專利名稱：秦皮藥材或其提取物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥中活性成分的檢測(cè)方法，具體來(lái)說(shuō)，涉及秦皮藥材或其提取 物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的HPCE檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
秦皮因地變異，品種來(lái)源有所不同，但均屬于木犀科(Oleaceae)涔屬(Fraxinus) 植物，其形態(tài)特征和氣味與本草所載類似。《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部規(guī)定秦 1 ^ IsJMiiiItl^Iffi S^hW Fraxinusrhynchophylla Hance> S^hW Fraxinus chinensis Roxb.、尖葉白賭樹(shù) Fraxinus szabaona Lingelsh.或宿柱白賭樹(shù) Fraxinus stylosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮。其中苦櫪白蠟樹(shù)分布于吉林、遼寧、河北、河南等地。白蠟 樹(shù)分布于華北、西北、華東、中南、西南及遼寧。尖葉白蠟樹(shù)分布于河北、陜西、山西、甘肅、湖 南。宿柱白蠟樹(shù)分布于陜西。商品藥材主要包括東北秦皮或遼寧秦皮(苦櫪白蠟樹(shù))、四川 秦皮(白蠟樹(shù))、陜西白點(diǎn)秦皮(宿柱白蠟樹(shù))、河南秦皮等。秦皮具有清熱解毒、清肝明目的功效，用于熱痢、泄瀉、赤白帶下、目赤腫痛、目生 翳膜等癥?，F(xiàn)代藥理研究表明，秦皮具有抗病原微生物、抗炎、利尿、抗凝和抗過(guò)敏、止咳祛 痰平喘、中樞抑制、抗腫瘤等多種作用，臨床可用治菌痢、慢性氣管炎、結(jié)膜炎等。秦皮主要含秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素等香豆素化合物，其主要化學(xué)成 分的理化性質(zhì)與結(jié)構(gòu)如下秦皮甲素(esculin)異名七葉苷(aesculin)、七葉樹(shù)甙、馬栗樹(shù)皮苷、6、7_ 二羥香豆素_6_葡萄糖苷、 七葉靈、esculoside、bicolorin、enullachroma、crataegin、polychrome、escosyl。分子式 C15H16O9,分子量340.觀，針狀結(jié)晶(熱水)，mp. 204°C -206 °C，難溶于冷水，溶于沸水。溶于 熱乙醇、甲醇、吡啶、醋酸乙酯和醋酸。秦皮乙素(esculetin)異名七葉素(aesculetin)、七葉苷元、七葉樹(shù)內(nèi)酯、馬栗樹(shù)皮素、七葉亭、6、7_ 二 羥香豆素、cichorigeniruesculetol。分子式C9H6O4,分子量178. 14。棱狀結(jié)晶(冰醋酸) 或葉狀結(jié)晶(真空升華得)，mp. 2680C -270°C，溶于稀堿顯藍(lán)色熒光、尚易溶于熱乙醇及冰 醋酸，幾乎不溶于乙醚及沸水。秦皮苷(fraxin)異名白蠟樹(shù)苷、秦皮素-8-葡萄糖苷(fraxetin-8-glucoside)、paviin、 fraxo-side。分子式C16H18Oltl,分子量370. 30。水合物為黃色針狀結(jié)晶(乙醇水溶液)，無(wú) 水物mp.205°C (迅速加熱)。微溶于冷水，易溶于熱水及熱乙醇，不溶于乙醚。秦皮素(fraxetin)異名秦皮亭、白蠟樹(shù)內(nèi)酯、fraXetol、7，8-二羥基-6-甲氧基香豆素(7， 8-dihydroxy-6-methoxy-coumarin)。分子式 CltlH8O5，分子量 208. 16。片狀結(jié)晶(乙醇水溶
權(quán)利要求
1.一種使用HPCE檢測(cè)秦皮藥材或其提取物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的 方法，其特征在于以磷酸二氫鹽-硼砂為緩沖貯備液，其PH值介于7. 8-9. 2之間，以乙腈為 有機(jī)改性劑，檢測(cè)波長(zhǎng)介于200-400nm之間，工作電壓介于5_30kV之間。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于內(nèi)標(biāo)物為黃豆苷元。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)方法，其特征在于所述秦皮藥材或其提取物的供試 品溶液是醇提物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于制備緩沖貯備液時(shí)使 用的磷酸二氫鹽的濃度為80-120mmol/L，優(yōu)選為lOOmmol/L ；硼砂溶液濃度為30-70mmol/ L，優(yōu)選為50mmol/L;兩種溶液的體積配比為2 1-1 4，優(yōu)選體積配比為1. 02 1.98。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法，運(yùn)行時(shí)緩沖貯備液水有機(jī)改性劑的體積配比 為 1. 5 1 0. 2-4 1 1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于緩沖貯備液的PH值為8.6。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于工作電壓為20kV。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)方法，其特征在于運(yùn)行時(shí)緩沖貯備液水有機(jī)改性劑 的體積配比為3 1 0.8。
10.HPCE在同時(shí)檢測(cè)秦皮藥材或其提取物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了秦皮藥材或其提取物中秦皮苷、秦皮甲素、秦皮素、秦皮乙素等4種有效成分的高效毛細(xì)管電泳(HPCE)快速定量方法。通過(guò)本發(fā)明的方法，4種秦皮香豆素在10min內(nèi)得到良好分離和測(cè)定，同時(shí)各成分均具有良好的線性關(guān)系和回收率。本方法測(cè)定結(jié)果與HPLC法相比相關(guān)性良好，而分析時(shí)間則大大縮短，對(duì)環(huán)境污染顯著降低，分析運(yùn)行成本明顯減少，為考察秦皮藥材的有效成分分布和不同采收時(shí)期含量的變化規(guī)律提供了快速高效的分析手段，也可供秦皮提取物內(nèi)在質(zhì)量考察及新藥開(kāi)發(fā)研究參考。
文檔編號(hào)A61K36/63GK102091132SQ20111002572
公開(kāi)日2011年6月15日 申請(qǐng)日期2011年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月25日
發(fā)明者張琦 申請(qǐng)人:西南民族大學(xué)