專利名稱：一種注射用n(2)-l-丙氨酰-l-谷氨酰胺制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)制藥的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺是由丙氨酸和谷氨酰胺縮合反應(yīng)得到的二肽類物質(zhì)，進入體內(nèi)后N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺迅速水解為丙氨酸及谷氨酰胺，為接受腸外營養(yǎng)的病人提供谷氨酰胺。谷氨酰胺在人體中起著重要作用，一些重要的細胞功能，如蛋白質(zhì)的合成、細胞的吞噬作用和淋巴細胞的增殖、以及腸粘膜細胞的能量供應(yīng)等都必須依賴充足的谷氨酰胺， 所以在臨床上補充外源性的谷氨酰胺是非常有益的。在各種創(chuàng)傷、感染等應(yīng)激條件下，谷氨酰胺需要量大大增加，此時補充適當?shù)耐庠葱缘墓劝滨０穼τ诨颊叩幕謴?fù)具有重要作用。 特別是當病人不能正常飲食，而靠靜脈營養(yǎng)或要素飲食支持時，谷氨酰胺是必須補充的重要營養(yǎng)素。由于谷氨酰胺在水中溶解度差，在水溶液中不穩(wěn)定，在加熱滅菌的條件下還會生成有毒的焦谷氨酸和氨，所以一般靜脈使用的復(fù)方氨基酸溶液中都不含谷氨酰胺。而 N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是谷氨酰胺的良好載體，進入體內(nèi)后迅速水解為丙氨酸及谷氨酰胺。N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺克服了谷氨酰胺的本身的缺點，溶解度好、穩(wěn)定性好、 加熱滅菌不會形成焦谷氨酸和氨，因此是谷氨酰胺的理想替代物。目前國內(nèi)已上市的M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺劑型為輸液劑和粉針劑，由于 N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺穩(wěn)定性較差，溶液狀態(tài)長期放置易分解，而且注射液存在雜質(zhì)含量高、純度低，不便于運輸、貯藏等缺點。專利CN1004^931C中公開了一種M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺無菌粉針劑的制備方法，其分別對M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺和甘露醇進行無菌精制，得到無菌原料再進行混合分裝。該方法復(fù)雜繁瑣，無菌精制成本高，而且加入的甘露醇不起起到保護NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺穩(wěn)定性的目的，還會影響主藥含量及活性。本研究人員在長期的實際運用過程中，還發(fā)現(xiàn)M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺在實際生產(chǎn)中采用的方法，一直存在幾個問題，一是成品水分不易控制，標準中規(guī)定其水分含量不得超過3%，二是產(chǎn)品凍型不好，三是穩(wěn)定性和復(fù)水性差。水分超標容易使無水的干粉再次吸潮，影響產(chǎn)品穩(wěn)定性；凍型不好主要表現(xiàn)為得到的干粉外觀不盡如人意，往往會出現(xiàn)氣孔、萎縮、干燥結(jié)塊、松散和變色等情況，干粉凍型不好，不僅影響產(chǎn)品外觀，而且造成干粉的含量不均一，使用時復(fù)水性較差等不良影響。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺及其制備方法，以解決現(xiàn)有產(chǎn)品中的水分超標、產(chǎn)品凍型不好、穩(wěn)定性和復(fù)水性差以及輔料影響產(chǎn)品含量等問題。具體地，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案1、一種注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，由M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料直接經(jīng)配液、凍干、分裝制備而成，制備方法經(jīng)過以下步驟(1)取NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入注射用水，充分攪拌使其完全溶解；(2)溶液中加入針用活性碳，充分攪拌，過濾脫炭，再經(jīng)0. 2 μ m的過濾器進行除菌過濾；(3)取濾液置于已滅菌的凍干盤中，裝入凍干機冷凍箱，進行預(yù)凍，抽真空，加熱， 升華干燥，解吸干燥，破真空，凍干結(jié)束；(4)通入干燥除菌高純氮氣，待恢復(fù)至常壓，出箱，無菌分裝，壓塞，軋蓋，即得注射用N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。