專利名稱：促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到提供一種促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式裝置，尤其是ー種可降解的促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的裝置。
背景技術(shù)：
周圍神經(jīng)缺損修復(fù)與功能重建，是百余年來世界臨床醫(yī)學(xué)研究一大難題。隨著社會經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，機(jī)械化的程度増加，交通日益發(fā)達(dá)，人口流動倍增的情況下，周圍神經(jīng)的損傷就急速地上升。周圍神經(jīng)損傷均多發(fā)于青壯年勞動力，勞動カ的傷殘成為社會發(fā)展與家庭沉重的經(jīng)濟(jì)與倫理負(fù)擔(dān)，制約和阻礙著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。周圍神經(jīng)損傷的治療效果不理想，主要難題之ー是沒有合適材料修復(fù)神經(jīng)損傷后出現(xiàn)的缺損。臨床上最常用的移植材料是自體神經(jīng)，但供體直徑細(xì)，可切取的數(shù)量非常有限，難以滿足臨床需要，且取材后會造成供區(qū)新的神經(jīng)缺損，出現(xiàn)供區(qū)神經(jīng)瘤形成和相應(yīng)神經(jīng)功能障礙等并發(fā)癥，因此，周圍神經(jīng)移植材料的研制一直是神經(jīng)修復(fù)領(lǐng)域的重點課題。近年來，不少國家的研究機(jī)構(gòu)和企業(yè)投入了大量人力、物力與資金對周圍神經(jīng)修復(fù)材料進(jìn)行研究。已知作為理想的周圍神經(jīng)支架材料應(yīng)能為神經(jīng)再生提供最佳的理化和生物學(xué)微環(huán)境，包括(1)良好的生物相容性(無毒性，低免疫原性，無致畸致癌性)和降解性，神經(jīng)修復(fù)后能被機(jī)體吸收。(2)具有可塑性和一定的機(jī)械強(qiáng)度，可保護(hù)再生神經(jīng)順利通過神經(jīng)缺損區(qū)；(3)具有與所修復(fù)神經(jīng)相似的仿生三維支架結(jié)構(gòu)，支持并引導(dǎo)再生神經(jīng)的生長；(4)材料的組分與構(gòu)成有良好的生物相容性；(5)保證神經(jīng)再生修復(fù)所需的營養(yǎng)供應(yīng)，支架材料內(nèi)有調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞生長，分化并促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)和組織再生的神經(jīng)營養(yǎng)因子，改善神經(jīng)再生的微環(huán)境，提高軸突的再生速度。目前制備的具有良好生物相容性和仿生化的神經(jīng)移植物技術(shù)較為成熟，在國內(nèi)外已有不少專利申請。如中國專利200910250344. 7使用PLGA、殼聚糖和膠原蛋白生物可降解材料制成的神經(jīng)再生導(dǎo)管；200910034583. 9則提供一種由聚合物經(jīng)靜電紡絲方法制備的納米纖維組成的導(dǎo)管狀神經(jīng)移植物；200910020942. 5則使用I型膠原蛋白、殼聚糖、明膠制成一種高仿真組織工程神經(jīng)修復(fù)材料以及此前本申請的申請人的20041002724. 8組織工程化神經(jīng)移植物等。然而單一的神經(jīng)導(dǎo)管不含有任何生物活性物質(zhì)，僅是神經(jīng)再生的物理通道，不具備任何生物活性，所以其修復(fù)的效果不佳，特別是對于更需要營養(yǎng)物質(zhì)的長段神經(jīng)缺損。但是如何保證神經(jīng)再生修復(fù)所需的營養(yǎng)供應(yīng)，提供具有支持、引導(dǎo)促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)和組織再生的營養(yǎng)物質(zhì)，改善神經(jīng)再生微環(huán)境，且能形成濃度梯度指導(dǎo)神經(jīng)軸突導(dǎo)向生長仍是尚未解決的難題。雖然現(xiàn)可通過在神經(jīng)移植物上種植具有生物學(xué)活性的種子細(xì)胞，通過其在體內(nèi)外環(huán)境中分化為可分泌促神經(jīng)生長物質(zhì)的類許旺細(xì)胞(如中國專利 200410027223. 