專利名稱：用于誘導(dǎo)特異性免疫耐受的組合物的制作方法
用于誘導(dǎo)特異性免疫耐受的組合物本發(fā)明涉及在宿主中誘導(dǎo)針對肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)(active principle)的免疫耐受的組合物，特別地針對治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)，肽或蛋白質(zhì)自身抗原，誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)，或者肽或蛋白質(zhì)移植抗原。本發(fā)明還涉及治療哺乳動物(包括人)的方法。已知肝臟有助于誘導(dǎo)免疫耐受。這一點可以通過肝臟中食物抗原的耐受以及對肝臟異體移植的接受來舉例證明。對某些遞送到肝臟的外源性抗原的抗原特異性耐受也可以證明。E. Breous等的文章H印atology，August 2009，612至621頁報道了肝臟調(diào)節(jié)T細胞和枯否氏細胞是對靶向鼠肝臟之抗原的全身性T細胞耐受性的重要中介物。他們報道了在肝靶向基因轉(zhuǎn)移模型中細胞毒T淋巴細胞對非自身抗原的應(yīng)答受到肝臟調(diào)節(jié)T細胞的控制，肝臟調(diào)節(jié)T細胞應(yīng)答于所述抗原而分泌免疫抑制性細胞因子白介素IL-10。此外，在此背景下，使得枯否氏細胞(Kupffer cell)致耐受而不是產(chǎn)生免疫應(yīng)答?？莘袷霞毎闹履褪茏饔靡灿蒀. Ju等報道，Chem. Res. Toxicol. 2003，16 :1514 1519。另外參見 Α. H. Lau 等 Gut 2003，52 1075 1078。本發(fā)明的目的是提供可用于誘導(dǎo)針對多種肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的免疫耐受的組合物。特別地，其目的是提供針對一種或多種肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的特異性免疫耐受。因此，本發(fā)明的一個目的是在宿主中誘導(dǎo)針對肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的免疫耐受的組合物，所述組合物包含含有所述活性物質(zhì)的紅細胞。此活性物質(zhì)可以是治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)，肽或蛋白質(zhì)自身抗原，誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)，肽或蛋白質(zhì)移植抗原，以及其混合物。所述活性物質(zhì)可以是天然的、合成的或重組來源的。“含有”分子旨在涵蓋含有目的肽、多肽或蛋白質(zhì)以及另一部分的分子，所述另一部分可以是任何來源并且對于所述肽、 多肽或蛋白質(zhì)的作用無害。例如，這些部分包括半抗原。不受理論的約束，認為本發(fā)明的組合物誘導(dǎo)抗原特異性調(diào)節(jié)T細胞(Treg)并且產(chǎn)生免疫抑制細胞因子或白細胞介素，特別是IL-10。生物的和/或來源于生物技術(shù)的肽、多肽或蛋白質(zhì)越來越多被用作治療劑。然而， 公認這些物質(zhì)可誘導(dǎo)體液和/或細胞免疫應(yīng)答。針對這些治療劑的免疫反應(yīng)的后果多種多樣從沒有任何臨床意義的抗體短暫出現(xiàn)到嚴重威脅生命的狀況。潛在的臨床后果是嚴重的過敏性反應(yīng)、療效降低和誘導(dǎo)自身免疫(包括針對所述肽、多肽或蛋白質(zhì)之內(nèi)源形式的抗體)。(European Medicines Agency, Committee for Medicinal products for human use (CHMP)，Guidelines on immunogenicity assessment of biotechnology-derived therapeutic proteins, Draft, London,24 January 2007)0治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)定義為有效治療疾病的肽、多肽或蛋白質(zhì)，或者是含有有效治療疾病之分子的肽、多肽或蛋白質(zhì)，所述疾病尤其是通過施以該分子可得到糾正的缺陷所引起的疾病。