專利名稱：一種冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物及其在制備抗疲勞產(chǎn)品的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種冬蟲夏草菌絲體發(fā)酵提取物，具體來(lái)說(shuō)是涉及一種冬蟲夏草 (Cordyceps sinensis (Berk. ) Sacc.)菌絲體固體發(fā)酵提取物，另外還涉及這種固體發(fā)酵提取物在抗疲勞方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
近年來(lái)，研究開發(fā)抗疲勞的天然藥物已成為國(guó)內(nèi)外的關(guān)注熱點(diǎn)。冬蟲夏草作為一種滋補(bǔ)中藥，具有保肺益腎、止咳化痰、治陽(yáng)痿遺精及腰膝酸痛等功效，是最貴重的一種藥用真菌，其重要的藥用價(jià)值和廣泛的藥理作用享譽(yù)全世界。現(xiàn)代研究表明，冬蟲夏草在消除運(yùn)動(dòng)性疲勞和增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力方面有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，不僅能增加運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)的能量物質(zhì)，而且有調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌、加強(qiáng)代謝等作用，并可刺激體內(nèi)激素的分泌釋放，增強(qiáng)心血管系統(tǒng)、 消化系統(tǒng)以及造血系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)等功能，延緩過(guò)度疲勞的產(chǎn)生。目前有關(guān)于天然冬蟲夏草、冬蟲夏草頭孢蟲草(即冬蟲夏草菌種，是冬蟲夏草的無(wú)性型)液體培養(yǎng)菌絲體及其濾液的抗疲勞效果研究(鄭偉等。三種冬蟲夏草制劑抗疲勞作用的比較。航空軍醫(yī)，2003，31 O) :49-50)，發(fā)現(xiàn)菌液組對(duì)增強(qiáng)小鼠記憶力效果最好。還有關(guān)于蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵所產(chǎn)生的冬蟲夏草菌絲體的抗疲勞作用的研究(陳新霞等。冬蟲夏草菌絲體的抗疲勞作用研究。中國(guó)生化藥物雜志，2009，30 (5) :321-323)，結(jié)果表明冬蟲夏草菌絲體能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間(P < 0. 05)，增加小鼠肝糖原儲(chǔ)備量(P < 0. 01)， 降低運(yùn)動(dòng)后小鼠血乳酸含量(P <0.01)，具有明顯的抗疲勞作用。因此現(xiàn)在開發(fā)出很多冬蟲夏草菌絲體的保健品，但大多數(shù)是以液體深層發(fā)酵的方法來(lái)獲得菌絲體的，如中國(guó)專利 200810167083. 8披露了一種冬蟲夏草菌絲體飲料及其制備方法，中國(guó)專利200910110525. X披露了一種人工發(fā)酵培養(yǎng)冬蟲夏草在制備抗疲勞、耐缺氧保健品或藥品中的應(yīng)用。此外， 也有研究表明人工固體發(fā)酵培養(yǎng)的冬蟲夏草菌絲體蟲草多糖含量明顯高于天然蟲草(劉仲敏等。人工固體發(fā)酵培養(yǎng)冬蟲夏草菌絲體的研究。河南科學(xué)，1994，12 ) :335-338)，以及冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵粉中3’ -脫氧腺苷，甘露醇的含量明顯高于冬蟲夏草子實(shí)體相應(yīng)的成分的研究(王尊生，等。冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵粉化學(xué)成分的分析。天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2005，17 (3) :331-336)。但還沒(méi)有利用冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物來(lái)開發(fā)抗疲勞產(chǎn)品的報(bào)道或相關(guān)的技術(shù)專利。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于開發(fā)出一種冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物，另外還開發(fā)出這種冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物在抗疲勞方面的用途。我們將野生冬蟲夏草(Cordyc印s sinensis (Berk. ) Sacc.)子實(shí)體通過(guò)菌種收集、 保藏與復(fù)壯，母種、一級(jí)液體種和二級(jí)生產(chǎn)種的制作，固體發(fā)酵物的制備，固體發(fā)酵提取物的提取等步驟，得到的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物能夠有效提高負(fù)重游泳小鼠的游泳時(shí)間，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。本發(fā)明的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物，其特征是由包括以下步驟的方法制備得到(1)將野生冬蟲夏草(Cordyc印s sinensis (Berk. ) Sacc.)子實(shí)體進(jìn)行組織分離， 于冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得純菌株，并進(jìn)行復(fù)壯，所述的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由葡萄糖 2%，蛋白胨0. 5% 1%，麥芽浸出粉0. 3% 0. 5%, 酵母浸膏0. 3% 0. 