專利名稱：一種治療病毒性肝炎藥物組合物的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法，特別涉及一種治療病毒 性肝炎的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
病毒性肝炎是由多種肝炎病毒引起的常見傳染病，具有傳染性強(qiáng)、傳播途徑復(fù)雜、 流行面廣泛，發(fā)病率較高等特點(diǎn)。臨床上主要表現(xiàn)為乏力、食欲減退、惡心、嘔吐、肝腫大及 肝功能損害，部分病人可有黃疸和發(fā)熱。有些患者出現(xiàn)蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛或上呼吸道癥狀，嚴(yán) 重者甚至?xí)l(fā)展為肝硬化甚至肝癌，嚴(yán)重危害人類健康。目前臨床上所用治療病毒性肝炎 的藥物雖然具有一定的療效，但不同程度地存在易使機(jī)體產(chǎn)生抗藥性及成癮性、副作用明 顯等缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物；本發(fā)明另一目的在于提供一種治療病毒性 肝炎的藥物組合物；本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供該藥物組合物的制備方法；本發(fā)明的第 四個(gè)目的在于提供該藥物組合物的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案1、2實(shí)現(xiàn)技術(shù)方案1 本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為茯苓500-1500重量份、茵陳500-1500重量份、白術(shù)500-1500重量份、郁金 150-450重量份、當(dāng)歸250-750重量份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半 枝蓮500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹參500-1500重量份、 澤蘭250-750重量份、柴胡150-450重量份、廣藿香150-450重量份、佩蘭250-750重量份、 紅花150-450重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茯苓960重量份、茵陳960重量份、白術(shù)960重量份、郁金320重量份、當(dāng)歸480重 量份、琥珀96重量份、白芍(炒)960重量份、半枝蓮960重量份、砂仁192重量份、虎杖480 重量份、丹參960重量份、澤蘭480重量份、柴胡320重量份、廣藿香320重量份、佩蘭480 重量份、紅花320重量份。技術(shù)方案2:本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為茯等500-1500重量份、茵陳500-1500重量份、郁金150-450重量份、當(dāng)歸250-750 重量份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半枝蓮500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹參500-1500重量份、澤蘭250-750重量份、柴胡 150-450重量份、廣藿香150-450重量份、佩蘭250-750重量份、紅花150-450重量份、板藍(lán) 根500-1500重量份、綿馬貫眾250-750重量份、白花蛇舌草500-1500重量份、重樓250-750
重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為茯苓960重量份、茵陳960重量份、郁金320重量份、當(dāng)歸480重量份、琥珀96重量 份、白芍(炒)960重量份、半枝蓮960重量份、砂仁192重量份、虎杖480重量份、丹參960 重量份、澤蘭480重量份、柴胡320重量份、廣藿香320重量份、佩蘭480重量份、紅花320重 量份、板藍(lán)根960重量份、綿馬貫眾480重量份、白花蛇舌草960重量份、重樓480重量份。取本發(fā)明技術(shù)方案1、2的藥物組合物原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成 臨床接受的劑型，包括但不限于合劑、濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、 緩釋劑、口服液體制劑。本發(fā)明藥物組合物技術(shù)方案1制備合劑方法為當(dāng)歸、郁金、廣藿香、佩蘭、砂仁、 澤蘭提取揮發(fā)油6-10小時(shí)，蒸餾后的水溶液另器收集；揮發(fā)油用3-5倍重量份的β -環(huán) 糊精飽和水溶液法包結(jié)，干燥，得揮發(fā)油環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參用4-8倍重量份 的85%乙醇回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇 味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余藥味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮 1-2小時(shí)，合并煎液，濾過；濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相對密度為 1.02 1.04的稠膏I，加乙醇使含醇量達(dá)60-80%，靜置12-36小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇 至適量，與上述丹參提取液合并，并濃縮至60 65°C相對密度為1. 10-1. 15的稠膏II，加入 80%的單糖漿900-1200體積份，揮發(fā)油β-環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入浸膏內(nèi)；再加入 苯甲酸鈉9-10g，攪勻，加水至3000-4500體積份，濾過，灌裝，滅菌，即得。本發(fā)明藥物組合物技術(shù)方案2制備方法為以上十九味，當(dāng)歸、郁金、廣藿香、佩 蘭、砂仁、澤蘭提取揮發(fā)油6-10小時(shí)，蒸餾后的水溶液另器收集；揮發(fā)油用3-5倍重量份的 β-環(huán)糊精飽和水溶液法包結(jié)，干燥，得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參用4-8倍重量 份的85%乙醇回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇 味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余茵陳等十二味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份 的水煎煮1-2小時(shí)，合并煎液，濾過；濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相 對密度為1. 02 1. 04的稠膏I，加乙醇使含醇量達(dá)60-80%，靜置12-36小時(shí)，濾過，濾液 回收乙醇至適量，與上述丹參提取液合并，濃縮至相對密度為1. 