專利名稱：利用角質(zhì)酶提取蘋果多酚的方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是一種從蘋果皮中提取蘋果多酚的方法，涉及在水或含醇體系中，利用角質(zhì)酶從蘋果皮中提取蘋果多酚。
背景技術(shù)：
蘋果多酚具有很多重要的生理功能，是一類重要的天然生物活性物質(zhì)。由于蘋果多酚的抗衰老、抗癌變、抗氧化、清除自由基、防止維生素劣化、抗輻射以及阻礙紫外線吸收等功能，使其在醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域中都有應(yīng)用。前人研究表明，蘋果皮中的多酚含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于蘋果的其它部位。然而在生產(chǎn)蘋果汁、蘋果酒等的過程中，產(chǎn)生了蘋果皮渣。這些皮渣有的直接當(dāng)垃圾深埋外，對環(huán)境造成了污染；有的用于生產(chǎn)飼料，而蘋果皮中蛋白質(zhì)含量較低，其中的營養(yǎng)物質(zhì)得不到充分的利用。因?yàn)槿绾斡行У膹奶O果皮渣中提取蘋果多酚成為眾多研究者所關(guān)注的問題。目前多酚物質(zhì)的提取工藝主要有超臨界二氧化碳提取法、微波浸提法、超聲波提取法、有機(jī)溶劑浸提法等。其中有機(jī)溶劑浸提法是最傳統(tǒng)的多酚提取方法，溶劑主要是甲醇、乙醇和丙酮。而甲醇和丙酮是對人體有害的物質(zhì)。專利號為CN01120589.X的發(fā)明專利公開了有機(jī)溶劑提取蘋果皮渣中蘋果多酚的方法，該方法提取時間長、多酚得率低。專利號為CN1803790A的發(fā)明專利公開了超臨界二氧化碳法提取蘋果多酚；專利號為CN1810799A 的專利公開了微波浸提法提蘋果多酚。在這些方法中都沒有涉及到生物酶法。2008年有研究人員報導(dǎo)了利用果膠酶對蘋果渣中多酚類物質(zhì)的提取方法，但該方法的提取時間過長、 提取效率低。角質(zhì)酶(EC 3. 1. 1. 74)是一種多功能酶，具有酯酶和脂肪酶的功能，屬于絲氨酸酯酶的一種，可水解不溶性多聚體角質(zhì)的酯鍵和其他可溶性的酯，也可催化酯化和轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)。研究表明角質(zhì)酶在乙醇溶液中具有一定的穩(wěn)定性，可以在乙醇溶液中實(shí)現(xiàn)角質(zhì)酶的催化反應(yīng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所解決的技術(shù)問題提供一種提取蘋果多酚的方法。解決上述問題的技術(shù)方案是是在水或醇體系中加入角質(zhì)酶降解原料蘋果皮。所述醇溶液為乙醇，乙醇濃度為(Γ50%。所述原料蘋果皮經(jīng)過粉碎，料液比為1 l(Tl 75 (m/v)。所述酶基質(zhì)比(m/m)為1 50 1 1000，比酶活為200U/mg。本發(fā)明還提供了一種上述方法的應(yīng)用，是用上述方法輔助蘋果多酚的生產(chǎn)，提高多酚的溶出量。本發(fā)明擴(kuò)展了角質(zhì)酶在食品加工中的應(yīng)用領(lǐng)域，具有如下突出優(yōu)點(diǎn)
1.蘋果皮渣資源豐富，利用率較低，提高資源利用率和經(jīng)濟(jì)價值，充分?jǐn)U展其在食品工業(yè)中的應(yīng)用。
2.角質(zhì)酶是一種多功能性的酶，具有酯酶和脂肪酶的功能。在食品工業(yè)中，可應(yīng)用在乳制品、風(fēng)味化合物的生產(chǎn)中。本發(fā)明利用角質(zhì)酶水解角質(zhì)的作用，提取蘋果多酚。3.將角質(zhì)酶應(yīng)用于從蘋果皮中提取蘋果多酚，避免或減少了有機(jī)溶劑的使用。4.蘋果多酚是一類重要的天然生物活性物質(zhì)。具有抗衰老、抗癌變、抗氧化、清除自由基、防止維生素劣化、抗輻射以及阻礙紫外線吸收等功能。在醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域中都有應(yīng)用，具有廣闊的市場前景。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