3,200410027224. 8,200410027221. 4,200420045860. 9、200420045859. 6,200420045858. 1,200420045857. 7,200410027222. 9 等)或在支架材料上添加各種神經(jīng)營養(yǎng)因子，通過化學(xué)或生物等構(gòu)建控釋系統(tǒng)實現(xiàn)局部持續(xù)緩慢釋放(如中國專利 200410012856. 3，200410009429. 3，200610081506. 5，200610150792. 6 等)。雖然使用種子細(xì)胞，通過體內(nèi)或體外誘導(dǎo)成類雪旺細(xì)胞，也能分泌有益于神經(jīng)再生的營養(yǎng)因子，可促進(jìn)軸突再生和髓鞘形成，但是其分泌神經(jīng)再生物質(zhì)具有時效局限性，且干細(xì)胞的治療涉及使用安全性，標(biāo)準(zhǔn)性和倫理學(xué)等諸多問題。迄今為止，除了造血干細(xì)胞治療血液病，全世界尚未有任何ー個研究和醫(yī)療機(jī)構(gòu)的干細(xì)胞治療得到受理和審評。我國衛(wèi)生部更是于2009年3月頒布實施的《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》中也明確將干細(xì)胞技術(shù)歸入“第三類醫(yī)療技木”，稱其“涉及重大倫理問題，安全性、有效性尚需經(jīng)規(guī)范的臨床試驗研究進(jìn)ー步驗證”。因此這種細(xì)胞型組織工程離臨床應(yīng)用距離尚遠(yuǎn)。而通過化學(xué)或生物等技術(shù)方法在支架材料上添加各種神經(jīng)營養(yǎng)因子，一方面技術(shù)要求較高，制作復(fù)雜，難以保證神經(jīng)營養(yǎng)因子的活性，難以標(biāo)準(zhǔn)化穩(wěn)定生產(chǎn)，另一方面多數(shù)只能添加少量的単一神經(jīng)營養(yǎng)因子，對神經(jīng)再生的促進(jìn)的作用相當(dāng)有限，以致應(yīng)用受限；因此如何在現(xiàn)有的周圍神經(jīng)移植物材料包容有多種神經(jīng)營養(yǎng)因子已是研究的熱點。同時如能在這種材料上進(jìn)行有定向的濃度梯度分布的，一方面可以保證遠(yuǎn)端足夠量的神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)，防止靶器官和肌肉的過快退化和萎縮，另一方面則可以創(chuàng)造ー個各向異性的細(xì)胞生長環(huán)境，使細(xì)胞行為發(fā)生取向而實現(xiàn)導(dǎo)向。這對于提高周圍神經(jīng)移植修復(fù)效果將有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置，該裝置具有簡便、安全、高效的優(yōu)點，可用于裝載多種促神經(jīng)再生物質(zhì)，并將促神經(jīng)再生物質(zhì)按照神經(jīng)遠(yuǎn)、近端形成濃度梯度，環(huán)繞于周圍神經(jīng)移植物的周圍，形成有利于周圍神經(jīng)軸突再生的微環(huán)境。本發(fā)明所述的ー種促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置，是由兩個対稱的半柱形組件合攏形成的中空的柱形裝置；在所述柱形裝置內(nèi)分隔成多個獨(dú)立的小間室，用于裝載不同濃度的促神經(jīng)再生物質(zhì)；所述柱形裝置的兩端是開放的，供周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料從一端穿入并從另一端穿出；兩個半柱形組件的間隙通過醫(yī)用生物蛋白膠封閉成為封閉的管狀結(jié)構(gòu)；所述半柱形組件是由可降解的生物相容性材料制備的。在本發(fā)明所述的裝置內(nèi)，促神經(jīng)再生物質(zhì)圍繞所置入的周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料，使得周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料周圍富集有多種促神經(jīng)再生物質(zhì)，形成有利于周圍神經(jīng)軸突再生的微環(huán)境；通過醫(yī)用生物蛋白膠封閉成為管狀結(jié)構(gòu)，可植入體內(nèi)需要周圍神經(jīng)修復(fù)的地方，作為周圍神經(jīng)移植物的裝置。