10-1. 15的稠膏II，加入揮 發(fā)油β -環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型， 包括但不限于合劑、濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體 制劑或凍干粉針劑。本發(fā)明藥物組合物技術(shù)方案2制備合劑方法優(yōu)選為以上十九味，當(dāng)歸、郁金、廣 藿香、佩蘭、砂仁、澤蘭提取揮發(fā)油8小時(shí)，蒸餾后的水溶液另器收集；揮發(fā)油用4倍重量份 的β-環(huán)糊精飽和水溶液法40°C包結(jié)，40°C干燥，得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參 用6倍重量份的85%乙醇回流提取2次，每次1小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至 無醇味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余茵陳等十二味加水煎煮2次，每次加8倍量水煎煮 1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過；濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相對密度為1. 02 1. 04的稠膏I，加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置M小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至適量， 與上述丹參提取液合并，并濃縮至60 65°C相對密度為1. 10-1. 15的稠膏II，加入80% 的單糖漿960體積份，揮發(fā)油β-環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入浸膏內(nèi)；再加入苯甲酸鈉 9. 6g，加水至3200體積份，濾過，灌裝，滅菌，即得。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或 幾種鑒別A、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，加水10_30ml使溶解，用乙 酸乙酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10_30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)右?酸乙酯0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳蒿對照藥材0. 5-1. 5g，加水40_60ml， 煎煮0. 5-1. 5小時(shí)，取上清液，濃縮至10-30ml，用乙酸乙酯萃取1_3次，第一次20_40ml， 第二次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 5-1. 5ml使溶解，作為對照 藥材溶液；吸取供試品溶液0. 5-1. 5 μ 1，對照藥材溶液4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層 板上，以0.5-2 0.5-2比例的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置 365nm紫外光燈下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒 光斑點(diǎn)；B、取本藥物組合物制劑4/1000-8/1000日用劑量研細(xì)，加40-60 %乙醇5_25ml，超 聲處理10-30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每Iml含 0. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-15 μ 1，分 別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以30-50 1-10 5-15 0. 1-0. 3比例的三氯甲烷-乙酸 乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1-10%香草醛硫酸溶液，100-110°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取本藥物組合物制劑1/100-5/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚20_40ml，回流提取 20-40分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 4-0. 6ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng) 歸對照藥材lg，加乙醚5-15ml，超聲處理5-15分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴ml 使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同 一硅膠G薄層板上，以5-15 0. 1-1. 0比例的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開， 取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯 相同顏色的熒光斑點(diǎn)；D、取丹參酮II A對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Umg的溶液，作為對照品溶 液；取本藥物組合物制劑1/100-5/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚20-40ml，回流提取20-40分 鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 4-0. 6ml使溶解，作為供試品溶液，吸取供試品溶液 5-15 μ 1，對照品溶液4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4-8 1比例的環(huán)己烷-乙 酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 的暗紅色斑點(diǎn)；Ε、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，研細(xì)，加甲醇10_30ml，超聲處理 10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?. 5-3. 5mol/L硫酸溶液5_15ml使溶解，置水浴中加 熱20-40分鐘，立即冷卻，用三氯甲烷振搖提取兩次，每次5-15ml，合并三氯甲烷液，蒸干， 殘?jiān)蛹状?. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每Iml含 0. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4-8 μ 1，分
