專利名稱：在人類和生物技術工業(yè)中用于預防、消除和治療dna類病毒的胡黃連提取物的制作方法
在人類和生物技術工業(yè)中用于預防、消除和治療DNA類病
毒的胡黃連提取物本發(fā)明涉及用于治療肝臟和其他的紊亂和疾病的植物提取物，更具體而言，本發(fā)明涉及玄叁科植物家族的植物體的提取物及其級份，該提取物及其級份在預防、消除、治療和管理由病毒、其他病原體和毒性物質引起的多種肝臟紊亂和疾病中，在預防、消除、治療和管理由一般的DNA和RNA類病毒引起的感染和疾病中，在預防、消除、治療和管理與多種病毒、真菌、細菌和原生動物有關的感染和疾病/紊亂中，在預防、消除、治療和管理在生物技術和發(fā)酵工業(yè)中遭遇的對培養(yǎng)物的病毒感染中用作藥物、營養(yǎng)食品和食物組合物；用作保肝試劑；與肝臟、其他器官和系統(tǒng)有關的以及在人類和動物受試者的健康和護理中及在研究和工業(yè)中用于其他應用的預防試劑。此外，本發(fā)明還涉及制備所述提取物的方法。如在傳統(tǒng)的醫(yī)藥系統(tǒng)中所報告的那樣，已知玄叁目植物具有醫(yī)藥性質。這些植物的醫(yī)藥效力是由于該目植物中存在的多種糖苷所產生的。更容易得到的玄叁科植物為胡黃連屬植物。胡黃連屬的三個成員由于安全性以及缺乏毒性而特別受到關注。它們是印度古月黃連(Picrorhiza kurrooa Royle)、Picrorhiza scrophulariflora Pennell 禾口 Neopicrorhiza scrophulariifIora0印度胡黃連(在印度也稱為Katuka)在印度廣泛存在。它在喜馬拉雅山脈中在海拔大約3000至5000米處生長。已知因其提取物的性質而用作肝臟保護劑和免疫調控齊U。傳統(tǒng)上，在用于哮喘、支氣管炎、瘧疾、慢性痢疾、病毒性肝炎、胃不適、蝎螫傷的印度草醫(yī)系統(tǒng)andian Ayurvedic system of medicine)中使用所述植物的根，并且在用于刺激食欲和改善消化中用作苦補劑。已知該植物的根作為肝保護劑以及減輕發(fā)燒中的治療價值，但是在現(xiàn)有技術中，關于該植物的根是對抗肝炎和其他病毒還是僅僅作為肝臟的復壯劑(rejuvenant)還沒有公開和證據(jù)。此外，所述的植物在中國、尼泊爾、不丹和其他地區(qū)也生長，其中所述植物的根和根莖在傳統(tǒng)上可用于痢疾、黃疸、骨蒸、肝保護和免疫調控功能。已知所述的植物，特別是根富含萜類化合物和糖苷。術語Picrorhiza和Picrorrhiza的拼寫稍微不同，并且在本說明書中可交換使用并是指相同的材料。物種名胡黃連(Picrorhiza kurrooa)在下文中為了簡潔而縮寫為冊。 就本說明書的目的而言，首寫字母“ 1 ”可以指上文提及的3種胡黃連物種或者其他胡黃連物種之一，或者同時指一種或多種胡黃連物種。例如，在考慮所述物種的提取物的混合物的情況下，術語Hi是指所有的物種。可以采用適于所述內容的含義。首寫字母“P”可用作術語胡黃連的縮寫。此外，術語“部分”和“因子”在本說明書中可交換使用，并且除非另作說明，都是指相同的含義。在本說明書中，所提及的“提取”可以為作為整體的植物體的提取方法或者指單獨的提取操作，該操作在所述的方法中為步驟之一(濾去步驟或固體-液體提取步驟)。可以采用適于所述內容的含義。術語“成分”和“構成部分”在本文中多處可交換使用，其含義就本文的內容而言相當清楚。植物體是指用于本發(fā)明的提取方法的起始材料，在發(fā)酵結束時形成的最終產物被稱為提取物。此外，術語“植物體”還用于指處于方法中的物質物體，其處于所述方法中的不同階段。處于所述方法中不同階段的液體蒸氣是指提取物或溶液?？梢圆捎眠m于所述內容的含義。在現(xiàn)有技術中，在1 中的活性部分是指胡黃連素，其包含胡黃連糖苷，該胡黃連糖苷為糖苷。胡黃連素進一步包含被稱為胡黃連苦苷I、II、III的環(huán)烯醚萜糖苷以及其他的胡黃連苦苷。已經鑒定出多種其他的部分，例如加拿大麻素、drosin and nine cucurbitacin糖苷，加拿大麻素為有效的抗炎試劑，另兩種也被報告具有醫(yī)藥性質。在整個所述的目(玄參科家族)中，均勻地形成了這些醫(yī)藥因子，并且特別是在胡黃連屬的所有植物中。因此到目前為止，在現(xiàn)有技術中，所述的Hi提取物的醫(yī)藥效力并非歸因于特定的活性部分(因子)。目前已知，具體而言的P屬以及一般而言的玄參科家族(縮寫為S家族)的植物體均包含親脂性和非親脂性構成部分。所述家族的親脂性化合物和構成部分在下文中進一步稱為LC (縮寫)，相似地，所述家族的非親脂性構成部分和化合物被稱為NLC。這主要是為了簡潔的目的，并且無意于對本發(fā)明的范圍進行任何的限定。