專利名稱：獸用土青注射液制備方法及臨床應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種獸用土青注射液制備方法及臨床應(yīng)用，特別是一種由土霉素、青蒿素、甲氧芐氨嘧啶、氟尼辛葡甲胺和氯化鎂(或氧化鎂)組成的復(fù)方制劑的制備方法。本發(fā)明的注射液對(duì)豬氣喘病、副豬嗜血桿菌病、腸炎、腹瀉、牛巴氏桿菌病、附紅體、立克次體、 支原體引起的感染性疾病有顯著療效。
背景技術(shù)：
土霉素為四環(huán)素類抗生素。本品為廣譜抑菌劑，許多立克次體屬、支原體屬、衣原體屬、螺旋體、阿米巴原蟲和某些瘧原蟲對(duì)本品敏感，其他如放線菌屬、炭疽桿菌、單核細(xì)胞增多性李斯特菌、梭狀芽孢桿菌、奴卡菌屬、弧菌、布魯菌屬、彎曲桿菌、耶爾森菌等也對(duì)本品敏感。多年來(lái)土霉素及其相關(guān)制劑廣泛應(yīng)用，土霉素堿因口服吸收少，且含較多量差向化合物，已不再口服使用，現(xiàn)普遍使用土霉素注射液。土霉素堿微溶于水，可溶于甲醇、乙醇、 丙二醇等，在空氣中較穩(wěn)定，但其制劑在酸性或堿性條件下，遇熱或長(zhǎng)時(shí)間存放均易變色或沉淀、甚至變成黑色，造成效價(jià)降低。在獸醫(yī)臨床中，土霉素對(duì)豬的副傷寒、附紅細(xì)胞體、炭疽病、喘氣病、痢疾、豬肺疫均療效顯著；在家禽方面，用于雛禽痢疾、衣原體病、還可以用緩解應(yīng)激反應(yīng)、提高產(chǎn)蛋量、促進(jìn)幼禽增重等；在水產(chǎn)方面，應(yīng)用于治療魚類弧病菌、脫磷病、 爛鰓病、鰻魚受德化氏病、鱒魚瘡病、鰻赤鰭病等。青篙素是從中藥青篙中提取的有過(guò)氧基團(tuán)的倍半萜內(nèi)酯藥物。其對(duì)鼠瘧原蟲紅內(nèi)期超微結(jié)構(gòu)的影響，主要是瘧原蟲膜系結(jié)構(gòu)的改變，該藥首先作用于食物泡膜、表膜、線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，此外對(duì)核內(nèi)染色質(zhì)也有一定的影響。提示青篙素的作用方式主要是干擾表膜-線粒體的功能。可能是青篙素作用于食物泡膜，從而阻斷了營(yíng)養(yǎng)攝取的最早階段，使瘧原蟲較快出現(xiàn)氨基酸饑餓，迅速形成自噬泡，并不斷排出蟲體外，使瘧原蟲損失大量胞漿而死亡。在獸醫(yī)臨床中，主用于畜禽等動(dòng)物立克次體、原蟲、細(xì)菌、病毒等引起的多種瘟熱疫病。甲氧芐氨嘧啶屬抑菌劑，為親脂性弱堿，其對(duì)大腸埃希菌、克雷伯菌屬、奇異變形桿菌、沙門菌屬、志賀菌屬均具有抗菌活性。本品作用機(jī)制為干擾細(xì)菌的葉酸代謝。主要為選擇性抑制細(xì)菌的二氫葉酸還原酶的活性，使二氫葉酸不能還原為四氫葉酸，而合成葉酸是核酸生物合成的主要組成部分，因此本品阻止了細(xì)菌核酸和蛋白質(zhì)的合成，且本品與細(xì)菌的二氫葉酸還原酶的結(jié)合較之對(duì)哺乳類動(dòng)物酶的結(jié)合緊密5萬(wàn) 6萬(wàn)倍。本品與土霉素合用可使細(xì)菌的葉酸合成代謝遭到雙重阻斷，有協(xié)同作用，使土霉素抗菌活性增強(qiáng)，并可使抑菌作用轉(zhuǎn)為殺菌作用，減少耐藥菌株產(chǎn)生。氟尼辛葡甲胺為苯基乙酸衍生物，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、解熱鎮(zhèn)痛作用，其鎮(zhèn)痛作用比阿司匹林和吲哚美辛強(qiáng)，約為阿司匹林的沈 50倍，系外周型鎮(zhèn)痛藥。特點(diǎn)為藥效強(qiáng)，不良反應(yīng)輕，劑量小，個(gè)體差異小。獸醫(yī)臨床上常用于緩解馬的內(nèi)臟絞痛、肌肉與骨骼紊亂引起的疼痛及抗炎；牛的各種疾病感染引起的急性炎癥的控制，如蹄葉炎、關(guān)節(jié)炎等，另外也可用于母豬乳房炎、子宮炎及無(wú)乳綜合征的輔助治療。