7別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以5-25 4-6 0. 5-1. 5比例的30 60°C石油醚-甲酸乙 酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨氣中熏后，日光下檢視；供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；含量測定照高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷 鍵合硅膠為填充劑；5-25 70-95比例的乙腈-水為流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù) 按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2600 ；對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品4_6mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解 并稀釋至刻度，搖勻，即得每Iml中含芍藥苷40-60 μ g的對照品溶液；供試品溶液制備取裝量差異項(xiàng)下的本藥物組合物制劑，研細(xì)，取6/10000-1/1000 日用劑量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50-70 %甲醇15-35ml，密塞，稱定重量，功率 250W，頻率40KHZ超聲處理20-40分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用50-70%甲醇補(bǔ)足減少重 量，搖勻，取上清液，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5_15μ 1，注入液相色譜儀，測 定，即得；本藥物組合物制劑每日用劑量含白芍以芍藥苷C23H28O11計(jì)，應(yīng)不得少于50_70mg。本發(fā)明所述重量份與體積份的關(guān)系為克/毫升。本發(fā)明藥物組合物不同制劑的日用劑量(每日服用劑量或每日使用劑量)因制劑 不同而不同，但不同制劑的日用劑量中含相當(dāng)生藥量相同。本發(fā)明質(zhì)量檢測方法以日用劑 量為計(jì)量單位。按照原藥材的量換算，成人每日用劑量相當(dāng)原藥材的量為280-360g。本發(fā)明藥物組合物經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)有顯著恢復(fù)ALT、AST、GGT、BiL等肝功能主要 指標(biāo)的作用具備見效快，無毒副作用，使用安全，獲效后不易復(fù)發(fā)等優(yōu)勢。本發(fā)明組合物相比現(xiàn)有制劑具備很好的藥效，本發(fā)明藥物組合物的輔料工藝經(jīng)過 篩選，發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油與β-環(huán)糊精在一定的條件及配比下包合，可以達(dá)到較好的療效；本發(fā)明 所提供的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，是通過大量具體創(chuàng)造性試驗(yàn)篩選后得到，鑒別方法 中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經(jīng)濟(jì)適用、 結(jié)果快速，并且對不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的 篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制，并且用該方法 測定的產(chǎn)品相比其他方法測定的產(chǎn)品在藥效上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。


說明書附圖是揮發(fā)油β -環(huán)糊精包結(jié)實(shí)驗(yàn)流程圖。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1 藥物組對保肝降酶、利膽、退黃、吞噬廓清能力的藥效學(xué)試驗(yàn)藥物組I 取本發(fā)明實(shí)施例2制備的藥物組合物合劑藥物組II 取本發(fā)明實(shí)施例13制備的藥物組合物合劑對照組市售清熱疏肝合劑。一.保肝降酶作用
1.對急性肝損傷的保護(hù)作用取昆明小鼠84只，體重18_20g，雌雄各半，隨機(jī)分為7組。第一組正常對照組， 每日灌服等量飲用水；第二組模型組，每日灌服等量飲用水；第三組藥物組I，灌服藥 物組I藥液30ml (相當(dāng)于生藥9. 32g)/kg體重·日；第四組藥物組II，灌服藥物組II藥 液30ml (相當(dāng)于生藥9. 32g)/kg體重·日；第五組對照組，灌服0. 4g/ml清熱疏肝合劑 0.;3ml/10g(相當(dāng)于含生藥134g/kg)體重 日。第二 五組，在連續(xù)給藥14天后，用D-半 乳糖胺0. 8g/kg體重小鼠腹腔注射進(jìn)行造模。在造模24小時(shí)末次給藥半小時(shí)后，從小鼠眼 眶取血，測SGPT、SG0T含量，結(jié)果見表1。表1本發(fā)明藥物組對D-半乳糖胺所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用(X士SD)
權(quán)利要求
1.一種治療病毒性肝炎藥物組合物的檢測方法，其特征在于該方法中的含量測定方法為色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；5-25 70-95比例 的乙腈-水為流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于沈00 ；對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品4-6mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀 釋至刻度，搖勻，即得每Iml中含芍藥苷40-60 μ g的對照品溶液；供試品溶液制備取裝量差異項(xiàng)下的該藥物組合物制劑，研細(xì)，取6/10000-1/1000 日用劑量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50-70%甲醇15-35ml，密塞，稱定重量，功 率250W，頻率40KHZ超聲處理20-40分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用50-70%甲醇補(bǔ)足 減少重量，搖勻，取上清液，濾過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液 各5-15 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；本藥物組合物制劑每日用劑量含白芍以芍藥苷 C23H28O11計(jì)，應(yīng)不得少于50-70mg ；所述藥物組合物的原料藥組成為茯等500-1500重量份、茵陳500-1500重量份、白術(shù)500-1500重量份、郁金150-450 重量份、當(dāng)歸250-750重量份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半枝蓮 