這些發(fā)明人觀察到在傳統(tǒng)的醫(yī)藥實踐或者在當前的現(xiàn)有技術中報告、討論或研究的所有上述命名的I3K醫(yī)藥因子主要是NLC。注意，現(xiàn)有技術(包括傳統(tǒng)的醫(yī)藥實踐)已經將NLC本身限定于僅使用水和醇(甲醇和乙醇)作為提取溶劑。這些發(fā)明人注意到，一般而言所述的溶劑提取所述的NLC，并且?guī)缀跸械腖C。因此，現(xiàn)有技術僅關注NLC及它們的醫(yī)藥性質，并且不會擴展至這些其他的成分。在P植物體中主要的NLC為其糖苷。在現(xiàn)代，多種植物糖苷的大量醫(yī)藥性質已經為大家所知。它們延伸至多種疾病和紊亂。在植物界中發(fā)現(xiàn)不同類型的糖苷。只要至少關注醫(yī)藥性質和作用，在現(xiàn)有技術中的焦點和中心已經完全集中在P糖苷上?，F(xiàn)有技術顯示并未認識到S家族植物中其他構成部分的性質和程度，即，所述的LC和它們的醫(yī)藥意義。由于現(xiàn)有技術已經基本將其他溶劑(也會或多或少程度地提取LC并使它們暴露于探討、研究和醫(yī)藥審查的溶劑)由它們的研究中排除，所以所述的情況是可以理解的。據(jù)推測，現(xiàn)有技術探究了它們的醫(yī)藥效力的性質和程度?？赡苁怯捎谒痛继崛∥锉憩F(xiàn)出相當大的醫(yī)藥效力并提供了足夠用于研究的范圍，關注不會擴展至其他的提取溶劑，并由此集中在S家族的親脂構成部分。通過這些發(fā)明人的試驗觀察，他們確定所述的LC(S家族的親脂化合物)的醫(yī)藥活性為極高的數(shù)量級。如下說法也不能說是不正確的與所述的糖苷相反，所述的NLC的醫(yī)藥作用的范圍和劇增是相當大且令人驚奇地高和廣泛的。本發(fā)明首先考慮了所述的LC，并證明它們作為(例如)抗病毒化合物的相當特別醫(yī)藥意義。此外，本發(fā)明還首次確定NLC的存在往往會損害并減少LC的醫(yī)藥效力，因此重要的是生產1 提取物，該提取物包含基本獨特的LC或者具有最少含量的NLC。最終，這些發(fā)明人提供了新的方法，并確定了優(yōu)選地提取所述的LC并且其提取概況基本排除了所述的NLC的合適的溶劑。這些發(fā)明人觀察到NLC會掩蓋LC的醫(yī)藥作用。在包含所述的LC的提取物中存在任何的NLC都會具有降低LC的醫(yī)藥效力的作用。可能是某些S家族的NLC具有與LC相反的作用。無論機制如何，本發(fā)明通過試驗確定LC具有顯著的醫(yī)藥作用，并且優(yōu)選的是LC提取物必須基本不含NLC以便實現(xiàn)它們完全的醫(yī)藥效力。
因此，本發(fā)明的新的1 提取物以極為基本的方式不同于現(xiàn)有技術的1 提取物，其不同之處在于本發(fā)明的Hi提取物的醫(yī)藥部分不用于現(xiàn)有技術的Hi提取物的醫(yī)藥部分。在現(xiàn)有技術的1 提取物中基本不具有本發(fā)明的新的Hi提取物的醫(yī)藥部分，并且由于下文中詳細說明的原因，在本發(fā)明的新的Hi提取物中基本避免了在現(xiàn)有技術的Hi提取物中的醫(yī)藥部分。在本發(fā)明的新的Hi提取物中的醫(yī)藥部分為S家族植物的LC，而不是S家族的糖苷，該糖苷為現(xiàn)有技術的Hi提取物中的醫(yī)藥部分。在本發(fā)明的新的1 提取物中的主要醫(yī)藥因子為在S家族植物中發(fā)現(xiàn)的脂肪酸和萜烯，以及由S家族的糖苷形成的配糖體。在所述的方法中形成的所述的脂肪酸、萜烯和配糖體在現(xiàn)有技術的I3K提取物中不存在。已知，PK植物中的糖苷為胡黃連苦苷I、II和III 等。因此，現(xiàn)有技術的Hi提取物主要由所述的胡黃連苦苷和命名為加拿大麻素的化合物構成，而本發(fā)明的新的I3K提取物基本不含所述的胡黃連苦苷和其他的糖苷以及加拿大麻素。 在本發(fā)明的提取物中，我們所具有的并非為在原始植物體中存在的所述的胡黃連苦苷，而是有其衍生的配糖體。因此，注意本發(fā)明的方法不僅是提取的物理方法，而且引入的化學變化。這些發(fā)明人觀察到在提取方法的過程中形成了水解和酯化反應，從而釋放出提取物中的所述的配糖體。由于試驗觀察已經確定了較高的醫(yī)藥效力，所以提出該假說而并非進行約束。本發(fā)明具有在提取過程中發(fā)生了化學反應的試驗證據(jù)，使得本發(fā)明的提取方法涉及物理和化學變化的結合。本發(fā)明制備出己烷提取物，還制備出其中第一溶劑為乙醇、第二溶劑為己烷的提取物。發(fā)現(xiàn)在己烷提取物的過程中得到的產率為大約35%的較高的LC。HPLC分析表明在提取物中存在配糖體、留體萜烯以及長鏈脂肪酸結構。