專利名稱：一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于美容保健和醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
關(guān)于人體表皮的技術(shù)背景表皮是人體的第一道防護(hù)屏障，其主要組成細(xì)胞為角朊細(xì)胞，為了完成其屏障功能，角朊細(xì)胞必須進(jìn)行復(fù)雜而且受到嚴(yán)密調(diào)控的分化過(guò)程，最終形成包括基底層、棘層、顆粒層、透明層及角質(zhì)層的復(fù)層結(jié)構(gòu)。1、基底層是表皮的最底層，借基膜與深層的真皮相連。基底層細(xì)胞皆附在基底膜上，它是表皮中唯一可以分裂復(fù)制的細(xì)胞，并可以直接攝取微血管內(nèi)的養(yǎng)分，以補(bǔ)充細(xì)胞分裂復(fù)制之所需。基底層是一層矮柱狀上皮細(xì)胞。細(xì)胞較小、排列整齊，核呈卵圓形胞質(zhì)中常含有黑色素顆粒。矮柱狀上皮細(xì)胞之間有黑色素細(xì)胞。黑色素細(xì)胞略呈圓形，有樹(shù)枝狀突起，胞核較小，能產(chǎn)生黑色素顆粒。黑色素顆粒的多少與皮膚顏色的深淺有關(guān)。黑色素顆粒能夠吸收紫外線，使深層組織免受紫外線輻射的損害?；讓拥募?xì)胞分裂比較活躍，不斷產(chǎn)生新細(xì)胞并向淺層推移，以補(bǔ)充衰老、脫落的角質(zhì)細(xì)胞。2、棘細(xì)胞層位于基底層的淺面，由4-10層多邊形細(xì)胞組成，細(xì)胞較大，由許多棘狀突起，胞核呈圓形。較老的細(xì)胞往上送達(dá)棘細(xì)胞層。在這兒他們會(huì)擴(kuò)大呈扁平狀，并長(zhǎng)出棘狀物，以便牢固地攀靠在一起。3、顆粒層位于棘層的淺面，由2-3層梭形細(xì)胞組成。胞質(zhì)中有大小不等的透明角質(zhì)顆粒。普通染色呈強(qiáng)嗜堿性，胞核較小，染色較淡。老化的細(xì)胞繼續(xù)被推送到顆粒層里。 至此，細(xì)胞內(nèi)已充滿著含角質(zhì)素的顆粒。隨著角質(zhì)素的增加，細(xì)胞會(huì)逐漸地角質(zhì)化而死亡。4、透明層位于顆粒層的淺面，由2-3層無(wú)核的扁平細(xì)胞組成。胞質(zhì)中含有嗜酸性透明角質(zhì)，它由顆粒層細(xì)胞的透明角質(zhì)顆粒變性而成。5、角質(zhì)層位于表皮的最淺層，由幾層到幾十層扁平無(wú)核角質(zhì)細(xì)胞組成，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)充滿嗜酸性的角蛋白，對(duì)酸、堿，摩擦等因素有較強(qiáng)的抵抗力。角質(zhì)層的表面細(xì)胞常呈小片脫落，形成皮屑。角質(zhì)層是表皮的最上層，由已經(jīng)完全角質(zhì)化的死細(xì)胞所構(gòu)成的。這些緊密相連的死細(xì)胞，構(gòu)成了最重要的保護(hù)屏障層，能防止外界化學(xué)、物理、微生物等的侵犯。關(guān)于人體表皮屏障功能的技術(shù)背景表皮位于皮膚的最外層，是和美容關(guān)系最密切的結(jié)構(gòu)，皮膚的完整性、厚度、質(zhì)地和水合程度在一定程度上決定著皮膚的美觀和皮膚的生理功能。對(duì)于各種原因(年齡、日曬、藥物、美容等)引起的角質(zhì)層面部表皮的變薄或損傷，容易導(dǎo)致皮膚的生理功能失調(diào)， 引起皮膚疾病，如皮膚潮紅、毛細(xì)血管擴(kuò)張、色素沉著、皮膚老化，甚至引起某些皮膚疾病。1、在內(nèi)外界各種因素的刺激劑、致敏劑的作用下，使表皮細(xì)胞間的間質(zhì)受到破壞， 細(xì)胞與細(xì)胞間的粘接性喪失，表皮角質(zhì)形成細(xì)胞排列紊亂、錯(cuò)位。真皮和表皮內(nèi)的水分大量逸出，水分丟失。皮膚丟失水分后皮膚就干燥、缺水，潮紅，龜裂，鱗屑，嚴(yán)重者發(fā)生皸裂，出血。2、表皮屏障功能障礙，將使得表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的細(xì)胞與細(xì)胞之間的細(xì)胞間質(zhì)遭到破壞、丟失，粘合力消失，角質(zhì)形成細(xì)胞就會(huì)脫落。真皮內(nèi)和表皮水分丟失，皮膚干燥，表皮細(xì)胞更換時(shí)間就會(huì)縮短。脫落下來(lái)的角質(zhì)形成細(xì)胞是角化過(guò)度或角化不全細(xì)胞。大量角質(zhì)細(xì)胞堆積，不斷地脫落，這就成了銀屑病。3、當(dāng)表皮屏障功能喪失，大量水分丟失。表皮喪失了保濕功能，皮膚干燥、鱗屑、龜裂，形成皮膚干燥癥。表皮水分大量丟失，表皮細(xì)胞層次變薄，真皮內(nèi)膠原纖維減少，排列紊亂，從而導(dǎo)致皮膚干燥，萎癟，老化，缺乏彈性，出現(xiàn)皺紋。進(jìn)而發(fā)生皮膚灰暗，色素沉著和發(fā)生各種老年疣。4、皮膚屏障功能障礙，細(xì)胞間隙加大，皮膚完整性被破壞。從而對(duì)外界環(huán)境中各種物理，化學(xué)，微生物的刺激敏感性增高。由此引起皮膚病和皮膚干燥癥、皮膚瘙癢癥、濕疹、 異位性皮炎、銀屑病等。這些疾病可以歸結(jié)為干燥性皮膚病。因此，表皮作為人體肌膚的第一道天然屏障，對(duì)機(jī)體的保護(hù)具有以下多方面的作用。第一，能防護(hù)機(jī)械性、物理性刺激，這是因?yàn)楸砥さ慕琴|(zhì)層致密而堅(jiān)韌，在經(jīng)常受到摩擦和壓力的部位能增厚，以抵抗摩擦與壓迫。另外，表皮角質(zhì)層和色素可以防止紫外線損傷， 角質(zhì)層可將大部分日光反射回去，日曬會(huì)使角質(zhì)層增厚，此為防護(hù)紫外線的保護(hù)性反應(yīng)，而黑色素有較好的吸收和遮斷紫外線的作用，阻止紫外線穿透皮膚，使深部組織器官不致受到傷害；第二，可以防護(hù)化學(xué)物質(zhì)的腐蝕，這是由于角質(zhì)層細(xì)胞為無(wú)細(xì)胞核和含大量水分的扁平形細(xì)胞，似房頂瓦片互相交錯(cuò)，緊密結(jié)合，形成一層幾乎不可滲透的屏障，能阻止多數(shù)化學(xué)物質(zhì)的吸收，并防止表皮下面的液體滲透出來(lái)。如角質(zhì)層受到損傷，除失去水分外，滲透性也會(huì)發(fā)生變化，皮膚屏障作用喪失。第三，正常的皮膚經(jīng)常接觸細(xì)菌等微生物，在健康情況下不發(fā)生感染。除皮膚面上的毛囊口是相對(duì)的弱點(diǎn)外，一般說(shuō)皮膚是有抵抗細(xì)菌侵襲能力的。有人認(rèn)為這是與正常皮膚的酸性反應(yīng)(PH5.5左右)有關(guān)。