專利名稱：一種AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品的批量生產(chǎn)方法
—種AJS201 2拉維精L i vygene抗癌生物制品的批量生產(chǎn)方法本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥生產(chǎn)領(lǐng)域，更具體地講，涉及一種新型抗癌生物制品的批量生產(chǎn)方法。癌癥是人類面對(duì)的一種可怕的疾病，全世界的科學(xué)家對(duì)癌癥經(jīng)歷了長(zhǎng)達(dá)25年的研究，最終得出癌癥是細(xì)胞基因組發(fā)生了分崩離析的結(jié)果。目前，治療癌癥的常規(guī)方法為開刀切除、用化學(xué)藥物或放射線同位素進(jìn)行全身或局部治療，但治療的效果往往有限；手術(shù)切除只能在大體上切除癌病灶組織，不能“切除”惡變的染色體DNA。 [發(fā)明內(nèi)容]本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供的一種AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，不僅可以規(guī)模生產(chǎn)，且生產(chǎn)出的抗癌生物制品可以有效的治療癌癥。本發(fā)明提供的一種AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，包括步驟I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)；2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備；3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化。本發(fā)明提供的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，所述I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)為每一基因共轉(zhuǎn)染所用細(xì)胞為4X 108-6 X IO8,每次進(jìn)行40-60個(gè)基因共轉(zhuǎn)染，每次共轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的AJS2008拉維精病毒的細(xì)胞培養(yǎng)液為7. 5-10升；以0. 5cc為基本注射齊U，在一個(gè)單元的生產(chǎn)線上每周生產(chǎn)25-50個(gè)劑量為I X IO9I. U的注射針劑。本發(fā)明提供的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，所述生產(chǎn)單元的數(shù)量為4-5個(gè)，每個(gè)單元進(jìn)行操作的工作人員為8人，其中2人負(fù)責(zé)生產(chǎn)線所需的細(xì)胞和培養(yǎng)液、轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒DNA、以及間質(zhì)聚合的特殊溶劑ULtrapureMMA的準(zhǔn)備，2人負(fù)責(zé)基因轉(zhuǎn)染、含病毒的培養(yǎng)液的收集，2人負(fù)責(zé)制劑的加工純化與包裝，另外2人負(fù)責(zé)對(duì)制備的制劑進(jìn)行檢定。本發(fā)明提供的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，所述2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備包括a)以全封閉隔離方式進(jìn)行AJS2012拉維精注射溶液的收集、凈化、“間質(zhì)聚合”及制劑的分裝與低溫保存；b)圍繞生產(chǎn)線的無(wú)菌、無(wú)污染、無(wú)感染性擴(kuò)散環(huán)節(jié)，加強(qiáng)操作的安全性；c)容器采用一次性產(chǎn)品，使用前經(jīng)過(guò)r射線放射滅菌；d)生產(chǎn)過(guò)程中的廢棄物品采用專門的容器存放，接觸或保存AJS2012拉維精的容器在高壓蒸煮之前需另行密封存放；所有用于生產(chǎn)AJS2012拉維精的培養(yǎng)基液需消毒后方可傾倒丟棄；e)工作人員需著防護(hù)服，佩戴口罩及雙層手套。本發(fā)明提供的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，所述3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化f)在計(jì)算機(jī)控制的工作站里進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，使用程序式基因轉(zhuǎn)染混合器；g)采用數(shù)字式分裝器或多吸頭移液器對(duì)AJS2012拉維精溶液的凈化、懸浮和分裝；在計(jì)算機(jī)控制的多功能操作機(jī)上完成制劑的密封包裝，每一批制劑的生產(chǎn)制備情況以數(shù)據(jù)形式由計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)處理，并對(duì)AJS2012拉維精的滴度、感染性、以及阻滯癌細(xì)胞增殖周期的生物學(xué)功能測(cè)試作出報(bào)告。上述技術(shù)方案是采用對(duì)癌細(xì)胞DNA進(jìn)行“手術(shù)”，即癌的基因治療，以“其人之道還 治其人之身”，用“好”的DNA取代細(xì)胞內(nèi)“變壞”的DNA或制止“壞”的DNA的破壞行為。