專利名稱：一種靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬生物醫(yī)藥技術領域，涉及一種靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物及其制備方法。
背景技術：
研究顯示，腫瘤組織不同于正常組織，其血管豐富、血管壁間隙較寬、結構完整性差，淋巴回流缺失，因此包載藥物的納米粒子可通過EPR效應在腫瘤組織富集。然而有研究發(fā)現(xiàn)，納米粒子進入循環(huán)系統(tǒng)后，由于主要被單核吞噬細胞系統(tǒng)(MPS)攝取，使藥物在肝、脾和肺中聚集，這不僅減低了藥物的治療指數(shù)，同時對這些器官造成了很大的毒副作用。因此，構建腫瘤靶向遞藥系統(tǒng)，降低抗腫瘤藥物對正常器官的損害，實現(xiàn)藥物的靶向傳釋越來越引起人們的關注。 整合素(Integrin)為細胞黏附分子家族的重要成員之一，是細胞外基質(zhì)(ECM)的主要受體家族。在惡性腫瘤和受到腫瘤細胞分泌的促血管生長因子刺激活化后的內(nèi)皮細胞中，整合素ανβ3表達顯著性上調(diào)，而在正常人體內(nèi)成熟的血管內(nèi)皮細胞和絕大多數(shù)正常組織器官中整合素ανβ3呈低水平表達。整合素ανβ3特異性識別并結合細胞外基質(zhì)配體分子中的RGD (精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)序列后發(fā)生構象改變而活化，介導下游信號轉(zhuǎn)導，發(fā)揮重要的調(diào)控作用。由于所有實體瘤或者腫瘤細胞成瘤過程必然伴隨著腫瘤新生血管生成，整合素α ν β 3作為腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的共有物質(zhì)，具有一定的特異性，因此整合素ανβ3是腫瘤治療潛在的分子靶點。所述的含RGD序列的多肽，如線性RGD肽、環(huán)狀RGD肽及RGD肽的多聚體，具有相對分子質(zhì)量小、穩(wěn)定、易于制備，且無免疫原性等優(yōu)點；目前，已有含RGD肽序列的環(huán)肽進入臨床試驗。當前，應用聚合物材料制備納米載體用于抗腫瘤藥物的遞送是藥物輸送系統(tǒng)研究的熱點。所述聚合物載體可緩慢藥物緩釋，且通過聚乙二醇(PEG)修飾之后具有“隱形”特點，可有效逃避體內(nèi)的調(diào)理作用，延長藥物的半衰期；在功能化的PEG末端易于修飾連接抗體等生物活性物質(zhì)，可實現(xiàn)抗腫瘤藥物的靶向傳釋。因此，主動靶向的長循環(huán)聚合物載體在構建腫瘤靶向遞藥系統(tǒng)方面有著潛在的優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物及其制備方法。本發(fā)明的靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物，由RGD肽修飾的兩親性嵌段共聚物和脂溶性的抗腫瘤藥物紫杉醇組成，通過下述方法制得合成末端羧基修飾的兩親性嵌段共聚物(H00C-PEG-PTMC)，并以RGD多肽與羧基通過酰胺鍵相連，得到具有整合素受體靶向的RGD肽修飾的兩親性嵌段共聚物，由所述的具有整合素受體靶向RGD肽修飾的兩親性共聚物和普通嵌段共聚物MePEG-PTMC混合組成靶向整合素受體的納米復合物，將所述的靶向整合素受體的納米復合物包載脂溶性的抗腫瘤藥物紫杉醇，制得抗腫瘤靶向的整合素受體的紫杉醇納米復合物。所述的抗腫瘤藥物紫杉醇位于所述的兩親性嵌段共聚物中。
所述的納米復合物系統(tǒng)可增加抗腫瘤藥物在靶部位的藥物濃度并可減少其在非靶部位的蓄積，可有效地提高藥物的治療指數(shù)。本發(fā)明中，所述的末端羧基修飾的兩親性嵌段共聚物(H00C-PEG-PTMC)為帶有活
性基團羧基的兩親性嵌段共聚物，其合成方法如下
權利要求
1.一種靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物，其特征在于，由RGD肽修飾的兩親性嵌段共聚物和紫杉醇組成，通過下述方法制得 合成末端羧基修飾的兩親性嵌段共聚物HOOC-PEG-PTMC，以RGD多肽與羧基通過酰胺鍵相連，得到具有整合素受體靶向的RGD肽修飾的兩親性嵌段共聚物RGD-X-PEG-PTMC，由該兩親性共聚物與嵌段共聚物MePEG-PTMC混合制成靶向整合素受體的納米復合物，將所述的納米復合物包載紫杉醇，制得抗腫瘤靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物； 所述的具有整合素受體靶向的RGD肽修飾的兩親性嵌段共聚物RGD-X-PEG-PTMC，其中，RGD-X為含有Arg-Gly-Asp序列的線性RGD肽、環(huán)狀RGD肽以及RGD肽的多聚體。
