專利名稱：一種含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥領(lǐng)域，涉及ー種抗腫瘤血管栓塞劑，具體涉及ー種含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
經(jīng)動(dòng)脈化療栓塞已被公認(rèn)為治療惡性腫瘤的最有效的保守療法，尤其是對原發(fā)或轉(zhuǎn)移性肝癌的應(yīng)用更為普遍。但化療栓塞劑的不良作用已成為影響患者治療后生存質(zhì)量和生存期的關(guān)鍵因素。迄今為止的各種形式的化療栓塞術(shù)都是針對腫瘤的局部治療，它取得了一定的局部療效，卻同時(shí)損害了肝功和機(jī)體免疫狀態(tài)，如碘化油對靶器官(如肝臟)的理化損傷。為了解決目前臨床最常用的西藥油性栓塞劑對靶器官的理化損傷，中藥栓塞劑的研究是ー個(gè)行之有效行的方法。有報(bào)道，目前作為血管栓塞劑用的抗腫瘤中藥膠質(zhì)制劑有報(bào)道的有白芨膠制劑和天冬膠制劑。白芨的主要成份為甘露聚糖、淀粉、揮發(fā)油等。白芨具有消腫生肌、收斂止血之功效，主要有止血作用。臨床上多用于治療各種體內(nèi)外出血癥、外傷、燒傷、燙傷、潰瘍及皮膚皸裂等。但白芨無明確的抗腫瘤作用，在臨床上沒有作為抗腫瘤藥來使用。治療結(jié)果表明， 白芨是收斂止血藥，其膠質(zhì)制劑作為血管栓塞劑吋，抗腫瘤功效有限，不具備扶正和提高免疫功能的作用。天冬有明確的抗腫瘤作用，臨床上長期而廣泛用于多種腫瘤的治療，且療效顯著。 天冬膠劑即為天冬中提取的有效抗腫瘤成分，加入含碘溶液，制成新型的栓塞劑，用于腫瘤的介入治療。比較白芨膠而言，天冬膠劑除具有栓塞腫瘤血管的作用外，還具有直接的抑制腫瘤作用，和扶正，提高免疫的功能。有關(guān)臨床流行病學(xué)調(diào)研報(bào)道，對介入患者各證候進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)介入會(huì)傷陰、 助熱、生濕。介入組陰虛等證型明顯增多，并認(rèn)為“陰虛可能為肝癌所特有的，· · 且要重視保護(hù)陰液?！倍於亲剃幖哑?，作為栓塞劑可以直接固護(hù)被化療藥物損傷的肝陰。同吋，天冬具有改善肝功能的作用和提高機(jī)體的免疫功能?，F(xiàn)有技術(shù)的天冬膠制劑是以天冬飲片經(jīng)水煎、過篩、濃縮、醇沉而得的天冬粗多糖，加上含碘溶液制成，其尚存在有一定的雜質(zhì)、純度不高等缺陷，難以制成血管內(nèi)使用的注射用劑型。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑及其制備方法。本發(fā)明的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑為精制的中藥膠質(zhì)制劑(以下簡稱精制天冬膠質(zhì)制劑)，能用于腫瘤血管栓塞，具有抗腫瘤藥效。本發(fā)明以脫蛋白的天冬提取物(天冬脫蛋白多糖)為主要成分，加上含碘的溶液制成抗腫瘤血管栓塞劑。本發(fā)明中，以中藥材天冬提取物脫蛋白后，以制得的天冬脫蛋白多糖細(xì)粉為溶質(zhì)，以含碘溶液為溶剤，制成精制天冬膠質(zhì)制劑，每100毫升精制天冬膠質(zhì)制劑中含2. 0克至 50.0克天冬脫蛋白多糖。 所述含碘溶液可以是臨床上使用的各種含碘造影剤。本發(fā)明所涉及的中藥材天冬來源為中國藥典2000年版一部所收載中藥，并符合藥典質(zhì)量要求。