當(dāng)代畜禽業(yè)，從大量的臨床病例可以看出，革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌，附紅體、立克次體、支原體引起的感染性疾病，諸如附紅細(xì)胞體等血液；原蟲病、氣喘病、傳染性胸膜肺炎、副豬嗜血桿菌??；各種腸炎、拉稀等腸道疾??；鏈球菌病、仔豬副傷寒等，市場(chǎng)上缺少標(biāo)本兼治的治療藥物，迫切需求一種藥效可靠、療效好、使用方便的的特效藥物。CN101062042A(200710052243. X)公開了一種獸用復(fù)方長(zhǎng)效土霉素注射液及其制備方法，其注射液處方中含有土霉素、甲氧芐氨嘧啶或二甲氧芐氨嘧啶、氯化鎂或氧化鎂、 乙醇胺、抗氧劑、復(fù)合有機(jī)溶媒和水。該注射液的主要成分是土霉素，甲氧芐氨嘧啶，其產(chǎn)品藥效上已達(dá)到或超過(guò)進(jìn)口的類似產(chǎn)品-土霉素注射液，但沒有青蒿素和氟尼辛葡甲胺等特效成分。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明提供了一種獸用土青注射液制備方法及臨床應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)特點(diǎn)是將由土霉素、青蒿素、甲氧芐氨嘧啶、氟尼辛葡甲胺和氯化鎂 (或氧化鎂)組成復(fù)方制劑，其產(chǎn)品特點(diǎn)為(1)工藝領(lǐng)先，對(duì)氣喘病、傳染性胸膜肺炎有特效。( 高效、低毒且對(duì)局部組織刺激小。( 注射本品5分鐘在血液出現(xiàn)，2小時(shí)達(dá)到血液高峰且有效濃度維持2-3天。主要用于治療敏感的革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌，附紅體、立克次體、支原體引起的感染性疾病和繼發(fā)癥。特別應(yīng)用于(1)氣喘病、傳染性胸膜肺炎、副豬嗜血桿菌?。? 各種腸炎、拉稀等腸道疾??；C3)附紅細(xì)胞體等血液原蟲??；(4)鏈球菌病、 仔豬副傷寒等。在進(jìn)口獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，土霉素注射液的性狀要求為黃色至棕黃色澄明液體。但市場(chǎng)上很多土霉素注射液性狀為棕紅色或棕褐色，說(shuō)明土霉素注射液在生產(chǎn)或存儲(chǔ)過(guò)程中均存在氧化或降解現(xiàn)象。土霉素微溶于水，且在強(qiáng)堿性條件下極易被破壞而失去生物活性， 但藥典中規(guī)定土霉素注射液的PH要求為8. 0-9. 0。青蒿素在水中幾乎不溶，其水溶液濃度離治療效果的有效濃度相差巨大；氟尼辛葡甲胺是一種新型的、非留體類動(dòng)物專用的解熱鎮(zhèn)痛藥物，溶于水和乙醇；本發(fā)明的主要技術(shù)任務(wù)在于(1)尋求一種適宜的溶劑，保證青蒿素的完全溶解，以達(dá)到有效治療劑量。(2)尋求合適的溶劑，力求土霉素的完全溶解，在達(dá)到有效治療濃度的同時(shí)保證土霉素在堿性溶液中的穩(wěn)定性。(3)兼顧每種藥物的性質(zhì)，尋求合適的穩(wěn)定劑，保證復(fù)方土青注射液在規(guī)定PH范圍內(nèi)的穩(wěn)定性。一種獸用復(fù)方土青注射液，原料組分如下，均為重量份土霉素10_30g，青蒿素2_8g，甲氧芐氨嘧啶2_10g，氟尼辛葡甲胺2_10g，氯化鎂或氧化鎂2-10g，抗氧劑0. 1-lg, pH調(diào)節(jié)劑5-10g，復(fù)合有機(jī)溶媒40_60g，注射用水10_40g。上述獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，步驟如下(1)取處方量的α-吡咯烷酮、N，N-二甲基甲酰胺于容器中，攪拌均勻，加入土霉素?cái)嚢杈鶆虻肁液。(2)氯化鎂或氧化鎂、抗氧劑溶于水中，攪拌溶解均勻，得B液。(3)甲氧芐氨嘧啶用85°C丙二醇溶解均勻后，降溫至30°C以下，得C液。(4)氟尼辛葡甲胺用水溶解完全，得D液。(5)青蒿素用乙醇溶解完全，得E液。(6)將B液緩慢加入A液中，充分混合均勻，然后逐漸加入pH調(diào)節(jié)劑，并不斷攪拌，將藥液轉(zhuǎn)入50°C的水浴使之保溫，溶解澄明后加入溶液C、D和E。(7)保溫?cái)嚢?0分鐘，調(diào)節(jié)pH值在8. 0-9. 0之間，注射用水至定量。(8)藥液用0.22-0. 45 μ m的有機(jī)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，除菌，充氮?dú)?，無(wú)菌分裝即得。進(jìn)一步，獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中的α -吡咯烷酮、N，N-二甲基甲酰胺與步驟(3)中的丙二醇，步驟(5)中的乙醇，四者之間重量比為 (4-5) (1-2) (1-2) (1-2)。