2、根據(jù)技術(shù)方案1所述的注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，制備方法經(jīng)過以下步驟(1)取M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制藥液總量的注射用水，充分攪拌使其完全溶解為濃度為20% -25%的溶液；(2)加入配液總量0. 1-0. 4%的針用活性碳，攪拌溶解5-20分鐘，過濾脫炭，再經(jīng) 0. 2 μ m的過濾器進行除菌過濾；(3)取濾液置于已滅菌的凍干盤中，每盤裝量厚度為10_15mm，裝入凍干機冷凍箱，進行預(yù)凍，預(yù)凍溫度為-50 40°C，達溫后保持2-5小時，抽真空，真空度為10-25Pa， 加熱，溫度升至-200C，保持0. 5-2小時，升至-10°C保持3-6小時，升溫至-5°C，保持0. 5-2 小時，升至0°C，待干燥層消失后保溫1-4小時；然后升高壓力，壓力升高數(shù)每分鐘小于3Pa， 溫度再升至10°C，保持0. 5-2小時，升至30°C，保溫1-2小時，待真空穩(wěn)定后做壓力升高測試，每分鐘壓力升高< 3pa，凍干結(jié)束；(4)通入流速為0. 12-0. 15L/s的干燥除菌高純氮氣，時間為10_30分鐘，恢復(fù)至常壓，出箱，無菌分裝，壓塞，軋蓋，即得注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。3、根據(jù)技術(shù)方案2所述的注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，制備方法經(jīng)過以下步驟(1)取N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制藥液總量的注射用水，充分攪拌使其完全溶解為濃度為20%的溶液；(2)加入配液總量0. 3%的針用活性碳，攪拌溶解10分鐘，過濾脫炭，再經(jīng)0. 2μπι 的過濾器進行除菌過濾；(3)取濾液置于已滅菌的凍干盤中，每盤裝量厚度為12mm，裝入凍干機冷凍箱，進行預(yù)凍，預(yù)凍溫度為_40°C，達溫后保持3. 5小時，抽真空，真空度為10-25Pa，加熱，溫度升至-20°C，保持1小時，升至-10°C保持4小時，升溫至_5°C，保持1小時，升至0°C，待干燥層消失后保溫2小時；然后升高壓力，壓力每分鐘升高數(shù)小于3Pa，溫度再升至10°C，保持1 小時，升至30°C，保溫2小時，待真空穩(wěn)定后做壓力升高測試，每分鐘壓力升高< 3pa，凍干結(jié)束；
(4)通入流速為0. 12-0. 15L/s的干燥除菌高純氮氣，時間為20分鐘，恢復(fù)至常壓，出箱，無菌分裝，壓塞，軋蓋，即得注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。4、根據(jù)技術(shù)方案1-3所述的任意一種注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑， 配液步驟(1)中，按照重量份計，M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的濃度為20%-25%。5、根據(jù)技術(shù)方案4所述的注射用N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，配液步驟(1) 中，按照重量份計，N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的濃度為20%。本發(fā)明人針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，采取了以下技術(shù)措施對于輔料影響藥物活性及水溶性，不能保護藥物穩(wěn)定性的問題，本發(fā)明人在注射用NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺處方中未添加任何輔料，極大地保持藥物活性不受輔料干擾，在水溶液中迅速溶解，同時未添加輔料也降低了生產(chǎn)成本。對于產(chǎn)品不穩(wěn)定，易吸潮，水分超標問題，本發(fā)明人在注射用M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺生產(chǎn)過程的冷凍干燥結(jié)束后，采用氮氣保護，通入干燥的高純氮氣經(jīng)除菌過濾后進入前箱復(fù)壓，將制品與潔凈空氣中的水份和氧氣徹底隔離起來，避免產(chǎn)品吸潮和緩慢氧化，增加藥品的穩(wěn)定性。二是優(yōu)化凍干過程參數(shù)，使產(chǎn)品充分干燥，去除殘余水分。對于產(chǎn)品結(jié)晶度不高、凍型不好問題，本發(fā)明人通過對工藝處方和凍干條件進行分析，首先調(diào)整了凍干溶液的濃度及凍干盤的裝盤厚度。