專利名稱：一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的重組人白介素-Ii水溶液及其制備方法；尤其是一種穩(wěn)定的不含防腐劑和血液提取成分的重組人白介素-11水溶液及其制備方法。
背景技術(shù)：
人白介素-11 (IL-Il)是一種存在于人體骨髓、神經(jīng)、呼吸道及消化道上皮等多種組織，具有廣泛生理功能的細(xì)胞因子。IL-Il是一種強(qiáng)疏水性蛋白，無(wú)分子內(nèi)和分子間二硫鍵的結(jié)構(gòu)，也沒(méi)有潛在的糖基化位點(diǎn)，同時(shí)其Pl值高達(dá)11. 7。IL-Il對(duì)造血細(xì)胞尤其是巨核細(xì)胞具有重要的調(diào)控作用，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及小腸腺窩絨毛干細(xì)胞等非造血細(xì)胞亦具有明顯的生物活性，在骨髓造血調(diào)控中發(fā)揮重要作用。IL-Il用于治療腫瘤放化療引起的血小板減少癥，替代血小板輸注。對(duì)腫瘤放化療及骨髓移植治療具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。除用于治療血小板減少癥外，重組人白介素-11 (rhIL-11)還具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。如調(diào)節(jié)腸上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，促進(jìn)胃腸道黏膜損傷愈合，刺激破骨細(xì)胞的發(fā)育和神經(jīng)祖細(xì)胞的增殖，對(duì)活動(dòng)性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有緩解作用等。目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)銷售的rhIL-11尚無(wú)水針劑型被批準(zhǔn)，目前只有粉針劑。粉針劑成本高，使用時(shí)需要加入注射用水，給臨床使用帶來(lái)不便。尤其重要的是，粉針劑型存在著外觀不佳、不溶性微粒偏高、可見(jiàn)異物超標(biāo)等問(wèn)題，對(duì)病人的安全性存在著一定的隱患，因此研制開(kāi)發(fā)rhIL-11水針劑型具有重要的意義。以前的研究結(jié)果表明，rhIL-11溶液在存放過(guò)程中穩(wěn)定性較差，不溶性微粒逐漸增高，很快超過(guò)允許限度，溶液出現(xiàn)絮狀凝集物或細(xì)小蛋白顆粒。我們針對(duì)這個(gè)課題，展開(kāi)了一系列的研究，對(duì)處方進(jìn)行了優(yōu)化，最終研制成功了穩(wěn)定的rhIL-11的溶液配方，該配方可開(kāi)發(fā)成直接注射給藥的水針劑。水針劑型取代凍干劑型是生物制品的發(fā)展趨勢(shì)，許多醫(yī)藥公司都積極將細(xì)胞因子類蛋白質(zhì)藥物制成水針劑型，如干擾素、白介素2、G-CSF, EPO等。與凍干劑型相比，水針劑型具有明顯優(yōu)勢(shì)，水針無(wú)需溶解，直接注射，給藥方便，制造成本明顯降低，易于被醫(yī)生和患者接受，質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)較小等。但是，截止目前，尚無(wú)rhIL-11注射液劑型被批準(zhǔn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于創(chuàng)造性地發(fā)明一種穩(wěn)定的rhIL-11水溶液及其制備方法用于改善rhIL-11粉針重建溶液外觀不佳、不溶性微粒偏高、可見(jiàn)異物超標(biāo)等問(wèn)題，而且 rhIL-11水溶液產(chǎn)品質(zhì)量比粉針劑型有顯著提高。本發(fā)明中適宜的穩(wěn)定劑和緩沖體系是 rhIL-11在溶液狀態(tài)下保持穩(wěn)定的關(guān)鍵要素。為了達(dá)成上述目的，本發(fā)明的解決方案是