這種治療將具有抗癌功能的基因成分通過(guò)特殊的基因載體引入細(xì)胞中，它們阻斷癌細(xì)胞的增值周期；干擾或拮抗癌的信息傳遞；消除對(duì)抑癌基因的抑制，誘導(dǎo)癌細(xì)胞“變善”或干脆將癌細(xì)胞殺滅，對(duì)癌證起到了根治的作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品的批量生產(chǎn)方法具有以下優(yōu)點(diǎn)I、它對(duì)細(xì)胞增殖周期失控的癌細(xì)胞有效，而對(duì)增殖周期處于正常調(diào)節(jié)的細(xì)胞無(wú)明顯的“阻斷”作用。2、通常一個(gè)單獨(dú)的AJS2012拉維精(Livygene)核酸蛋白質(zhì)復(fù)合物分子僅僅作用于生長(zhǎng)的癌細(xì)胞，隨著癌細(xì)胞最終死亡，AJS2012拉維精(Livygene)也因此結(jié)束其使命，它本身對(duì)細(xì)胞或機(jī)體不產(chǎn)生“有害”的副作用；3、AJS2012拉維精(Livygene)通過(guò)對(duì)癌組織的直接注射產(chǎn)生治療作用，而不需要嚴(yán)謹(jǐn)復(fù)雜的體外細(xì)胞基因改造操作過(guò)程4、AJS2012拉維精(Livygene)治療癌癥是一個(gè)生物學(xué)過(guò)程，它需要作用于并阻斷癌細(xì)胞的增殖，最后啟動(dòng)癌細(xì)胞自身死亡的生物程序，它不是將癌病灶從外部根除，而是從癌病灶中將癌細(xì)胞消溶，到癌細(xì)胞內(nèi)將惡變DNA消滅。5、從AJS2012拉維精(Livygene)進(jìn)入癌細(xì)胞到最終將癌細(xì)胞消溶只需4_7天的時(shí)間。治療本身不會(huì)造成對(duì)患者機(jī)體組織的傷害，不會(huì)發(fā)生大量的出血，更重要的一點(diǎn)是由于AJS2012拉維精(Livygene)將癌細(xì)胞增殖周期阻斷，有效地遏制了癌的快速生長(zhǎng)，從而保護(hù)了鄰近正常組織不會(huì)被浸潤(rùn)和擴(kuò)散的癌細(xì)胞所破壞，在很大程度上減少了由于癌細(xì)胞惡性增殖所造成的“惡疫質(zhì)”。6、采用這種生物高科技對(duì)腫瘤實(shí)施“基因治療”，對(duì)接受治療的患者全身狀況起到有效的保護(hù)和維持作用，這是常規(guī)治療無(wú)法達(dá)到的。以下通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。[實(shí)施例I]本實(shí)施例的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，包括步驟I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)；2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備；3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化。I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)為每一基因共轉(zhuǎn)染所用細(xì)胞為4X 108，每次進(jìn)行40個(gè)基因共轉(zhuǎn)染，每次共轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的AJS2012拉維精病毒的細(xì)胞培養(yǎng)液為7. 5升；以0. 5cc為基本注射齊U，在一個(gè)單元的生產(chǎn)線上每周生產(chǎn)25個(gè)劑量為I X IO9I. U的注射針劑。生產(chǎn)單元的數(shù)量為4個(gè)，每個(gè)單元進(jìn)行操作的工作人員為8人，其中2人負(fù)責(zé)生產(chǎn)線所需的細(xì)胞和培養(yǎng)液、轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒DNA、以及間質(zhì)聚合的特殊溶劑ULtrapureMMA的準(zhǔn)備，2人負(fù)責(zé)基因轉(zhuǎn)染、含病毒的培養(yǎng)液的收集，2人負(fù)責(zé)制劑的加工純化與包裝，另外2人負(fù)責(zé)對(duì)制備的制劑進(jìn)行檢定。AJS2012拉維精注射制劑的制備包括a)以全封閉隔離方式進(jìn)行AJS2012拉維精注射溶液的收集、凈化、“間質(zhì)聚合”及制劑的分裝與低溫保存； b)圍繞生產(chǎn)線的無(wú)菌、無(wú)污染、無(wú)感染性擴(kuò)散環(huán)節(jié)，加強(qiáng)操作的安全性；c)容器采用一次性產(chǎn)品，使用前經(jīng)過(guò)r射線放射滅菌；d)生產(chǎn)過(guò)程中的廢棄物品采用專門的容器存放，接觸或保存AJS2012拉維精的容器在高壓蒸煮之前需另行密封存放；所有用于生產(chǎn)AJS2012拉維精的培養(yǎng)基液需消毒后方可傾倒丟棄；e)工作人員需著防護(hù)服，佩戴口罩及雙層手套。所述3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化f)在計(jì)算機(jī)控制的工作站里進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，使用程序式基因轉(zhuǎn)染混合器；g)采用數(shù)字式分裝器或多吸頭移液器對(duì)AJS2012拉維精溶液的凈化、懸浮和分裝；在計(jì)算機(jī)控制的多功能操作機(jī)上完成制劑的密封包裝，每一批制劑的生產(chǎn)制備情況以數(shù)據(jù)形式由計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)處理，并對(duì)AJS2012拉維精的滴度、感染性、以及阻滯癌細(xì)胞增殖周期的生物學(xué)功能測(cè)試作出報(bào)告。[實(shí)施例2]本實(shí)施例的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，包括步驟I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)；2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備；3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化。