專利名稱：負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種組織工程和醫(yī)學用品領域，尤其涉及一種負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片及其制備方法和應用。
背景技術：
女性盆底器官脫垂是常見的婦科疾病，其產生的原因包括產傷，神經肌肉的損傷， 環(huán)境因素及遺傳因素等。傳統(tǒng)的外科治療方案包括通過手術進行陰道前后壁修補或是子宮切除術。然而上述兩種治療方案只能修復脫垂的女性盆底器官，而無法提高組織本身的強度，無法達到盆底解剖結構重建，從而徹底治愈女性盆底器官脫垂等疾病的目的，手術后復發(fā)率高。為了克服傳統(tǒng)的手術方案，人們采用向人體中植入新型材料，從而幫助提高組織本身的強度，達到盆底解剖結構重建目的。而理想的盆底重建材料要求具有良好的生物相容性、三維立體結構有利于細胞遷移再生、以及具有較好的機械強度和可塑性，在盆底組織再生過程中提供良好的支架作用，再生完成后能自行降解，降解率要與組織再生率相適應。近年來，以聚丙烯網片為代表的合成網片材料廣泛應用于盆底重建手術中。如美國伊西康公司的中國專利CN101027012B就采用聚丙烯網片為材料制備一種最小侵入的醫(yī)學植入物和插入裝置，用于治療壓力性尿失禁等疾病。這些合成網片材料孔隙率較高，組織融合較佳，具有良好的生物力學性能，從而有效提高組織本身的強度。從而大大降低手術后的復發(fā)率。雖然采用合成網片材料可以有效治療盆底器官脫落等疾病，但合成網片植入后， 卻會引發(fā)諸如侵蝕暴露、感染、疼痛、性交不適等一系列與網片相關的并發(fā)癥，而且，目前盆底重建網片發(fā)生侵蝕的原因尚不明確，可能的原因包括網片變性、攣縮、膨脹、網片的面積較大；術后作為盆底組織生長的構架，在運動不當或負重時，網片與周圍組織產生相對運動，致使周圍脆弱、未完全修復的組織斷裂再修復，反復的慢性炎癥導致置入的網片發(fā)生侵蝕等。為了避免上述可能引起網片相關并發(fā)癥，人們開始對于網片進行修飾改進。其包括對網片進行膠原覆蓋、脂肪酸涂層、聚偏二氟乙烯涂層，從而提高網片與植入后的人體周邊組織的生物相容性。而在修飾中，效果最好的數殼聚糖修飾。殼聚糖是生物合成的天然多糖，是目前已知的天然多糖中唯一的堿性多糖。其結構與細胞外基質成分糖胺聚糖(GAGs)相似，由于殼聚糖含有較多的氨基，使其具有聚陽離子的特性，可與細胞表面帶負電荷的基團相互作用，與細胞膜發(fā)生非特異性吸附，從而有利于其與細胞外黏附分子及IV型膠原蛋白等結合，有助于相關細胞的黏附和組織的生長。而且殼聚糖還可有效促進血管內皮細胞的生長，有利于細胞的增殖和組織的修復。在同濟大學校報，第31卷第6期的醫(yī)學版上了報道了殼聚糖涂覆的聚丙烯網片在婦科中的應用，植入涂覆殼聚糖的聚丙烯網片可有效增加網片與人體組織的生物相容性。然而，需要指出的是不同的涂布方式及制作工藝影響著聚丙烯網片涂布殼聚糖的抑菌效果，也意味著適用于不同的疾病治療。對于涂覆殼聚糖的聚丙烯網片在治療不同疾病中的應用的研究，是目前醫(yī)學人體植入材料研究的重點。而目前，殼聚糖聚丙烯網片在治療女性盆底器官脫垂的醫(yī)用材料的應用尚未有合適方案。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供了負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片及其制備方法和應用，其克服了現(xiàn)有的治療女性盆底器官脫垂的醫(yī)用材料的不足，在聚丙烯網片的表面涂覆一層殼聚糖掛膜的同時負載干細胞，這樣在提高的材料機械強度和可塑性同時，增加了材料與植入后人體周邊組織的生物相容性和組織相容性，從而抑制現(xiàn)有人體植入材料治療女性盆底器官脫垂后出現(xiàn)的并發(fā)癥。本發(fā)明第一個目的是提供一種可負載干細胞的采用殼聚糖掛膜聚丙烯網片的制備方法，通過以下技術方案實現(xiàn)其目的