推斷，額外的產率相應于在己烷提取物中存在的這些配糖體、留體萜烯以及長鏈脂肪酸?；蛘咦鳛镾家族植物體中原始存在的或者作為與所述的化合物有關的反應產物的這些化合物基本不存在于通過乙醇-己烷溶劑系統(tǒng)得到的提取物中。乙醇-己烷肉桂基系統(tǒng)在提取過程中消除了這些成分。本發(fā)明的提取物進一步包含在S家族的植物中發(fā)現(xiàn)的脂肪酸。S家族的糖苷為使得現(xiàn)有技術的I3K提取物味道差的非?？嗟幕衔?。相反，本發(fā)明的1 提取物是非常可口的，其完全不含苦味因子。大量有氣味的因子在水和醇提取物中出現(xiàn)，因此，現(xiàn)有技術的1 提取物具有強的令人討厭的氣味，這降低了人類和動物消耗的可接受性。在S家族中的所述的胡黃連苦苷和其他糖苷是非常苦味的化合物。此外，在Hi植物中還發(fā)現(xiàn)較少量的其他苦味部分。另一方面，本發(fā)明的提取物基本上是無氣味的?？偠灾?，本發(fā)明的提取物完全不同于現(xiàn)有技術的提取物。本發(fā)明的提取物的萜烯和其他成分的醫(yī)藥作用機制既是未知的，而且還不存在它們相對于現(xiàn)有技術提取物成分而言的醫(yī)藥作用優(yōu)越性的解釋。但是，這些發(fā)明人強調通過本發(fā)明通過試驗確定了所述的優(yōu)異的醫(yī)藥活性。因此，現(xiàn)有技術的提取物的缺點在于存在糖苷成分，該成分與S家族的植物的所述的萜烯和其他LC相比具有相當?shù)偷尼t(yī)藥效力。此外，與所述的萜烯和其他LC相比，糖苷的醫(yī)藥效果的范圍也相當?shù)?。盡管它們是保肝藥，但是所述的糖苷不具有抗病毒活性。另一方面，所述的LC表現(xiàn)出強的對抗DNA和RNA病毒的抗病毒活性，因此與所述的NLC的有限的肝臟保護和再生作用相比，它們的作用相當廣泛。現(xiàn)有技術的提取物是非?？辔兜氖沟盟鼈儙缀跏遣贿m口的，并且它們的不可接受性進一步擴展了它們的具有強的令人討厭氣味的成分?，F(xiàn)有技術的提取方法的缺點在于它們限定于和兩種醇(乙醇和甲醇)，并且未擴展至可以產生新的且包含S家族的LC的較好及更有用的提取物的整個溶劑范圍。這些發(fā)明人通過細胞系試驗證明使用主要包含所述的親脂性成分的1 會積極地抑制肝炎和其他DNA和RNA類型的病毒的作用。其會進一步破壞病毒結構，從而提供了所述的I3K為高度有效的抗病毒組合物的證據(jù)。已知，與細胞膜結構有關的磷脂在一個末端包含兩條高度親脂(偏愛脂肪)的烷基鏈，而在另一個末端包含高度親水(偏愛水)的離子基團，例如磷酰膽堿。本發(fā)明人相信， 這使得1 提取物中的親脂性部分在治療病毒疾病的過程中具有更高的藥理學活性。本發(fā)明人的體外研究由獨立的試驗室所證實。他們證明I3K親脂性化合物具有極高的對抗DNA 和RNA病毒(包括肝炎B、流感、逆轉錄病毒(如HIV)和其他病毒)的抗病毒性質。因此，本發(fā)明的目的在于提供其中所述的1 植物體的親脂性成分基本為其主要成分的I3K提取物。本發(fā)明的另一個目的在于提供其中基本上所有的所述的Hi的親脂性成分均可靠地存在于所述的提取物中的Hi提取物。本發(fā)明的另一個目的在于提供其中所述的Hi的非親脂性成分基本是缺乏的或者是最少的I3K提取物。本發(fā)明的另一個目的在于提供其中所述的苦味的部分，特別是在1 中存在的1 糖苷和令人討厭的有氣味的成分，基本是缺乏的或者是最少的I3K提取物。本發(fā)明的另一個目的在于提供用于制備Hi提取物的提取方法，其中所述的親脂性因子為主要的成分，并且其中基本不含所述的Hi的非親脂性因子或者該因子最少。本發(fā)明的另一個目的在于提供所述的提取方法，使得在所述的提取物中可靠地出現(xiàn)在Hi植物體中原始存在的完整的一組親脂性因子，并使得所述的水解和酯化反應得以進行或者事實上被促進。本發(fā)明的另一個目的在于提供用于制備Hi提取物的提取方法，其中所述的在原始植物體中存在的萜烯和脂肪酸的提取達到最大，并且進一步使糖苷向配糖體的轉化最大，并且其隨后的提取可通過適當選擇的溶劑以及所選的提取參數(shù)來實現(xiàn)。本發(fā)明的另一個目的在于提供一組溶劑，由此可以進行1 的提取從而得到提取物，其中主要成分為所述的親脂性化合物，并且基本抑制或減少在待提取的Hi植物體中原始存在的非親脂性構成部分和/或苦味且令人討厭的氣味的成分的提取。因此，根據(jù)本發(fā)明，提供了玄叁科植物家族的植物體的提取物及其級份，該提取物及其級份在預防、消除、治療和管理由病毒、其他病原體和毒性物質引起的多種肝臟紊亂和疾病中，在預防、消除、治療和管理由一般的DNA和RNA類病毒引起的感染和疾病中，在預防、消除、治療和管理與多種病毒、真菌、細菌和原生動物有關的感染和疾病/紊亂中，在預防、消除、治療和管理在生物技術和發(fā)酵工業(yè)中遭遇的對培養(yǎng)物的病毒感染中用作醫(yī)藥、營養(yǎng)食品和食物組合物；用作保肝試劑；與肝臟、其他器官和系統(tǒng)有關的以及在人類和動物受試者的健康和護理中及在研究和工業(yè)中用于其他應用的預防試劑，所述的提取物包含所述植物家族的親脂性構成部分，其中所述的親脂性構成部分為所述植物家族的一種或多種萜烯。
