專利名稱：一種從茯磚茶中提取α-淀粉酶抑制劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從茯磚茶中提取α -淀粉酶抑制劑的方法。
背景技術(shù)：
α -淀粉酶抑制劑是一種新型治療糖尿病和肥胖癥的藥物，通過抑制人體糖代謝的關(guān)鍵酶α-淀粉酶的生物活性，減少食物中碳水化合物的消化吸收，從而達到降血糖和減輕體重的作用。與其他降糖減肥產(chǎn)品相比，副作用較小，因此開發(fā)α-淀粉酶抑制劑對特定人群的降糖及減肥具有較好的應(yīng)用前景。茯磚茶是以黑毛茶作為原料，經(jīng)過篩分、汽蒸、慪堆、壓制、發(fā)花和干燥等工序加工而成的一種黑茶，分為特制茯磚茶和普通茯磚茶，它們之間的主要區(qū)別，在于原料的拼配不同特制茯磚全部用三級黑毛茶作原料，而壓制普通茯磚的原料中，三級黑毛茶只占40 45%，四級黑毛茶占5 10%，其他茶占50%。茯磚茶主要銷往甘肅、新疆、西藏等邊疆地區(qū)，是我國邊疆游牧民族生活的必需品。近年來，國內(nèi)外研究者從不同角度研究了茯磚茶的生物活性，對茯磚茶的減肥、降血脂、抗腫瘤、治療腹瀉等效應(yīng)進行了探討，取得了良好的效果，但尚未見有對茯磚茶中α-淀粉酶抑制劑活性物質(zhì)提取方面的研究報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種從特制茯磚茶中提取α -淀粉酶抑制劑的方法，制備工藝簡單，成本低，所提取的α -淀粉酶抑制劑有較高的生物活性。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種從茯磚茶中提取α -淀粉酶抑制劑的方法，所述方法包括(1)將茯磚茶粉碎，所得茶粉加入8 15倍量的40% 60%乙醇水溶液(m :v，茶粉質(zhì)量以g計，乙醇水溶液體積以HiL計)，40°C 60°C恒溫提取1 3次、每次Ih 池，合并提取液濃縮至無乙醇味得到濃縮液；所述茯磚茶為市購特制茯磚茶；(2)將步驟(1)所得的濃縮液用三氯甲烷萃取3 5次，分離取水相溶液用乙酸乙酯萃取3 5次，分離取乙酸乙酯相溶液，減壓干燥得到所述α -淀粉酶抑制劑。優(yōu)選的，所述茯磚茶粉碎過20 40目篩得到茶粉。優(yōu)選的，所述方法如下(1)將茯磚茶粉碎過20 40目篩，所得茶粉加入10倍量的55%乙醇水溶液，54°C 恒溫提取2次、每次105min，合并提取液濃縮至無乙醇味得到濃縮液；(2)將步驟(1)所得的濃縮液用等體積三氯甲烷萃取4次，分離取水相溶液用等體積乙酸乙酯萃取4次，分離取乙酸乙酯相溶液，減壓干燥得到所述α -淀粉酶抑制劑。本發(fā)明從茯磚茶中分離提取出α -淀粉酶抑制劑活性物質(zhì)主要成分為茯磚茶多酚，多酚含量為60% 75%，該α-淀粉酶抑制劑活性較高，優(yōu)選條件下對α-淀粉酶的半抑制濃度(IC50)為 1. 09mg/mL。本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)在以茯磚茶為原料制備α-淀粉酶抑制劑，制備工藝簡單，所得產(chǎn)品對α -淀粉酶有較好的抑制活性，有利于提高茯磚茶的附加值，為茯磚茶進一步開發(fā)成保健和功能性食品提供方法。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步描述，但本發(fā)明的保護范圍并不僅限于此實施例1 α -淀粉酶抑制劑活性的測定利用3，5-二硝基水楊酸法(DNS法)進行測定，具體如下將0. 2mL α -淀粉酶溶液 (用含6. 7mmol/L NaClWpH 6. 9、20mmol/L磷酸緩沖液配制)與0. 2mL含不同濃度α-淀粉酶抑制劑的提取液混合均勻，并置于37°C水浴中預(yù)熱15min后，加入0. 