所述天冬，是天冬的塊根及根莖，主要化學(xué)成分含留體皂甙，又含7個(gè)寡糖(oligosaccharide) I VL分別為多種低聚糖，還含有葡萄糖，果糖，蔗糖(sucrose)， β-谷甾醇(β-sitosterol)，5-甲氧基甲基糖醛(5-methoxymenthyl furfural)以及瓜氨酸(citrul 1 ine)、天冬酰胺(asparagine)、絲氨酸(serine)等多種氨基酸。從塊根抑瘤有效部位中分離出4種多糖天冬多糖(asparagus polysaccharide) A、B、C、D。本發(fā)明的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑通過下述方法和步驟制備
(1)提取天冬粗多糖
取天冬飲片(市售)若干，加蒸餾水浸泡后，用打漿機(jī)破碎；冷水浸泡48小時(shí)紗布過濾； 殘?jiān)谜麴s水重復(fù)提取1次，合并2次提取液，并減壓濃縮；75 %乙醇沉淀后，離心去上清液；依次用95 %乙醇、無水乙醇和乙醚各洗滌沉淀物；真空干燥，制得天冬粗多糖；
(2)天冬粗多糖脫蛋白
將制得的天冬粗多糖溶于蒸餾水，超聲波振蕩30分鐘，離心去除不溶于水的物質(zhì)；加入鏈菌蛋白酶E，39°C恒溫水浴96小時(shí)；離心去除沉淀，上清液用Sevag法繼續(xù)脫蛋白，制得上層脫蛋白多糖的溶液；加丙酮直至白色絮狀沉淀不再析出，離心收集沉淀，真空干燥， 制得脫蛋白多糖；
(3)天冬脫蛋白多糖純化
將脫蛋白多糖溶于蒸餾水，分批上DEAE-52纖維素柱用0. IN NaOH洗脫，(a萘酚ー硫酸法檢測)收集多糖部分，HCl中和至pH值為7. 0 ；減壓濃縮后分批上瓊脂糖凝膠(6% )柱脫鹽，蒸餾水洗脫，(AgN03、a萘酚-硫酸法檢測)；收集含糖部分減壓濃縮，分別以30%、 80%乙醇沉淀，真空冷凍干燥，制得純品天冬脫蛋白多糖；
(4)制得含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑(精制天冬膠質(zhì)制劑)
將上述純品天冬脫蛋白多糖制成細(xì)粉，取2. 0至50. 0克，加入含碘溶液至100毫升，溶脹，分裝，得成品精制天冬膠質(zhì)制劑；IOOtlC流通蒸汽消毒1小時(shí)，即得。本發(fā)明中，精制天冬膠制劑經(jīng)薄層層析法鑒定，結(jié)果顯示，提取物中只含多糖，不含單糖；
本發(fā)明中，經(jīng)化學(xué)反應(yīng)法和瓊脂糖凝膠電泳法鑒定，結(jié)果顯示，提取物中不含蛋白質(zhì)； 本發(fā)明中，經(jīng)高效液相色譜法檢測，用纖維素及瓊脂糖凝膠層析柱純化，獲得純度高、 已脫蛋白的天冬多糖；高效液相色譜檢測分子量結(jié)果表明30%醇沉純品天冬脫蛋白多糖呈近似對稱單一主峰，主峰面積占85%以上，分子量范圍在5000 400000(如表1、

圖1、圖 2所示)。表1是30%醇沉天冬脫蛋白多糖以水為流動(dòng)相標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)間。表 權(quán)利要求
1.一種含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑，其特征在干，以天冬脫蛋白多糖為主要成分，加含碘的溶液制成抗腫瘤血管栓塞劑，所述天冬脫蛋白多糖為溶質(zhì)，含碘溶液為溶劑，其中每100毫升栓塞劑中含2. 0克至50. 0克天冬脫蛋白多糖。
2.按權(quán)利要求1所述的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑，其特征在于，所述天冬脫蛋白多糖為細(xì)粉。