500-1500重量份、砂仁100-300重量份、虎杖250-750重量份、丹參500-1500重量份、澤蘭 250-750重量份、柴胡150-450重量份、廣藿香150-450重量份、佩蘭250-750重量份、紅花 150-450重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物的檢測方法，其特征在于該方法中的含量測定為 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；15 85比例的乙腈-水為流動相，檢測波長為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于沈00 ；對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋 至刻度，搖勻，即得每Iml中含芍藥苷50 μ g的對照品溶液；供試品溶液制備取裝量差異項(xiàng)下的本藥物組合物制劑，研細(xì)，取7/10000日用劑量， 精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加60 %甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ 超聲處理30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用60 %甲醇補(bǔ)足減少重量，搖勻，取上清液，濾 過，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即 得；本藥物組合物制劑每日用劑量含白芍以芍藥苷C23H28O11計(jì)，應(yīng)不得少于60mg ； 所述藥物組合物的原料藥組成為茯苓500-1500重量份、茵陳500-1500重量份、郁金150-450重量份、當(dāng)歸250-750重量 份、琥珀50-150重量份、白芍(炒)500-1500重量份、半枝蓮500-1500重量份、砂仁100-300 重量份、虎杖250-750重量份、丹參500-1500重量份、澤蘭250-750重量份、柴胡150-450重 量份、廣藿香150-450重量份、佩蘭250-750重量份、紅花150-450重量份、板藍(lán)根500-1500 重量份、綿馬貫眾250-750重量份、白花蛇舌草500-1500重量份、重樓250-750重量份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的檢測方法，其特征在于該方法包括如下鑒別 方法的一種或幾種鑒別A、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，加水10-30ml使溶解，用乙酸乙 酯萃取1-3次，第一次20-40ml，第二次10_30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取茵陳蒿對照藥材0. 5-1. 5g，加水40_60ml，煎煮 0. 5-1. 5小時(shí)，取上清液，濃縮至10-30ml，用乙酸乙酯萃取1_3次，第一次20_40ml，第二次 10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 5-1. 5ml使溶解，作為對照藥材溶 液；吸取供試品溶液0. 5-1. 5 μ 1，對照藥材溶液4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以 0.5-2 0. 5-2比例的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫 外光燈下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；B、取本藥物組合物制劑4/1000-8/1000日用劑量研細(xì)，加40-60%乙醇5_25ml，超聲 處理10-30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每Iml含 0. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5-15 μ 1，分 別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以30-50 1-10 5-15 0. 1-0. 3比例的三氯甲烷-乙酸 乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1-10%香草醛硫酸溶液，100-110°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取本藥物組合物制劑1/100-5/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚20-40ml，回流提取20-40 分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 4-0. 6ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對照 藥材lg，加乙醚5-15ml，超聲處理5-15分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解， 作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以5-15 0. 1-1.0比例的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾 干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏 色的熒光斑點(diǎn)；D、取丹參酮IIA對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含l-3mg的溶液，作為對照品溶液；照 薄層色譜法試驗(yàn)，吸取鑒別C項(xiàng)下的供試品溶液5-15 μ 1，對照品溶液4-6 μ 1，分別點(diǎn)于同 一硅膠G薄層板上，以4-8 1比例的環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試 品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；Ε、取本藥物組合物制劑1/100-3/100日用劑量，研細(xì)，加甲醇10-30ml，超聲處理 10-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?. 5-3. 5mol/L硫酸溶液5_15ml使溶解，置水浴中加 熱20-40分鐘，立即冷卻，用三氯甲烷振搖提取兩次，每次5-15ml，合并三氯甲烷液，蒸干， 殘?jiān)蛹状?. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每Iml含 0. 5-1. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4-8 μ 1，分 別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以5-25 4-6 0. 5-1. 