皮膚表面上形成的“酸性膜”，不利于細(xì)菌、霉菌和病毒的生長(zhǎng)和繁殖。皮膚不僅僅對(duì)機(jī)體具有保護(hù)作用，同時(shí)對(duì)機(jī)體生理功能具有調(diào)節(jié)作用。比如，正常角質(zhì)層中的脂質(zhì)、天然保濕因子使角質(zhì)層保持一定的含水量，對(duì)皮膚具有保濕功能，保持皮膚的柔軟性、彈性；另外健康的皮膚既可防止過(guò)多的體內(nèi)熱外散，又可防止過(guò)高的體外熱傳入。所以，表皮的重建及修復(fù)對(duì)于皮膚的保護(hù)是非常重要的。關(guān)于當(dāng)前表皮重建及修復(fù)的技術(shù)背景如何重建或修復(fù)表皮屏障功能是處理皮膚問(wèn)題的首選。修復(fù)表皮屏障功能最簡(jiǎn)單的方法就是外用保濕劑化妝品。所謂保濕化妝品，就是能夠能增加皮膚水分，濕度的就是保濕化妝品，其主要的功能是增加表皮角質(zhì)細(xì)胞的含水量，使用之后可以覆蓋在表皮上形成一層油，防止水分的丟失以及吸收外界水分輸入皮膚，可以很快糾正皮膚干燥、皸裂，但是， 這些單純的保濕化妝品不能從根本上修復(fù)表皮屏障功能，且容易導(dǎo)致皮膚油膩。當(dāng)前，市場(chǎng)上很多的表皮屏障重建及修復(fù)產(chǎn)品，大多是通過(guò)添加相關(guān)細(xì)胞因子，促進(jìn)表皮細(xì)胞的增殖、 生長(zhǎng)，從而重建及修復(fù)表皮屏障。1、一些表皮重建及修復(fù)產(chǎn)品通過(guò)添加相關(guān)的細(xì)胞生長(zhǎng)因子來(lái)促進(jìn)表皮細(xì)胞的重建和修復(fù)。如表皮生長(zhǎng)因子(EGF)作為表皮修復(fù)和重建的主要成分，是人體內(nèi)存在的一種生長(zhǎng)因子，它的主要功能是促進(jìn)皮膚細(xì)胞的分裂。研究表明極微量的EGF即能強(qiáng)烈刺激上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞的增殖、生長(zhǎng)，抑制衰老基因表達(dá)，阻止皮膚衰老，使皮膚各組成份保持最佳生理狀態(tài)。此外，它還能刺激細(xì)胞外一些大分子(如透明質(zhì)酸和膠原蛋白等)的合成與分泌，滋潤(rùn)皮膚，是決定皮膚活力和健康的關(guān)鍵因素。其作用機(jī)制是EGF主動(dòng)與表皮細(xì)胞膜上的特異性受體相結(jié)合，從而激活蛋白酶，加快蛋白質(zhì)的合成，促進(jìn)成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)， 促進(jìn)表皮細(xì)胞增殖分化，促進(jìn)彈性纖維細(xì)胞的發(fā)育及增強(qiáng)其功能，激活老化細(xì)胞的再生，加速細(xì)胞的新陳代謝和更新，快使衰老死亡的細(xì)胞得以及時(shí)補(bǔ)充，更多地合成和分泌膠原蛋白、透明質(zhì)酸等大分子；改善皮膚微循環(huán)，提供良好的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，使損傷的表皮得以即時(shí)修復(fù)和重建，同時(shí)還能達(dá)到消除皺紋、抗衰老、淡化色斑、滋潤(rùn)補(bǔ)水的效果，使肌膚恢復(fù)光潔和平滑。2、角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)作為另一種用于表皮重建和修復(fù)的細(xì)胞因子，通過(guò)與上皮細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體(KGFR)結(jié)合，特異性地刺激皮膚表皮層細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和遷移，使皮膚光滑細(xì)膩，消除皺紋，抗表皮老化，增加皮膚彈性；能夠促進(jìn)老化和受損細(xì)胞的修復(fù)，調(diào)節(jié)細(xì)胞新陳代謝；使表皮血管豐富，為皮膚細(xì)胞提供更多的營(yíng)養(yǎng)成分和氧分子，促進(jìn)皮膚恢復(fù)到最佳生理狀態(tài)，使皮膚紅潤(rùn)白嫩；另外，KGF可明顯刺激人成熟角質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)，并具有防輻射和抗炎作用，能夠顯著加強(qiáng)皮膚抵御外界不良刺激的能力。其作用機(jī)制包括①促有絲分裂可能與促有絲分裂的基因(如c-myC、C-f0S)和生長(zhǎng)因子(如轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子)，以及核苷酸合成的調(diào)節(jié)酶(如腺苷琥珀酸裂解酶)有關(guān)。②激活信號(hào)通路角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子可能通過(guò)PKC和MAH(來(lái)完成防護(hù)作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。③調(diào)節(jié)酶活性角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子可能通過(guò)誘導(dǎo)一些解毒酶的表達(dá)，如非硒依賴性谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、過(guò)氧化物還原酶VI、核呼吸因子和肺部表皮型脂肪酸結(jié)合蛋白等，參與活性氧簇的解毒作用。雖然這些細(xì)胞因子在表皮重建及修復(fù)上發(fā)揮了一定的作用，但由于細(xì)胞因子屬于蛋白質(zhì)或多肽，因此單純地添加于化妝品中，不僅會(huì)因?yàn)樗鼈冏陨磔^短的半衰期易導(dǎo)致其生物活性降低，而且，還因?yàn)榛瘖y品中配方中的多種化工原料、以及化妝品在制備過(guò)程中的加熱條件等諸多因素均容易導(dǎo)致細(xì)胞因子失活；特別是單一的應(yīng)用細(xì)胞因子，無(wú)法全方位、 多層次地重建及修復(fù)表皮細(xì)胞；另外，當(dāng)表皮受到紫外線或輻射損傷、皮膚外用某些制劑或藥物、或者皮膚組織衰老時(shí)，表皮細(xì)胞膜上的細(xì)胞因子受體表達(dá)量降低，且受體活性也下降，所添加的細(xì)胞因子無(wú)法與足夠的受體結(jié)合，從而使得細(xì)胞因子的生物利用度降低，無(wú)法很好地發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)；除此之外，目前所添加細(xì)胞因子的化妝品中，缺乏良好的細(xì)胞因子保護(hù)劑和協(xié)同劑，加上添加的細(xì)胞因子濃度或含量大多數(shù)為理論設(shè)計(jì)量，并未經(jīng)過(guò)系統(tǒng)和規(guī)范的時(shí)效-量效及藥代動(dòng)力學(xué)等基礎(chǔ)研究，因此，實(shí)際應(yīng)用時(shí)不僅應(yīng)用范圍局限，而且作用效果也很有限。