在一個實施方案中，所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為抗體。涵蓋其任何片段。在另一個實施方案中，所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為凝血因子。涵蓋其任何片段。在另一個實施方案中，所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為酶。涵蓋其任何片段。在另一個實施方案中，所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為生長因子。涵蓋其任何片段。術(shù)語片段用于涵蓋已知代替整個分子來有效治療相關(guān)疾病的肽、多肽或蛋白質(zhì)的任何片段。這些定義也涵蓋糖基化形式。在一個實施方案中，所述活性物質(zhì)為溶酶體酶。所述溶酶體酶可以是用于通過酶替代療法(enzyme replacement therapy, ERT)治療或糾正溶酶體儲積癥的酶，所述溶酶體儲積癥包括龐貝氏癥(pompe disease)(糖原貯積病II型(Glycogen storage disease type II))、法布瑞氏癥(Fabry disease)和粘多糖儲積癥(Mucopolysaccharidose)MPS I。 例如-α葡萄糖苷酶(alphaglucosidase)，如治療龐貝氏癥的Myozyme ；-拉羅尼酶(Iaronidase)，如治療MPS I 的 Aldurazymen0 ；-α 半乳糖昔醇 A(alphagalactosidase Α)或阿力口糖醇 α (agalsidase alpha), 如治療法布瑞氏癥的Fabrazyme 和R印lagal 。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)為可用于治療血友病的凝血因子。所述凝血因子可以是因子VIII，特別地用于治療血友病A。所述凝血因子可以是因子IX，特別地用于治療血友病B。所述凝血因子可以是因子VII，其用于治療兩種血友病。肽或蛋白質(zhì)自身抗原定義為是正常組織的成分并且在患者中作為有害的體液或細胞介導(dǎo)免疫應(yīng)答靶標(如在自身免疫疾病中)的抗原。在一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(liheumatoid Arthritis, RA)的。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對多發(fā)性硬化(Multiple Sclerosis, MS)的。例如所述活性物質(zhì)為髓磷脂堿性蛋白質(zhì)。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對青少年糖尿病的，如1型糖尿病和 LADA(Latent Autoimmune Diabetes of Adults，成人潛伏性自身免疫糖尿病)。例如，β 細胞抗原，特別是谷氨酸脫羧酶(glutamic acid decarboxylase，GAD)、前胰島素和胰島素樣生長因子 2(insuline-like growth factor-2，IGF2)、和其混合物。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對葡萄膜炎的。例如，視網(wǎng)膜S抗原。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對炎性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)的，如克羅恩病(Crohn，s disease)和潰瘍性結(jié)腸炎。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對銀屑病的。在另一個實施方案中，所述活性物質(zhì)是針對獲得性重癥肌無力的。例如，乙酰膽堿受體。誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)定義為在宿主中負責(zé)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)，所述反應(yīng)可包括過敏性休克。在一個實施方案中，所述誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)為以上提到的治療性