進(jìn)一步，獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(6)中pH調(diào)節(jié)劑的最佳選擇為乙醇胺。進(jìn)一步，獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟O)、(4)中所用的注射用水的最佳比例為3 2。進(jìn)一步，獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(7)中pH值的優(yōu)化范圍為8. 4-8.7。進(jìn)一步，獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(8)中除菌方法為0. 22-0. 45 μ m的有機(jī)濾膜進(jìn)行過(guò)濾。進(jìn)一步，獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(8)中充氮?dú)夥盅b的益處在于防止主藥降解，增加土霉素注射液的穩(wěn)定性。與其他土霉素注射液相比較，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，選擇氯化鎂為金屬離子絡(luò)合劑， 使不溶于水的土霉素與鎂離子形成絡(luò)合物，優(yōu)選α-吡咯烷酮與N，N-二甲基甲酰胺為復(fù)方溶媒，用以增加土霉素絡(luò)合物在水溶液中的穩(wěn)定性；青蒿素幾乎不溶于水，優(yōu)選乙醇為溶劑，使難溶性的青蒿素達(dá)到了有效治療濃度，充分發(fā)揮藥效；氟尼辛葡甲胺為解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎藥物，特點(diǎn)為藥效強(qiáng)，不良反應(yīng)輕，劑量小，個(gè)體差異小。該藥的加入，對(duì)于家畜發(fā)熱、疼痛性疾病等效果顯著，妥善解決了家畜發(fā)熱性疾病的問(wèn)題；兼顧每種原料的性質(zhì)，本注射液選擇優(yōu)化PH值8. 4-8. 7，同時(shí)選用優(yōu)化抗氧劑，增強(qiáng)復(fù)方土青注射液的穩(wěn)定性。
具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。實(shí)施例1、復(fù)方土青注射液制備方法一種獸用復(fù)方土青注射液，含有如下組分，均為重量份土霉素10g，青蒿素4g，甲氧芐氨嘧啶4g，氟尼辛葡甲胺4g，氯化鎂4g，硫代硫酸鈉 0. 5g，乙醇胺6g，α -吡咯烷酮30g，N, N- 二甲基甲酰胺10g，丙二醇10g，乙醇10g，注射用水8g。該獸用復(fù)方土青注射液采用如下方法進(jìn)行制備(1)取處方量的^-吡咯烷酮3(^、隊(duì)N-二甲基甲酰胺IOg于容器中，攪拌均勻， 加入土霉素IOg攪拌均勻得A液。(2)氯化鎂4g、硫代硫酸鈉0. 5g溶于水中，攪拌溶解均勻，得B液。(3)甲氧芐氨嘧啶4g，用丙二醇IOg加熱85°C溶解均勻后，降溫至30°C以下，得C液。(4)氟尼辛葡甲胺4g用水溶解完全，得D液。
(5)青蒿素4g用乙醇IOg溶解完全，得E液。(6)將B液緩慢加入A液中，充分混合均勻，然后逐漸加入乙醇胺，并不斷攪拌，將藥液轉(zhuǎn)入50°C的水浴使之保溫，溶解澄明后加入溶液C、D和E。(7)保溫?cái)嚢?0分鐘，調(diào)節(jié)pH值為8. 6，注射用水至定量。(8)藥液用0.22-0. 45 μ m的有機(jī)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，除菌，充氮?dú)猓瑹o(wú)菌分裝即得。實(shí)施例2、復(fù)方土青注射液制備方法一種獸用復(fù)方土青注射液，含有如下組分，均為重量份土霉素15g，青蒿素6g，甲氧芐氨嘧啶5g，氟尼辛葡甲胺4g，氧化鎂6g，硫脲0. 7g， 乙醇胺5g，α -吡咯烷酮25g，N, N- 二甲基甲酰胺5g，丙二醇10g，乙醇10g，注射用水9g。該獸用復(fù)方土青注射液采用如下方法進(jìn)行制備(1)取處方量的α-吡咯烷酮158、隊(duì)^二甲基甲酰胺58于容器中，攪拌均勻，加入土霉素15g攪拌均勻得A液。(2)氧化鎂6g、硫脲0. 7g溶于水中，攪拌溶解均勻，得B液。