一種負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片的制備方法，其中，步驟如下 步驟一，將潔凈的聚丙烯網片浸泡于濃度為廣5%的殼聚糖鑄膜液中，直至在所述聚丙烯網片上涂覆一層殼聚糖膜，制得殼聚糖掛膜聚丙烯網片；
步驟二，在3(T40°C下，將制得的殼聚糖掛膜聚丙烯網片浸泡于懸液細胞密度為 1 X IO5^l X IO7個/毫升的干細胞懸液中3飛個小時，從而得到負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片。上述的方法，其中，在所述步驟二中，采用干細胞懸液滴加在所述殼聚糖掛膜聚丙烯網片上，直至干細胞懸液剛好沒過所述殼聚糖掛膜聚丙烯網片，并在3(T40°C下，浸泡 3 5個小時。上述的方法，其中，在所述步驟二中，所述的干細胞為兔脂肪干細胞，并優(yōu)選培養(yǎng)至第四代的兔脂肪干細胞。上述的方法，其中，在所述步驟一中，在所述步驟二中殼聚糖掛膜聚丙烯網片制備過程中，將潔凈的聚丙烯網片浸泡于所述的鑄膜液中壙7min后取出，晾干后，再次浸泡入所述鑄膜液中Γ7π η，再次晾干；并重復所述聚丙烯網片浸泡于所述鑄膜液，與晾干過程， 直至在所述聚丙烯網片上涂覆一層殼聚糖膜，制得殼聚糖掛膜聚丙烯網片。上述的方法，其中，還包括所述殼聚糖鑄膜液的制備過程，其包括以下步驟將一定量的殼聚糖溶解在乙酸溶液中；之后向溶液中加入占總固體原料質量的4飛％戊二醛和占總固體原料質量的45飛0%正庚烷；并在45飛0°C，攪拌條件下交聯(lián)反應0. 5 1. 5小時，靜置后，制得殼聚糖質量含量為廣5%的殼聚糖的鑄膜液。本發(fā)明第二個目的是提供一種上述方法制備的負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片，其中，包括作為支架的聚丙烯網片，所述聚丙烯網片表面涂覆有一層殼聚糖掛膜；在殼聚糖掛膜的聚丙烯網片上負載有干細胞。所述干細胞優(yōu)選為兔脂肪干細胞。上述的負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片，其中，在所述殼聚糖掛膜的聚丙烯網片上的所述兔脂肪干細胞的接種密度為1 XIO3 1 X IO5個/立方厘米。本發(fā)明第三個目的是提供一種上述的負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片的應用，所述負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片用于治療女性盆底器官脫垂治療的植入醫(yī)用材料。
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采用本發(fā)明一種殼聚糖掛膜聚丙烯網片的制備方法的優(yōu)點在于
1.本發(fā)明負載兔脂肪干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片，一方面利用聚丙烯網片孔隙率高、周圍組織很好地契入生長的特點，可以增強修補部位的抗拉伸性能，另一方面利用殼聚糖的良好生物相容性以及兔脂肪干細胞成體干細胞的作用，以期有效的降低植入部位聚丙烯網片侵蝕、暴露及組織粘連等并發(fā)癥的發(fā)生，在女性盆底重建外科中，有利于提高盆底重建手術聚丙烯材料的組織相容性，減少盆底重建術后并發(fā)癥，具有很高的醫(yī)用價值。2.本發(fā)明負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片的制備方法簡單易行，不涉及任何有毒有害試劑，對醫(yī)用補片的后續(xù)使用無不利影響，而且原料殼聚糖，以及兔脂肪干細胞來源廣泛，易于取得，大大減小了醫(yī)用成本，實用性強。


