纖維和柑桔纖維。
5.如權(quán)利要求4所述的懸浮液，其中所述至少一種纖維和所述至少一種碳水化合物選自低聚葡萄糖(G0S α )、低聚果糖(F0Q、菊粉和/或麥芽糖糊精。
6.如權(quán)利要求1 5中任一項(xiàng)所述的懸浮液，其中所述植物性脂質(zhì)的熔點(diǎn)為45°C 65 "C。
7.如權(quán)利要求6所述的懸浮液，其中所述植物性脂質(zhì)的熔點(diǎn)為50°C 60°C。
8.如權(quán)利要求1 7中任一項(xiàng)所述的懸浮液，其中所述微生物的菌株涂布有單一脂質(zhì)涂層。
9.如權(quán)利要求8所述的懸浮液，其中所述脂質(zhì)涂層由聚甘油-6-二硬脂酸酯構(gòu)成，微生物脂質(zhì)涂層的重量比優(yōu)選為50 50或40 60。
10.如權(quán)利要求1 9中任一項(xiàng)所述的懸浮液，其中所述微生物的菌株涂布有第一脂質(zhì)涂層和第二脂質(zhì)涂層。
11.如權(quán)利要求10所述的懸浮液，其中所述第一脂質(zhì)涂層由氫化棕櫚油脂構(gòu)成，并且所述第二脂質(zhì)涂層由二硬脂酸棕櫚酸甘油酯構(gòu)成，所述第一脂質(zhì)涂層與所述第二脂質(zhì)涂層的重量比優(yōu)選為3 1。
12.如權(quán)利要求1 11中任一項(xiàng)所述的懸浮液，其用作治療例如兒科患者的腸絞痛等腸道紊亂的藥物。
13.至少一種選自由權(quán)利要求1所述的物種組成的組中的微生物的菌株在制備權(quán)利要求1 12中任一項(xiàng)所述的懸浮液中的應(yīng)用，所述懸浮液用于治療例如兒科患者的腸絞痛等腸道紊亂。
14.如權(quán)利要求13所述的應(yīng)用，其中所述微生物涂布有單一脂質(zhì)涂層。
15.如權(quán)利要求14所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)涂層由聚甘油-6-二硬脂酸酯構(gòu)成，微生物脂質(zhì)涂層的重量比優(yōu)選為50 50或40 60。
16.如權(quán)利要求13所述的應(yīng)用，其中所述微生物的菌株涂布有第一脂質(zhì)涂層和第二脂質(zhì)涂層。
17.如權(quán)利要求16所述的應(yīng)用，其中所述第一脂質(zhì)涂層由氫化棕櫚油脂構(gòu)成，并且所述第二脂質(zhì)涂層由二硬脂酸棕櫚酸甘油酯構(gòu)成，所述第一脂質(zhì)涂層與所述第二脂質(zhì)涂層的重量比優(yōu)選為3 1。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種特別適于兒科應(yīng)用的含有益生菌的油性懸浮液。
文檔編號(hào)A61K47/44GK102438589SQ201080016252
公開日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2010年3月9日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月9日
發(fā)明者G·P·斯特羅齊, L·莫格納 申請(qǐng)人:益生菌股份公司