專(zhuān)利名稱(chēng)：一種低酸高品質(zhì)銀杏葉提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種低酸高品質(zhì)銀杏葉提取物的制備方法，該銀杏葉提取物可作為治 療血瘀型胸痹及血瘀型輕度腦動(dòng)脈硬化引起的眩暈以及冠心病、心絞痛、心肌梗塞等疾病 的原料藥，屬于中藥制備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病居各種死因首位，已成為人類(lèi)死亡病因最高的頭號(hào)殺手。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目 前中國(guó)60歲以上人口已逾3億，人口老齡化的來(lái)臨使心腦血管疾病患者也相應(yīng)上升。同時(shí) 現(xiàn)代社會(huì)來(lái)自工作、社會(huì)、生活等方面的壓力促使心腦血管疾病在30歲至40歲的中青年人 中的發(fā)病率也不斷上升，發(fā)病的年齡跨度在不斷擴(kuò)大。目前，雖然西醫(yī)治療心腦血管疾病 的藥物較多，但是由于副作用大等原因，臨床使用受到了限制。銀杏葉制劑作為臨床安全 有效的治療心腦血管疾病的藥物，在全球臨床市場(chǎng)已取得廣泛認(rèn)可。從技術(shù)先進(jìn)性角度來(lái) 看，銀杏葉制劑至今已經(jīng)歷大約5個(gè)發(fā)展階段，即第一代將銀杏葉烘干，粉碎原生藥壓片； 第二代將銀杏葉用水提取后濃縮成膏，然后烘干、制粒壓片，但對(duì)其中的主要有效成分銀杏 黃酮和銀杏內(nèi)酯沒(méi)有進(jìn)行控制；第三代在第二代的基礎(chǔ)上對(duì)主要有效成分銀杏黃酮和銀杏 內(nèi)酯進(jìn)行定性控制，但無(wú)有害成分銀杏酸含量標(biāo)示；第四代控制有效成分銀杏黃酮在 以上，銀杏內(nèi)酯在6%以上，有害成分銀杏酸控制在IOppm以下；第五代控制有效成分總黃 酮在44%以上，黃酮苷在以上，銀杏內(nèi)酯在6%以上，有害成分銀杏酸控制在5ppm以 下。中國(guó)藥典2010版要求銀杏葉提取物中含總黃酮醇苷不得少于對(duì)％，含總內(nèi)酯不得少于 6%，銀杏酸含量小于IOppm ；美國(guó)藥典對(duì)此的要求是含總黃酮醇苷為22 27%，含總內(nèi)酯 為5. 4 12%，銀杏酸含量小于IOppm ；德國(guó)藥典對(duì)此要求是總黃酮醇苷為22 27%，含 內(nèi)酯為5 7%，銀杏酸含量小于lOppm。由此可見(jiàn)，控制好總黃酮醇苷、總內(nèi)酯和銀杏酸的 含量是銀杏葉提取物質(zhì)量的關(guān)鍵因素。已經(jīng)報(bào)道的銀杏葉提取物的現(xiàn)有工藝技術(shù)有微波提取法，超臨界萃取法等?，F(xiàn)有 技術(shù)中大多數(shù)只關(guān)注提取物的純化，追求有效成分的高含量，忽視了有害成成分銀杏酸的 含量控制，在臨床使用中容易引發(fā)不良反應(yīng)。為了解決此問(wèn)題，有少數(shù)報(bào)道提出增加有效成 分含量，降低有害成分含量的銀杏葉提取物，但是提取工藝繁瑣，還有的需要用到葡聚糖凝 膠等高貴填料，無(wú)法實(shí)現(xiàn)工業(yè)化大生產(chǎn)。其次，目前有效成分只聚焦于銀杏黃酮醇苷和萜類(lèi) 內(nèi)酯，而文獻(xiàn)報(bào)道二苯乙烯類(lèi)成分具有抗氧化、降低血脂等功效，對(duì)心血管具有良好的保護(hù) 作用，有可能是銀杏提取物治療心腦血管疾病的另一大類(lèi)活性成分。而目前所有報(bào)道的文 獻(xiàn)專(zhuān)利均未控制其中3，3' -二甲氧基_4，4' -二羥基二苯乙烯的含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種低酸高品質(zhì)銀杏葉提取物的制備方法，通過(guò)該提取方法 得到的銀杏葉提取物，顯著提高活性成分銀杏總黃酮醇苷、總內(nèi)酯的含量，降低有害成分銀 杏酸的含量，以更好的滿(mǎn)足藥物的臨床需要；首次對(duì)銀杏葉提取物中的二苯乙烯類(lèi)成分進(jìn)