圖1為未經處理的聚丙烯網片掃描電鏡(X500倍)圖片； 圖2為2. 5%殼聚糖掛膜聚丙烯網片掃描電鏡(X 300)圖片；
圖3為rADSCs與殼聚糖掛膜聚丙烯網片復合培養(yǎng)，細胞在殼聚糖膜上粘附生長情況的倒置顯微鏡(X40)圖片。
具體實施例方式本發(fā)明提供了一種負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片其包括作為支架的聚丙烯網片，所述聚丙烯網片表面涂覆有一層殼聚糖掛膜；且在殼聚糖掛膜的聚丙烯網片上負載有干細胞。其中，所述干細胞優(yōu)選為兔脂肪干細胞，進一步優(yōu)選為第四代兔脂肪干細胞， 且干細胞在聚丙烯網片上的接種密度為1 X IO3 1 X IO5個/立方厘米。本發(fā)明公開了上述負載兔脂肪干細胞的聚丙烯網片的制備方法，其過程包括，
步驟一，將潔凈的聚丙烯網片浸泡于濃度為廣5%的殼聚糖鑄膜液中，直至在所述聚丙烯網片上涂覆一層殼聚糖膜，制得殼聚糖掛膜聚丙烯網片；
步驟二，將密度為1 X IO5^l X IO7個/毫升的干細胞懸液滴加在殼聚糖掛膜聚丙烯網片上，直至干細胞懸液剛好沒過所述殼聚糖掛膜聚丙烯網片，并在3(T40°C下，使殼聚糖掛膜聚丙烯網片浸沒與干細胞懸液中3飛個小時從而得到負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片。經體外實驗表明rADSCs與殼聚糖修飾聚丙烯網片共培養(yǎng)24h后，如圖3所示，在顯微鏡下觀察，見細胞在殼聚糖鑄膜液修飾的聚丙烯網片材料上生長。掃描電鏡下可見細胞在殼聚糖掛膜支架上生長良好，呈三角形或是長梭形，分泌細胞基質。其中，前序步驟包括，
(1).殼聚糖掛膜聚丙烯網片的制備，其具體過程包括
a.清潔聚丙烯網，將普通的聚丙烯網片置于無水乙醇中浸泡，并采用去離子水沖洗多次后，置60°C的烘箱中烘干，從而得到潔凈的聚丙烯網片。b.殼聚糖鑄膜液制備，稱取一定質量的殼聚糖，并溶解在廣3%乙酸溶液中；之后向溶液中加入戊二醛和正庚烷；并在45飛0°C條件下交聯(lián)反應0. 5^1. 5小時，靜置一段時間后，制得殼聚糖質量含量為廣5%的殼聚糖的鑄膜液；
c.殼聚糖掛膜聚丙烯網片制備，將清潔的聚丙烯網片浸泡于殼聚糖鑄膜液中Γ7π η后取出，晾干后，再次浸泡入所述鑄膜液中Γ7π η，再次晾干；重復上述聚丙烯網片浸泡于所述鑄膜液，與晾干過程，直至在所述聚丙烯網片上涂覆一層殼聚糖膜，從而制得殼聚糖掛膜聚丙烯網片。制得的殼聚糖掛膜聚丙烯網片先用5 10%的NaOH清洗后，再用去離子水反反復清洗。這樣便得到了潔凈的殼聚糖掛膜聚丙烯網片。經過上述步驟制得殼聚糖掛膜聚丙烯網片，如圖2顯微鏡照片觀察顯示，經殼聚糖修飾的網孔呈半透明薄膜狀，且膜上有許多孔徑大小不一的間隙。未經處理的圖1所示的普通聚丙烯網片，表面光潔，與之相比圖2中的殼聚糖掛膜聚丙烯網片可見許多細小的空隙和裂縫，這說明殼聚糖膜很好的涂覆在聚丙烯網上，而殼聚糖可有效促進血管內皮細胞的生長，有利于細胞的增殖和組織的修復，而且具有良好的機械性能和可塑性。(2).兔脂肪干細胞(rADSCs)分離、培養(yǎng)及傳代
a.按30mg/kg的麻醉劑量沿耳緣靜脈注入3%異戊巴比妥鈉麻醉。取兔腹股溝部皮下脂肪組織2. (Γ3. Og,并在無菌條件下將脂肪組織放入含IOmL體積分數為5%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)液的50mL離心管中；