因此，根據(jù)本發(fā)明，進一步提供了由玄叁科植物家族的一種或多種植物提取植物體的方法，該方法包括以下步驟得到待提取的植物體；根據(jù)需要將所述的植物體進行準備操作，例如切割、切碎、漂白、干燥、粉碎、研磨、篩分等；將得自準備步驟的植物體與預定的非水性溶劑、溶劑系列或溶劑混合物接觸，其中優(yōu)選的是，所述的非水性溶劑、溶劑系列或溶劑混合物在預定的溫度及預定的持續(xù)時間下通過以系列、平行或混雜的構造排列的一個或多個提取操作來提取植物體中的親脂性成分；通過任何已知的手段在所述的方法中將提取物溶液與植物體分離；通過任何已知的手段將所述的溶劑與所述的提取物溶液分離， 例如通過蒸發(fā)溶劑從而產生濃縮的提取物溶液或固體形式的產物。因此，本發(fā)明的1 提取物基本包含S植物家族的萜烯構成部分。所述的提取物可以包含一種所述的萜烯或者S家族的萜烯的任何混合物。優(yōu)選的是，所述的萜烯在提取物中為單一的主要的成分，并且萜烯與脂肪酸在提取物中未所述親脂性成分的主要部分。提取物進一步包含S植物家族的脂肪酸。此外，本發(fā)明的Hi提取物基本包含在S植物家族中存在的糖苷的配糖體。這些糖苷在提取條件下發(fā)生了反應(例如水解)或分解，并產生它們各自的配糖體，這些配糖體隨后通過本發(fā)明的溶劑提取出來而進入到提取物中。優(yōu)選的是，所述的萜烯、脂肪酸和配糖體的結合的量(其作為整體為LC)為80重量％或更高。優(yōu)選的是，本發(fā)明的提取物不含所述的苦味的糖苷，并且在提取物中其他NLC的量作為整體占提取物的0. 01重量％至20重量％。優(yōu)選的是，所述的糖苷、kutkiside、胡黃連苦苷、力口拿大麻素和drosin —起的量不超過提取物的20重量％。優(yōu)選的是，少于10%的提取物是水溶性的。在本發(fā)明的范圍內，所述的本發(fā)明的Hi提取物可以為所述S植物家族的任何物種的提取物。注意本發(fā)明的提取方法可容易且簡單地擴展至任何所述的物種。同樣容易且簡單的是，所述的方法適用于所述物種的任何混合物。優(yōu)選的是，提取物得自上文提及的三個物種的、混合物￡P度胡黃連、Picrorhiza scrophularif Iora Pennell 禾口 Neopicrorhiza scrophulariiflora.由毒性的角度而言，所述的這三種物種是受到偏愛的。用于提取的植物體可以為植物的任何部分，例如根、根莖、莖、葉、花、樹皮、種子等。在本發(fā)明的范圍內，可以提取所述部分的任何混合物或組合。優(yōu)選的是，所提取的植物體為根或根莖，更優(yōu)選的為根或根莖的混合物。此外，所述部分的任何其他混合物也在本發(fā)明的范圍內。本發(fā)明的提取方法為固體-液體提取方法。如上文所述，植物體可以為S植物家族的任何植物。在本發(fā)明的范圍內，所述的植物體可以為得自不同所述的植物的植物體的混合物。優(yōu)選的是，植物體得自物種印度胡黃連、Picrorhiza scrophularifIora Pennell, 或Neopicrorhiza scrophulariiflora、或這三個物種的任何混合物或組合。所述的準備步驟是可任選的，并且可以根據(jù)需要采用一個或多個步驟?？梢栽诔睗竦幕蚋稍锏闹参矬w上進行提取。優(yōu)選的是，所述的物體可以通過目光干燥或方法干燥進行預干燥。優(yōu)選的是，切割并切碎植物體以減小尺寸，從而在提取步驟中確保更好的固體-液體接觸。優(yōu)選的是，將植物體粉碎并研磨至大約l_5mm尺寸或更小的尺寸。優(yōu)選的是進行漂白操作。在本發(fā)明的方法中采用的溶劑為非水性的。優(yōu)選的是非極性的，但是極性和其他溶劑在本發(fā)明的范圍內。優(yōu)選的是，所述的溶劑是非醇性的，但是可以使用鏈長為4個或更多C原子的一羥基醇，即使它們是極性的。優(yōu)選的是，所述的溶劑在其結構中具有4個或更多的C原子的烴鏈，或者其中是環(huán)狀或環(huán)部分。