(3)甲氧芐氨嘧啶5g，用丙二醇IOg加熱85°C溶解均勻后，降溫至30°C以下，得C液。(4)氟尼辛葡甲胺4g用水溶解完全，得D液。(5)青蒿素6g用乙醇IOg溶解完全，得E液。 (6)將B液緩慢加入A液中，充分混合均勻，然后逐漸加入乙醇胺5g，并不斷攪拌， 將藥液轉(zhuǎn)入50°C的水浴使之保溫，溶解澄明后加入溶液C、D和E。(7)保溫?cái)嚢?0分鐘，調(diào)節(jié)pH值為8. 5，注射用水至定量。(8)藥液用0. 22-0. 45 μ m的有機(jī)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，除菌，充氮?dú)?，無(wú)菌分裝即得。實(shí)施例3、復(fù)方土青注射液制備方法一種獸用復(fù)方土青注射液，含有如下組分，均為重量份土霉素30g，青蒿素3g，甲氧芐氨嘧啶3g，氟尼辛葡甲胺2g，氧化鎂4g，甲醛合次亞硫酸氫鈉0. 3g，二乙醇胺5g，α -吡咯烷酮15g，N, N- 二甲基甲酰胺10g，丙二醇15g，乙醇 7g，注射用水6g。該獸用復(fù)方土青注射液采用如下方法進(jìn)行制備(1)取處方量的^-吡咯烷酮158、隊(duì)N-二甲基甲酰胺IOg于容器中，攪拌均勻， 加入土霉素30g攪拌均勻得A液。(2)氧化鎂4g、甲醛合次亞硫酸氫鈉0. 3g溶于水中，攪拌溶解均勻，得B液。(3)甲氧芐氨嘧啶3g，用丙二醇15g加熱85°C溶解均勻后，降溫至30°C以下，得C 液。(4)氟尼辛葡甲胺2g用水溶解完全，得D液。(5)青蒿素3g用乙醇7g溶解完全，得E液。(6)將B液緩慢加入A液中，充分混合均勻，然后逐漸加入三乙醇胺，并不斷攪拌， 將藥液轉(zhuǎn)入50°C的水浴使之保溫，溶解澄明后加入溶液C、D和E。(7)保溫?cái)嚢?0分鐘，調(diào)節(jié)pH值為8. 7，注射用水至定量。(8)藥液用0. 22-0. 45 μ m的有機(jī)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，除菌，充氮?dú)?，無(wú)菌分裝即得。實(shí)施例4、復(fù)方土青注射液制備方法
一種獸用復(fù)方土青注射液，含有如下組分，均為重量份土霉素15g，青蒿素2g，甲氧芐氨嘧啶5g，氟尼辛葡甲胺4g，氯化鎂10g，亞硫酸氫鈉0. lg，乙醇胺8g，α-吡咯烷酮25g，N，N-二甲基甲酰胺5g，丙二醇10g，乙醇7g，注射用水9g該獸用復(fù)方土青注射液采用如下方法進(jìn)行制備(1)取處方量的α-吡咯烷酮25g、N，N-二甲基甲酰胺5g于容器中，攪拌均勻，加入土霉素15g攪拌均勻得A液。(2)氯化鎂10g、亞硫酸氫鈉0. Ig溶于水中，攪拌溶解均勻，得B液。(3)甲氧芐氨嘧啶5g，用丙二醇IOg加熱85°C溶解均勻后，降溫至30°C以下，得C液。(4)氟尼辛葡甲胺4g用水溶解完全，得D液。(5)青蒿素2g用乙醇7g溶解完全，得E液。(6)將B液緩慢加入A液中，充分混合均勻，然后逐漸加入乙醇胺8g，并不斷攪拌， 將藥液轉(zhuǎn)入50°C的水浴使之保溫，溶解澄明后加入溶液C、D和E。(7)保溫?cái)嚢?0分鐘，調(diào)節(jié)pH值為8. 5，注射用水至定量。(8)藥液用0. 22-0. 45 μ m的有機(jī)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，除菌，充氮?dú)?，無(wú)菌分裝即得。按本方案生產(chǎn)的獸用復(fù)方土青注射液，按市售產(chǎn)品進(jìn)行包裝，分別按藥典標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行常溫試驗(yàn)、加速試驗(yàn)，從一年的觀察結(jié)果來(lái)看，其性狀(黃色)、pH值(8. 4-8. 7)、處方中各組分含量(90. 0-110.0%)均在規(guī)定范圍之內(nèi)，說(shuō)明該注射液非常穩(wěn)定。該實(shí)施例的獸用復(fù)方土青注射液的臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下表1獸用復(fù)方土青注射液臨床治療效果(治療劑量1kg體重0. Iml)
權(quán)利要求