b.之后用鏈霉素溶液及PBS反復間隔沖洗兔脂肪組織。并將脂肪組織置于直徑IOOmm 培養(yǎng)皿中，充分粉碎。將粉碎后的脂肪組織置于50mL離心管中，加入0. 1%1型膠原酶溶液 20mL，在37°C恒溫搖床消化60min后，2000 r/min離心10 min,除去上清液并獲得高密度的細胞沉淀物；在細胞沉淀物中加入培養(yǎng)液(LG-DMEM，10%FBS，100mg/mL鏈霉素，100 U/mL青霉素)使細胞重懸，此即為脂肪干細胞。c.按IO6個/毫升的細胞密度接種于培養(yǎng)皿內，加入培養(yǎng)液至8mL。將接種好細胞的培養(yǎng)皿置于37°C、體積分數為5%C02中，并在100%飽和濕度的條件下，培養(yǎng)4 后首次換液(此時，倒置相差顯微鏡下觀察見大量細胞貼壁和漂浮的血細胞)。用PBS反復輕輕沖洗去除漂浮的細胞，并加入DMEM和體積分數為10%胎牛血清培養(yǎng)液。隔天換液，細胞融合至80%傳代。并且，傳代前用少量PBS洗滌1次，加入0. 25%胰蛋白酶和0. 02%EDTA 2mL,此時觀察可見大部分細胞胞質回縮、形態(tài)變圓，立即加入3mL含血清的DMEM培養(yǎng)液終止消化， 收集細胞懸液、計數，以2X IO4個/立方厘米的細胞密度接種于新的培養(yǎng)皿內。當細胞長至70% 80%融合時，再次傳代。本發(fā)明優(yōu)選用培養(yǎng)傳代至第4代的rADSCs細胞負載于殼聚糖掛膜聚丙烯網片。下面我們通過具體實施例進一步詳細闡明本發(fā)明，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于下述各個實施例。實施例1
稱取1. 25g殼聚糖溶解在體積分數為的乙酸溶液中，再加入總固體重量5%的戊二醛和總固體重量50%的正庚烷，在磁力攪拌轉速為230r/min、溫度為45°C的條件下交聯(lián)反應lh，靜止脫泡一晚，得到殼聚糖質量分數分別為2. 5%的鑄膜液。將聚丙烯網片 (Gynmesh ，美國強生醫(yī)療器械有限公司生產)置于無水乙醇中浸泡Mh，以去除網片表面的雜質。取出網片，用去離子水多次沖洗后置60°C的烘箱中烘干。鑄膜液倒入培養(yǎng)皿中，將網片置于其中浸泡5min，取出掛起自然晾干，數小時后重復浸泡、晾干的過程，直至網片上均勻涂覆了殼聚糖膜。此時得到殼聚糖膜中含有醋酸，用質量分數為10%的NaOH稀溶液處理 30min，處理后的網片用去離子水多次沖洗直至洗液為中性為止。
rADSCs與殼聚糖修飾聚丙烯網片共培養(yǎng)取未掛膜的聚丙烯網片和殼聚糖掛膜聚丙烯網片各3張，制作成IOmmX IOmm大小。先用75%酒精浸泡消毒45min，再用PBS清洗 3飛次，換培養(yǎng)液浸泡，置37°C培養(yǎng)箱孵育M小時，確定有無細菌生長。收集預先準備好的第4代兔脂肪干細胞，調整懸液細胞密度為1 X IO5個/mL。用分子槍吸取100 μ L細胞懸液均勻滴加于每片聚丙烯網片材料上，置37°C培養(yǎng)箱中4小時后加培養(yǎng)液，以剛沒過材料為且。經檢測，本實施例制備的聚丙烯網片兔脂肪干細胞的接種密度為1. 2X103個/立方厘米。體外實驗表明rADSCs與殼聚糖修飾聚丙烯網片共培養(yǎng)24h后，在顯微鏡下觀察， 見細胞在殼聚糖鑄膜液修飾的聚丙烯網片材料上生長。掃描電鏡下可見細胞在殼聚糖掛膜支架上生長良好，呈三角形或是長梭形，分泌細胞基質。而兔ADSCs與未掛膜的聚丙烯網片共培養(yǎng)24h后，表面未見細胞生長。實施例2
稱取1. 25g殼聚糖溶解在體積分數為的乙酸溶液中，再加入總固體重量5%的戊二醛和總固體重量50%的正庚烷，在磁力攪拌轉速為230r/min、溫度為45°C的條件下交聯(lián)反應lh，靜止脫泡一晚，得到殼聚糖質量分數分別為2. 5%的鑄膜液。將聚丙烯網片 (Gynmesh ，美國強生醫(yī)療器械有限公司生產)置于無水乙醇中浸泡Mh，以去除網片表面的雜質。取出網片，用去離子水多次沖洗后置60°C的烘箱中烘干。鑄膜液倒入培養(yǎng)皿中，將網片置于其中浸泡5min，取出掛起自然晾干，數小時后重復浸泡、晾干的過程，直至網片上均勻涂覆了殼聚糖膜。