所以，如何科學(xué)、合理、有效的應(yīng)用細(xì)胞因子，提高其生物活性、增加相關(guān)功效成分與細(xì)胞因子之間的相互協(xié)同保護(hù)作用、以及強(qiáng)化細(xì)胞因子在表皮重建中的復(fù)配作用，是我們需要去解決的問(wèn)題之一。關(guān)于全血的基本組分及其功效作用的技術(shù)背景血液是流動(dòng)在心臟和血管內(nèi)的不透明紅色液體，主要成分為血漿、血細(xì)胞和血小板三種。血細(xì)胞又分為紅細(xì)胞和白細(xì)胞。血漿中含有人體所需最基本、較齊全的營(yíng)養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子等，如氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)離子、糖類、激素、酶，這些成分能為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)細(xì)胞的增殖和分化，而血漿中豐富和齊全的細(xì)胞生長(zhǎng)因子，能夠特異性與目的細(xì)胞膜上受體結(jié)合、并通過(guò)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路促進(jìn)和加快細(xì)胞的增殖及生長(zhǎng)代謝及相關(guān)因子的表達(dá)等，可為體外細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞生長(zhǎng)和生存的提供很好的環(huán)境條件。血液中的血細(xì)胞勻漿后能釋放很多的細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如血細(xì)胞中含有大量的超氧化物歧化酶，具有抗自由基，達(dá)到抗衰老的作用；白細(xì)胞釋放的內(nèi)容物可起到抗炎的作用； 血小板中勻漿后能釋放生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子、 表皮生長(zhǎng)因子等，這些生長(zhǎng)因子可促進(jìn)軟組織和皮膚的愈合，并且它們之間有著良好的協(xié)同作用。加上自體血液是抽取患者本人靜脈血經(jīng)離心分離后所獲得的自體成分，來(lái)源方便、 制備簡(jiǎn)便、安全有效、新鮮無(wú)污染、無(wú)刺激、無(wú)過(guò)敏、無(wú)毒副作用等特點(diǎn)，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究及醫(yī)學(xué)美容領(lǐng)域中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。近年來(lái)，隨著自體血漿(血清)在醫(yī)學(xué)美容，整形外科(皮膚修復(fù)治療，外科整形) 中展現(xiàn)出其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，并得到了良好的效果。另外由于來(lái)其源于自體，無(wú)免疫排斥，并發(fā)癥少，安全性高等特點(diǎn)，為其進(jìn)一步在皮膚美容領(lǐng)域中展現(xiàn)出來(lái)廣闊的應(yīng)用前景。但是，由于過(guò)低或過(guò)高濃度的血清(血漿)制品對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)并非最佳濃度，因此難以達(dá)到最佳的生物學(xué)效應(yīng)；而且，過(guò)高的血液濃度有時(shí)可能會(huì)抑制表皮細(xì)胞的增殖、分化，甚至引起細(xì)胞毒性，導(dǎo)致表皮細(xì)胞損傷(生長(zhǎng)遲緩或抑制)，特別需要指出的是，血清(血漿)只是全血的一部分，通常只能提供表皮細(xì)胞生長(zhǎng)最基本的營(yíng)養(yǎng)成分和部分微環(huán)境條件，而難以提供自體表皮層結(jié)構(gòu)及其屏障重建所需要達(dá)到的最佳微環(huán)境及細(xì)胞生長(zhǎng)因子濃度或含量和種類。 事實(shí)上，全血中的血細(xì)胞含有許多血清(血漿)之中少有的成分，如紅細(xì)胞中含有豐富的抗氧化酶，如超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSHPX)等，對(duì)于表皮修復(fù)及屏障結(jié)構(gòu)重建過(guò)程中的抗氧化及自由基清除至關(guān)重要；血細(xì)胞中含有的血小板經(jīng)過(guò)激活后可釋放多種大量細(xì)胞生長(zhǎng)因子，這對(duì)促進(jìn)或加快表皮細(xì)胞的分裂、增殖及改善表皮細(xì)胞活性及細(xì)胞膜上相應(yīng)受體也具有重要意義；血細(xì)胞中的白細(xì)胞可釋放出大量抗炎因子、淋巴細(xì)胞因子及其它生物活性成分因子等，對(duì)于改善表皮的免疫功能等也具有積極作用。因此，在應(yīng)用血液制品進(jìn)行皮膚修復(fù)和屏障功能重建時(shí)，所應(yīng)用的自體血液不僅需要確定合適的濃度或劑量，而且，還需要血細(xì)胞及其所釋放的多種生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子等協(xié)同作用，使其有效地應(yīng)用于表皮修復(fù)及皮膚屏障功能重建，更好地發(fā)揮出自體血液自體應(yīng)用的最大價(jià)值和生物學(xué)效應(yīng)，這也是我們所要解決的重要技術(shù)問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)背景技術(shù)中存在的缺點(diǎn)和問(wèn)題加以改進(jìn)、創(chuàng)新，提供一種用于皮膚表皮層屏障重建的新產(chǎn)品，這種產(chǎn)品可以從根本上解決表皮屏障障礙的問(wèn)題，完全可以滿足人們的需求。