其次對產(chǎn)品的凍干參數(shù)條件進行不斷摸索，發(fā)現(xiàn)影響成品凍型的主要是預(yù)凍和升華干燥階段升溫速度不均衡、保溫時間短等因素，本發(fā)明延長了預(yù)凍過程的保溫時間，使樣品內(nèi)溫度自動平衡，消除其中的溫度梯度，溶液完全形成固態(tài)，避免了在升華過程中溶解周圍產(chǎn)品從而導(dǎo)致凍型萎縮；在升華干燥階段將升溫的速度改為相對平穩(wěn)，升溫差距降低，每上升一個溫度段進行適當?shù)谋?，這樣可以使藥品在比較均衡的條件下進行升華，避免了升溫過快或者板層溫度差異大，導(dǎo)致產(chǎn)品還有較大水分從而影響凍型。本發(fā)明通過對技術(shù)參數(shù)的選擇，找到了解決現(xiàn)有技術(shù)問題的方法，因此，采用本發(fā)明方法制得的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺具有如下有益效果1、無添加任何輔料，直接采用凍干后的M2)-L_丙氨酰-L-谷氨酰胺無菌粉末分裝，避免輔料對藥物活性、穩(wěn)定性、水溶性等的影響，同時未添加輔料，節(jié)約了生產(chǎn)成本。2、在配制過程中，調(diào)整了凍干溶液的濃度及凍干盤的裝盤厚度，避免了濃度及厚度造成凍干后產(chǎn)品的含水量偏高及凍型不好的影響。3、在凍干過程中，采用最合適的工藝參數(shù)，極大程度的避免了凍干過程中水份去除不凈及溫度控制不好對產(chǎn)品形態(tài)的不良影響，將產(chǎn)品水分控制在最低水平；同時溫度傳遞均勻，不會出現(xiàn)塌陷、氣泡、松散、萎縮等現(xiàn)象，且制得的產(chǎn)品疏松飽滿，小顆粒細晶體較多，顆粒均勻。4、冷凍干燥結(jié)束后，采用氮氣保護，避免產(chǎn)品吸潮和緩慢氧化，增加藥品的穩(wěn)定性。5、得到的產(chǎn)品水溶性好，加水速溶，純度高，穩(wěn)定性高。為了使本領(lǐng)域普通技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明，本申請人進行了一系列實驗研究，以證明本發(fā)明的效果1、輔料選擇實驗取N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料200g，加120ml注射用水溶解，分成4份，分別加入藥用輔料甘露醇、乳糖、氯化鈉及不加輔料，再加入0. Ig針用活性碳，攪拌溶解15分鐘，過濾脫炭，再經(jīng)0. 2 μ m的過濾器進行除菌過濾，凍干，出箱。以藥物的溶解度、溶液澄清度與顏色、水分、含量，產(chǎn)品外觀形態(tài)為指標，考察輔料對藥物的影響。結(jié)果如下表1。表1輔料選擇實驗
組別溶解度溶液澄清度與顏色水分含量外觀形態(tài)甘露醇組易溶略有渾濁、無色3.8%95.4%表明萎縮乳糖組易溶略有渾濁、微黃色5. 2%93. 6%塌陷、變色氣化鈉組易溶略有渾濁、乳內(nèi)色4. 4%93. 1%結(jié)塊、變硬未加輔料組極易溶解澄清無色2.6%98. 2%疏松、飽滿 實驗表明，未添加輔料的N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在凍干以后，主藥在水溶液中迅速溶解，溶液澄清無色，含量高于添加輔料組，水分控制達到小于3%的標準，同時外觀飽滿疏松，因此，我們選擇不添加任何輔料，對產(chǎn)品進行凍干。2、溶液濃度及裝盤厚度研究溶液的濃度過高或過低導(dǎo)致凍干后產(chǎn)品干燥結(jié)塊或萎縮、水分不合格等，同樣裝盤的溶液過厚也會導(dǎo)致凍干后產(chǎn)品的含水量偏高。本實驗選取NO) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，分別制成10%、15%、20%、25%、30%五種不同的溶液濃度(g/100ml水)，裝盤厚度控制在10-15mm之間，以產(chǎn)品凍型及水分為指標，考察溶液濃度及裝盤厚度對產(chǎn)品成型性的影響。結(jié)果如下表2。表2溶液濃度裝及盤厚度范圍選擇實驗
權(quán)利要求
1.一種注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，其特征在于由M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料直接經(jīng)配液、凍干、分裝制備而成，制備方法經(jīng)過以下步驟(1)取M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入注射用水，充分攪拌使其完全溶解；(2)溶液中加入針用活性碳，充分攪拌，過濾脫炭，再經(jīng)0.2 μ m的過濾器進行除菌過濾；(3)取濾液置于已滅菌的凍干盤中，裝入凍干機冷凍箱，進行預(yù)凍，抽真空，加熱，升華干燥，解吸干燥，破真空，凍干結(jié)束；(4)通入干燥除菌高純氮氣，待恢復(fù)至常壓，出箱，無菌分裝，壓塞，軋蓋，即得注射用 N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，其特征在于制備方法經(jīng)過以下步驟(1)取N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制藥液總量的注射用水，充分攪拌使其完全溶解為濃度為20% -25%的溶液；(2)加入配液總量0.1-0. 