此時得到殼聚糖膜中含有醋酸，用質量分數為10%的NaOH稀溶液處理 30min，處理后的網片用去離子水多次沖洗直至洗液為中性為止。rADSCs與殼聚糖修飾聚丙烯網片共培養(yǎng)取未掛膜的聚丙烯網片和殼聚糖掛膜聚丙烯網片各3張，制作成IOmmX IOmm大小。先用75%酒精浸泡消毒45min，再用PBS清洗 3飛次，換培養(yǎng)液浸泡，置37°C培養(yǎng)箱孵育M小時，確定有無細菌生長。收集預先準備好的第4代兔脂肪干細胞，調整懸液細胞密度為1 X IO6個/mL。用分子槍吸取100 μ L細胞懸液均勻滴加于每片聚丙烯網片材料上，置37°C培養(yǎng)箱中4小時后加培養(yǎng)液，以剛沒過材料為且。經檢測，本實施例制備的聚丙烯網片兔脂肪干細胞的接種密度為1. IX IO4個/立方厘米。體外實驗表明rADSCs與殼聚糖修飾聚丙烯網片共培養(yǎng)24h后，在顯微鏡下觀察， 見細胞在殼聚糖鑄膜液修飾的聚丙烯網片材料上生長。掃描電鏡下可見細胞在殼聚糖掛膜支架上生長良好，呈三角形或是長梭形，分泌細胞基質。而兔ADSCs與未掛膜的聚丙烯網片共培養(yǎng)24h后，表面未見細胞生長。實施例3
稱取1. 25g殼聚糖溶解在體積分數為H的乙酸溶液中，再加入總固體重量5%的戊二醛和總固體重量50%的正庚烷，在磁力攪拌轉速為230r/min、溫度為45°C的條件下交聯(lián)反應lh，靜止脫泡一晚，得到殼聚糖質量分數分別為2. 5%的鑄膜液。將聚丙烯網片 (Gynmesh ，美國強生醫(yī)療器械有限公司生產)置于無水乙醇中浸泡Mh，以去除網片表面的雜質。取出網片，用去離子水多次沖洗后置60°C的烘箱中烘干。鑄膜液倒入培養(yǎng)皿中，將網片置于其中浸泡5min，取出掛起自然晾干，數小時后重復浸泡、晾干的過程，直至網片上均勻涂覆了殼聚糖膜。此時得到殼聚糖膜中含有醋酸，用質量分數為10%的NaOH稀溶液處理 30min，處理后的網片用去離子水多次沖洗直至洗液為中性為止。rADSCs與殼聚糖修飾聚丙烯網片共培養(yǎng)取未掛膜的聚丙烯網片和殼聚糖掛膜聚丙烯網片各3張，制作成IOmmX IOmm大小。先用75%酒精浸泡消毒45min，再用PBS清洗 3飛次，換培養(yǎng)液浸泡，置37°C培養(yǎng)箱孵育M小時，確定有無細菌生長。收集預先準備好的第4代兔脂肪干細胞，調整懸液細胞密度為1 X IO7個/mL。用分子槍吸取100 μ L細胞懸液均勻滴加于每片聚丙烯網片材料上，置37°C培養(yǎng)箱中4小時后加培養(yǎng)液，以剛沒過材料為且。經檢測，本實施例制備的聚丙烯網片兔脂肪干細胞的接種密度為1 X IO5個/立方厘米。綜上所述，本發(fā)明殼聚糖掛膜聚丙烯網片的制備方法制得的殼聚糖掛膜聚丙烯網片一方面利用聚丙烯補片孔隙率高、周圍組織很好地契入生長的特點，可以增強修補部位的抗拉伸性能；另一方面利用殼聚糖的良好生物相容性，可以有效的降低植入部位聚丙烯網片侵蝕、暴露及組織粘連等并發(fā)癥的發(fā)生。其特別適用于臨床女性盆底重建外科，提高盆底重建手術聚丙烯材料的組織相容性，減少盆底重建術后并發(fā)癥。而且本發(fā)明的制備方法過程簡單易行，不涉及任何有毒有害試劑，對醫(yī)用補片的后續(xù)使用無不利影響。而制得的殼聚糖掛膜聚丙烯網片，特別適用于臨床女性盆底重建外科，提高盆底重建手術聚丙烯材料的組織相容性，減少盆底重建術后并發(fā)癥。以上對本發(fā)明的具體實施例進行了詳細描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限制于以上描述的具體實施例。對于本領域技術人員而言，任何對本發(fā)明進行的等同修改和替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應涵蓋在本發(fā)明的范圍內。