①本發(fā)明產(chǎn)品主要成分來(lái)源于抽取自體靜脈血經(jīng)全血?jiǎng)驖{后所獲得的自體成分，來(lái)源方便、制備簡(jiǎn)便、安全有效、新鮮無(wú)污染、無(wú)刺激、無(wú)過(guò)敏、無(wú)毒副作用；② 本發(fā)明科學(xué)、合理、有效的應(yīng)用細(xì)胞因子，提高其生物活性、并增加相關(guān)功效成分與細(xì)胞因子之間的相互協(xié)同保護(hù)作用、以及強(qiáng)化細(xì)胞因子在表皮重建中的復(fù)配作用；③本發(fā)明確定了自體血液合適的濃度或劑量，而且，還有血細(xì)胞及其所釋放的多種生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子等協(xié)同作用，使其有效地應(yīng)用于表皮修復(fù)及皮膚屏障功能重建，更好地發(fā)揮出自體血液自體應(yīng)用的最大價(jià)值和生物學(xué)效應(yīng)。本發(fā)明通過(guò)發(fā)揮了自體全血?jiǎng)驖{液和細(xì)胞因子各自的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)屏蔽了它們之間不足，制備出了一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，用于皮膚表皮層屏障的重建。本發(fā)明的目的是提供一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物。 本發(fā)明的另一目的是提供該用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物的制備方法。1、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案(1)本發(fā)明所述的一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，其
特征在于它是由下述重量配比的原料組成
新鮮自體全血5 95
重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉0.001 0.050
重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉0.001 0.050
枸櫞酸三鈉1.5 4.2
磷酸二氫鈉0.20 0.35
葡萄糖3.0 4.5
枸櫞酸(U0 0.52
腺嘌呤0.015 0.07
生理鹽水5 35。(2)本發(fā)明所述的一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，其特征在于它是由下述優(yōu)選重量配比的原料組成
新鮮自體全血70
重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉0.01
重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉0.01
枸櫞酸三鈉2.73
磷酸二氫鈉0.22
葡萄糖3.20
枸櫞酸0.327
腺嘌呤0.028
生理鹽水23.475。
(3)本發(fā)明所述的一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，其特征在于所述的一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物的制備方法包括以下步驟①按上述一種用于表皮重建的血液勻漿復(fù)合物的原料配比，用分析天平分別準(zhǔn)確稱取配方量的枸櫞酸三鈉、磷酸二氫鈉、葡萄糖、枸櫞酸、腺嘌呤置于經(jīng)過(guò)洗消過(guò)的容器中， 加入配方量的生理鹽水進(jìn)行充分溶解，混合均勻，過(guò)濾除菌備用；②在準(zhǔn)備用于盛血的容器中先加入上述配制的液體，然后嚴(yán)格按照人體抽血的規(guī)范化要求，將采集到的受術(shù)者的肘中靜脈血液按配方量加入后顛倒混勻，然后混勻的全血進(jìn)行勻漿處理，勻漿之后再使用超聲破碎處理，勻漿及超聲破碎過(guò)程要在低溫環(huán)境中或在冰上操作進(jìn)行；③將獲得的自體全血?jiǎng)驖{物加入配方量的重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉和重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉，充分溶解，輕輕混合均勻后，即為一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，置于4°C冰箱中保存和備用。(4)本發(fā)明產(chǎn)品使用方法凈面后，用熱毛巾敷面或噴霧機(jī)蒸面10分鐘，待毛孔張開(kāi)，表皮溫度提高后使用；取適量制備好的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物自，均勻地涂抹于面部或患處，30分鐘后洗凈即可。2、本發(fā)明的主要技術(shù)優(yōu)點(diǎn)與以往的皮膚表皮屏障重建產(chǎn)品相比，本發(fā)明的產(chǎn)品能從根本上解決表皮屏障功能的問(wèn)題?；谧泽w全血?jiǎng)驖{液的生物學(xué)特性，其含有大量皮膚所需的營(yíng)養(yǎng)成分，能達(dá)到保濕、抗氧化、促進(jìn)相關(guān)細(xì)胞的增殖及蛋白的合成。尤其是能促進(jìn)表皮層細(xì)胞的形成，預(yù)防及解決由于表皮屏障功能損害而引起的皮膚疾病，效果十分理想。①自體全血?jiǎng)驖{來(lái)源方便、制備簡(jiǎn)單，成本低廉；另外，正常情況下，由于來(lái)源于自體，所以自體全血?jiǎng)驖{使用副作用小、且自體血液不會(huì)出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，生物相容性好，安全性高。②自體全血?jiǎng)驖{液能上調(diào)表皮細(xì)胞上的相關(guān)受體，從而使組方中的細(xì)胞因子能更好地與其受體結(jié)合，從而激活受體產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)，達(dá)到表皮重建的效果；另外，細(xì)胞因子和自體全血?jiǎng)驖{液聯(lián)合使用，產(chǎn)生的這種強(qiáng)化協(xié)同作用是單純細(xì)胞因子作用無(wú)法比擬的。