粉碎干燥的蘋果皮，在水溶液中37°C下，按照料液比為1:75 (g/ml)、酶基質(zhì)比(m/m) 為1:100、反應(yīng)pH為8. 0、反應(yīng)時間為20min。多酚的提取率為60. 23%。實(shí)施例2
粉碎干燥的蘋果皮，在水溶液中60°C下，按照料液比為1:75 (g/ml)、酶基質(zhì)比(m/m) 為1:100、反應(yīng)pH為8.0、反應(yīng)時間為20min。多酚的提取率為73. 35%。實(shí)施例3
粉碎干燥的蘋果皮，在20%乙醇體系中50°C下，按照料液比為1:50 (g/ml)、酶基質(zhì)比 (m/m)為1:100、反應(yīng)？!1為8.0、反應(yīng)時間為151^11。多酚的提取率為80. 70%。實(shí)施例4
粉碎干燥的蘋果皮，在30%乙醇體系中50°C下，按照料液比為1:50 (g/ml)、酶基質(zhì)比 (m/m)為1:100、反應(yīng)？!1為8.0、反應(yīng)時間為151^11。多酚的提取率為86. 38%。實(shí)施例5
粉碎干燥的蘋果皮，在30%乙醇體系中37°C下，按照料液比為1:50 (g/ml)、酶基質(zhì)比 (m/m)為1:100、反應(yīng)？!1為8.0、反應(yīng)時間為151^11。多酚的提取率為83. 56%。實(shí)施例6
粉碎干燥的蘋果皮，在30%乙醇體系中37°C下，按照料液比為1:10 (g/ml)、酶基質(zhì)比 (m/m)為1 100、反應(yīng)pH為8.0、反應(yīng)時間為15min。多酚的提取率為75. 81%。實(shí)施例7
粉碎干燥的蘋果皮，在50%乙醇體系中37°C下，按照料液比為1:10 (g/ml)、酶基質(zhì)比 (111/111)為1:100、反應(yīng)？!1為8.0、反應(yīng)時間為151^11。多酚的提取率為81. 79%。
權(quán)利要求
1.利用角質(zhì)酶提取蘋果多酚的方法，是在水或醇體系中加入角質(zhì)酶降解原料蘋果皮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述醇為乙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是乙醇濃度為(Γ50%。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是料液比(m/v)為l:l(Tl:75。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是酶基質(zhì)比(m/m)為1 5(Tl 1000，比酶活為 200U/mgo
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是原料蘋果皮經(jīng)過粉碎。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是按照料液比(m/V)l:l(Tl:75在水或乙醇溶液中加入粉碎后的蘋果皮，按照酶基質(zhì)比(m/m) l:5(Tl :1000添加比酶活為200U/mg的角質(zhì)酶進(jìn)行酶解。
8.—種權(quán)利要求1所述方法在輔助蘋果多酚生產(chǎn)中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用角質(zhì)酶提取蘋果多酚的方法。本發(fā)明利用角質(zhì)酶在水溶液和乙醇溶液中都能催化角質(zhì)水解的特性，將角質(zhì)酶用于蘋果多酚的生產(chǎn)。采用角質(zhì)酶可以在較低的溫度下助提蘋果多酚，可不用有機(jī)溶劑或減少有機(jī)溶劑的消耗，使蘋果多酚的生產(chǎn)更加綠色環(huán)保、節(jié)能。
文檔編號A61K131/00GK102233017SQ20111017813
公開日2011年11月9日 申請日期2011年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月29日
發(fā)明者王淼, 王莉 申請人:江南大學(xué)