在未限定本發(fā)明的范圍的條件下，所述的溶劑可以為得自以下列表中的一種二氯甲烷，己烷，η-己烷，C-己烷，甲苯，t-BuOMe，Et2O, 甲基異丁基酮，醋酸乙烯酯，醋酸乙酯，叔丁醇，DMA，異丙醇，甲酸，甲酰胺，甲乙酮，N, N-二甲基甲酰胺，醋酸，丙酮，乙腈，苯，I" 丁醇，2- 丁醇，2- 丁酮，1-丁醇，四氯化碳，氯苯，氯仿， 環(huán)己烷，1，2_ 二氯乙烷，二乙醚，二乙二醇，二甘醇二甲醚(二乙二醇二甲基醚)，1，2_甲氧基-乙烷(乙二醇二甲醚，DME)，二甲基醚，二甲基-甲酰胺(DMF)，二甲基亞砜(DMSO)， 二惡烷，乙醇，醋酸乙酯，乙二醇，甘油，庚烷，六甲基磷酸酰胺(HMPA)，六甲基磷酸三酰胺 (HMPT)，甲醇，甲基叔丁基醚(MTBE)，二氯甲烷，N-甲基_2_吡咯烷酮(NMP)，硝基甲烷，戊烷，石油醚(石油英)，1_丙醇，2-丙醇，吡啶，四氫呋喃(THF)，三乙基胺，鄰-、間-和對-二甲苯，白精油(white spirit)，植物油，石腦油，松節(jié)油，含氧溶劑(例如醇，乙二醇醚，醋酸甲酯，醋酸乙酯，酮，酯，乙二醇醚，乙二醇酯)；用作溶劑的有機化合物包括芳香化合物和其他烴，醇，酯，醚，酮，胺，硝酸化和商代烴；以及無機溶劑，例如氨水，硫磺酸，氯氟磺酰，表面活性劑，洗滌劑，PH緩沖劑，水和重水。在本發(fā)明的范圍內，可以使用上述溶劑的任何兩種或多種的溶劑混合物來進行提取。備選地，在本發(fā)明的范圍內，可以使用選自上述溶劑中的兩種或多種溶劑進行系列提取。本發(fā)明的提取方法包括固體-液體提取步驟，其中所述的植物體與合適的溶劑接觸。可以通過本發(fā)明的方法或者在本發(fā)明的范圍內的其他方法來生產本發(fā)明的提取物。在本發(fā)明的范圍內，可以通過用于實施提取步驟的任何已知的手段來制備本發(fā)明的提取物， 例如溶劑提取、吸水凝膠提取、液化氣(例如CO2)提取、酶法、膜過濾、液體-液體提取、液體-固體提取、樹脂提取、逆相提取、色譜等。在本發(fā)明的范圍內，在通過蒸發(fā)或其他手段消除溶劑之后，可以將本發(fā)明的提取產物進行干燥或者經過其他操作，例如研磨、篩選、吸附在賦形劑等上。提取物可以為納米顆粒、納米凝膠形式，或者被加工構成了疫苗或佐劑。在本發(fā)明的范圍內，本發(fā)明的提取物可以進一步包含所述的S植物家族的以下構成部分中的一種或多種糖苷酯、糖苷醚、脂肪族化合物、芳香化合物、糖苷羧化物、留體糖苷、長鏈脂肪酸、配糖體、?；涮求w、脂肪醇、脂肪酸、留體酯、留體脂肪酸、留體醇、甾醇、 萜類化合物、留體三萜烯、氧化的三萜烯、三萜烯的酯、三萜烯的酸、三萜烯的醇、葫蘆素、具有5-40個C原子的萜類化合物部分、長鏈羥基脂肪酸部分、樹脂酸、在留體骨架上構建的三萜類化合物。在本發(fā)明的范圍內，提取物可以為用于口服給藥、靜脈內給藥、肌肉內給藥、皮下給藥、腹膜內給藥、直腸給藥、鼻內給藥、經皮給藥、皮上給藥、舌下給藥等的任何已知的形式。此外，提取物還可以為任何已知的醫(yī)藥的鹽形式，并且可以包含用于著色、風味、口味、 質地等的添加劑。此外，本發(fā)明的提取物還包含額外的治療因子作為加入的添加劑，該添加劑提供了額外的效力和/或結合的治療作用。所述的添加劑可以為營養(yǎng)因子，從而產生具有治療作用的營養(yǎng)食品或食物組合物。此類添加劑的實例為糖、維生素、礦物質、氨基酸、 金屬、油、脂肪酸、醇、溶劑和其他植物提取物。本發(fā)明的提取物可以為由所述的親脂性成分在合適的基材或吸附在任何已知的賦形劑上形成的固體形式的組合物或溶液。本發(fā)明的提取物可以可任選地經過進一步加工從而改變其性質、形式、形狀、顏色、質地，并且增加其效果和可接受性。任何這種改變形式的所述提取物都在本發(fā)明的范圍內。此類改變方法的實例為提取物的標準化、分級從而得到不同的級份、均化、強化等。本發(fā)明的提取物可以為在本發(fā)明的范圍內的級份形式。可以通過任何已知的手段對提取物進行分級，例如HPLC-高效液相色譜、氣相色譜(GC)等。在本發(fā)明的范圍內，任何所述的級份或其混合物都可以構成本發(fā)明的提取物。優(yōu)選的是非極性的烴溶劑。更優(yōu)選的是，所述的溶劑為η-己烷。為了更清楚地理解本發(fā)明，在未限定本發(fā)明的范圍的條件下，下文將描述本發(fā)明的一些實施方案。實施方案1 1.取得所述的1 植物的根和根莖，并進行目光干燥。手工撿出外來顆粒。2.通過噴灑器對植物體進行水洗，從而消除沙和污物。3.然后，在真空下對植物體進行空氣干燥從而減少水分。4.然后，對植物體進行人工研磨，并將研磨的物體進行空氣干燥從而消除痕量的水分。5.將所述物體的批料進行稱重，并裝載到反應器(提取容器)中。6.加入己烷并加入固體-液體混合物。(備選物為任何其他的非極性溶劑)7.對加熱的混合物進行持續(xù)攪拌。8.使包含所述的反應的提取方法進行大約M小時的時間。9.將植物體與溶液分離。10.在真空下，將溶液轉移至另一個容器中。11.