5%，瓊脂2%和余量的水組成；(2)將步驟(1)的純菌株接入無(wú)菌的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基中，10 15°C下，暗培養(yǎng) 30 35天后，光照4 6天，選取轉(zhuǎn)色較快且菌絲生長(zhǎng)整齊的菌種，作為母種，所述的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基組成與步驟(1)相同；(3)將母種經(jīng)復(fù)壯挑選后接至無(wú)菌冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)10 20天， 選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2 3mm的菌種作為一級(jí)液體菌種，所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基PH 6.0 6. 5，按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由葡萄糖^ ？^，蛋白胨化5% 1%， 麥芽浸出粉0. 3% 0. 5%，酵母浸膏0. 3% 0. 5%和余量的水組成；(4)將步驟C3)得到的一級(jí)液體菌種接入冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，一級(jí)液體菌種體積是冬蟲夏草液體培養(yǎng)基體積的3% 10%，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2 3mm的菌種作為二級(jí)生產(chǎn)種，所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法與步驟(3)相同；(5)在無(wú)菌的環(huán)境下，將二級(jí)生產(chǎn)種用無(wú)菌水按體積比1 1 1. 3稀釋后接入無(wú)菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，進(jìn)行避光培養(yǎng)9 14天至菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行光照培養(yǎng)，光強(qiáng) 400 ΙΟΟΟΙχ，空氣相對(duì)濕度80% 90%，10 15°C，經(jīng)7 12天后得到冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物，所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基是按Ikg大米和1 1. 3L營(yíng)養(yǎng)液的比例配制而成，所述的營(yíng)養(yǎng)液pH6. 0 6. 5，按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%，由葡萄糖1% 2(%，蛋白胨0.5(% 1(%， 麥芽浸出粉0. 3% 0. 5%，酵母浸膏0. 3% 0. 5%和余量的水組成；(6)將步驟(5)得到的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物在40 60°C的溫度下烘干，粉碎，再加入10 50倍體積的蒸餾水，通過(guò)80 90°C的熱水回流提取1 3次，趁熱抽濾， 合并濾液，濃縮至濾液體積的30% 50%，得到冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物。上述所用的麥芽提取粉和酵母浸膏都是市售品。步驟(1)所述的組織分離可采用常規(guī)的方法進(jìn)行，步驟(1)和步驟C3)所述的復(fù)壯是為了防止菌株退化，可以采用常規(guī)方法進(jìn)行。本發(fā)明的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物的制備方法和優(yōu)化條件同上所述。本發(fā)明的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物可用于制備抗疲勞產(chǎn)品。本發(fā)明制備冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物的方法與常用的液體發(fā)酵法相比較具有工藝簡(jiǎn)單，環(huán)保，無(wú)廢液排放，成本低廉等特點(diǎn)，因此具有廣泛的實(shí)用性和可操作性。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明由本發(fā)明方法制備的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，因此具有良好的抗疲勞作用。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，不是對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1 將收集到的野生冬蟲夏草(Cordyc印s sinensis (Berk. ) Sacc.)子實(shí)體通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行組織分離，按0. 3cmX0. 5cm大小的量接于冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基(按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù) 100%計(jì)，由葡萄糖1%，蛋白胨0. 5%，麥芽浸出粉0. 3%，酵母浸膏0. 3%，瓊脂2%和余量的水組成)上培養(yǎng)，獲得純菌株，為防止菌株退化，按照常規(guī)方法(選取新鮮子實(shí)體，在無(wú)菌條件下進(jìn)行組織分離，接種至冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基上，置于15°C下，遮光培養(yǎng)5 7d。以出發(fā)菌株為對(duì)照，比較所得菌株的生長(zhǎng)能力，主要觀察菌絲的生長(zhǎng)速度、轉(zhuǎn)色速度和原基形成數(shù)量等情況。最后，對(duì)斜面生長(zhǎng)情況較好的菌株進(jìn)行試驗(yàn)。)