3.按權(quán)利要求1所述的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑，其特征在于，所述的栓塞劑是膠質(zhì)制劑。
4.按權(quán)利要求1所述的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑，其特征在于，所述含碘溶液是含碘造影剤。
5.按權(quán)利要求1所述的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑，其特征在干，所述栓塞劑中每100毫升制劑中含天冬脫蛋白多糖2克，其中含碘溶液是非離子型造影剤碘比醇注射液。
6.按權(quán)利要求1所述的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑，其特征在干，所述栓塞劑中每100毫升制劑中含天冬脫蛋白多糖50克，其中含碘溶液是非離子型造影剤碘比醇注射液。
7.權(quán)利要求1所述的含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑的制備方法，其特征在干，其包括步驟(1)提取天冬粗多糖取天冬飲片若干，加蒸餾水浸泡后，用打漿機(jī)破碎；冷水浸泡48小時(shí)紗布過濾；殘?jiān)谜麴s水重復(fù)提取1次，合并2次提取液，并減壓濃縮；75 %乙醇沉淀后，離心去上清液；依次用95 %乙醇、無水乙醇和乙醚各洗滌沉淀物；真空干燥，制得天冬粗多糖；(2)天冬粗多糖脫蛋白將天冬粗多糖溶于蒸餾水，超聲波振蕩30分鐘，離心去除不溶于水的物質(zhì)；加入鏈菌蛋白酶E，39°C恒溫水浴96小時(shí)；離心去除沉淀，上清液用Sevag法繼續(xù)脫蛋白，制得上層脫蛋白多糖的溶液；加丙酮至白色絮狀沉淀不析出，離心收集沉淀，真空干燥，制得脫蛋白多糖；(3)天冬脫蛋白多糖純化將脫蛋白多糖溶于蒸餾水，分批上DEAE-52纖維素柱用0. IN NaOH洗脫，收集多糖部分，HCl中和至pH值為7.0 ；減壓濃縮后分批上6%瓊脂糖凝膠柱脫鹽，蒸餾水洗脫；收集含糖部分減壓濃縮，分別以30%、80%乙醇沉淀，真空冷凍干燥，制得純品天冬脫蛋白多糖；(4)精制天冬膠制得將上述獲得的天冬多糖打成細(xì)粉，取2. 0至50. 0克上述細(xì)粉，加入含碘溶液至100毫升，溶脹，分裝，IOO0C流通蒸汽消毒1小吋，即得。
全文摘要
本發(fā)明屬中藥領(lǐng)域，涉及一種含天冬脫蛋白多糖的抗腫瘤血管栓塞劑及其制備方法。本發(fā)明采用中藥材天冬，經(jīng)提取、脫蛋白、純化、干燥等制備過程，得天冬脫蛋白多糖，加入含碘溶液制成每100毫升制劑中含天冬脫蛋白多糖2.0克至50.0克的精制天冬膠質(zhì)制劑。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的栓塞劑具有低毒，與水溶性抗腫瘤藥相溶性良好、且有藥物緩釋作用；注入肝動(dòng)脈后可引起局部血管的梗塞而致腫瘤組織壞死；還具有直接的抑制腫瘤藥效，和具有扶正，提高免疫的功能，是效果良好的末梢型抗腫瘤栓塞劑。本發(fā)明的制備方法，能高效率地保留藥材中的有效成分，簡化中藥制劑的制備，保護(hù)環(huán)境，有利于批量生產(chǎn)的操作。
文檔編號(hào)A61K9/08GK102579476SQ201110009339
公開日2012年7月18日 申請日期2011年1月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月17日
發(fā)明者劉力, 張閩光, 相建峰, 耿堅(jiān), 邢東煒, 陳剛, 黃學(xué)菁 申請人:上海市中醫(yī)醫(yī)院