5活性肽、多肽或蛋白質(zhì)，其中本發(fā)明使得能夠避免一些或任何對這些物質(zhì)的過敏發(fā)應(yīng)以及對其的中和。在另一個實施方案中，所述誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)為食物來源的或者任何其他可進入血液循環(huán)并引起過敏反應(yīng)的肽或多肽分子，例如在經(jīng)口攝入后。肽或蛋白質(zhì)移植抗原定義為移植的組織所呈現(xiàn)的抗原，其參與患者中的移植物排斥，例如移植物抗宿主病(Graft Versus Host Disease，GVHD)。在一個實施方案中，所述移植抗原是參與腎臟移植排斥的抗原。在一個實施方案中，所述移植抗原是參與心臟移植排斥的抗原。在一個實施方案中，所述移植抗原是參與肝臟移植排斥的抗原。術(shù)語“宿主”優(yōu)選地指人，但也指動物，特別是寵物(尤其狗或貓)和體育動物(尤其是馬)。根據(jù)本發(fā)明，所述紅細胞含有(即封裝有)活性物質(zhì)(active principle，AP)，其表示AP位于或基本上位于紅細胞內(nèi)部。在一個實施方案中，所述組合物靶向網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的抗原呈遞細胞 (antigen-presenting cell, APC)。根據(jù)這一特征，所述紅細胞設(shè)計為、選為或修飾為促進對網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的抗原呈遞細胞(APC)的靶向。在一個優(yōu)選實施方案中，所述組合物靶向肝臟，尤其是枯否氏細胞。根據(jù)這一特征，所述紅細胞設(shè)計為、選為或修飾為促進肝臟靶向。遞送AP到肝臟的結(jié)果是誘導(dǎo)AP耐受性，尤其是AP特異性耐受性。這種耐受性的誘導(dǎo)涉及肝臟的致耐受性APC。這些細胞基本上是枯否氏細胞(Kupffer cell，KC)、未成熟的肝臟樹突細胞，和肝竇內(nèi)皮細胞。在一個優(yōu)選的實施方案中，所述組合物用于抑制APC的促炎反應(yīng)。根據(jù)這一特征， 所述紅細胞優(yōu)選地設(shè)計為或修飾為抑制APC的促炎反應(yīng)。在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明所述組合物包含含有AP并靶向肝臟的紅細胞。 所述組合物通過肝臟的APC，尤其KC，促進這些紅細胞的吞噬作用。根據(jù)第一個實施方案，所述紅細胞含有AP，并且為與識別所述紅細胞表面上表位的免疫球蛋白形成的免疫復(fù)合物形式，以促進肝臟的APC，尤其KC，對所述紅細胞的吞噬作用。所述組合物還使得促進巨噬細胞的吞噬作用成為可能。優(yōu)選地，所述免疫球蛋白為免疫球蛋白G?？捎脕懋a(chǎn)生足夠調(diào)理作用的抗體如抗凝血因子(anti-Iihesus)抗體、抗血型糖蛋白(anti-glycophorin)抗體、和抗CRl (CRl = 1型補體受體)抗體。優(yōu)選抗凝血因子抗體。根據(jù)另一個實施方案，所述靶向肝臟和/或抑制促炎癥應(yīng)答通過適當?shù)幕瘜W(xué)處理來進行，所述化學(xué)處理使用修飾紅細胞表面的試劑，特別地橋聯(lián)或交聯(lián)劑如雙(磺基琥珀酰亞胺基)辛二酸鹽(bis (sulphosuccinimidyl) suberate，BS3或BS3)、戊二醛或神經(jīng)氨酸酶。根據(jù)另一個實施方案，所述靶向肝臟和/或抑制促炎癥應(yīng)答通過使用離子載體來進行。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，離子載體表示一種脂溶性分子，其使得能夠穿過細胞膜的脂雙層來運輸離子。離子載體可以是，特別地脂溶性分子，如微生物所合成以用于運輸離子穿過細胞膜脂雙層的。一般來說，所述離子載體能夠與離子形成復(fù)合物并用作離子運