③因自體全血?jiǎng)驖{經(jīng)過(guò)強(qiáng)化后，除含有表皮細(xì)胞生存最基本的全營(yíng)養(yǎng)成分及最適合的微環(huán)境條件之外，還含有表皮細(xì)胞生長(zhǎng)最需要的細(xì)胞生長(zhǎng)因子，特別是表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子，可對(duì)表皮修復(fù)更好，皮膚屏障功能重建效果更快；自體全血?jiǎng)驖{液除了能強(qiáng)化細(xì)胞因子效果外，還能提高細(xì)胞因子在外環(huán)境中的穩(wěn)定性，使得細(xì)胞因子活性保存時(shí)間更長(zhǎng)。④用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物具有抗衰老以及保濕效果；同時(shí)自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物能促進(jìn)表皮細(xì)胞、角朊細(xì)胞的增殖、分化，最終形成包括基底層、棘層、顆粒層、透明層及角質(zhì)層的復(fù)層結(jié)構(gòu)。從多方面、多層次、根本上改變?nèi)梭w皮膚各種細(xì)胞組織的代謝，改善微循環(huán)，恢復(fù)皮膚健康，達(dá)到表皮層重建的效果。⑤本發(fā)明不僅提高了表皮細(xì)胞生存所需的天然全營(yíng)養(yǎng)成分、最適PH條件(6. 0 6. 2)、離子濃度、以及細(xì)胞生長(zhǎng)、生存、生活的最佳微環(huán)境，還提供了激活表皮細(xì)胞所需最佳的自體全血?jiǎng)驖{液濃度，更加有利于表皮細(xì)胞的分裂和增殖及生命活動(dòng)。
⑥本發(fā)明所應(yīng)用的自體血液為合適的濃度或劑量，而且，還有血細(xì)胞及其所釋放的多種生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子等協(xié)同作用，使其有效地應(yīng)用于表皮修復(fù)及皮膚屏障功能重建，更好地發(fā)揮出自體血液自體應(yīng)用的最大價(jià)值和生物學(xué)效應(yīng)。⑦由于過(guò)高的血液制品濃度可能會(huì)抑制表皮細(xì)胞的增殖、分化，甚至引起細(xì)胞毒性，導(dǎo)致表皮細(xì)胞損傷；過(guò)低的濃度又達(dá)不到表皮重建的效果。本發(fā)明產(chǎn)品組方的自體全血濃度是通過(guò)實(shí)驗(yàn)反復(fù)確認(rèn)的，所以能更好地應(yīng)用于表皮屏障功能重建，更好地發(fā)揮出其應(yīng)用價(jià)值。⑧本發(fā)明制備出的一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物可望成為一個(gè)從根本上解決表皮屏障問(wèn)題的產(chǎn)品，且其制備方法簡(jiǎn)單、操作方便、簡(jiǎn)單易學(xué)、 易于推廣，適合用于有合法醫(yī)療美容資格的醫(yī)療美容機(jī)構(gòu)。3、本發(fā)明的主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)①以自體全血?jiǎng)驖{液為原料制備出一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，能從根本上解決皮膚屏障功能，而不是治標(biāo)不治本。這是一般保濕劑、營(yíng)養(yǎng)護(hù)膚品無(wú)法達(dá)到的，克服了當(dāng)前技術(shù)背景存在的不足。②在自體全血?jiǎng)驖{中添加了表皮細(xì)胞增殖、分化所需的細(xì)胞因子，彌補(bǔ)了自體全血?jiǎng)驖{在表皮重建中的不足，確保了自體全血?jiǎng)驖{液的生物活性，提高了其重建表皮屏障的效果。③自體全血?jiǎng)驖{液能夠?yàn)榻M方中表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子提供很好的保護(hù)屏障，降低這些細(xì)胞因子被降解的風(fēng)險(xiǎn)，從而提高其生物活性；另外，自體全血?jiǎng)驖{液能激活、上調(diào)表皮細(xì)胞上的相關(guān)受體，使得表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子能更好地與受體結(jié)合，產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)，起到了強(qiáng)化細(xì)胞因子的作用，這是細(xì)胞因子單獨(dú)添加于一般基質(zhì)中使用所無(wú)法比擬的。④本發(fā)明克服了細(xì)胞因子半衰期短，生物活性低的問(wèn)題，使得細(xì)胞因子，可以全方位、多層次地重建及修復(fù)表皮細(xì)胞；另外，本發(fā)明經(jīng)過(guò)系統(tǒng)和規(guī)范的時(shí)效-量效及藥代動(dòng)力學(xué)等基礎(chǔ)研究，所以更加科學(xué)、合理、有效的應(yīng)用細(xì)胞因子，提高其生物活性、增加相關(guān)功效成分與細(xì)胞因子之間的相互協(xié)同保護(hù)作用、以及強(qiáng)化了細(xì)胞因子在表皮重建中的復(fù)配作用。⑤本發(fā)明確定了在應(yīng)用自體血液進(jìn)行皮膚修復(fù)和屏障功能重建時(shí)，所需要的合適濃度或劑量，同時(shí)，在血細(xì)胞及其所釋放的多種生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子等的協(xié)同作用下，使自體血液有效地應(yīng)用于表皮修復(fù)及皮膚屏障功能重建，更好地發(fā)揮出自體血液自體應(yīng)用的最大價(jià)值和生物學(xué)效應(yīng)。⑥組方中自體全血?jiǎng)驖{液和表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子以及其它輔助成分之間能相互促進(jìn)、相互調(diào)節(jié)，達(dá)到了揚(yáng)長(zhǎng)避短、強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合的作用；加上復(fù)合物合適的 PH(6. 0 6.幻以及合適的濃度，使得自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物能最大限度地發(fā)揮其表皮屏障重建及修復(fù)作用。