將溶液過濾三次，從而消除懸浮的物體和未溶解的物體，此后將溶液送至反應容器(蒸發(fā)儀)中，在此，溶劑在真空下被蒸發(fā)。在蒸發(fā)過程中，將溫度保持低于70°C。12.回收溶劑并送至用于提取再利用。13.將由蒸發(fā)得到的固體殘余物在受控的氣氛下在真空中進行空氣干燥。干燥的材料為本發(fā)明的提取產物并將相同的材料送至用于測試。實施方案2 1.與實施方案1的步驟1和2相同。2.通過機械手段將1 植物體研磨成小塊。3.量取批料，并加載至反應器(提取裝置)中。4.將溶劑、戊烷和醋酸乙酯的混合物裝載至反應器中。(備選物戊烷、醋酸乙酯、 丙酮、η-己烷、醚、氯仿和四氫呋喃的任意混合物)。5.加熱反應器的內容物，并進行持續(xù)攪拌。提取進行大約36小時。6.將植物體與溶液分離。7.在真空下，將溶液轉移至另一個容器中。8.將溶液過濾三次，并將澄清的液體在真空下在大約80°C下蒸發(fā)。9.回收溶劑。10.收集由蒸發(fā)得到的固體殘余物，并在真空下在氮氣氣氛(備選地為二氧化碳) 中進行空氣干燥。
11.干燥的產物為本發(fā)明的產物提取物。將其送至用于測試。實施方案3 1.與實施方案1的步驟1和2相同。2.將1 植物體壓碎形成糊狀物，并與足量的水混合。3.加入有機酸(備選地為無機酸)從而降低pH以便引發(fā)糖苷的酯化反應。4.持續(xù)攪拌大約M小時。5.在該節(jié)段，加入η-己烷溶劑(備選地為石油醚)，并在攪拌下持續(xù)提取大約4 小時。6.到出溶液并過濾。7.在真空下，通過在大約75°C下加熱使溶劑由溶液中蒸發(fā)。8.收集半固體殘余物，并在真空下在大約80°C下凍干，再進一步加工從而得到粉末形式的產物。9.所得的粉末為本發(fā)明的提取產物，并送至用于測試。實施方案4 1.與實施方案1的步驟1和2相同。2.將1 植物體研磨成糊狀物，并進行蒸汽蒸餾。3.將蒸氣冷凝，并收集蒸氣蒸餾后的殘余溶液。4.加入酯酶。調節(jié)pH和溫度，并將溶液攪拌大約6小時。5.在真空下將溫度升至大約100°C，從而使酶變性。6.然后冷卻溶液。7.加入石油醚，并將混合物攪拌大約4小時。8.過濾溶液從而消除酶殘渣和未溶解的顆粒。9.所述的溶液分離成石油醚層和水性層。10.在真空下加熱石油醚，從而使溶劑蒸發(fā)。11.所收集的固體殘余物為本發(fā)明的提取產物。12.將提取產物空氣干燥并送至用于測試。13.使水由水性層中蒸發(fā)。在真空下進行蒸發(fā)。殘余物包含在Hi植物體中的水溶性成分。實施方案5 1.與實施方案1的步驟1、2和3相同。2.通過機械手段將1 植物體研磨成小塊。3.量取批料，并加載至提取反應器中。4.將測量量的溶劑乙醇(備選物甲醇)裝載至反應器中。5.將反應器的內容物加熱至所需的水平，同時進行攪拌，并將這種條件保持大約 24小時。6.在真空下，將溶液轉移至另一個反應容器中。7.將溶液過濾三次。8.將水加入到溶液中，并攪拌大約1小時。9.加入溶劑η-己烷(備選為戊烷)，并將內容物攪拌大約6小時。
10.使溶液靜置大約4小時。11.在真空下進行蒸發(fā)，從而蒸餾出溶劑，由此回收固體或半固體形式的本發(fā)明的提取產物。12.將包含水和醇的平衡液體蒸餾，從而回收溶劑。13.在真空下，在氮氣氣氛(備選為CO2氣氛)中對產物進行空氣干燥，并送至用于測試和微生物檢測。實施方案6 1.與實施方案1的步驟1至3相同。2.與實施方案5的項2相同。3.量取Hi植物體的批料，并加載至提取反應器中。4.使用所需量的η-己烷(本實施方案的備選溶劑為戊烷、1，4_ 二惡烷、二乙醚和石油醚)來裝載反應器。5.將反應器的內容物加熱至所需的水平，并攪拌大約M小時。6.在真空下，將溶液轉移至另一個容器中，并過濾三次。7.在真空下加熱溶液從而使溶劑蒸發(fā)，由此得到固體或半固體形式的本發(fā)明的提取產物。8.在真空下，在氮氣氣氛(備選為CO2氣氛)中通過空氣干燥消除產物中的殘余溶劑。9.將產物送至用于物理性質的測試以及微生物檢測。除了上文描述的以外的實施方案和變體對于本領域的技術人員而言都是可行的， 并且它們都在本發(fā)明的范圍和實質內。
權利要求
1.一種玄叁科植物家族的植物體的提取物或其級份，該提取物及其級份在預防、消除、 治療和管理由病毒、其他病原體和毒性物質引起的多種肝臟紊亂和疾病中，在預防、消除、 治療和管理由一般的DNA和RNA類病毒引起的感染和疾病中，在預防、消除、治療和管理與多種病毒、真菌、細菌和原生動物有關的感染和疾病/紊亂中，在預防、消除、治療和管理在生物技術和發(fā)酵工業(yè)中遭遇的對培養(yǎng)物的病毒感染中用作藥物、營養(yǎng)和食物組合物；用作保肝試劑；與肝臟、其他器官和系統(tǒng)有關的以及在人類和動物受試者的健康和護理中及在研究和工業(yè)中用于其他應用的預防試劑，所述的提取物包含所述的植物家族的親脂性構成部分，所述的主要的親脂性構成部分為所述的植物家族的一種或多種萜烯和脂肪酸。