6mL預(yù)熱到37°C 的10g/L的淀粉溶液。反應(yīng)5min，立即加入l.OmL DNS顯色劑。于沸水中顯色5min，冰水浴冷卻后用8mL去離子水稀釋，取樣0. 2mL于96孔板，用酶標(biāo)儀于540nm處測定吸光值。以不加α-淀粉酶抑制劑的試樣為對照。α-淀粉酶抑制劑對α-淀粉酶抑制率的計算方法為抑制率(％ ) = (1-加入抑制劑后α-淀粉酶活性/不加抑制劑α-淀粉酶活性)X 100%。實施例2 以α -淀粉酶抑制劑對α _淀粉酶活性的抑制率為參考的醇提工藝的確定根據(jù)Box-Behnken中心組合試驗設(shè)計原理，綜合單因素試驗結(jié)果，選取乙醇濃度、 提取時間和提取溫度3個對抑制劑提取率影響較為顯著的因素，并在單因素試驗基礎(chǔ)上采用三因素三水平的響應(yīng)面分析方法。具體實施方法為取粉碎至20目的特制茯磚茶(購于湖南益陽茶廠，下同)粉3. 00g，加入濃度為40% 60% (ν/ν)的乙醇水溶液30mL，提取 Ih 池，提取溫度為40°C 60°C，相同條件下提取兩次。合并提取液，真空減壓濃縮至溶液無醇味，定容至250mL，測定提取液對α-淀粉酶的抑制率。試驗分析方案及結(jié)果如表1。表1 試驗分析方案及結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種從茯磚茶中提取α-淀粉酶抑制劑的方法，所述方法包括(1)將茯磚茶粉碎，所得茶粉加入8 15倍質(zhì)量的40% 60%乙醇水溶液，40°C 60°C恒溫提取1 3次、每次Ih 池，合并提取液濃縮至無乙醇味得到濃縮液；(2)將步驟(1)所得的濃縮液用三氯甲烷萃取3 5次，分離取水相溶液用乙酸乙酯萃取3 5次，分離取乙酸乙酯相溶液，減壓干燥得到所述α -淀粉酶抑制劑。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述茯磚茶粉碎過20 40目篩得到茶粉。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述方法如下(1)將茯磚茶粉碎過20 40目篩，所得茶粉加入10倍質(zhì)量的55%乙醇水溶液，54°C 恒溫提取2次、每次105min，合并提取液濃縮至無乙醇味得到濃縮液；(2)將步驟(1)所得的濃縮液用等體積三氯甲烷萃取4次，分離取水相溶液用等體積乙酸乙酯萃取4次，分離取乙酸乙酯相溶液，減壓干燥得到所述α -淀粉酶抑制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從茯磚茶中提取α-淀粉酶抑制劑的方法，所述方法包括(1)將茯磚茶粉碎過篩，所得茶粉加入8～15倍量的40％～60％乙醇水溶液，40℃～60℃恒溫提取1～3次，合并提取液濃縮得到濃縮液；(2)將步驟(1)所得的濃縮液用三氯甲烷萃取3～5次，分離取水相溶液用乙酸乙酯萃取3～5次，分離取乙酸乙酯相溶液，減壓干燥得到所述α-淀粉酶抑制劑。本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)在以茯磚茶為原料制備α-淀粉酶抑制劑，制備工藝簡單，所得產(chǎn)品對α-淀粉酶有較好的抑制活性，有利于提高茯磚茶的附加值，為茯磚茶進一步開發(fā)成保健和功能性食品提供方法。
文檔編號A61P3/10GK102210785SQ20111014662
公開日2011年10月12日 申請日期2011年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月1日
發(fā)明者何軍邀, 姜運耀, 王普 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)