專利名稱：光皮樹油在降血脂藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及光皮樹油在降血脂藥物開發(fā)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
高血脂是指血液中一些或者全部的脂質(zhì)及脂蛋白處于非正常的較高水平的情況。它是血脂異常最常見的一種形式。高血脂在人群中非常普遍，由于它會對動脈粥樣硬化產(chǎn)生影響，因此也被認為是心血管疾病的一種危險因素?，F(xiàn)在已經(jīng)有許多降血脂藥物被研發(fā)出來。這些藥物降血脂的機理各異，有的從膽汁酸途徑加強膽固醇通量，有的抑制肝臟合成膽固醇，還有的通過提高低密度脂蛋白受體活性來發(fā)揮作用。然而，很多這樣的合成藥物會產(chǎn)生副作用，從而限制了它們的臨床應(yīng)用。比如非常適用于降低低密度脂蛋白含量的他汀類藥物有導致肌肉損傷的風險。煙酸是一種很好的降低三酸甘油酯的藥物，但它可能導致高血糖癥以及肝損傷。 近年來，許多天然植物油被報道具有很好的降血脂功能，比如大豆油、玉米油、芝麻油等。目前已知，油脂對血脂水平的影響與其中的脂肪酸的飽和程度有關(guān)；飽和脂肪酸(SFA)可使血脂升高，單價不飽和脂肪酸(MUFA)對血脂影響較少，而多價不飽和脂肪酸(PUFA)則具有降低血脂的作用。具有降血脂功能的植物油中PUFA的含量通常都較高。光皮樹(Cornus wilsoniana Wanger)是一種木本油料植物,產(chǎn)量高,含油量高,廣泛分布于中國黃河以南地區(qū)，集中在海拔低于IOOOm的石灰?guī)r山區(qū)。光皮樹油作為食用油已有100多年歷史。光皮樹油脂主要成分為月桂酸、肉豆蘧酸、棕桐酸、硬脂酸、油酸、芥酸、亞油酸、亞麻酸等，不飽和脂肪酸的含量超過70%以上，含有多種降血脂活性成分，比如共軛亞油酸、β -谷留醇等。因此光皮樹油是一種潛在的具有較強降血脂功能的植物油，可以應(yīng)用于降血脂食物或藥物的開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于研究光皮樹油在降血脂藥物開發(fā)中的應(yīng)用本發(fā)明的技術(shù)方案如下用成年雄性SD大鼠進行動物實驗，建立高血脂模型。然后將他們隨機分成4組，繼續(xù)給予其中一組大鼠高脂食物，這一組即是高脂肪對照組(HFCG組)，剩下三組因為給予的高脂食物中添加的光皮樹油劑量的不同分為低劑量組(LDG組，100mg/kg體重)，中劑量組(MDG組，150mg/kg體重)，高劑量組(HDG組，300mg/kg體重)。經(jīng)過六周的飼養(yǎng)，與HFCG組相比，LDG組，MDG組和HDG組的大鼠血清中的總膽固醇(TC)分別降低了 13. 2%，22. 1%和29.8% ;低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)分別降低了 26. 7%，36. 9%和39. 7%，降血脂效果顯著。因此，光皮樹油可以應(yīng)用于降血脂藥物的開發(fā)。
具體實施方式
I、光皮樹油與化學藥品光皮樹油由湖南林業(yè)科學院提供，是將2009年采集的光皮樹果實風干后，于2010年8月用KOMET冷榨機榨取所得?；瘜W藥品購自Sigma公司，所有的溶劑均為分析純。2、實驗動物與食物實驗動物為由揚州大學提供的重量為150_170g/只的50只成年雄性SD大鼠。分成五組，每10只為一組，每一組置于一只籠子中喂養(yǎng)，正常飼料按照國家標準(GB14924-1994)準備。高脂飼料的組成為78. 8%正常飼料，I %膽固醇，10%蛋黃粉，10%豬油，O. 2%膽鹽。將40只小鼠連續(xù)喂食高脂飼料4周，使其建立高血脂模型，然后將它們分成四組。將光皮樹油溶解在含1%羧甲基纖維素鈉的純凈水中，通過攪拌制成懸浮液備用。繼續(xù)給予其中一組大鼠高脂飼料至第六周，這一組即是高脂肪對照組(HFCG組)，剩下三組因為給予的高脂飼料中添加的光皮樹油劑量的不同分為低劑量組(LDG組，100mg/kg體重)，中劑量組(MDG組，150mg/kg體重)，高劑量組(HDG組，300mg/kg體重)。另外十只 小鼠作為正常對照組(NCG組)給予普通飼料，并在試驗期間用IOmlI %的羧甲基纖維素鈉對它們進行灌胃。3、動物實驗與取樣在六周的試驗期內(nèi)，給予小鼠自由飲水及攝食。自來水每三天更新一次，實驗飼料每天更新一次，每周記錄一次食物消耗量和體重。在實驗的結(jié)尾，將小鼠禁食過夜，稱重，麻醉，然后采用二氧化碳吸入法殺死小鼠。取腹靜脈血樣并存于試管中。將試管置于37°C水浴中I. 5小時，使血液凝結(jié)，然后將試管在4°C條件下置于冰箱I小時。