2.根據(jù)上述權利要求1所述的提取物，其中所述的提取物中所述的親脂性成分高于大約80重量％。
3.根據(jù)上述權利要求2所述的提取物，其中所述的主要的親脂性成分包含所述的植物家族的一種或多種脂肪酸和萜烯，所述的脂肪酸和萜烯的含量占所述的提取物中所述的親脂性成分的多于大約50重量％。
4.根據(jù)上述權利要求1至3的任意一項中所述的提取物，其中所述的提取物中所述的非親脂性成分為大約0. 01重量％ -20重量％。
5.根據(jù)上述權利要求1至4的任意一項中所述的提取物，其中所述的提取物中水溶性成分的量占所述的提取物中所述的親脂性成分的量的大約0.01重量％ -10重量％。
6.根據(jù)上述權利要求1至5的任意一項中所述的提取物，其中所述的提取物中苦味的且有氣味的成分的量不超過大約0. 5重量％。
7.根據(jù)上述權利要求1至6的任意一項中所述的提取物，所述的提取物衍生自才直物物禾中度古月黃連、Picrorhiza scrophularifIora Pennell 或 Neopicrorhiza scrophulariiflora,并且優(yōu)選得自兩種或多種所述的物種的混合物。
8.根據(jù)上述權利要求1至7的任意一項中所述的提取物，所述的提取物衍生自所述的植物部分之一，所述的植物部分選自植物的葉、莖、根莖、根、花、樹皮、種子、或其他部分， 并且優(yōu)選為根或根莖，更優(yōu)選為它們的混合物。
9.根據(jù)上述權利要求1至8的任意一項中所述的提取物，所述的提取物進一步包含所述的S植物家族的其他構成部分的一種或多種，例如糖苷酯、糖苷醚、脂肪族化合物、芳香化合物、糖苷羧化物、留體糖苷、長鏈脂肪酸、配糖體、酰化配糖體、脂肪醇、脂肪酸、留體酯、 甾體脂肪酸、留體醇、留醇、萜類化合物、留體三萜烯、氧化的三萜烯、三萜烯的酯、三萜烯的酸、三萜烯的醇、葫蘆素、具有5-40個C原子的萜類化合物部分、萜烯及它們的脂肪酸、酯、 甾醇、醇、鹽、碳水化合物、酸、皂苷、生物堿、苯酚、丹寧酸、木質素、類黃酮、激素、顏料、兒茶酚、蛋白質、肽、離子、氧化形式、烴、長鏈羥基脂肪酸部分、樹脂酸、在留體骨架上構建的三萜類化合物。
10.根據(jù)上述權利要求1至9的任意一項中所述的提取物，所述的提取物為適用于口服給藥、靜脈內給藥、肌肉內給藥、皮下給藥、腹膜內給藥、直腸給藥、鼻內給藥、經皮給藥、皮上給藥、舌下給藥或其他方式的任何已知的形式、或者為納米顆粒、或納米凝膠、或吸附在賦形劑上的形式。
11.根據(jù)上述權利要求1至10的任意一項中所述的提取物，所述的提取物為任何已知的醫(yī)藥上可接受的鹽。
12.根據(jù)上述權利要求1至11的任意一項中所述的提取物，所述的提取物進一步包含一種或多種添加劑，例如任何已知的治療成分、營養(yǎng)因子、顏色、風味、質地和有氣味的成分。
13.—種通過提取玄參科家族的一種或多種植物的植物體而獲得的提取物，該提取物在預防、消除、治療和管理由病毒、其他病原體和毒性物質引起的多種肝臟紊亂和疾病中， 在預防、消除、治療和管理由一般的DNA和RNA類病毒引起的感染和疾病中，在預防、消除、 治療和管理與多種病毒、真菌、細菌和原生動物有關的感染和疾病/紊亂中，在預防、消除、 治療和管理在生物技術和發(fā)酵工業(yè)中遭遇的對培養(yǎng)物的病毒感染中用作藥物、營養(yǎng)和食物組合物；用作保肝試劑；與肝臟和其他器官有關的以及在人類和動物受試者的健康和護理中及在研究和工業(yè)中用于其他應用的預防試劑。
14.根據(jù)上述權利要求1至13的任意一項中所述的提取物的級份或級份的混合物，所述的級份是通過已知的分級手段獲得的，例如高效液相色譜(HPLC)、或氣相色譜(GC)、或其他手段。
15.根據(jù)上述權利要求1至14的任意一項中所述的提取物在預防、消除、治療和管理由病毒、真菌、細菌和原生動物在人類和動物受試者中引起的感染和疾病中的用途。
16.根據(jù)上述權利要求15所述的提取物的用途，其中所述的感染和疾病為人類和動物受試者的肝臟的感染和疾病。
17.根據(jù)上述權利要求14至15的任意一項中所述的提取物的用途，其中所述的感染和疾病由RNA類的病毒引起。
18.根據(jù)上述權利要求14至15的任意一項中所述的提取物的用途，其中所述的感染和疾病是源自DNA類的病毒的感染和疾病。
19.根據(jù)上述權利要求15所述的提取物的用途，其中所述的感染和疾病為皰疹、病毒性肝炎、流感、口咽念珠菌病、接合菌病、孢子絲菌病、分枝桿菌肺結核、鏈球菌肺炎、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、以及其他感染和疾病中的一種。
