專利名稱：乳糖酶納米微囊的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種新型藥劑技術領域，尤為乳糖酶納米微囊的制備方法。
背景技術：
乳糖酶(Lactase),其系統(tǒng)名為B-D-半乳糖甘半乳糖水解酶(galactosidegalactohydrase),或簡稱 B-半乳糖苷酶(B-galactosidase)。一般來說，該酶有兩種催化性質一是催化水解反應，就是在特定條件下水解B-D-半乳苷鍵，將乳糖水解成a-D-葡萄糖和B-D-半乳糖二是催化轉移反應，在乳糖分子的半乳糖一側連接1-4個半乳糖，生成低聚半乳糖(aglactooligosaccharide, G0S),作為一中益菌作用因子而用于功能性食品的開發(fā)。乳糖酶是一種白色粉末，無臭無味，溶解后是一種淺棕色的液體，是一種無毒副作用的生物酶制劑，已有FDA、FCC、WH0/FA0和JACFA等權威機構評審確定為安全 物質，國際生化編號為EC. 3. 2. I. 23，CAS編號為9030-11-2。我國衛(wèi)生部已于1998年10月同意將其列入食品添加劑衛(wèi)生使用標準GB2760之中，允許在食品工業(yè)生產(chǎn)中使用。小腸中乳糖酶活性從十二子腸近段向遠段逐漸增加，在空腸或近段回腸達高峰，末段回腸酶水平低。乳糖酶可將人體內的乳糖分解成葡萄糖和半乳糖，葡萄糖是人體各部分代謝的能量來源，半乳糖則是人大腦和黏膜組織代謝時所必須的結構糖，是嬰兒大腦發(fā)育的必要組織，與嬰兒大腦迅速成長有著密切的聯(lián)系。再者，乳糖酶還可以在人體內通過轉糖苷作用生成低聚糖，這些低聚糖是一種低分量，不黏稠的水溶性膳食纖維，它在人體腸道內作為益菌增殖因子僅能被雙歧桿菌所利用，卻不能被腐敗細菌所利用，如此可大大減少腸道內有害毒素物質的產(chǎn)生，對預防便秘和腹瀉有很重要的作用。載藥微囊是將固態(tài)或液態(tài)藥物用輔料包裝成微小膠囊，在藥劑學上把粒徑在IOnm IOOnm的載藥微囊稱納米囊。近年來,載藥納米微囊因其具有網(wǎng)狀皮內系統(tǒng)革巴向性、緩釋性及表面可修飾性而成為醫(yī)藥學領域的熱點研究對象。利用該系統(tǒng)的特點，在改變藥物體內分布、提高局部濃度、減輕毒副作用、提高生物利用度等方面取得了引人注目的成績。

發(fā)明內容
為了實現(xiàn)該發(fā)明目的，本發(fā)明乳糖酶納米微囊的制備方法，是一種復乳法，該法用1.0% -3.0%的乳酸酶水溶液體第一水相Wl ；0. 05% 0. 20%聚乙烯醇、0. 1% -0.2%穩(wěn)定劑吐溫80的水溶液體第二水相；1. 0% -2. 0%濃度的聚乳酸的二氯乙烷與乙酸乙酯混合溶液(溶劑的比為I : I)作為有機相0 ;濃度為0. 1%羥丙基甲基纖維素(HP55)的乙醇一丙酮溶液為沉積色復劑。第一水相W1與有機相0以I ; 10比例混合，經(jīng)超聲乳化制成初乳液W1ZU初乳相W/0經(jīng)與第二水相以0. 5-1. 5 10比例混合,經(jīng)分散乳化制成復乳液W1AVW2 ;復乳液用W1A)/W2 ;中滴加沉淀包復劑，在常溫常壓下經(jīng)攪拌至溶劑完全揮發(fā)，HP55即在納米微囊表面沉積包復，經(jīng)高速離心，純水洗滌、凍干即為乳糖酶納米微囊；包復沉淀使用的試劑為0. 1%羥丙基甲基纖維素(HP55)的乙醇-丙酮溶液，乙醇丙酮的比例為I : 1，該沉淀包復劑的用量與復乳液W1AvV2的比例為體積1.0 5.5。具體實施方法實施例一I、稱取0. 25g(精確至0. OOlg)烯醇于250mL燒杯中，加水150mL，保鮮膜密封并扎幾個小孔，于恒溫磁力攪拌器上加熱攪拌至聚乙烯醇完全溶解后，繼續(xù)攪拌2min 3min后立即置于250mL容量瓶中，洗滌燒杯3次，并將洗滌液也轉移到容量瓶中，冷卻后定容至刻度；2、稱取0. lg(精確至O.OOlg)聚乳酸和0.05g(精確至O.OOlg)大豆卵磷脂與50*30高型稱量瓶中，在通風櫥內加2. 5mL 二氯甲烷和2. 5mL乙酸乙酯，密封搖勻。(此有機相為0)；3、取0.04g乳糖酶于另一稱量瓶中，加2mL水(此第一水相溶液為W1)； 4、分別向IOOmL燒杯和250mL燒杯中加入50mL和150mL⑴中溶解完全的聚乙烯醇，再分別加入0. 2g吐溫80電磁爐攪拌。(此第二水相溶液為w2)；5、采用復乳法(wi/o/wj。首先,將0. 5mL第一水相W1注射入5mL有機相0,超聲波分散制得初乳液(Wl/o)，然后加入50mL第二水相(W2)中，經(jīng)分散乳化，制得復乳液(W1/o/w2)。將該復乳液迅速傾入一定體積的水分散相中，然后上述體系中滴加10mL、0. 