而且，由于采用內(nèi)部分隔狀凹槽的結(jié)構(gòu)，能夠裝載各種膠狀的促神經(jīng)再生物質(zhì)，加快軸突再生速度；并可將促神經(jīng)再生物質(zhì)按照神經(jīng)遠(yuǎn)、近端形成濃度梯度，對神經(jīng)生長起到一定的導(dǎo)向作用。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述的半柱形組件具有至少40N/mm2的斷裂強(qiáng)度。因此，由這些半柱形組件制成的管狀裝置能夠提供一定機(jī)械支持，能維持形狀不容易塌陷，從而保護(hù)裝置內(nèi)周圍神經(jīng)移植物，防止纖維瘢痕組織長入。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述的半柱形組件具有50% 80%之間的孔隙率，以及具有5Mm 50Mm之間的微孔直徑。因此，半柱形組件具有一定的孔隙結(jié)構(gòu)，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的通透，可使毛細(xì)血管和纖維組織長入，不妨礙裝置內(nèi)的周圍移植物獲得血管化，也避免其內(nèi)所裝載促神經(jīng)再生物質(zhì)大量外滲。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述的半柱形組件是由以下可降解的生物 相容性材料制成殼聚糖、藻酸鹽、絲素蛋白、纖維素、膠原蛋白、甲殼素、幾丁糖、聚乳酸、聚羥基こ酸、聚羥基丁酸脂、聚已內(nèi)脂、聚こ醇酸、脂肪族聚酯、聚磷酸酷、聚碳酸酷、聚氨酯及它們的共聚物。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述的周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料是選自用于周圍神經(jīng)缺損修復(fù)的人工合成材料、天然生物材料或者組織工程神經(jīng)。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述人工合成材料是選自以下可降解的生物相容性材料聚乳酸、聚羥基こ酸、聚羥基丁酸脂、聚已內(nèi)脂、聚こ醇酸、脂肪族聚酯、聚磷酸酷、聚碳酸酷、聚氨酯及它們的共聚物。 根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述天然生物材料是選自來源于有活性的自體、去細(xì)胞同種異體或去細(xì)胞異種生物體的神經(jīng)、骨骼肌、血管、肌膜管、黏膜、羊膜以及無活性的殼聚糖、藻酸鹽、絲素蛋白、纖維素、膠原蛋白、甲殼素、幾丁糖。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述組織工程神經(jīng)是種植有活性種子細(xì)胞的組織工程支架。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述的種子細(xì)胞是選自許旺細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)細(xì)胞、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。根據(jù)本發(fā)明所述的裝置的進(jìn)ー步特征，所述促神經(jīng)再生物質(zhì)是選自神經(jīng)營養(yǎng)因子，如神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)素家族；神經(jīng)分裂素，如睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子、和白細(xì)胞介素-6;非神經(jīng)營養(yǎng)因子，如成纖維細(xì)胞生長因子、白細(xì)胞抑制因子、類胰島素生長因子、表皮生長因子、膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、血小板源性生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子@ ;或者它們的兩種或兩種以上的組合。這些促神經(jīng)再生物質(zhì)可參與周圍神經(jīng)再生、調(diào)節(jié)和創(chuàng)傷修復(fù)的物質(zhì)，有保護(hù)周圍神經(jīng)損傷后的神經(jīng)元及軸突，可促進(jìn)軸突再生，加快神經(jīng)修復(fù)作用。本發(fā)明所述的促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置具有以下特點和優(yōu)點