20.根據(jù)上述權利要求15至19的任意一項中所述的提取物的用途，其中所述的提取物包含用于額外或補充治療作用的添加劑；和/或用于營養(yǎng)、顏色、質地、風味、氣味和其他的因子。
21.一種由玄參科植物家族的一種或多種植物的植物體進行提取的方法，該方法包括以下步驟得到所述的待提取的植物體；根據(jù)需要將所述的植物體進行準備操作，例如切害ι]、切碎、漂白、干燥、粉碎、研磨、篩分或其他方法；將得自所述的準備步驟的所述的植物體與預定的非水性溶劑、溶劑系列或溶劑混合物接觸，其中優(yōu)選的是，所述的非水性溶劑、溶劑系列或溶劑混合物在預定的溫度及預定的持續(xù)時間下通過以系列、平行或混雜的排列排列成的一個或多個提取操作來提取所述的植物體中的所述的親脂性成分；通過任何已知的手段在所述的方法中將所述的提取物溶液與所述的植物體分離；通過任何已知的手段將所述的溶劑與所述的提取物溶液分離，例如通過蒸發(fā)溶劑從而產生濃縮的提取物溶液或固體形式的產物，所述的方法可任選地包含任何一個或多個已知的處理操作，例如傾倒、過濾和其他操作。
22.根據(jù)上述權利要求21所述的提取方法，其中所述的溶劑、溶劑系列或溶劑混合物為以下溶劑之一或它們的混合物二氯甲烷，己烷，η-己烷，C-己烷，甲苯，t-BuOMe，Et2O,甲基異丁基酮，醋酸乙烯酯，醋酸乙酯，叔丁醇，DMA，異丙醇，甲酸，甲酰胺，甲乙酮，N, N-二甲基甲酰胺，醋酸，丙酮，乙腈，苯，I" 丁醇，2- 丁醇，2- 丁酮，1- 丁醇，四氯化碳，氯苯，氯仿，環(huán)己烷，1，2_氯乙烷，二乙醚，二乙二醇，二甘醇二甲醚(二乙二醇二甲基醚)，1，2_甲氧基-乙烷(乙二醇二甲醚，DME)，二甲基醚，二甲基-甲酰胺(DMF)，二甲基亞砜(DMSO)， 二惡烷，乙醇，醋酸乙酯，乙二醇，甘油，庚烷，六甲基磷酸酰胺(HMPA)，六甲基磷酸三酰胺 (HMPT)，甲醇，甲基叔丁基醚(MTBE)，二氯甲烷，N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)，硝基甲烷，戊烷，石油醚(石油英)，1_丙醇，2-丙醇，吡啶，四氫呋喃(THF)，三乙基胺，鄰-、間-和對-二甲苯，白精油，植物油，石腦油，松節(jié)油，含氧溶劑(例如醇，乙二醇醚，醋酸甲酯，醋酸乙酯， 酮，酯，乙二醇醚，乙二醇酯)；用作溶劑的有機化合物包括芳香化合物和其他烴，醇，酯， 醚，酮，胺，硝酸化和商代烴；以及無機溶劑，例如氨水，硫磺酸，氯氟磺酰，表面活性劑，洗滌齊U，PH緩沖劑，水和重水。
23.根據(jù)上述權利要求21至22的任意一項中所述的提取方法，其中所述的溶劑為 η-己燒。
24.根據(jù)上述權利要求21至23的任意一項中所述的提取方法，其中所述的提取的植物體為所述的植物物種印度胡黃連、Picrorhiza scrophularifIora Pennell或 Neopicrorhiza scrophulariifIora,并且優(yōu)選得自兩種或多種所述的物種的混合物。
25.根據(jù)上述權利要求21至M的任意一項中所述的提取方法，其中所述的待提取的植物體包含莖、葉、花、種子、樹皮、根莖、根或者所述的植物的其他部分，并且優(yōu)選為所述的根或根莖，更優(yōu)選為所述的根和根莖的混合物。
26.—種基本如本文所述的由玄參科植物家族的一種或多種植物的植物體進行提取的方法。
27.根據(jù)上述權利要求1至14的任意一項中所述的提取物或其任意的級份，該提取物或其任意的級份是通過上述權利要求21至沈的任意一項中所述的方法制得的。
28.根據(jù)上述權利要求1至11的任意一項中所述的提取物，其中所述的提取物配制成任何一種已知的形式以用于給藥，例如片、囊片、膠囊、貼片、軟膠囊、局部凝膠、糖漿、補藥、粉末、泡騰劑、混合飲劑、咀嚼劑、注射劑、納米顆粒、和其他形式。
全文摘要
本發(fā)明公開的胡黃連植物的提取物以及制備該提取物的方法。所述的提取物具有強的對抗DNA和RNA類病毒的抗病毒作用，并且還具有對抗細菌、真菌和原生動物微生物體的作用。所述的提取物基本包含在玄參科植物家族中形成的親脂性化合物，特別是其萜烯和脂肪酸。所述的提取物可以額外包含在所述的植物家族中形成的其他所述的親脂性化合物以及糖苷的配糖體。本發(fā)明公開的多種提取溶劑。
文檔編號A61P31/20GK102481328SQ201080034535
公開日2012年5月30日 申請日期2010年8月11日 優(yōu)先權日2009年8月12日
發(fā)明者M·么達薩尼, S·B·迪威 申請人:M·么達薩尼