I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)為每一基因共轉(zhuǎn)染所用細(xì)胞為6X 108，每次進(jìn)行60個(gè)基因共轉(zhuǎn)染，每次共轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的AJS2012拉維精病毒的細(xì)胞培養(yǎng)液為10升；以0. 5cc為基本注射齊U，在一個(gè)單元的生產(chǎn)線上每周生產(chǎn)50個(gè)劑量為IXlO9LU的注射針劑。生產(chǎn)單元的數(shù)量為5個(gè)，每個(gè)單元進(jìn)行操作的工作人員為8人，其中2人負(fù)責(zé)生產(chǎn)線所需的細(xì)胞和培養(yǎng)液、轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒DNA、以及間質(zhì)聚合的特殊溶劑ULtrapureMMA的準(zhǔn)備，2人負(fù)責(zé)基因轉(zhuǎn)染、含病毒的培養(yǎng)液的收集，2人負(fù)責(zé)制劑的加工純化與包裝，另外2人負(fù)責(zé)對(duì)制備的制劑進(jìn)行檢定。2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備包括a)以全封閉隔離方式進(jìn)行AJS2012拉維精注射溶液的收集、凈化、“間質(zhì)聚合”及制劑的分裝與低溫保存；b)圍繞生產(chǎn)線的無(wú)菌、無(wú)污染、無(wú)感染性擴(kuò)散環(huán)節(jié)，加強(qiáng)操作的安全性；c)容器采用一次性產(chǎn)品，使用前經(jīng)過(guò)r射線放射滅菌；
d)生產(chǎn)過(guò)程中的廢棄物品采用專門的容器存放，接觸或保存AJS2008拉維精的容器在高壓蒸煮之前需另行密封存放；所有用于生產(chǎn)AJS2012拉維精的培養(yǎng)基液需消毒后方可傾倒丟棄；e)工作人員需著防護(hù)服，佩戴口罩及雙層手套。3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化f)在計(jì)算機(jī)控制的工作站里進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，使用程序式基因轉(zhuǎn)染混合器；g)采用數(shù)字式分裝器或多吸頭移液器對(duì)AJS2012拉維精溶液的凈化、懸浮和分裝；在計(jì)算機(jī)控制的多功能操作機(jī)上完成制劑的密封包裝，每一批制劑的生產(chǎn)制備情況以數(shù)據(jù)形式由計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)處理，并對(duì)AJS2012拉維精的滴度、感染性、以及阻滯癌細(xì)胞增殖周 期的生物學(xué)功能測(cè)試作出報(bào)告。[實(shí)施例3]本實(shí)施例的AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法,包括步驟I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)；2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備；3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化。I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)為每一基因共轉(zhuǎn)染所用細(xì)胞為5X 108，每次進(jìn)行50個(gè)基因共轉(zhuǎn)染，每次共轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的AJS2012拉維精病毒的細(xì)胞培養(yǎng)液為9升；以0. 5cc為基本注射齊U，在一個(gè)單元的生產(chǎn)線上每周生產(chǎn)40個(gè)劑量為IXlO9LU的注射針劑。生產(chǎn)單元的數(shù)量為5個(gè)，每個(gè)單元進(jìn)行操作的工作人員為8人，其中2人負(fù)責(zé)生產(chǎn)線所需的細(xì)胞和培養(yǎng)液、轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒DNA、以及間質(zhì)聚合的特殊溶劑ULtrapureMMA的準(zhǔn)備，2人負(fù)責(zé)基因轉(zhuǎn)染、含病毒的培養(yǎng)液的收集，2人負(fù)責(zé)制劑的加工純化與包裝，另外2人負(fù)責(zé)對(duì)制備的制劑進(jìn)行檢定。2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備包括a)以全封閉隔離方式進(jìn)行AJS2012拉維精注射溶液的收集、凈化、“間質(zhì)聚合”及制劑的分裝與低溫保存；b)圍繞生產(chǎn)線的無(wú)菌、無(wú)污染、無(wú)感染性擴(kuò)散環(huán)節(jié)，加強(qiáng)操作的安全性；c)容器采用一次性產(chǎn)品，使用前經(jīng)過(guò)r射線放射滅菌；d)生產(chǎn)過(guò)程中的廢棄物品采用專門的容器存放，接觸或保存AJS2012拉維精的容器在高壓蒸煮之前需另行密封存放；所有用于生產(chǎn)AJS2012拉維精的培養(yǎng)基液需消毒后方可傾倒丟棄；e)工作人員需著防護(hù)服，佩戴口罩及雙層手套。