6載體。在一個實施方案中，所述離子載體與二價陽離子如鈣離子形成復(fù)合物。根據(jù)本發(fā)明，所述離子載體可與鈣一起使用，其誘導(dǎo)細胞內(nèi)鈣濃度的增加和磷脂酰絲氨酸的暴露，導(dǎo)致紅細胞的早衰。例如，可使用鈣離子載體A23187(卡西霉素)。認為，離子載體例如A23187誘導(dǎo) RBC細胞內(nèi)鈣離子濃度的增加，導(dǎo)致細胞衰老，以及對衰老紅細胞的吞噬抑制促炎癥應(yīng)答。 其根據(jù) Romero P. J. , RomeroE. A, Blood Cells Mol，Dis，25 (1999) 9-19 ；和 Bratosin D. et al. , Cell Death Differ,8(2001) 1143-11560在一個特定實施方案中，將至少兩種靶向方法相組合，例如，所述組合物包含含有 AP的紅細胞，所述紅細胞是免疫復(fù)合物的形式并經(jīng)過化學(xué)處理以使得促進它們在肝臟中被攝取以及被APC (特別是KC)所吞噬。在一個實施方案中，所述紅細胞來源于患者自身。在另一個實施方案中，所述紅細胞來源于血型匹配的捐獻者。本發(fā)明的組合物在同一紅細胞中可包含一種或多種AP，或在不同的紅細胞中包含每一種AP。在紅細胞中封裝活性物質(zhì)的技術(shù)是已知的，本文優(yōu)選的裂解-再封裝的基本技術(shù)描述于專利EP-A-101341和EP-A-679101，本領(lǐng)域技術(shù)人員可參考這些技術(shù)。根據(jù)此技術(shù)， 向透析元件(如透析管或透析袋)的第一區(qū)室連續(xù)地供應(yīng)紅細胞懸浮液，而第二區(qū)室含有相對于紅細胞懸浮液來說是低滲的水溶液，以裂解紅細胞；然后，在再封裝單元里，在AP存在下，通過增加滲透壓和/或膨脹壓誘導(dǎo)紅細胞的再封裝，之后收集含有AP的紅細胞懸浮液。在到目前為止所描述的方案中，優(yōu)選W02006/016247給出的方法，該方法使得可以有效、可重復(fù)、安全、穩(wěn)定地封裝AP。該方法包括以下步驟1.在等滲溶液中配制紅細胞壓積水平大于或等于65%的紅細胞沉淀懸液，冷卻至+1°C 至+8°C。2.用來自所述紅細胞沉淀的紅細胞樣品測定滲透脆性，步驟1和步驟2可以按任何次序?qū)嵤?包括平行實施)，3.在持續(xù)維持在+1 ！至+8°C的溫度下，在相同腔室內(nèi)進行的細胞裂解和AP過程， 其包括使紅細胞壓積水平大于或等于65%紅細胞懸浮液和冷卻至+1°C至+8°C的低滲裂解液通過透析袋；并且根據(jù)之前測定的滲透脆性調(diào)節(jié)裂解參數(shù)；和4.在高滲溶液存在下，在溫度為+30至+40°C的第二腔室中進行的再封裝過程。“內(nèi)化”旨在表示AP滲透進入紅細胞。特別的，為了透析，將紅細胞沉淀以高紅細胞壓積水平懸浮在等滲溶液中，紅細胞壓積水平大于或等于65%，優(yōu)選的大于或等于70%，以及將該懸液冷卻到+1 ！至+8°C，優(yōu)選+2°C至+6°C，通常+4°C附近。根據(jù)一個特定實施方案，紅細胞壓積水平為65%至80%， 優(yōu)選70%至80%。有利地，在臨細胞裂解之前測定紅細胞的滲透脆性。有利地，紅細胞或含有它們的懸液處于接近或等于用來溶解它們的溫度。根據(jù)本發(fā)明的另一個有利特征，滲透脆性測量快速地進行，即裂解過程在取出樣品后很短時間內(nèi)實施。優(yōu)選地，取出樣品到開始裂解這段時間少于或等于30分鐘，優(yōu)選為少于或等于25分鐘，甚至少于或等于20分鐘。有關(guān)在測量和考慮滲透脆性的情況下實施裂解再封裝過程的形式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可參考W02006/016M7以得到更多細節(jié)。根據(jù)本發(fā)明的一個特征，本發(fā)明的組合物最終包含紅細胞壓積水平為約40%至約 70%，優(yōu)選約45%至約55%，更優(yōu)選約50%的紅細胞懸液。優(yōu)選地包裝成約1至約250ml 的體積。包裝物優(yōu)選為血袋、注射器和類似的適于血液輸注或施用的形式。優(yōu)選地，對應(yīng)于醫(yī)學(xué)處方的所封裝AP的量全部包含在血袋、注射器等中。本發(fā)明的另一個目的是用于在宿主中誘導(dǎo)針對肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的免疫耐受的方法，所述組合物包含含有選自下列的活性物質(zhì)的紅細胞治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)，肽或蛋白質(zhì)自身抗原，誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)，以及肽或蛋白質(zhì)移植抗原。該方法包括向宿主施用有效量的本發(fā)明組合物，特別是通過靜脈內(nèi)、注射或輸注，優(yōu)選通過輸注。根據(jù)本發(fā)明的一個特征，施用約Iml至約250ml，尤其是約IOml至約250ml，通常是約IOml至約200ml的紅細胞懸液。