(I)提供ー種可裝載促神經(jīng)再生物質(zhì)的裝置，作為用于植入的周圍神經(jīng)移植物的裝置，使得周圍神經(jīng)移植物周圍富集有多種的神經(jīng)再生物質(zhì)，形成有利于周圍神經(jīng)軸突再生的微環(huán)境。(2)所裝載的促神經(jīng)再生物質(zhì)種類不受限制，可根據(jù)實際使用需要選擇且可有較多容量，突破目前使用各種復(fù)雜技術(shù)只能在周圍神經(jīng)移植物添加少量的単一促神經(jīng)再生物質(zhì)的限制，同時也減少既往復(fù)雜的化學(xué)或生物加工過程中對促神經(jīng)再生物質(zhì)活性的影響。(3)該裝置內(nèi)的分隔狀結(jié)構(gòu)可實現(xiàn)促神經(jīng)再生物質(zhì)形成濃度梯度，有可能對周圍神經(jīng)再生的軸突伸展和定向生長有明顯的促進(jìn)作用。(4)整個制作エ藝簡便、安全、經(jīng)濟(jì)又高效，實現(xiàn)的手段較為簡便，有利于規(guī)?；a(chǎn)和臨床的推廣使用。
具體實施例方式實施例一本發(fā)明所述的促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置的制備
制備材料使用以聚(乳酸-羥基こ酸)共聚物(PLGA)。半柱形組件的制備以聚(乳酸-羥基こ酸)共聚物(PLGA)(摩爾比GA LA=20 80)為原材料，將其溶于ニ氯甲烷中，加入粒徑200 300微米的NaCl做致孔劑(PLGA與NaCl質(zhì)量比1:9)，同時按5%的比例添加賴氨酸作為堿性調(diào)節(jié)劑，并混合均勻，將混合物在專用模具中成膜。模具中的混合物在室溫下，通風(fēng)櫥中自然揮發(fā)。96小時后，脫模，取出半柱狀支架，將其移到真空干燥箱，37°C真空干燥48小吋。將半柱狀材料浸入裝有去離子水的800ml大燒杯中，每4小時更換一次去離子水。去離子水洗滌96小時后，將半柱狀材料取出，在干燥箱中37°C干燥48小吋。然后在真空干燥箱中，37°C真空干燥48小吋，即可得到PLGA組件。組件的裝配和使用在所制備的半柱形組件內(nèi)裝載促神經(jīng)再生物質(zhì)，如膠凍狀的神經(jīng)生長因子(NGF)，并于神經(jīng)近端處從高到底的濃度轉(zhuǎn)入不同的小間隔室內(nèi)，置入一根同種異體去細(xì)胞神經(jīng)修復(fù)材料后，將兩個半柱形組件合閉，并使用醫(yī)用生物蛋白膠粘合封閉，形成ー種管狀結(jié)構(gòu)，使得同種異體去細(xì)胞神經(jīng)修復(fù)材料周圍富集有神經(jīng)生長因子(NGF)。
實施例ニ 本發(fā)明所述的促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置的制備
制備材料為殼聚糖。半柱形組件的制備取350 mg的殼聚糖溶于3 mg/ml醋酸溶液10ml，抽真空靜置12 h，將殼聚糖溶液注入專用模具中。將注模的樣品順軸向緩慢浸入深低溫冷淋劑(液氮)中，進(jìn)行梯度冷淋。將10 cm長的膠原蛋白-殼聚糖懸濁液的硅膠管冰凍體裁剪成2. Ocm短節(jié)段放置于預(yù)冷的鋁盤中，放入Alphal-2型冷凍干燥機(jī)，在-60°C、100 m torr條件下凍干24 h。在冷凍干燥機(jī)的真空環(huán)境中，冷凍支架中的溶劑冰晶發(fā)生升華，得到具有微孔結(jié)構(gòu)的組件。真空狀態(tài)下升溫至0°C保持6 h，再繼續(xù)升溫至22°C保持30 60 min，解除真空，升至常溫，即可制得干燥成形的殼聚糖組件。組件的裝配和使用在所制備的半柱形組件內(nèi)裝載促神經(jīng)再生物質(zhì)，如膠凍狀的睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)，并于神經(jīng)近端處按從高到底的濃度轉(zhuǎn)入不同的小間隔室內(nèi)，置入一根聚已內(nèi)脂制備的神經(jīng)導(dǎo)管后，將兩個半柱形組件合閉，并使用醫(yī)用生物蛋白膠粘合封閉，形成ー種管狀結(jié)構(gòu)，使得周圍神經(jīng)修復(fù)材料周圍富集有睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)。實施例三本發(fā)明所述的促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置的制備