對(duì)菌種進(jìn)行復(fù)壯。將原始菌株按0. 3cmX0. 5cm大小的量接入無(wú)菌的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基(按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由葡萄糖1%，蛋白胨0. 5%，麥芽浸出粉0. 3%，酵母浸膏0. 3%，瓊脂 2%和余量的水組成)中，10°C下，暗培養(yǎng)30天后，光照4天，選取轉(zhuǎn)色較快且菌絲生長(zhǎng)整齊的菌種，作為母種。取葡萄糖10g，蛋白胨5g，麥芽浸出粉3g，酵母浸膏3g，溶解于無(wú)菌水979g，調(diào)整 PH至6. 0，得到冬蟲夏草液體培養(yǎng)基。將母種經(jīng)復(fù)壯挑選(選取新鮮子實(shí)體，在無(wú)菌條件下進(jìn)行組織分離，接種至冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基上，置于15°C下，遮光培養(yǎng)5 7d。以出發(fā)菌株為對(duì)照，比較所得菌株的生長(zhǎng)能力，主要觀察菌絲的生長(zhǎng)速度、轉(zhuǎn)色速度和原基形成數(shù)量等情況。最后，對(duì)斜面生長(zhǎng)情況較好的菌株進(jìn)行試驗(yàn)。)后接至無(wú)菌冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)10天，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2mm的作為一級(jí)菌種。將一級(jí)液體菌種3mL接入IOOmL冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2毫米的作為二級(jí)生產(chǎn)種，用于蟲草的固體發(fā)酵生產(chǎn)。將葡萄糖10g，蛋白胨5g，麥芽浸出粉3g，酵母浸膏3g，無(wú)菌水979g混合，調(diào)節(jié)pH 至6.0，得到營(yíng)養(yǎng)液。將大米Ikg和營(yíng)養(yǎng)液IL配制成固體發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)高壓滅菌，冷卻后即可用于接種。在無(wú)菌室內(nèi)，將二級(jí)生產(chǎn)種用無(wú)菌水按體積比1 1稀釋后接入無(wú)菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每瓶接入17mL。再進(jìn)行避光培養(yǎng)9天，待菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行光照培養(yǎng)，光強(qiáng) 4001x，空氣相對(duì)濕度80%，10°C，7天后得到冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物。將冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物在40°C的烘箱內(nèi)烘干，并將其粉碎，再加入10倍體積的蒸餾水，通過(guò)80°C的熱水回流提取1次，趁熱抽濾，濃縮至濾液體積的30%，得到冬蟲夏草固體發(fā)酵提取物。實(shí)施例2 將收集到的野生冬蟲夏草(Cordyc印s sinensis (Berk. ) Sacc.)子實(shí)體通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行組織分離，按0. 3cmX0. 5cm大小的量接于冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基(按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù) 100%計(jì)，由葡萄糖1. 5%，蛋白胨0. 8%，麥芽浸出粉0. 4%，酵母浸膏0. 4%，瓊脂2%和余量的水組成)上培養(yǎng)，獲得純菌株，為防止菌株退化，按照實(shí)施例1的常規(guī)方法對(duì)菌種進(jìn)行復(fù)壯。將原始菌株按0. 3cmX0. 5cm大小的量接入無(wú)菌的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基(按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由葡萄糖1. 5%，蛋白胨0. 8%，麥芽浸出粉0. 4%，酵母浸膏0. 4%，瓊脂 2%和余量的水組成)中，13°C下，暗培養(yǎng)33天后，光照5天，選取轉(zhuǎn)色較快且菌絲生長(zhǎng)整齊
5的菌種，作為母種。取葡萄糖15g，蛋白胨8g，麥芽浸出粉4g，酵母浸膏4g，溶解于無(wú)菌水969g，調(diào)整 PH至6. 3，得到冬蟲夏草液體培養(yǎng)基。將母種按照實(shí)施例1的常規(guī)方法復(fù)壯挑選后接至無(wú)菌冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)15天，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2mm的作為一級(jí)菌種。將一級(jí)液體菌種7mL接入IOOmL冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2mm的作為二級(jí)生產(chǎn)種，用于蟲草的固體發(fā)酵生產(chǎn)。將葡萄糖19. 5g，蛋白胨10. 4g，麥芽浸出粉5. 2g，酵母浸膏5. 2g，無(wú)菌水1259. 7g 混合，調(diào)節(jié)PH至6. 3，得到營(yíng)養(yǎng)液。將大米Ikg和營(yíng)養(yǎng)液1. 3L配制成固體發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)高壓滅菌，冷卻后即可用于接種。在無(wú)菌室內(nèi)，將二級(jí)生產(chǎn)種用無(wú)菌水按體積比1 1.2稀釋后接入無(wú)菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每瓶接入19mL。