專利名稱：一種麥角甾苷的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種麥角留苷的應(yīng)用，具體說，是涉及一種麥角留苷在治療糖尿病中的新用途，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
當(dāng)前，糖尿病已成為嚴(yán)重危害現(xiàn)代人類健康的三大慢性疾病之一。目前用于治療糖尿病的藥物主要有磺脲類、格列奈類、雙胍類、噻唑烷二酮類化合物及α -糖苷酶抑制劑等。這些藥物對(duì)糖尿病具有一定的治療作用，但同時(shí)也伴隨著許多副作用，如消化道的不良反應(yīng)及一定的肝腎毒性等。因此尋找低毒有效的新方法是糖尿病藥物研究的重要任務(wù)。麥角甾苷(acteoside)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下是一種苯乙醇苷類化合物，廣泛分布于肉蓯蓉屬、車前屬、地黃屬等多種植物中。 研究表明，麥角留苷具有多種生理活性，如抗腫瘤、抗菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、保肝、解痙、抗?jié)儭⒚庖哒{(diào)節(jié)、神經(jīng)保護(hù)、抗尿酸升高、促進(jìn)組胺和花生四烯酸的釋放，以及血管舒張等作用，在臨床上具有重要的藥用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種麥角甾苷的新用途。本發(fā)明所述的麥角留苷的新用途是指麥角留苷以單一形式用于治療糖尿病的藥物制劑的制備中。進(jìn)一步，本發(fā)明所述的麥角留苷的新用途是指麥角留苷以與藥學(xué)上可接受的藥物載體組成的組合物形式用于治療糖尿病的藥物制劑的制備中。所述的糖尿病為I型和/或II型糖尿病。所述的麥角留苷來源于車前屬植物的提取物。所述的麥角留苷是由車前子乙醇提取物的水混懸液經(jīng)過石油醚萃取到石油醚層接近無色，棄去石油醚層，水層用水飽和的正丁醇萃取，至正丁醇層接近無色，合并正丁醇層并減壓濃縮，再通過硅膠柱、ODS反相柱、半制備型高效液相色譜柱和kphadex LH-20凝膠柱層析得到。所述的車前子乙醇提取物推薦為車前子經(jīng)過2 6倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到的提取物；優(yōu)選為車前子經(jīng)過3 5倍體積的體積分?jǐn)?shù)為70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到的提取物。所述的硅膠柱層析用的洗脫液優(yōu)選乙酸乙酯-甲醇-水溶液體系。所述的ODS反相柱層析用的洗脫液優(yōu)選甲醇-水溶液體系。所述的kphadex LH-20凝膠柱層析用的洗脫液優(yōu)選甲醇。所述的藥物制劑形式可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括片劑、糖衣片劑、 薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)?、噴霧劑、滴劑、貼劑；優(yōu)選口服劑型，如膠囊劑、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、散劑、丹劑、膏劑等。所述的口服劑型可含有常用的賦形劑，諸如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色齊U、調(diào)味劑和濕潤(rùn)劑，必要時(shí)可對(duì)片劑進(jìn)行包衣。適宜的填充劑包括纖維素、甘露糖醇、乳糖和其它類似的填充劑；適宜的崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羥基乙酸淀粉鈉；適宜的潤(rùn)滑劑包括，例如硬脂酸鎂。適宜的藥物可接受的濕潤(rùn)劑包括十二烷基硫酸鈉。本發(fā)明利用HepG2細(xì)胞進(jìn)行體外葡萄糖消耗試驗(yàn)，同時(shí)利用四氧嘧啶導(dǎo)致的I型糖尿病小鼠，鏈脲佐菌素導(dǎo)致的I型糖尿病小鼠，鏈脲佐菌素加高脂飼料導(dǎo)致的II型糖尿病大鼠進(jìn)行體內(nèi)降糖藥效實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，麥角留苷在體外試驗(yàn)中可促進(jìn)葡萄糖的消耗，顯示了很低的細(xì)胞毒性；同時(shí)在體內(nèi)試驗(yàn)中可明顯提高血清胰島素水平，降低空腹血糖水平， 顯示出良好的治療糖尿病活性，為麥角留苷開拓了一種新的藥用價(jià)值。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取車前子粗粉lkg，用4倍體積的體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇水溶液回流提取池，重復(fù) 3次。合并提取液，過濾、濃縮干溶劑。將用1 3重量/體積比的水稀釋得到的上述濃縮提取液的水混懸液，用石油醚 (60 90°C)多次萃取，至石油醚層接近無色，棄去石油醚層；水層用水飽和的正丁醇萃取， 至正丁醇層接近無色，合并正丁醇層并減壓濃縮。通過硅膠柱層析，用體積比為35 1 0.4的乙酸乙酯-甲醇-水溶液體系進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得到麥角留苷粗品。反復(fù)通過硅膠(乙酸乙酯-甲醇-水梯度系統(tǒng))柱、ODS反相(甲醇-水體系) 柱、半制備型高效液相色譜柱(Pre-LC)和kphadex LH-20凝膠(甲醇)柱層析，直至得到麥角甾苷純品。分離得到的麥角甾苷的光譜數(shù)據(jù)如下麥角留苷(acteoside)，為淡黃色粉末，低分辨質(zhì)譜得到該化合物的質(zhì)量數(shù)為 624. 24，分子式為 C29H36O15,紫外光譜 Amax :232，246，289，332nm ；紅外光譜(KBr)max cm—1 3410,2927,1697,1604,1514,1447,1370,1277,1162,1030,809 ；1H NMR(500MHz, CD3OD)數(shù)據(jù)為6. 