制備材料為股原蛋白。半柱形組件的制備稱取膠原蛋白150mg溶于0. 05mmol/L冰醋酸溶液，4で條件下攪拌90min (18000r/min),負(fù)壓抽真空后于4 °C冰箱中過夜，充分混合成凝膠狀懸池液后將其注入專用模具中成型，并以2X10_5m/S的速度進(jìn)入冷凝劑中后，將其放入預(yù)冷的鋁盤中，于_40°C、IOOmtorr條件中凍干48h，制得干燥成型的膠原蛋白組件。組件的裝配和使用組件的裝配和使用在所制備的半柱形組件內(nèi)裝載促神經(jīng)再生物質(zhì)，如膠凍狀的膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)，并于神經(jīng)近端處按從高到底的濃度轉(zhuǎn)入不同的小間隔室內(nèi)，置入ー根以許旺細(xì)胞為種子細(xì)胞、去細(xì)胞神經(jīng)為支架的組織工程神經(jīng)后，將兩個半柱形組件合閉，并使用醫(yī)用生物蛋白膠粘合封閉，形成ー種管狀結(jié)構(gòu)，使得該組織工程神經(jīng)修復(fù)材料周圍富集有膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)。上述實施例一至三中所采用的專用模具為半柱狀結(jié)構(gòu)(如不銹鋼棒或玻璃管)，半柱狀凹面有n片分隔形成n+1層結(jié)構(gòu)(n=l, 2, 3......),半徑為I 5mm,長度可任意控制，直徑和長度主要是根據(jù)所要修復(fù)的神經(jīng)長度和直徑?jīng)Q定，壁厚0. 2 1mm。具體使用時，可不同濃度的膠凍狀促神經(jīng)再生物質(zhì)按照順序注入兩個半柱狀的不同凹槽內(nèi)，然后將周圍神經(jīng)移植物(如去細(xì)胞同種異體神經(jīng)修復(fù)材料等)置于促神經(jīng)再生物質(zhì)表面，然后將兩個半柱狀組件合閉，兩組間的空隙使用醫(yī)用生物蛋白膠涂擦，干燥后可完全閉合。使得現(xiàn)有周圍神經(jīng)移植物周圍富集有多種的神經(jīng)再生物質(zhì)，用于周圍神經(jīng)缺損移植修復(fù)用材料，以提高修復(fù)效果。根據(jù)與上述實施例類似的實驗，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以采用其他生物可降解的相容性材料來制備半柱形組件，例如藻酸鹽、絲素蛋白、纖維素、甲殼素、幾丁糖、聚羥基丁酸脂、聚已內(nèi)脂、聚こ醇酸、脂肪族聚酯、聚磷酸酷、聚碳酸酷、聚氨酯及它們的共聚物。經(jīng)測定，這些半柱形組件具有至少40N/mm2的斷裂強(qiáng)度，因此，能夠提供一定機(jī)械支持，保護(hù)裝置內(nèi)周圍神經(jīng)移植物，能維持形狀不容易塌陷，防止纖維瘢痕組織長入。同吋，這些半柱形組件具有50% 80%的孔隙率，以及需5Mm 50Mm之間的微孔直徑，因此具有一定的孔隙結(jié)構(gòu)，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的通透，可使毛細(xì)血管和纖維組織長入，不妨礙裝置內(nèi)的周圍移植物獲得血管化，也避免其內(nèi)所裝載促神經(jīng)再生物質(zhì)大量外滲。 在周圍神經(jīng)缺損修復(fù)實驗中，置入本發(fā)明所述的裝置內(nèi)的周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料可選自用于周圍神經(jīng)缺損修復(fù)的人工合成材料、天然生物材料或者組織工程神經(jīng)。所述人工合成材料是選自以下可降解的生物相容性材料聚乳酸、聚羥基こ酸、聚羥基丁酸脂、聚已內(nèi)脂、聚こ醇酸、脂肪族聚酯、聚磷酸酷、聚碳酸酷、聚氨酯及它們的共聚物。所述天然生物材料是選自來源于有活性的自體、去細(xì)胞同種異體或去細(xì)胞異種生物體的神經(jīng)、骨骼肌、血管、肌膜管、黏膜、羊膜以及無活性的殼聚糖、藻酸鹽、絲素蛋白、纖維素、膠原蛋白、甲殼素、幾丁糖。所述組織工程神經(jīng)是種植有活性種子細(xì)胞的組織工程支架。所述的種子細(xì)胞是選自許旺細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)細(xì)胞、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等可能對周圍神經(jīng)再生有益的活性并用于構(gòu)建組織工程神經(jīng)的種子細(xì)胞。