在4°C下離心IOmin將血清從血液中分離出來，然后儲存在_20°C下以便做進一步的試驗。放血之后，切除肝臟，將肝臟在冰的生理鹽水里洗凈，稱重，用液氮冷凍，然后儲存在_70°C下以便做肝臟脂質(zhì)分析。4、脂質(zhì)參數(shù)分析血清中的總膽固醇(TC)，總甘油酸三酯(TG)，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，以及高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)濃度直接用試劑盒(購自上海西域集團)進行測量。肝臟中脂質(zhì)按以下步驟提取用氯仿和甲醇混合溶液(體積比2 I)處理肝組織，用液氮干燥提取物，并將提取液溶解于異丙醇，經(jīng)超聲波處理制成懸浮液。然后測量肝臟中的TC和TG的含量。5、統(tǒng)計分析動物實驗的結(jié)果使用SPSS13. O軟件進行方差分析，數(shù)值表示為平均值土標準差，方差分析可以衡量各組之間的差異性，P < O. 05則表示差異性非常大。6、光皮樹油的降血脂效果圖一顯示了經(jīng)過六周飼養(yǎng)的小鼠血清脂質(zhì)，脂蛋白，肝重以及肝臟脂質(zhì)的變化情況。如圖一(a)所示，正常對照組中小鼠血清中的TC和TG分別為2. 98和I. 02mmol/L。喂食高脂飼料的HFCG小鼠血清中的TC和TG有很明顯的上升，分別達到了 5. 48和2. 69mmol/L (p < O. 01)，與HFGG組相比，MDG (p < O. 05)和HDG組(p < O. 01)的血清TC水平明顯降低，呈現(xiàn)出劑量相關(guān)性。LDG組，MDG組和HDG組的小鼠血清中的TG分別降低了 13. 2%,22.1%和29.8%。如果比較血清中的TG，我們會發(fā)現(xiàn)HDG組(p < O. 05)比HFCG組表現(xiàn)出更顯著的降低作用，為51. 6%。但LDG組和MDG組沒有太大的差異性(P > O. 05)。
圖一(b)顯示，正常對照組中小鼠血清中的低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)分別為I. 33和2. 08mmol/L, HFCG中的LDL-C明顯上升到4. 64mmol/L (p < O. 01)，HDL-C 則明顯降低到 I. 53mmol/L (p < O. 01)。相比較于 HFCG 組，LDG 組(P < O. 05) ,MDG 組(p < O. 01)，HDG 組(p < 0.01)中的 LDL-C 都有顯著的降低，分別降低了 26. 7%，36. 9%和39.7%。但上面三組的HDL C水平跟HFCG組相比沒有太大的不同。圖一(C)顯示的是飼養(yǎng)六周之后的小鼠的肝重情況。跟正常對照組小鼠肝重相t匕，HFCG組小鼠肝重有較大的增加(P < O. 01)。相比較于HFCG組，按照300mg/kg體重的添加量，光皮樹油能顯著的減輕肝重(P < O. 05)，大約減輕了 20. 7 %。圖一(d)表明，跟正常對照組相比，HFCG組小鼠肝臟的TC和TG濃度有明顯的增加(P < O. 01)。結(jié)果顯示，相比較于HFCG組，MDG組(p < O. 05)和HDG組(p < O. 01)中肝臟中的TG濃度分別降低了 24. 6%和39. 3%;HDG組中肝臟TC含量降低了 16.2% (p < O. 05)。
總的來說，我們的數(shù)據(jù)顯示，食用光皮樹油對于高血脂的治療具有較強的功效。
權(quán)利要求
1.光皮樹油在降血脂藥物開發(fā)中的應(yīng)用。
全文摘要
用成年雄性SD大鼠進行動物實驗，建立高血脂模型。然后將他們隨機分成4組，繼續(xù)給予其中一組大鼠高脂食物，這一組即是高脂肪對照組(HFCG組)，剩下三組因為給予的高脂食物中添加的光皮樹油劑量的不同分為低劑量組(LDG組，100mg/kg體重)，中劑量組(MDG組，150mg/kg體重)，高劑量組(HDG組，300mg/kg體重)。經(jīng)過六周的飼養(yǎng)，與HFCG組相比，LDG組，MDG組和HDG組的大鼠血清中的總膽固醇(TC)分別降低了13.2％，22.1％和29.8％；低密度脂蛋白膽固醇(LDL C)分別降低了26.7％，36.9％和3％，降血脂效果顯著。因此，光皮樹油可以應(yīng)用于降血脂藥物的開發(fā)。
文檔編號A61P3/06GK102670692SQ201110063909
公開日2012年9月19日 申請日期2011年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月17日
發(fā)明者付杰, 何禎祥, 張莉蓉, 張雪薇, 朱海亮, 楊先輝 申請人:南京大學