2.按權利要求I所述的靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物，其特征在于，所述的靶向整合素受體的納米復合物通過下述方法制備 將所述的兩親性嵌段共聚物RGD-X-PEG-PTMC與所述的嵌段共聚物MePEG-PTMC按比例混合，共溶于有機溶劑中，采用乳化/溶劑蒸發(fā)法制備靶向整合素受體的納米復合物； 其中，所述組分的質(zhì)量百分比為RGD-X-PEG-PTMC為5 % -25 %，MePEG-PTMC為95% -75%。
3.按權利要求I所述的靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物，其特征在于，所述的末端羧基修飾的兩親性嵌段共聚物HOOC-PEG-PTMC采用如下合成方法
4.按權利要求I所述的靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物，其特征在于，所述的RGD肽修飾的兩親性共聚物RGD-X-PEG-PTMC，通過下述方法制備
5.按權利要求I所述的靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物，其特征在于，所述的納米復合物粒徑為10_400nm。
6.一種制備權利要求I的靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物的方法，其特征在于，其包括步驟 (1)按下述的質(zhì)量比取各組分抗腫瘤藥物紫杉醇I% -10%, RGD-X-PEG-PTMC與MePEG-PTMC混合物90-99 %，其中，所述的混合物中RGD-X-PEG-PTMC為5 % -25 %、MePEG-PTMC 為 95% -75% ; (2)將上述各組分用有機溶劑溶解，超聲使載體材料和藥物充分溶解；將該溶液加到表面活性劑溶液中，冰浴探頭超聲，得初乳后，滴加到低濃度的表面活性劑溶液中固化后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑，制得包載抗腫瘤藥物紫杉醇的靶向整合素受體的納米復合物。
7.按權利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(I)中，抗腫瘤藥物紫杉醇質(zhì)量比為 1% -8%。
8.按權利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述有機溶劑選自二氯甲烷或三氯甲烷；表面活性劑溶液為5ml的O. 6%的膽酸鈉溶液。
9.按權利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，冰浴探頭超聲條件為超聲功率為200W，超聲時間為5s，超聲間隔時間為5s，超聲次數(shù)為15次。
10.按權利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述初乳滴加到25ml的O.3%的膽酸鈉溶液中；固化的條件為磁力攪拌100r/min,攪拌Imin ;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑的溫度為37°C。
全文摘要
本發(fā)明屬生物醫(yī)藥技術領域，涉及一種靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物及其制備方法和應用。本發(fā)明合成了末端羧基修飾的兩親性嵌段共聚物HOOC-PEG-PTMC，并以RGD多肽與羧基通過酰胺鍵相連，得到RGD肽修飾的兩親性嵌段共聚物；將脂溶性的抗腫瘤藥物紫杉醇引入到所述兩親性嵌段共聚物中，制得靶向整合素受體的紫杉醇納米復合物。實驗結果表明，所述的紫杉醇納米復合物可增加抗腫瘤藥物在靶部位的藥物濃度，并可減少其在非靶部位的蓄積，有效地提高藥物的治療指數(shù)。本發(fā)明經(jīng)抗腫瘤藥效學試驗，結果顯示，所述的紫杉醇納米復合物比Taxol對照組具有更優(yōu)異的抗腫瘤活性。
文檔編號A61K31/337GK102836436SQ20111017475
公開日2012年12月26日 申請日期2011年6月25日 優(yōu)先權日2011年6月25日
發(fā)明者方曉玲, 姜新義, 沙先誼 申請人:復旦大學