3行了定量控制，以更好的控制產(chǎn)品質(zhì)量。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的一種低酸高品質(zhì)銀杏葉提取物的制備方法，該方法包括以下步驟a)將干燥銀杏葉粉碎至過(guò)20 30目篩，用質(zhì)量百分比濃度為65 85%乙醇加 熱回流提取，過(guò)濾，濾液濃縮至稠膏；b)在上述稠膏中加入銀杏葉重量3 6倍的水，攪勻，冷藏靜置M 48h，離心， 得上清液；c)將制得的上清液，以每克樹(shù)脂加入1. 5 2. 5ml上清液的比例，通過(guò)混合樹(shù)脂 組成的離子交換柱，先用水洗滌，再用質(zhì)量百分比濃度為陽(yáng) 70%的乙醇洗脫，收集55 70%乙醇洗脫液，將洗脫液濃縮，得濃縮液；其中，混合樹(shù)脂為大孔吸附樹(shù)脂與聚酰胺樹(shù)脂 按照4 1 9 1的重量比組成；優(yōu)選大孔吸附樹(shù)脂與聚酰胺樹(shù)脂按照6 1 9 1 的重量比組成。d)向所得濃縮液中加入水和低極性有機(jī)溶劑作為萃取溶劑，萃取2 3次，有機(jī)層 棄去，水相液濃縮，得濃縮液；干燥濃縮液，得銀杏葉提取物。所述的大孔吸附樹(shù)脂優(yōu)選為DM130、AB-8或DlOl型；所述的萃取溶劑為濃縮液體 積1 3倍的水和1 3倍的低極性有機(jī)溶劑，其中，低極性有機(jī)溶劑為乙醚、氯仿、環(huán)己烷 或正己烷，優(yōu)選環(huán)己烷或正己烷。采用水洗滌時(shí)用量為3 4倍柱體積，乙醇洗脫時(shí)用量 12 16倍柱體積，洗脫速度為20 30ml/min。所述的干燥濃縮液方式為噴霧干燥或真空干燥。本發(fā)明所制備的高品質(zhì)銀杏葉提取物中總黃酮含65%以上(銀杏葉提取物中含 35%以上的黃酮醇苷)，總萜類(lèi)內(nèi)酯含10%以上，3，3' -二甲氧基_4，4' - 二羥基二苯乙 烯含量達(dá)0.05%以上，銀杏酸含量低于2ppm。在步驟a)中回流提取的次數(shù)可為1 3次， 每次提取時(shí)間為1 2小時(shí)，每次乙醇用量為銀杏葉干重的6 14倍。優(yōu)選回流提取3 次，每次提取時(shí)間為1 2小時(shí)，三次乙醇用量范圍分別為銀杏葉干重的12 14倍(第一 次)，10 12倍(第二次)，6 8倍(第三次)。提取后濃縮得到的稠膏在60°C時(shí)相對(duì)密 度為1. 15 1. 25。上述銀杏葉提取物成分所指的“％”均為質(zhì)量百分含量。關(guān)鍵工藝參數(shù)的主要篩選過(guò)程如下試驗(yàn)1、考察了不同類(lèi)型大孔吸附樹(shù)脂富集純化銀杏葉提取物的效果。取7份Ikg的干燥銀杏葉，分別粉碎過(guò)20 30目篩，用75%乙醇加熱回流提取三 次，每次時(shí)間分別均是1.5小時(shí)，三次乙醇用量范圍是分別為銀杏葉干重的14倍，10倍，8 倍，提取液合并，濾過(guò)，減壓濃縮至60°C時(shí)相對(duì)密度為1. 15 1. 25的稠膏后，加干燥銀杏葉 3倍量水，充分?jǐn)噭颍?°C冷庫(kù)冷藏靜置48小時(shí)后，離心，上清液分別過(guò)不同的大孔樹(shù)脂柱， 先用4倍柱體積的蒸餾水洗滌，再分別用6倍柱體積質(zhì)量百分比濃度為55%的乙醇和8倍 柱體積70%的乙醇按20ml/min速度洗脫，合并洗脫液，洗脫液濃縮，噴霧干燥，即得。結(jié)果如表1所示表權(quán)利要求