1.一種獸用復(fù)方土青注射液，其特征在于，原料組成如下，均為重量比土霉素10-30g，青蒿素2-8g，甲氧芐氨嘧啶2-10g，氟尼辛葡甲胺2-10g，氯化鎂或氧化鎂2-10g，抗氧劑0. 1-lg, pH調(diào)節(jié)劑5-10g，復(fù)合有機(jī)溶媒40_60g，注射用水10_40g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于，所述的抗氧劑為亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、硫脲、甲醛合次亞硫酸氫鈉和無(wú)水亞硫酸鈉中一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于，所述的pH調(diào)節(jié)劑為乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺或乙二胺中一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于，所述的復(fù)合有機(jī)溶媒為α-吡咯烷酮、丙二醇、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺和乙醇中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于制備方法是按以下步驟進(jìn)行(1)取處方量的α-吡咯烷酮、N，N-二甲基甲酰胺于容器中，攪拌均勻，加入土霉素?cái)嚢杈鶆虻肁液。(2)氯化鎂或氧化鎂、抗氧劑溶于水中，攪拌溶解均勻，得B液。(3)丙二醇加熱至85°C，加入甲氧芐氨嘧啶溶解均勻后，降溫30°C以下，得C液。(4)氟尼辛葡甲胺用水溶解完全，得D液。(5)青蒿素用乙醇溶解完全，得E液。(6)將B液緩慢加入A液中，充分混合均勻，然后逐漸加入pH調(diào)節(jié)劑，并不斷攪拌，將藥液轉(zhuǎn)入50°C的水浴使之保溫，溶解澄明后加入溶液C、D和E。(7)將合并液保溫?cái)嚢?0分鐘，調(diào)節(jié)pH值在8.0-9. 0之間，注射用水至定量。(8)藥液用0.22-0. 45 μ m的有機(jī)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，充氮?dú)猓瑹o(wú)菌分裝即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(1) 中的α-吡咯烷酮、N，N-二甲基甲酰胺與步驟(3)中的丙二醇，步驟(5)中的乙醇，四者之間重量比為 G-5) (1-2) (1-2) (1-2)。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(6) 中PH調(diào)節(jié)劑的最佳選擇為乙醇胺。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(7) 中PH值的最佳優(yōu)化范圍為8. 4-8. 7。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的獸用復(fù)方土青注射液的制備方法，其特征在于所述步驟(7) 中充氮?dú)夥盅b的益處為能增加土霉素注射液的穩(wěn)定性。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種獸用土青注射液制備方法及臨床應(yīng)用，注射液原料主要包括土霉素、青蒿素、甲氧芐氨嘧啶、氟尼辛葡甲胺、氧化鎂或氯化鎂、抗氧劑、pH調(diào)節(jié)劑、復(fù)合有機(jī)溶媒和水。本發(fā)明作為一種獸用復(fù)方制劑，主要用于治療敏感的革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌，附紅體、立克次體、支原體引起的感染性疾病和繼發(fā)感染。獸用復(fù)方土青注射液制備方法簡(jiǎn)單，生產(chǎn)過(guò)程溫和，螯合溫度低，穩(wěn)定性好，使用方便，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/44GK102228462SQ201110123128
公開日2011年11月2日 申請(qǐng)日期2011年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月13日
發(fā)明者劉在青, 李莎, 李逐波, 田洪強(qiáng), 肖建森, 郭麗華, 陳冰 申請(qǐng)人:山東德州神牛藥業(yè)有限公司