所述生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化f)在計(jì)算機(jī)控制的工作站里進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，使用程序式基因轉(zhuǎn)染混合器；g)采用數(shù)字式分裝器或多吸頭移液器對(duì)AJS2012拉維精溶液的凈化、懸浮和分裝；在計(jì)算機(jī)控制的多功能操作機(jī)上完成制劑的密封包裝，每一批制劑的生產(chǎn)制備情況以數(shù)據(jù)形式由計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)處理，并對(duì)AJS2012拉維精的滴度、感染性、以及阻滯癌細(xì)胞增殖周期的生物學(xué)功能測(cè)試作出報(bào)告。以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對(duì)其限制，盡管本領(lǐng)域的技術(shù)人員閱讀本申請(qǐng)后，參照上述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行種種修改或變更，但這些修改或變更，均在申請(qǐng)待批本發(fā)明的權(quán)利申請(qǐng)要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法,其特征在于所述生產(chǎn)方法包括步驟 I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)；2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備；3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化。
2.如權(quán)利要求I所述的批量生產(chǎn)方法，其特征在于所述I)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)為每一基因共轉(zhuǎn)染所用細(xì)胞為4X 108-6X 108，每次進(jìn)行40-60個(gè)基因共轉(zhuǎn)染，每次共轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的AJS2012拉維精病毒的細(xì)胞培養(yǎng)液為7. 5-10升；以0. 5cc為基本注射劑，在一個(gè)單元的生產(chǎn)線上每周生產(chǎn)25-50個(gè)劑量為I X IO9I. U的注射針劑。
3.如權(quán)利要求2所述的批量生產(chǎn)方法，其特征在于所述生產(chǎn)單元的數(shù)量為4-5個(gè)，每個(gè)單元進(jìn)行操作的工作人員為8人，其中2人負(fù)責(zé)生產(chǎn)線所需的細(xì)胞和培養(yǎng)液、轉(zhuǎn)染用的質(zhì)粒DNA、以及間質(zhì)聚合的特殊溶劑ULtrapureMMA的準(zhǔn)備，2人負(fù)責(zé)基因轉(zhuǎn)染、含病毒的培養(yǎng)液的收集，2人負(fù)責(zé)制劑的加工純化與包裝，另外2人負(fù)責(zé)對(duì)制備的制劑進(jìn)行檢定。
4.如權(quán)利要求I所述的批量生產(chǎn)方法，其特征在于2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備包括 a)以全封閉隔離方式進(jìn)行AJS2012拉維精注射溶液的收集、凈化、“間質(zhì)聚合”及制劑的分裝與低溫保存； b)圍繞生產(chǎn)線的無(wú)菌、無(wú)污染、無(wú)感染性擴(kuò)散環(huán)節(jié)，加強(qiáng)操作的安全性； c)容器采用一次性產(chǎn)品，使用前經(jīng)過(guò)r射線放射滅菌； d)生產(chǎn)過(guò)程中的廢棄物品采用專門的容器存放，接觸或保存AJS2012拉維精的容器在高壓蒸煮之前需另行密封存放；所有用于生產(chǎn)AJS2012拉維精的培養(yǎng)基液需消毒后方可傾倒丟棄； e)工作人員需著防護(hù)服，佩戴口罩及雙層手套。
5.如權(quán)利要求I所述的批量生產(chǎn)方法，其特征在于3)、所述生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化 f)在計(jì)算機(jī)控制的工作站里進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，使用程序式基因轉(zhuǎn)染混合器； g)采用數(shù)字式分裝器或多吸頭移液器對(duì)AJS2012拉維精溶液的凈化、懸浮和分裝；在計(jì)算機(jī)控制的多功能操作機(jī)上完成制劑的密封包裝，每一批制劑的生產(chǎn)制備情況以數(shù)據(jù)形式由計(jì)算機(jī)存儲(chǔ)處理，并對(duì)AJS2012拉維精的滴度、感染性、以及阻滯癌細(xì)胞增殖周期的生物學(xué)功能測(cè)試作出報(bào)告。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種AJS2012拉維精Livygene抗癌生物制品的批量生產(chǎn)方法，其特征在于所述生產(chǎn)方法包括步驟1)、擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)；2)、AJS2012拉維精注射制劑的制備；3)、生產(chǎn)線的自動(dòng)化和數(shù)據(jù)化；該種AJS2012拉維精抗癌生物制品批量生產(chǎn)方法，不僅可以規(guī)模生產(chǎn)，且生產(chǎn)出的抗癌生物制品可以有效的治療癌癥。
文檔編號(hào)A61K35/76GK102772435SQ20111011977
公開日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2011年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月10日
發(fā)明者劉作智 申請(qǐng)人:北京阿恩替生物科技有限公司