權利要求
1.一種負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片，其特征在于，包括作為支架的聚丙烯網片，所述聚丙烯網片表面涂覆有一層殼聚糖掛膜；且在殼聚糖掛膜的聚丙烯網片上負載有干細胞。
2.根據權利要求1所述的負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片，其特征在于，所述干細胞為兔脂肪干細胞。
3.根據權利要求1所述的負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片，其特征在于，在所述殼聚糖掛膜的聚丙烯網片上的所述兔脂肪干細胞的接種密度為IX IO3 IX IO5個/立方厘米。
4.一種權利要求1所述的負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片的制備方法，其特征在于，步驟如下步驟一，將潔凈的聚丙烯網片浸泡于濃度為廣5%的殼聚糖鑄膜液中，直至在所述聚丙烯網片上涂覆一層殼聚糖膜，制得殼聚糖掛膜聚丙烯網片；步驟二，在3(T40°C下，將制得的殼聚糖掛膜聚丙烯網片浸泡于懸液細胞密度為 1 X IO5^l X IO7個/毫升的干細胞懸液中3飛個小時，從而得到負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，在所述步驟二中，采用干細胞懸液滴加在所述殼聚糖掛膜聚丙烯網片上，直至干細胞懸液剛好沒過所述殼聚糖掛膜聚丙烯網片，并在3(T40°C下，浸泡3飛個小時。
6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，在所述步驟二中，所述的干細胞為兔脂肪干細胞。
7.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，在所述步驟一中，殼聚糖掛膜聚丙烯網片制備過程中，將潔凈的聚丙烯網片浸泡于所述的鑄膜液中Γ7π η后取出，晾干后，再次浸泡入所述鑄膜液中Γ7π η，再次晾干；并重復所述聚丙烯網片浸泡于所述鑄膜液，與晾干過程，直至在所述聚丙烯網片上涂覆一層殼聚糖膜，制得殼聚糖掛膜聚丙烯網片。
8.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，還包括所述殼聚糖鑄膜液的制備過程，其包括以下步驟將一定量的殼聚糖溶解在乙酸溶液中；之后向溶液中加入占總固體原料質量的4 6%戊二醛和占總固體原料質量的45飛0%正庚烷；并在45飛0°C，攪拌條件下交聯(lián)反應0. 5^1. 5小時，靜置后，制得殼聚糖質量含量為廣5%的殼聚糖的鑄膜液。
9.一種權利要求1所述的負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片的應用，其特征在于， 所述負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片用于治療女性盆底器官脫垂治療的植入醫(yī)用材料。
全文摘要
本發(fā)明提供了負載干細胞的殼聚糖掛膜聚丙烯網片及其制備方法和應用，其克服了現(xiàn)有的治療女性盆底器官脫垂的醫(yī)用材料的不足，在聚丙烯網片的表面涂覆一層殼聚糖掛膜的同時負載干細胞，這樣在提高的材料機械強度和可塑性同時，增加了材料與植入后人體周邊組織的生物相容性和組織相容性，從而抑制現(xiàn)有人體植入材料治療女性盆底器官脫垂后出現(xiàn)的并發(fā)癥。
文檔編號A61L31/10GK102302807SQ20111027097
公開日2012年1月4日 申請日期2011年9月14日 優(yōu)先權日2011年9月14日
發(fā)明者吳氫凱, 孫俊芬, 張 榮, 滕銀成, 程慧 申請人:上海市第六人民醫(yī)院