5比例的30 60°C石油醚-甲酸乙 酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨氣中熏后，日光下檢視；供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物的檢測，其特征在于該方法包括如下鑒別方法的一 種或幾種A、取本藥物組合物制劑14/1000日用劑量，加水20ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，第 一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試 品溶液；另取茵陳蒿對照藥材lg，加水50ml，煎煮1小時(shí)，取上清液，濃縮至20ml，用乙酸乙 酯萃取2次，第一次30ml，第二次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使 溶解，作為對照藥材溶液；吸取供試品溶液1 μ 1，對照藥材溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以1 1比例的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下觀察，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑占.^ \\\ B、取本藥物組合物制劑6/1000日用劑量研細(xì)，加50%乙醇15ml，超聲處理20分鐘，濾 過，濾液作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照 品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以 40 5 10 0.2比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干， 噴以5%香草醛硫酸溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng) 的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取本藥物組合物制劑3/100日用劑量，研細(xì)，加乙醚30ml，回流提取30分鐘，濾過， 濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對照藥材lg，加乙 醚10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為對照藥材 溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以 9.5 0. 5比例的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光 燈下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；D、取丹參酮IIA對照品，加乙酸乙酯制成每Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄 層色譜法試驗(yàn)，吸取鑒別C項(xiàng)下的供試品溶液10 μ 1，對照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以6 1比例的環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜中， 在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的暗紅色斑點(diǎn)；E、取本藥物組合物制劑14/1000日用劑量，研細(xì)，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過， 濾液蒸干，殘?jiān)?. 5mol/L硫酸溶液IOml使溶解，置水浴中加熱30分鐘，立即冷卻，用三 氯甲烷振搖提取兩次，每次10ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試 品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；照薄層色 譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各6μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以15 5 1比例的 30 60°C石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨氣中熏后， 日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
5.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物的檢測方法，其特征在于所述藥物組合物的制備 方法為以上十九味，當(dāng)歸、郁金、廣藿香、佩蘭、砂仁、澤蘭提取揮發(fā)油6-10小時(shí)，蒸餾后的 水溶液另器收集；揮發(fā)油用3-5倍重量份的β-環(huán)糊精飽和水溶液法包結(jié)，干燥，得揮發(fā)油 β -環(huán)糊精包結(jié)物，備用；丹參用4-8倍重量份的85 %乙醇回流提取1-3次，每次0. 5-1. 5 小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，得丹參提取液，備用；藥渣與其余茵陳等 十二味加水煎煮1-3次，每次加6-10倍重量份的水煎煮1-2小時(shí)，合并煎液，濾過；濾液與 上述蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60 65°C相對密度為1. 02 1. 04的稠膏I，加乙醇使 含醇量達(dá)60-80%，靜置12-36小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至適量，與上述丹參提取液合并， 濃縮至相對密度為1. 10-1. 15的稠膏II，加入揮發(fā)油β -環(huán)糊精包結(jié)物粉碎成細(xì)粉，加入常 規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于合齊 、濃縮丸齊 、膠囊齊 、滴丸 劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療病毒性肝炎的藥物組合物檢測方法，該藥物組合物的原料藥組成為茵陳、板藍(lán)根、綿馬貫眾、茯苓、郁金、半枝蓮、廣藿香等。本發(fā)明所提供的中藥組合物的檢測方法，是通過大量具體創(chuàng)造性試驗(yàn)篩選后得到，鑒別方法中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經(jīng)濟(jì)適用、結(jié)果快速，并且對不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制，并且用該方法測定的產(chǎn)品相比其他方法測定的產(chǎn)品在藥效上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。
文檔編號A61K35/10GK102091299SQ201110033498
公開日2011年6月15日 申請日期2007年8月3日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月3日
發(fā)明者付建家, 付立家 申請人:北京亞東生物制藥有限公司