置入本發(fā)明所述的裝置內(nèi)的促神經(jīng)再生物質(zhì)可選自神經(jīng)營養(yǎng)因子，如神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)素家族；神經(jīng)分裂素，如睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子、和白細(xì)胞介素_6 ;非神經(jīng)營養(yǎng)因子，如成纖維細(xì)胞生長因子、白細(xì)胞抑制因子、類胰島素生長因子、表皮生長因子、膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、血小板源性生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子3 ;或者它們的兩種或兩種以上的組合。這些促神經(jīng)再生物質(zhì)可參與周圍神經(jīng)再生、調(diào)節(jié)和創(chuàng)傷修復(fù)的物質(zhì)，有保護(hù)周圍神經(jīng)損傷后的神經(jīng)元及軸突，可促進(jìn)軸突再生，加快神經(jīng)修復(fù)作用。實施例四本發(fā)明所述的促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置用于獼猴橈神經(jīng)長段缺損的修復(fù)實驗。在獼猴上臂橈神經(jīng)深支起點以上Icm切取4cm長橈神經(jīng)造成5cm長神經(jīng)缺損，對神經(jīng)端端進(jìn)行標(biāo)記，試驗組使用實施例一所制備的植入式可降解裝置進(jìn)行修復(fù)，自體神經(jīng)移植組使用相應(yīng)長度的自體神經(jīng)修復(fù)，去細(xì)胞神經(jīng)移植組使用相應(yīng)長度的單純同種異體去細(xì)胞神經(jīng)修復(fù)。術(shù)后克式針(直徑I. 5_)固定肘關(guān)節(jié)屈135°。動態(tài)觀察8月，并進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)、電生理學(xué)和行為學(xué)的評價。術(shù)后各組動物存活良好，實驗組傷ロ愈合良好，未發(fā)現(xiàn)局部紅腫、積液、破潰，實驗動物未出現(xiàn)不良反應(yīng)。術(shù)后8個月各組動物均恢復(fù)了伸腕功能，試驗組伸腕動作幅度與自體神經(jīng)移植組相當(dāng)，優(yōu)于去細(xì)胞神經(jīng)移植組；神經(jīng)電生理檢測均可發(fā)現(xiàn)神經(jīng)動作電位存在，并發(fā)現(xiàn)試驗組的神經(jīng)刺激閾值與自體神經(jīng)組相當(dāng)，低于去細(xì)胞神經(jīng)組，最大振幅和神經(jīng)傳導(dǎo)速度與自體神經(jīng)組無顯著性差異，但優(yōu)于去細(xì)胞神經(jīng)組；組織學(xué)檢測顯示在試驗組和自體神經(jīng)移植組中，可見大量陽性染色的許旺細(xì)胞和神經(jīng)纖維， 神經(jīng)纖維排列整齊、規(guī)則，而去細(xì)胞神經(jīng)組神經(jīng)移植體遠(yuǎn)段S-IOO蛋白和神經(jīng)微絲蛋白免疫組化染色見有少量的陽性染色許旺細(xì)胞和神經(jīng)纖維且排列雜亂。上述結(jié)果顯示了根據(jù)本發(fā)明所述的植入式可降解裝置進(jìn)行修復(fù)獼猴橈神經(jīng)長段缺損是可行有效，且優(yōu)于傳統(tǒng)的單純同種異體去細(xì)胞神經(jīng)。
權(quán)利要求
1.一種促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置，其特征在于所述裝置是由兩個對稱的半柱形組件合攏形成的中空的柱形裝置；在所述柱形裝置內(nèi)分隔成多個獨(dú)立的小間室，用于裝載不同濃度的促神經(jīng)再生物質(zhì)；所述柱形裝置的兩端是開放的，供周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料從一端穿入并從另一端穿出；兩個半柱形組件的間隙通過醫(yī)用生物蛋白膠封閉成為封閉的管狀結(jié)構(gòu)；所述半柱形組件是由可降解的生物相容性材料制備的。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的裝置，其特征在于所述的半柱形組件具有至少40N/mm2的斷裂強(qiáng)度。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的裝置，其特征在于所述的半柱形組件具有50% 80%之間的孔隙率，以及需在5Mm 50Mm之間的微孔直徑。