4、本發(fā)明的一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物作用原理血液中含有人體所需最基本、較齊全的營(yíng)養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子等，如氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)離子、糖類、激素、酶，這些成分能為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)細(xì)胞的增殖和分化，為體外細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞生長(zhǎng)和生存的提供很好的環(huán)境條件。而通過(guò)勻漿后的全血后能釋放很多的細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如血細(xì)胞中含有大量的超氧化物歧化酶，具有抗自由基，達(dá)到抗衰老的作用；白細(xì)胞釋放的內(nèi)容物可起到抗炎的作用；血小板中勻漿后能釋放生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等，這些生長(zhǎng)因子可促進(jìn)軟組織和皮膚的愈合，并且它們之間有著良好的協(xié)同作用。加上自體血液是抽取患者本人靜脈血經(jīng)離心分離后所獲得的自體成分，來(lái)源方便、制備簡(jiǎn)便、安全有效、新鮮無(wú)污染、無(wú)刺激、無(wú)過(guò)敏、無(wú)毒副作用等特點(diǎn)。全血?jiǎng)驖{后的這些特點(diǎn)為其應(yīng)用于表皮層屏障提供了得天獨(dú)厚的條件，能促進(jìn)表皮細(xì)胞的增殖、分化，使得表皮細(xì)胞層變厚，增加真皮層內(nèi)的膠原纖維，使得皮膚水潤(rùn)，富有彈性；增加表皮細(xì)胞間的粘接性，保持表皮內(nèi)的水分，防止皮膚干燥；可以從根本上解決表皮屏障問(wèn)題。從而能解決由于各種原因引起的角質(zhì)層面部表皮的變薄或損傷而引起皮膚疾病，如皮膚潮紅、毛細(xì)血管擴(kuò)張、色素沉著、皮膚老化等。組方中的表皮生長(zhǎng)因子，能促進(jìn)成纖維細(xì)胞、表皮細(xì)胞代謝、增殖和生長(zhǎng)，促進(jìn)彈性纖維細(xì)胞的發(fā)育及增強(qiáng)其功能，激活老化細(xì)胞的再生，加速細(xì)胞的新陳代謝和更新，快速代謝老化角質(zhì)，修復(fù)斷裂的淺表皮成纖維細(xì)胞，延緩表皮細(xì)胞的老化。即使極微量的表皮生長(zhǎng)因子也能強(qiáng)烈刺激細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制衰老基因表達(dá)，阻止皮膚衰老，使皮膚各組成份保持最佳生理狀態(tài)，它還能刺激透明質(zhì)酸和膠原蛋白等的合成與分泌，增加皮膚含水量，進(jìn)而增加皮膚彈性，滋潤(rùn)肌膚。表皮生長(zhǎng)因子能刺激外胚層和內(nèi)胚層起源的各種細(xì)胞增殖遷移，加快新陳代謝達(dá)到皮膚代謝的效果。同時(shí)還可以促進(jìn)皮膚血管壁細(xì)胞的新陳代謝，增加毛細(xì)血管的密度，改善皮膚微循環(huán)，從而使氣血通暢，膚色紅潤(rùn)。表皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從細(xì)胞外主動(dòng)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)，增加細(xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)，快速生成新生細(xì)胞，使衰老細(xì)胞快速角化、 脫落，促進(jìn)真皮層細(xì)胞分泌合成膠原纖維、多糖、糖蛋白等功能分子，使已斷裂、變性的膠原纖維和彈性纖維得到修復(fù)，肌纖維排列整齊緊密，從而減少和消除皺紋。表皮生長(zhǎng)因子對(duì)表皮細(xì)胞的增殖有較強(qiáng)的促進(jìn)作用，使用后表皮細(xì)胞變得年輕化，使新生細(xì)胞比例增加，降低了皮膚中黑色素和有色細(xì)胞的含量，使得表皮組織中較少有色素及死亡細(xì)胞的殘留等累積，使皮膚表現(xiàn)出白皙光滑，消除瘀斑和色素沉著等異常皮膚表現(xiàn)。在去斑的治療期和恢復(fù)期使用表皮生長(zhǎng)因子能有效遏止色素斑復(fù)發(fā)。角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子通過(guò)與上皮細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體結(jié)合，特異性地刺激皮膚表皮層細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和遷移，使皮膚光滑細(xì)膩，消除皺紋，抗表皮老化，增加皮膚彈性；能夠促進(jìn)老化和受損細(xì)胞的修復(fù)，調(diào)節(jié)細(xì)胞新陳代謝；使表皮血管豐富，為皮膚細(xì)胞提供更多的營(yíng)養(yǎng)成分和氧分子，促進(jìn)皮膚恢復(fù)到最佳生理狀態(tài)，使皮膚紅潤(rùn)白嫩；另外，角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子可明顯刺激人成熟角質(zhì)細(xì)胞的生長(zhǎng)，并具有防輻射和抗炎作用，能夠顯著加強(qiáng)皮膚抵御外界不良刺激的能力。其作用機(jī)制包括①促有絲分裂可能與促有絲分裂的基因(如 c-myc、c-fos)和生長(zhǎng)因子(如轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子)，以及核苷酸合成的調(diào)節(jié)酶(如腺苷琥珀酸裂解酶)有關(guān)。②激活信號(hào)通路角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子可能通過(guò)PKC和MAH(來(lái)完成防護(hù)作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。③調(diào)節(jié)酶活性角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子可能通過(guò)誘導(dǎo)一些解毒酶的表達(dá)，如非硒依賴性谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、過(guò)氧化物還原酶VI、核呼吸因子和肺部表皮型脂肪酸結(jié)合蛋白等，參與活性氧簇的解毒作用。