1%羥丙基甲基纖維素鈦酸酯(HP55)的無水乙醇-丙酮溶液(體積比為I : I)常溫常壓下攪拌至溶劑會發(fā)完畢，HP55即可在納米微囊的表面沉積，即得腸溶包衣乳糖酶納米微囊懸浮液。20000ram離心收集納米微囊，用超純水洗3邊后凍干，儲存于干燥器中，即為成品。實例二I、稱取250g聚乙烯醇于250L反應釜中，加水約150L保鮮膜封閉并扎幾個小孔，于恒溫磁力攪拌器上加熱攪拌至聚乙烯醇完全溶解后，繼續(xù)攪拌2min 3min后，迅速冷卻，用水添加至250L ；2、稱取IOOg聚乳酸和50g大豆卵磷脂于溶解釜中，在通風櫥內加2. 5L乙酸乙酯，密封搖勻。(此為有機相0)；3、取40g乳糖酸于另一容器中，加2L水(此第一水相為Wl)；4、分別向200g和250L燒杯中加入150ml (I)中溶解完全的聚乙烯醇，在分別加入200g吐溫80電磁爐攪拌。(此第二水相為w2)；5、、采用復乳法(W1AvV2)15首先，將0.5L第一水相溶液(Wl)注射入5L有機相
(O)，超聲波分散制成初乳液(W1A))，然后加入50L第二水相(W2)中，經(jīng)分散乳化，制得復乳液(W1AvV2)15將該復乳液迅速傾入一定體積的水分散相中，然后在上述體系中滴加iol、0. 1%羥丙基甲基纖維素鈦酸酯(HP55)的無水乙醇-丙酮溶液(體積比為I : 1)，常溫常壓下攪拌至溶劑會發(fā)完畢，HP55即可在納米微囊的表面沉積，即得腸溶包衣乳酸酶納米微囊的懸浮液。20000g離心收集納米微囊，用超純水清洗3邊后凍干，儲存于干燥器中，即為成品。以上所述，實施方式僅僅是對本發(fā)明的優(yōu)選實施方式進行描述，并非對本發(fā)明的范圍進行限定，在不脫離本發(fā)明技術的精神的前提下，本領域工程技術人員對本發(fā)明的技術方案作出的各種變形和改進，均應落入本發(fā)明的權利要求書確定的保護范圍內。
權利要求
1.乳糖酶納米微囊的制備方法，其特征在于使用了復乳法、即w/o/w法，將乳糖酶溶入水中，是為第一水相(W1)，將聚乙烯醇加熱攪拌溶于水中，再加入穩(wěn)定劑吐溫80攪拌溶解是為第二水相(w2)，將聚乳酸和大豆卵磷脂溶于二氯甲烷與乙酸乙酯的混合溶液，是為有機相(O);將(W1)加入(O)中，超聲分散制的初乳液(W1A));將初乳液(W1A))加到(W2)中分散乳化，得到復乳液(W1A)ZV2);在復乳液(W1A)ZV2)中滴加羥丙基纖維素鈦酸酯(HP55)的乙醇一丙酮溶液，在常溫常壓攪拌使有機溶劑揮發(fā)，HP55在納米微囊表面沉積，得到腸溶包衣乳糖酶納米微囊懸濁液，懸濁液經(jīng)高速離心、純水洗滌并凍干，即得乳糖酸納米微囊成品O
2.根據(jù)權利要求所述的乳糖酶納米微囊的制備方法，其特征在于第一水相(W1)乳糖酶的濃度為1% -3% ;第二水相(W2)中，聚乙烯醇的濃度為O. 05% -O. 20%穩(wěn)定劑吐溫80的濃度為O. 1% -O. 2%。
3.根據(jù)權利I所述的乳糖酶納米微囊的制備方法，其特征在于有機相溶劑二氯甲烷與乙酸乙酯的比例為I : I，聚乳糖的濃度為1.0%-2.0%聚乳酸的濃度為O. 5%-I. 5%。
4.根據(jù)權利I所述的乳糖酶納米微囊的制備方法，其特征在于初乳液(W1A))中第一水相(W1)與有機相(O)的比例為I : 10，經(jīng)超聲分散制取，初乳液(Wl/0)與第二水相(W2)的比例為O. I O. 15 I. O,經(jīng)分散乳化制成復乳液(W1AVW2)。
5.根據(jù)權利I所述的乳糖酶納米微囊的制備方法，其特征是復乳液(W1AvV2)中滴加的羥丙基甲基纖維素(HP55)的乙醇-丙酮溶液，該溶液與復乳液(W1AvV2)的體積e為I 5. 5，羥丙基甲基纖維素在共有機溶劑中的濃度為0.1%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種乳酸酶納米微囊的制備方法，所述的制備方法為復乳法，系將乳糖酶水溶加入含聚乳酸的表面活性劑水分散液中，經(jīng)超聲分散制成初乳液；初乳液加入含聚乙烯醇經(jīng)乳化劑吐溫80的水分散液，經(jīng)分散乳化制得復乳液；在復乳液中加入羥丙基纖維素鈦酸酯(HP55)的乙醇丙酮溶液，常溫常壓攪拌使溶劑揮發(fā)，HP55在納米微囊表面沉積，經(jīng)高速離心、水洗、凍干，即為乳糖酶納米微囊。本發(fā)明的乳糖酶納米微囊具有網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)靶向性、緩釋性及表面可修飾性等特性。該產(chǎn)品具有改變藥物體內分布、提高局部濃度、提高生物利用度等作用。
文檔編號A61K47/38GK102793688SQ201110149039
公開日2012年11月28日 申請日期2011年5月26日 優(yōu)先權日2011年5月26日
發(fā)明者張啟美 申請人:張啟美