再進(jìn)行避光培養(yǎng)12天，待菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行光照培養(yǎng)， 光強(qiáng)7001x，空氣相對(duì)濕度85%，12°C，10天后得到冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物。將冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物在50°C的烘箱內(nèi)烘干，并將其粉碎，再加入30倍體積的蒸餾水，通過(guò)90°C的熱水回流提取2次，趁熱抽濾，濃縮至濾液體積的40%，得到冬蟲夏草固體發(fā)酵提取物。實(shí)施例3 將收集到的野生冬蟲夏草(Cordyc印s sinensis (Berk. ) Sacc.)子實(shí)體通過(guò)常規(guī)方法進(jìn)行組織分離，按0. 3cmX0. 5cm大小的量接于冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基(按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù) 100%計(jì)，由葡萄糖2%，蛋白胨1%，麥芽浸出粉0. 5%，酵母浸膏0. 5%，瓊脂2%和余量的水組成)上培養(yǎng)，獲得純菌株，為防止菌株退化，按照實(shí)施例1常規(guī)方法對(duì)菌種進(jìn)行復(fù)壯。將原始菌株按0. 3cmX0. 5cm大小的量接入無(wú)菌的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基(按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100 %計(jì)，由葡萄糖2 %，蛋白胨1 %，麥芽浸出粉0. 5 %，酵母浸膏0. 5 %，瓊脂2 % 和余量的水組成)中，15°C下，暗培養(yǎng)35天后，光照6天，選取轉(zhuǎn)色較快且菌絲生長(zhǎng)整齊的菌種，作為母種。取葡萄糖20g，蛋白胨10g，麥芽浸出粉5g，酵母浸膏5g，溶解于無(wú)菌水960g，調(diào)整 PH至6. 5，得到冬蟲夏草液體培養(yǎng)基。將母種按照實(shí)施例1常規(guī)方法復(fù)壯挑選后接至無(wú)菌冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)20天，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為3mm的作為一級(jí)菌種。將一級(jí)液體菌種IOmL接入IOOmL冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為3mm的作為二級(jí)生產(chǎn)種，用于蟲草的固體發(fā)酵生產(chǎn)。將葡萄糖Mg，蛋白胨12g，麥芽浸出粉6g，酵母浸膏6g，無(wú)菌水1152g混合，調(diào)節(jié) PH至6. 5，得到營(yíng)養(yǎng)液。將大米Ikg和營(yíng)養(yǎng)液1. 2L配制成固體發(fā)酵培養(yǎng)基，經(jīng)高壓滅菌，冷卻后即可用于接種。在無(wú)菌室內(nèi)，將二級(jí)生產(chǎn)種用無(wú)菌水按體積比1 1.3稀釋后接入無(wú)菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，每瓶接入22mL。再進(jìn)行避光培養(yǎng)14天，待菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行光照培養(yǎng)， 光強(qiáng)ΙΟΟΟΙχ，空氣相對(duì)濕度90%，15°C，12天后得到冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物。將冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物在60°C的烘箱內(nèi)烘干，并將其粉碎，再加入50倍體積的蒸餾水，通過(guò)90°C的熱水回流提取3次，趁熱抽濾，濃縮至濾液體積的50%，得到冬蟲夏草固體發(fā)酵提取物。實(shí)施例4 取經(jīng)檢疫后的SPF級(jí)KM雄性小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，以每組10只/籠，群養(yǎng)，自由進(jìn)食飲水為條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組用實(shí)施例1的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物 1. 82g · kg-1 · Cf1為劑量，每天按0. 2mL/10g體重灌胃給予相應(yīng)小鼠；蒸餾水對(duì)照組給予等量的蒸餾水；安神補(bǔ)腦液(來(lái)源吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司，編號(hào)MC10008，批號(hào) 1003012，主要成份鹿茸、何首烏、淫羊藿、干姜、甘草、大棗、維生素Bi，購(gòu)自市場(chǎng))組按 0. 2mL/10g體重給予安神補(bǔ)腦液；每天1次，連續(xù)給藥30天。30天后進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)， 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明提取物能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間(P < 0. 05)(試驗(yàn)結(jié)果對(duì)照組的游泳平均時(shí)間是25. 5567分鐘，標(biāo)準(zhǔn)差是6. 795029835 ；安神補(bǔ)腦液組的游泳平均時(shí)間 34. 0083分鐘，標(biāo)準(zhǔn)差8. 782526428, ρ值0. 027044024 ；實(shí)驗(yàn)組的游泳平均時(shí)間41. 0034分鐘，標(biāo)準(zhǔn)差 20. 45147758，ρ 值 0. 035974568)。