角質(zhì)層細(xì)胞有保護(hù)皮膚的重要功能，衰老和角化嚴(yán)重的角質(zhì)層細(xì)胞只能用表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子這一類的生長(zhǎng)因子加速表皮細(xì)胞的更新，用新的角層細(xì)胞取代老化的角質(zhì)細(xì)胞。更重要的是皮下組織有豐富的免疫細(xì)胞(如樹(shù)狀突細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等)，有效地保護(hù)皮膚免遭各種病原對(duì)皮膚的侵襲，還能清除各種代謝產(chǎn)物，使代謝產(chǎn)物不容易積累形成暗瘡或黑斑，這些免疫細(xì)胞本身還能釋放各種生長(zhǎng)因子，調(diào)節(jié)各種細(xì)胞生長(zhǎng)。角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子與表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子在功能上是類似的，但在深層修復(fù)，促進(jìn)血管和膠原纖維的生長(zhǎng)和發(fā)育上，角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子優(yōu)于表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子，但表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子分子量小，容易進(jìn)入表皮細(xì)胞，表皮細(xì)胞是其主要的靶細(xì)胞，故對(duì)表皮細(xì)胞生長(zhǎng)有特別的功能。它們一起是可以兼容并互為補(bǔ)充的，兩者配合使用對(duì)修復(fù)表皮和祛除皺紋的作用更顯著。因此利用自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物不僅可以給皮膚提供各種需要的營(yíng)養(yǎng)成分，而且能夠給皮膚提供合適的微環(huán)境，利于表皮細(xì)胞的增殖、分化?？偟膩?lái)說(shuō)，本發(fā)明確定了在應(yīng)用自體血液進(jìn)行皮膚修復(fù)和屏障功能重建時(shí)，所需要的合適濃度或劑量，同時(shí)，在血細(xì)胞及其所釋放的多種生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子等的協(xié)同作用下，使自體血液有效地應(yīng)用于表皮修復(fù)及皮膚屏障功能重建，更好地發(fā)揮出自體血液自體應(yīng)用的最大價(jià)值和生物學(xué)效應(yīng)。另外，自體血液與細(xì)胞因子的復(fù)配，克服了細(xì)胞因子半衰期短，生物活性低的問(wèn)題，使得細(xì)胞因子，可以全方位、多層次地重建及修復(fù)表皮細(xì)胞；另外，本發(fā)明經(jīng)過(guò)系統(tǒng)和規(guī)范的時(shí)效-量效及藥代動(dòng)力學(xué)等基礎(chǔ)研究，所以更加科學(xué)、合理、有效的應(yīng)用細(xì)胞因子，提高了細(xì)胞因子的生物活性、增加了相關(guān)功效成分與細(xì)胞因子之間的相互協(xié)同保護(hù)作用、以及強(qiáng)化了細(xì)胞因子在表皮重建中的復(fù)配作用。通過(guò)這樣合理的復(fù)配，使得自體全血?jiǎng)驖{液復(fù)合物可以從整體上，多方面、多層次地改變?nèi)梭w皮膚各種細(xì)胞組織的代謝，改善微循環(huán)，恢復(fù)皮膚健康，創(chuàng)造了一個(gè)傳統(tǒng)化妝品難以達(dá)到的境界。5、本發(fā)明制備注意事項(xiàng)(1)自體全血的采血部位通常來(lái)源于肘中靜脈或其他肘靜脈，如肘靜脈不明顯或采集不便、加上血液用量不是太大時(shí)，也可采集手背靜脈和外踝靜脈等，但采集的最好是空腹靜脈血，以減少脂血等。(2)采集血液前，應(yīng)認(rèn)真檢查血液收集管內(nèi)是否干燥和消毒，還應(yīng)仔細(xì)檢查采血針與血液收集器是否正確合理連接；另外，血液收集管是否放好(嚴(yán)防打碎)。在采血過(guò)程中， 尤應(yīng)將血液沿血液收集管的管壁自然而緩慢流入，嚴(yán)禁劇烈振搖，嚴(yán)防血液產(chǎn)生氣泡，以免出現(xiàn)溶血和弓I起血漿纖維蛋白原變性。(3)采血過(guò)程中，如遇個(gè)別受術(shù)者“暈針”或出現(xiàn)抽血眩暈時(shí)不要慌張，可立即讓其平臥休息片刻即可恢復(fù)。必要時(shí)，可讓其嗅吸芳香氨汀。如仍未恢復(fù)，則可針刺(或拇指掐)人中及合谷等穴位，直至蘇醒。(4)為了防止抽血時(shí)發(fā)生低血糖反應(yīng)及緊張性休克，應(yīng)首先做好受術(shù)者的思想工作，消除其緊張心理。抽血完成后，也可囑受術(shù)者適當(dāng)飲食一些飲料、稀飯之類的流質(zhì)食物； 尤其應(yīng)注意了解和觀察受術(shù)者全身反應(yīng)狀況，嚴(yán)密防止高血壓及心血管病等意外。(5)對(duì)于可能遇到患有高脂血癥的患者，為了防止出現(xiàn)脂血或乳糜血，建議治療頭幾天堅(jiān)持清淡飲食、同時(shí)采集空腹12小時(shí)以上的靜脈血。通常情況下，脂血或乳糜血、溶血、黃疸血等情況，不適合用于本發(fā)明。(6)特別應(yīng)該注意的是，在抽血時(shí)，嚴(yán)禁將采血器的氣泡或空氣誤入至靜脈之中， 而且，在抽血時(shí)注射器只能向外抽、絕對(duì)不能向靜脈內(nèi)推，以免注射空氣進(jìn)去，形成氣栓造成嚴(yán)重后果、甚至生命危險(xiǎn)。(7)要注意保存好所采集的血液，并及時(shí)勻漿。自體全血最好是現(xiàn)采現(xiàn)用、當(dāng)天或一次用完，以保持血液新鮮和治療效果。如實(shí)在用不完，可密封保存于低溫冰箱之中，但時(shí)間不要超過(guò)3天，且在再次使用或治療時(shí)，應(yīng)置于37°C恒溫水浴中稍加復(fù)溫及強(qiáng)化。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例子來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的產(chǎn)品和制備方法實(shí)施例1 一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物的制備方法一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物是由下述優(yōu)選重量配比的原料組成