4 %的針用活性碳，攪拌溶解5-20分鐘，過濾脫炭，再經(jīng) 0. 2 μ m的過濾器進行除菌過濾；(3)取濾液置于已滅菌的凍干盤中，每盤裝量厚度為10-15mm，裝入凍干機冷凍箱，進行預(yù)凍，預(yù)凍溫度為-50 _40°C，達溫后保持2-5小時，抽真空，真空度為10-25Pa，加熱， 溫度升至-200C，保持0. 5-2小時，升至-10°C保持3-6小時，升溫至-5°C，保持0. 5-2小時， 升至0°C，待干燥層消失后保溫1-4小時；然后升高壓力，壓力升高數(shù)每分鐘小于3Pa，溫度再升至10°C，保持0. 5-2小時，升至30°C，保溫1-2小時，待真空穩(wěn)定后做壓力升高測試，每分鐘壓力升高< 3pa，凍干結(jié)束；(4)通入流速為0.12-0. 15L/s的干燥除菌高純氮氣，時間為10-30分鐘，恢復(fù)至常壓， 出箱，無菌分裝，壓塞，軋蓋，即得注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，其特征在于制備方法經(jīng)過以下步驟(1)取N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入配制藥液總量的注射用水，充分攪拌使其完全溶解為濃度為20%的溶液；(2)加入配液總量0.3%的針用活性碳，攪拌溶解10分鐘，過濾脫炭，再經(jīng)0. 2μπι的過濾器進行除菌過濾；(3)取濾液置于已滅菌的凍干盤中，每盤裝量厚度為12mm，裝入凍干機冷凍箱，進行預(yù)凍，預(yù)凍溫度為-40°C，達溫后保持3. 5小時，抽真空，真空度為10-25Pa,加熱，溫度升至-20°C，保持1小時，升至-10°C保持4小時，升溫至_5°C，保持1小時，升至0°C，待干燥層消失后保溫2小時；然后升高壓力，壓力每分鐘升高數(shù)小于3Pa，溫度再升至10°C，保持1 小時，升至30°C，保溫2小時，待真空穩(wěn)定后做壓力升高測試，每分鐘壓力升高< 3pa，凍干結(jié)束；(4)通入流速為0.12-0. 15L/s的干燥除菌高純氮氣，時間為20分鐘，恢復(fù)至常壓，出箱，無菌分裝，壓塞，軋蓋，即得注射用N(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的任意一種注射用NO)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，其特征在于配液步驟(1)中，按照重量份計，M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的濃度為20% -25%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的注射用M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑，其特征在于配液步驟(1)中，按照重量份計，M2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺水溶液的濃度為20%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種注射用N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制劑及其制備方法，它由N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料直接經(jīng)配液、凍干、分裝制備而成，方法經(jīng)過以下步驟(1)取N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料，加入注射用水，充分攪拌使其完全溶解；(2)溶液中加入針用活性碳，充分攪拌，過濾脫炭，再經(jīng)0.2μm的過濾器進行除菌過濾；(3)取濾液置于已滅菌的凍干盤中，裝入凍干機冷凍箱，進行預(yù)凍，抽真空，加熱，升華干燥，解吸干燥，破真空，凍干結(jié)束；(4)通入干燥除菌高純氮氣，出箱，無菌分裝，壓塞，軋蓋，即得注射用N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
文檔編號A61K38/05GK102228444SQ20111009205
公開日2011年11月2日 申請日期2011年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月13日
發(fā)明者馮志剛, 周黎亞, 宋婧瑜, 竇啟玲, 隋東虎 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司