權(quán)利要求
1.一種冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物，其特征是由包括以下步驟的方法制備得到(1)將野生冬蟲夏草Cordyc印ssinensis (Berk. ) Sacc.子實(shí)體進(jìn)行組織分離，于冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得純菌株，并進(jìn)行復(fù)壯，所述的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由葡萄糖 2%，蛋白胨0. 5% 1(%，麥芽浸出粉0. 3% 0. 5%，酵母浸膏0.3% 0.5%，瓊脂2%和余量的水組成；(2)將步驟(1)的純菌株接入無(wú)菌的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基中，10 15°C下，暗培養(yǎng) 30 35天后，光照4 6天，選取轉(zhuǎn)色較快且菌絲生長(zhǎng)整齊的菌種，作為母種，所述的冬蟲夏草斜面培養(yǎng)基組成與步驟(1)相同；(3)將上述母種經(jīng)復(fù)壯挑選后接至無(wú)菌冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)10 20天， 選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2 3mm的菌種作為一級(jí)液體菌種，所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基PH 6.0 6. 5，按其總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%計(jì)，由葡萄糖！^ ？^，蛋白胨化5% 1%， 麥芽浸出粉0. 3% 0. 5%，酵母浸膏0. 3% 0. 5%和余量的水組成；(4)將步驟C3)得到的一級(jí)液體菌種接入冬蟲夏草液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，一級(jí)液體菌種體積是冬蟲夏草液體培養(yǎng)基體積的3% 10%，選取菌絲球大小均勻一致、直徑為2 3mm的菌種作為二級(jí)生產(chǎn)種，所述的冬蟲夏草液體培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法與步驟C3)相同；(5)在無(wú)菌的環(huán)境下，將上述二級(jí)生產(chǎn)種用無(wú)菌水按體積比1 1 1. 3稀釋后接入無(wú)菌的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，進(jìn)行避光培養(yǎng)9 14天至菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行光照培養(yǎng)，光強(qiáng) 400 ΙΟΟΟΙχ，空氣相對(duì)濕度80% 90%，10 15°C，經(jīng)7 12天后得到冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物，所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基是按Ikg大米和1 1. 3L營(yíng)養(yǎng)液的比例配制而成，所述的營(yíng)養(yǎng)液PH6. 0 6. 5，按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100%，由由葡萄糖 2%，蛋白胨0. 5^-1%, 麥芽浸出粉0. 3% 0. 5%，酵母浸膏0. 3% 0. 5%和余量的水組成；(6)將步驟( 得到的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵物在40 60°C的溫度下烘干，粉碎， 再加入10 50倍體積的蒸餾水，通過(guò)80 90°C的熱水回流提取1 3次，趁熱抽濾，合并濾液，濃縮至濾液體積的30% 50%，得到冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物。
2.權(quán)利要求1所述的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物在制備抗疲勞產(chǎn)品方面的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物及其在制備抗疲勞產(chǎn)品方面的用途。其特征是通過(guò)將野生冬蟲夏草Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.子實(shí)體通過(guò)菌種收集、保藏與復(fù)壯，母種、一級(jí)液體種和二級(jí)生產(chǎn)種的制作，固體發(fā)酵物的制備，固體發(fā)酵提取物的提取等步驟制備得到本發(fā)明的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物。本發(fā)明制備冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物的方法與常用的液體發(fā)酵法相比較具有工藝簡(jiǎn)單，環(huán)保，無(wú)廢液排放，成本低廉等特點(diǎn)，因此具有廣泛的實(shí)用性和可操作性。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明由本發(fā)明方法制備的冬蟲夏草菌絲體固體發(fā)酵提取物能顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，因此具有良好的抗疲勞作用，可用于制備抗疲勞產(chǎn)品。
文檔編號(hào)A61P39/00GK102174417SQ20111004348
公開日2011年9月7日 申請(qǐng)日期2011年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月23日
發(fā)明者勞景輝, 姜子德, 宋斌, 李挺, 李泰輝, 林群英, 沈亞恒, 閆文娟 申請(qǐng)人:廣東省微生物研究所