施用具有合適的紅細胞壓積水平的所述懸液，一般為約40%至約70%，優(yōu)選地為約45%至約55%，更好地為約50%。紅細胞對于同時出現(xiàn)的活性物質(zhì)(裝入的活性物質(zhì))可以有它們自身的耐受性。因此，大數(shù)量的紅細胞可有利于耐受作用。另一方面，如上所述的靶向肝臟可允許使用低劑量的紅細胞。因此，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可選擇在患者中使用的最優(yōu)量的活性物質(zhì)和紅細胞，也可以考慮是否處理紅細胞以靶向肝臟。本發(fā)明還有一個目的是本發(fā)明組合物用于誘導(dǎo)針對所施用的紅細胞中所存在的活性物質(zhì)之特異性免疫耐受的用途。本發(fā)明的另一個目的是本發(fā)明的組合物，其用作誘導(dǎo)針對所施用的紅細胞中所存在的活性物質(zhì)之特異性免疫耐受的藥物。下面通過以采用非限制性實施例之實施方案的方式來詳細描述本發(fā)明，其參考以下附圖

圖1是表示表達F0XP3的⑶4T細胞之百分比的圖。圖2是表示產(chǎn)生IL-10的調(diào)節(jié)性⑶4+⑶25+T細胞之百分比的圖。圖3是表示脾臟中表達F0XP3的⑶4T細胞之百分比的圖。圖4是表示肝臟中表達F0XP3的⑶4T細胞之百分比的圖。圖5是表示OVA特異性⑶8T細胞之百分比的圖。實施例1 在小鼠紅細胞中封裝FITC-葡聚糖使用柱式低滲透析將FITC-葡聚糖熒光染料(70kDa)封裝到小鼠來源(0F1小鼠) 的紅細胞中。將血液離心，然后用PBS洗3遍。透析之前，在加至8mg/ml終濃度的FITC-葡聚糖存在下，將紅細胞壓積調(diào)節(jié)到70%。以aiil/分鐘的速率相對于具有低滲透壓的裂解緩沖液(逆流速率為15ml/分)透析紅細胞。用高滲溶液將離開柱的裂解紅細胞再次細胞化并在37°C孵育30分鐘。用含有葡萄糖的PBS洗數(shù)次以后，將細胞調(diào)節(jié)到50%紅細胞壓積。實施例2.用ImM的雙磺基琥珀酰亞胺辛二酸鹽(BS3)對含F(xiàn)ITC-葡聚糖的紅細胞的化學(xué)處理將封裝了 FITC-葡聚糖的紅細胞懸液洗數(shù)次，然后用PBS調(diào)節(jié)到1. 7X IO8細胞/ μ ，并與一體積的2mM BS3緩沖液(所述BS3溶液含有0. 09%的葡萄糖和磷酸鹽緩沖液，PH為7. 4。)混合，這樣得到ImM的BS3終濃度。細胞在室溫下孵育30分鐘。通過加入一體積的20mMtris-HCL和140mM的NaCl來停止反應(yīng)。在室溫孵育5分鐘之后，將混合物于 40C以800g離心5分鐘。然后將細胞用含葡萄糖的PBS (經(jīng)800g離心)洗兩次，用6%的 SAG-BSA (以IOOOg離心)洗一次，每次10分鐘，之后調(diào)節(jié)到紅細胞壓積為50%，得到終產(chǎn)
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ΡΠ O^MM 3.用5mM的雙磺某琥珀酰亞胺辛二酸鹽(BS3)對含F(xiàn)ITC-葡聚糖的紅細胞的化學(xué)處理將封裝了 FITC-葡聚糖的紅細胞懸液洗數(shù)次，然后用PBS調(diào)節(jié)到1. 7X IO8細胞/ μ 1，并與一體積的IOmM BS3緩沖液(所述BS3溶液含有0. 09%的葡萄糖和磷酸鹽緩沖液， PH為7.4。)混合，以獲得5mM的BS3終濃度。細胞在室溫下孵育30分鐘。通過加入一體積的20mM的tris-HCL和140mM的NaCl來停止反應(yīng)。在室溫孵育5分鐘之后，將混合物于 40C以800g離心5分鐘。然后將細胞用含葡萄糖的PBS (以800g離心)洗兩次，用6%的 SAG-BSA (以IOOOg離心)洗一次，每次10分鐘，之后調(diào)節(jié)到紅細胞壓積為50%，得到終產(chǎn)
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ΡΠ O實施例4用A23187離子載體處理含F(xiàn)ITC-葡聚糖的紅細胞將封裝了 FITC-葡聚糖的紅細胞懸液用含H印es IOmM, NaC1140mM, BSA 0. 1%, CaCl2 2. 5mM的緩沖液A洗一次，之后用緩沖液A將懸浮液稀釋到IXlO6細胞/μ 。將 DMSO中的離子載體濃度用緩沖液A稀釋，然后加入到細胞懸液中，得到0. 15 μ Μ、0. 2 μ M或 0. 3μΜ的終濃度。將細胞在37°C下孵育30分鐘。混合物于4°C以800g離心6分鐘。然后將細胞用含葡萄糖的PBS (以800g離心)洗兩次，用6%的SAG-BSA (以IOOOg離心)洗一次，得到終產(chǎn)品。