1.一種銀杏葉提取物的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟a)將干燥銀杏葉粉碎至過(guò)20 30目篩，用質(zhì)量百分比濃度為65-85%的乙醇加熱回 流提取，過(guò)濾，濾液濃縮至稠膏；b)在上述稠膏中加入銀杏葉重量3 6倍的水，冷藏靜置M 48h，離心，得上清液；c)將制得的上清液，以每克樹(shù)脂加入1.5 2. 5ml上清液的比例，通過(guò)混合樹(shù)脂組成 的離子交換柱，先用水洗滌，再用質(zhì)量百分比濃度為陽(yáng) 70%的乙醇洗脫，收集55 70% 乙醇洗脫液，將洗脫液濃縮，得濃縮液；其中，混合樹(shù)脂為大孔吸附樹(shù)脂與聚酰胺樹(shù)脂按照 41 91的重量比組成；d)向所得濃縮液中加入水和低極性有機(jī)溶劑作為萃取溶劑，萃取2 3次，有機(jī)層棄 去，水相液濃縮，得濃縮液；干燥濃縮液，得銀杏葉提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟a)中所述的稠膏在60°C時(shí)相對(duì) 密度為1. 15 1. 25。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟c)中大孔吸附樹(shù)脂為DM130、 AB-8 或 DlOl 型。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟c)中混合樹(shù)脂為大孔吸附樹(shù)脂與 聚酰胺樹(shù)脂按照61 91的重量比組成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟d)中所述的萃取溶劑為濃縮液體 積1 3倍的水和1 3倍的低極性有機(jī)溶劑，其中，低極性有機(jī)溶劑為乙醚、氯仿、環(huán)己烷 或正己烷。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于步驟d)中所述的低極性有機(jī)溶劑為環(huán) 己烷或正己烷。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的干燥為噴霧干燥或真空干燥。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所制備的銀杏葉提取物中總黃酮含 65%以上，總萜類(lèi)內(nèi)酯含量含10%以上，3，3' -二甲氧基_4，4' -二羥基二苯乙烯含量達(dá) 0. 05%以上，銀杏酸含量低于2ppm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于在銀杏葉提取物中含35%以上的黃酮 醇苷。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種低酸高品質(zhì)銀杏葉提取物的制備方法，該制備方法包括提取、精制純化分離、濃縮干燥。通過(guò)本發(fā)明方法得到的銀杏葉提取物總黃酮含量達(dá)65％以上(其中黃酮醇苷達(dá)35％以上)，總萜類(lèi)內(nèi)酯含量達(dá)10％以上，3，3′-二甲氧基-4，4′-二羥基二苯乙烯含量達(dá)0.05％以上，銀杏酸含量可低于2ppm。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明首次對(duì)3，3′-二甲氧基-4，4′-二羥基二苯乙烯含量進(jìn)行了定量控制，有效成分富集提取率高，有害成分銀杏酸含量低，具有生產(chǎn)過(guò)程符合工業(yè)化大生產(chǎn)要求，工藝路線更加合理的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/16GK102133244SQ20111006872
公開(kāi)日2011年7月27日 申請(qǐng)日期2011年3月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月22日
發(fā)明者徐成, 段緒紅, 秦勇, 胡傳良, 金春 申請(qǐng)人:江蘇神龍藥業(yè)有限公司