一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于包括如下組分 1)濃度為0. 25-20mg/ml的重組人白介素-11 ；2)維持pH在4.5-8. 5范圍內(nèi)的濃度為lmM-200mM的緩沖液體系；
3)穩(wěn)定重組人白介素11的穩(wěn)定劑；
4)等滲劑；
5)注射用水。所述的水溶液中各組分，每0. 4ml中按如下配方配制濃度為0. 25-20mg/ml的重組人白介素-11 :2mg;2)維持PH在4. 5-8. 5范圍內(nèi)的濃度為lmM-200mM的緩沖液體系 0. 3-1. Img ；3)穩(wěn)定重組人白介素-11的穩(wěn)定劑按總體積的0. 001%_1%加入；4)等滲劑按總體積的0. 1-5%加入；5)注射用水加至0. 4ml。所述的水溶液中各組分，每0. 4ml中優(yōu)選按如下配方配制濃度為0. 25-20mg/ml 的重組人白介素-11 :2mg ；2)維持PH在4. 5-8. 5范圍內(nèi)的濃度為lmM-200mM的緩沖液體系0. 4-0. 6mg ；3)穩(wěn)定重組人白介素-11的穩(wěn)定劑按總體積的0. 01%_0· 05%加入；4)等滲劑按總體積的0. 1-5%加入；5)注射用水加至0. 4ml。所述的緩沖體系采用磷酸鹽緩沖液，醋酸鹽緩沖液，枸櫞酸鹽緩沖液，丁二酸鹽緩沖液，Tris緩沖液中的一種；其中磷酸鹽緩沖液，其組成為磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉或者是磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀；所述的醋酸鹽緩沖液，其組成為醋酸和醋酸鈉或者是醋酸和醋酸鉀；所述的枸櫞酸緩沖液，其組成為枸櫞酸和磷酸氫二鈉或者是枸櫞酸和磷酸氫二鉀； 丁二酸緩沖液，其組成為丁二酸和丁二酸鈉；Tris緩沖液，其組成為T(mén)ris堿和鹽酸。所述的緩沖體系優(yōu)選采用磷酸鹽緩沖液。所述的穩(wěn)定劑采用聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇單月桂酸酯中的一種。(購(gòu)買廠商德國(guó)默克)
所述的穩(wěn)定劑優(yōu)選采用聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。所述的等滲劑采用氨基酸、氯化鈉溶液中的一種；且所述的氨基酸加入量為總體積的0. 5-5% ；氯化鈉溶液的加入量為總體積的0. 1-2. 0%。所述的氨基酸優(yōu)選采用甘氨酸，且其加入量為總體積的2. 3%。一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液的制備方法，包括如下步驟稱取濃度為 lmM-200mM的緩沖液體系；0. 3-1. Img ；穩(wěn)定劑按總體積的0. 01%_0· 05%量??；等滲劑按總體積的0. 1-5%量取；依次用無(wú)菌無(wú)熱源注射用水溶解、配制，除菌過(guò)濾后加入濃度為 0. 25-20mg/ml重組人白介素-11原液2mg(購(gòu)于廈門(mén)特寶生物工程股份有限公司，申請(qǐng)(專利)號(hào)201010201215. 1)；注射用水稀釋至0. 4ml，再次過(guò)濾，混勻；所述的除菌過(guò)濾器用 0. 2 μ m孔徑濾膜無(wú)菌濾器，分裝前取樣檢測(cè)無(wú)菌、內(nèi)毒素。分裝在無(wú)菌灌封室層流罩內(nèi)(A 級(jí)區(qū))進(jìn)行，分裝于容量為2ml的西林瓶中，單劑量裝每瓶0.5ml。分裝后成品置2_8°C下保存。