實施例5.在小鼠中注射所述紅細胞后FITC-葡聚糖的生物分布制備如下5批次來自小鼠OFl的含有FITC-葡聚糖的紅細胞，所述紅細胞按實施例1制取，用BS3或離子載體處理或者不做處理(基于實施例2至4)批次1 不處理批次2 :BS3 ImM批次3 :BS3 5mM批次4 離子載體0· 2μ M批次5 離子載體0· 3μΜ將每一批次在Jl通過IV注射進OFl小鼠。注射后1小時30分鐘后處死小鼠，回收血液、脾臟、肝臟和骨髓50μ 1血液的等分試樣，對于脾臟、肝臟和骨髓則是這些器官的所有細胞研磨和勻漿處理后的50 μ 1等分試樣。將這些等分試樣在-20°C冷凍至少20分鐘，然后在室溫下緩慢融解。來自對照組小鼠的等分試樣用來制作FITC-葡聚糖標準濃度范圍；這些等分試樣隨后用125 μ 1不同濃度的FITC-葡聚糖裂解來建立標準濃度范圍。用125 μ 1的蒸餾水裂解待分析的樣品等分試樣。然后在這些等分試樣中加入 175 μ 1 12%的TCA。然后，將混合物于4°C以15000g離心10分鐘。取200μ1的酸性上清，在熒光檢測G94nm激發(fā)，521nm發(fā)射)前加入500μ1 0.4Μ的三羥乙基胺。每個樣品的FITC-葡聚糖濃度可以利用標準濃度范圍算出，然后就可以推算出相應(yīng)器官中FITC-葡聚糖的比例。
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OFl小鼠中注射所述紅細胞后1小時30分時FITC-葡聚糖的生物分布(表1)
權(quán)利要求
1.用于在宿主中誘導(dǎo)針對肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的免疫耐受的組合物，所述組合物包含含有所述肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的紅細胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述活性物質(zhì)為治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)，肽或蛋白質(zhì)自身抗原，誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)，或者肽或蛋白質(zhì)移植抗原。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為抗體或其片段。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為凝血因子或其片段。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為酶或其片段。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)為生長因子或其片段。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其用于酶替代療法(ERT)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的組合物，其中所述活性物質(zhì)為溶酶體酶。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的組合物，其中所述溶酶體酶為用于龐貝氏癥(糖原貯積病II型)、 法布瑞氏癥或粘多糖儲積癥MPS I的替代療法(ERT)的酶。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的組合物，其中所述溶酶體酶選自α葡萄糖苷酶、拉羅尼酶和α 半乳糖苷酶A或阿加糖酶α。
11.根據(jù)權(quán)利要求4的組合物，其用于治療血友病。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的組合物，其中所述凝血因子為因子VII、因子VIII或因子IX。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述活性物質(zhì)為用于治療自身免疫疾病的肽或蛋白質(zhì)自身抗原。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的。
15.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對多發(fā)性硬化(MQ的。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中所述活性物質(zhì)為髓磷脂堿性蛋白質(zhì)。