69 (1H, d, J = 1. 7Hz, H-2)，6. 65 (1H, d, J = 8. OHz, H-5)，6. 55 (1H, dd，J = 1. 7， 8. 0Hz, H-6)，2. 78 (2H, m, CH2_7)，4. 02 (1H, m, H-8)，3. 72 (1H, m, H-8)，4. 36 (1H, d, J = 8. OHz, Η-Γ ) ,3. 43 (1H, m, H-2，)，3. 85 (1H, t, J = 9. 4Hz, H-3，) ,4. 95 (1H, t, J = 9. 4Hz, H-4，)，3. 57(lH，m，H-5，)，3. 66 (1H, m, CH2_6，)，3. 57(lH，m，CH2_6，)，5. 18 (1H, s，H-l，，)，3. 90 (1H, m, H-2” ) ,3. 61 (1H, m, H-3”)，3. 35 (1H, t, J = 9. 2Hz, H-4”) ,3. 61 (1H, m, H-5”)， 1. 18 (3H, d, H-6") ,7. 05 (1H, d, J = 1. 7Hz，H-2”，)，6. 78 (1H，d, J = 8. 4Hz，H-3”，)， 6. 95 (1H, dd, J=L 7,8. 4Hz, H_6”，),7. 59 (1H, d, J = 16. OHz, H-7”，)，6· 27 (1Η, d, J = 16. 0Hz，H-8”，)。13C NMR(125MHz, CD3OD)數(shù)據(jù)為131. 8 (C_l)，116. 6 (C_2)，146. 4 (C_3)， 144. 9 (C-4), 115. O (C_5), 123. 5 (C_6)，72. 5 (C_7)，36. 8 (C_8)，104. 5 (C_l，)，76. 5 (C_2')， 81. 9(C-3 ' ) ,70. 7 (C-4，) , 76. 3(C_5，) ,62. 7(C_6，)，103. 2(C-1") ,72. 6(C_2”)， 72. 4(C-3") ,74. 1 (C_4”)，70. 9(C_5”)，18. 7(C_6”)，127. 9(C_1”，)，121. 6(0-2'")， 117. 4 (C-3，，，) , 147. 1 (C_4，” ) , 150. O (C_5，” ) , 116. 8 (C_6，” ) , 148. 3 (C_7，” )， 115. 6(C-8”，)，168. 6(C-9”，)。實(shí)施例2將!fepG2細(xì)胞接種于96孔板，待細(xì)胞長(zhǎng)至60%融合，換上含0. 2%牛血清白蛋白 (BSA)的不同濃度麥角留苷的培養(yǎng)液，溫育24h后，檢測(cè)培液中的葡萄糖殘量，按下式計(jì)算 24h各孔細(xì)胞的葡萄糖消耗率。葡萄糖消耗率=(實(shí)驗(yàn)孔Oh實(shí)測(cè)值-實(shí)驗(yàn)孔24h實(shí)測(cè)值)/ (對(duì)照孔Oh實(shí)測(cè)值-對(duì)照孔24h實(shí)測(cè)值)X 100%。表1麥角留苷對(duì)HepG2細(xì)胞糖代謝的促進(jìn)作用
權(quán)利要求
1.一種麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于以麥角留苷單一形式用于治療糖尿病的藥物制劑的制備中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于以麥角留苷與藥學(xué)上可接受的藥物載體組成的組合物形式用于治療糖尿病的藥物制劑的制備中。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述的糖尿病為I型和/ 或II型糖尿病。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述的麥角留苷來源于車前屬植物的提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述的麥角留苷是由車前子乙醇提取物的水混懸液經(jīng)過石油醚萃取到石油醚層接近無色，棄去石油醚層，水層用水飽和的正丁醇萃取，至正丁醇層接近無色，合并正丁醇層并減壓濃縮，再通過硅膠柱、ODS反相柱、半制備型高效液相色譜柱和kphadex LH-20凝膠柱層析得到。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述的車前子乙醇提取物為車前子經(jīng)過2 6倍體積的體積分?jǐn)?shù)為60 90%的乙醇水溶液回流提取2 6次得到的提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述的車前子乙醇提取物為車前子經(jīng)過3 5倍體積的體積分?jǐn)?shù)為70 80%的乙醇水溶液回流提取3 5次得到的提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述的硅膠柱層析用的洗脫液為乙酸乙酯-甲醇-水溶液體系。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述的ODS反相柱層析用的洗脫液為甲醇-水溶液體系。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的麥角留苷的應(yīng)用，其特征在于所述&kphadexLH-20凝膠柱層析用的洗脫液為甲醇。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種麥角甾苷的應(yīng)用，是指麥角甾苷以單一或與藥學(xué)上可接受的藥物載體組成的組合物形式在制備治療糖尿病藥物制劑中的應(yīng)用，為麥角甾苷開拓了一種新的藥用價(jià)值。
文檔編號(hào)A61K31/7028GK102283854SQ20111017251
公開日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月23日
發(fā)明者季光, 楊莉, 王崢濤, 祁萌 申請(qǐng)人:上海中醫(yī)藥大學(xué)