新鮮自體全血70重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉0.01重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉0.01枸櫞酸三鈉2.73磷酸二氫鈉0.22葡萄糖3.20枸櫞酸0.327腺嘌呤0.028生理鹽水23.475—種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物的具體制備方法(以配制IOOml為例)(1)按上述一種用于表皮重建的血液勻漿復(fù)合物的原料配比，用分析天平分別準(zhǔn)確稱取配方量的枸櫞酸三鈉2. 73g、磷酸二氫鈉0. 22g、葡萄糖3. 2g、枸櫞酸0. 327g、腺嘌呤 0. 028g置于經(jīng)過(guò)洗消過(guò)的容器中，加入配方量的生理鹽水進(jìn)行充分溶解，混合均勻，過(guò)濾消毒待用；(2)在準(zhǔn)備用于盛血的容器中先加入上述配制的液體，然后嚴(yán)格按照人體抽血的規(guī)范化要求，將采集到的70ml受術(shù)者的肘中靜脈血液按配方量加入后顛倒混勻，然后混勻的全血進(jìn)行勻漿處理，勻漿之后將整個(gè)體系在超聲振蕩器中超聲IOmin進(jìn)行血細(xì)胞破碎處理，勻漿及超聲破碎過(guò)程要在低溫環(huán)境中或在冰上操作進(jìn)行；(3)關(guān)閉超聲振蕩器，將獲得的自體全血?jiǎng)驖{物加入配方量的重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉IOmg和重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉10mg，充分溶解，輕輕混合均勻后， 即為一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，置于4°C冰箱中保存和備用。
本發(fā)明所述的實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行的描述，并非對(duì)本發(fā)明構(gòu)思和范圍進(jìn)行限定，在不脫離本發(fā)明設(shè)計(jì)思想的前提下，本領(lǐng)域中的學(xué)者或工程技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作出的各種變型和改進(jìn)，均應(yīng)落入本發(fā)明的保護(hù)范圍，本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)的技術(shù)內(nèi)容，已經(jīng)全部記在權(quán)利要求書(shū)中。
權(quán)利要求
1. 一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料組成
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物， 其特征在于它是由下述優(yōu)選重量配比的原料組成
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，其特征在于所述的一種用于表皮重建的血液勻漿復(fù)合物的制備方法包括以下步驟(1)按上述一種用于表皮重建的血液勻漿復(fù)合物的原料配比，用分析天平分別準(zhǔn)確稱取配方量的枸櫞酸三鈉、磷酸二氫鈉、葡萄糖、枸櫞酸、腺嘌呤置于經(jīng)過(guò)洗消過(guò)的容器中，加入配方量的生理鹽水進(jìn)行充分溶解，混合均勻，過(guò)濾除菌備用；(2)在準(zhǔn)備用于盛血的容器中先加入上述配制的液體，然后嚴(yán)格按照人體抽血的規(guī)范化要求，將采集到的受術(shù)者的肘中靜脈血液按配方量加入后顛倒混勻，然后混勻的全血進(jìn)行勻漿處理，勻漿之后再使用超聲破碎處理，勻漿及超聲破碎過(guò)程要在低溫環(huán)境中或在冰上操作進(jìn)行；(3)將獲得的自體全血?jiǎng)驖{物加入配方量的重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉和重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子凍干粉，充分溶解，輕輕混合均勻后，即為一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物，置于4°C冰箱中保存和備用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于自體皮膚表皮層屏障重建的自體全血?jiǎng)驖{復(fù)合物及其制備方法。自體全血經(jīng)過(guò)勻漿后，在其所釋放的多種生物活性物質(zhì)及細(xì)胞生長(zhǎng)因子的協(xié)同作用下，使自體血液有效地應(yīng)用于表皮修復(fù)及皮膚屏障功能重建，更好地發(fā)揮出自體血液自體應(yīng)用的最大價(jià)值和生物學(xué)效應(yīng)；加上自體全血?jiǎng)驖{液能與其它輔助成分起到相互協(xié)同保護(hù)作用、以及強(qiáng)化細(xì)胞因子在表皮重建中的復(fù)配作用。因此，自體全血?jiǎng)驖{液復(fù)合物對(duì)表皮修復(fù)、表皮屏障功能重建效果好，能多方面、多層次地改善人體皮膚屏障功能問(wèn)題，恢復(fù)皮膚健康，從根本上解決表皮屏障功能的問(wèn)題。另外本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單、操作方便、簡(jiǎn)單易學(xué)、易于推廣，適合用于有合法醫(yī)療美容資格的醫(yī)療美容機(jī)構(gòu)。
文檔編號(hào)A61K8/98GK102188362SQ201110118629
公開(kāi)日2011年9月21日 申請(qǐng)日期2011年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月9日
發(fā)明者丁克祥, 丁宇, 左夏林, 楊永鵬, 羅迎霞, 董萍 申請(qǐng)人:丁克祥, 董萍