17.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對青少年糖尿病的。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其中所述活性物質(zhì)選自β細胞抗原、前胰島素、胰島素樣生長因子2(IGF2)和其混合物。
19.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對葡萄膜炎的。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的組合物，其中所述活性物質(zhì)為視網(wǎng)膜S抗原。
21.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對炎性腸病的。
22.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對克羅恩病的。
23.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對潰瘍性結(jié)腸炎的。
24.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的。
25.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對銀屑病的。
26.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其中所述活性物質(zhì)是針對獲得性重癥肌無力的。
27.根據(jù)權(quán)利要求沈的組合物，其中所述活性物質(zhì)為乙酰膽堿受體。
28.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述活性物質(zhì)為用于抗移植排斥的肽或蛋白質(zhì)移植抗原。
29.根據(jù)權(quán)利要求觀的組合物，其中所述移植抗原涉及腎臟移植排斥。
30.根據(jù)權(quán)利要求觀的組合物，其中所述移植抗原涉及心臟移植排斥。
31.根據(jù)權(quán)利要求觀的組合物，其中所述移植抗原涉及肝臟移植排斥。
32.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽或蛋白質(zhì)為食物來源的。
33.根據(jù)以上權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述紅細胞(1)含有所述活性物質(zhì)以及( 為與識別紅細胞表面上表位的免疫球蛋白形成的免疫復(fù)合物的形式以促進肝臟靶向。
34.根據(jù)權(quán)利要求33的組合物，其中所述紅細胞與抗凝血因子或抗血型糖蛋白A或抗 CRl的抗體形成免疫復(fù)合物。
35.根據(jù)權(quán)利要求33或34的組合物，其中所述免疫球蛋白為IgG。
36.根據(jù)以上權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述紅細胞經(jīng)化學(xué)處理從而靶向肝臟。
37.根據(jù)權(quán)利要求1至35中任一項的組合物，其用于抑制APC的促炎癥反應(yīng)。
38.在宿主中誘導(dǎo)針對肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的免疫耐受的方法，包括向所述宿主施用有效量的以上權(quán)利要求中任一項的組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及在宿主中誘導(dǎo)針對肽或蛋白質(zhì)活性物質(zhì)的免疫耐受的組合物，所述組合物包含含有活性物質(zhì)的紅細胞，所述活性物質(zhì)選自治療性肽、多肽或蛋白質(zhì)，肽、蛋白質(zhì)自身抗原，誘導(dǎo)過敏反應(yīng)的肽、多肽、或蛋白質(zhì)，以及肽或蛋白質(zhì)移植抗原。
文檔編號A61K38/43GK102596208SQ201080048552
公開日2012年7月18日 申請日期2010年10月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月27日
發(fā)明者揚·戈德弗蘭, 愛麗絲·班斯 申請人:愛瑞泰克藥物公司