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的裝置，其特征在于所述的半柱形組件是由以下可降解的生物相容性材料制成的殼聚糖、藻酸鹽、絲素蛋白、纖維素、膠原蛋白、甲殼素、幾丁糖、聚乳酸、聚羥基こ酸、聚羥基丁酸脂、聚已內(nèi)脂、聚こ醇酸、脂肪族聚酯、聚磷酸酷、聚碳酸酷、聚氨酯及它們的共聚物。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的裝置，其特征在于所述的周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料是選自用于周圍神經(jīng)缺損修復(fù)的人工合成材料、天然生物材料或者組織工程神經(jīng)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的裝置，其特征在于所述人工合成材料是選自以下可降解的生物相容性材料聚乳酸、聚羥基こ酸、聚羥基丁酸脂、聚已內(nèi)脂、聚こ醇酸、脂肪族聚酯、聚磷酸酯、聚碳酸酷、聚氨酯及它們的共聚物。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的裝置，其特征在于所述天然生物材料是選自來源于同種或異種天然生物組織，包括有活性的自體、去細(xì)胞同種異體或去細(xì)胞異種生物體的神經(jīng)、骨骼肌、血管、肌膜管、黏膜、羊膜以及無活性的殼聚糖、藻酸鹽、絲素蛋白、纖維素、膠原蛋白、甲殼素、幾丁糖。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的裝置，其特征在于所述組織工程神經(jīng)是種植有活性種子細(xì)胞的組織工程支架。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的裝置，其特征在干所述的種子細(xì)胞是選自許旺細(xì)胞、骨髄間充質(zhì)細(xì)胞，脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，神經(jīng)干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞。
10.根據(jù)權(quán)利I所述的裝置，其特征在干所述促神經(jīng)再生物質(zhì)是選自神經(jīng)營養(yǎng)因子，如神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)素家族；神經(jīng)分裂素，如睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子、和白細(xì)胞介素_6 ;非神經(jīng)營養(yǎng)因子，如成纖維細(xì)胞生長因子、白細(xì)胞抑制因子、類胰島素生長因子、表皮生長因子、膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、血小板源性生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子^ ;或者它們的兩種或兩種以上的組合。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種促進(jìn)周圍神經(jīng)移植后神經(jīng)再生的植入式可降解裝置。本發(fā)明所述的植入式可降解裝置，是由兩個對稱的半柱形組件合攏形成的中空的柱形裝置；在所述柱形裝置內(nèi)分隔成多個獨(dú)立的小間室，用于裝載不同濃度的促神經(jīng)再生物質(zhì)；所述柱形裝置的兩端是開放的，供周圍神經(jīng)移植修復(fù)材料從一端穿入并從另一端穿出；兩個半柱形組件的間隙通過醫(yī)用生物蛋白膠封閉成為封閉的管狀結(jié)構(gòu)；所述半柱形組件是由可降解的生物相容性材料制備的。本發(fā)明所述的植入式可降解裝置具有簡便、安全、高效的優(yōu)點，可用于裝載多種促神經(jīng)再生物質(zhì)，并將促神經(jīng)再生物質(zhì)按照神經(jīng)遠(yuǎn)、近端形成濃度梯度，環(huán)繞于周圍神經(jīng)移植物的周圍，形成有利于周圍神經(jīng)軸突再生的微環(huán)境。
文檔編號A61F2/02GK102836016SQ201110164968
公開日2012年12月26日 申請日期2011年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月20日
發(fā)明者劉小林, 朱慶棠, 鄭燦鑌 申請人:中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院