本發(fā)明的有益效果為本發(fā)明的獨(dú)特之處在于不僅能保證水溶液的穩(wěn)定性，解決了粉針劑型外觀不佳的問(wèn)題，而且首次發(fā)現(xiàn)PH對(duì)于降解物有關(guān)鍵的影響，發(fā)明的水針處方與凍干粉針劑型相比，質(zhì)量有顯著的提高。首先聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯的選擇是本發(fā)明的一個(gè)獨(dú)特之處，它既是非離子型表面活性劑，也是rhIL-11的穩(wěn)定劑。該穩(wěn)定劑可保持rhIL-11的水溶液澄清和性質(zhì)穩(wěn)定。適用于本發(fā)明的非離子表面活性劑聚氧乙烯失水山梨醇單月桂酸酯和聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。而緩沖體系對(duì)rhIL-11的影響是本發(fā)明的另一個(gè)獨(dú)特之處當(dāng)PH超過(guò)7. 0時(shí)，加速試驗(yàn)表明，SDS-PAGE電泳可見(jiàn)隨著pH升高而逐漸增加的聚合物條帶；當(dāng)PH超過(guò)8. 5，rhIL-11聚合物繼續(xù)增加出現(xiàn)沉淀，且這種沉淀是不可逆的；當(dāng)PH在低于7.0，隨著pH的逐步降低，SDS-PAGE電泳可見(jiàn)隨著pH降低逐漸增加的降解物條帶，當(dāng)PH降低至4. 5左右時(shí)，降解物含量達(dá)到2%。而在pH6. 0-7. 0范圍內(nèi)，rhIL-11樣品質(zhì)量能保持穩(wěn)定，加速試驗(yàn)結(jié)果也保持穩(wěn)定，產(chǎn)品純度均在98%以上，較傳統(tǒng)的粉針劑型質(zhì)量有明顯的提高。進(jìn)一步的研究包括等滲劑、緩沖液等。適用于本發(fā)明的等滲劑(同時(shí)也是蛋白保護(hù)劑)為氨基酸水溶液，氨基酸對(duì)蛋白有一定的保護(hù)作用，同時(shí)作為兼具酸性集團(tuán)和堿性基團(tuán)的兩性分子，性質(zhì)穩(wěn)定，具有一定的緩沖能力，可保持溶液滲透壓，減少對(duì)注射局部的刺激。其中優(yōu)選的是甘氨酸。適合本發(fā)明的緩沖體系是能保持水溶液制劑的PH值范圍在4. 5-8. 5的緩沖體系，包括磷酸鹽緩沖液，醋酸鹽緩沖液，枸櫞酸鹽緩沖液，丁二酸鹽緩沖液，Tris鹽酸緩沖液等，其中優(yōu)選的是磷酸鹽緩沖液體系
綜上所述本發(fā)明解決了凍干粉針劑型外觀不佳、不溶性微粒偏高，可見(jiàn)異物超標(biāo)等問(wèn)題；其次首次發(fā)現(xiàn)了 rhIL-11溶液的穩(wěn)定性與pH范圍和非離子化的表面活性劑有密切關(guān)系，是保持水溶液穩(wěn)定的關(guān)鍵因素；更重要的是本發(fā)明的rhIL-11水溶液具有很好的穩(wěn)定性，外觀澄清、聚合物減少、不含防腐劑、不含血液成分；在規(guī)定條件下，可穩(wěn)定保存24個(gè)月，且產(chǎn)品質(zhì)量比粉針劑型有明顯提高。


圖1 是實(shí)施例 1-17 在 2-80C W rhIL-11 純度(SDS-PAGE 法)圖譜；
圖2是實(shí)施例1-17在45°C加速考察10天的rhIL-11純度(SDS-PAGE法)圖譜。
具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例將進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明
實(shí)施例1-4中水溶液中各組分，每0. 4ml中按表1配方配制；實(shí)施例5-8中水溶液中各組分，每0. 4ml中按表2配方配制；實(shí)施例9-12中水溶液中各組分，每0. 4ml中按表3配方配制；實(shí)施例13-16中水溶液中各組分，每0. 4ml中按表4配方配制；實(shí)施例17-20中水溶液中各組分，每0. 4ml中按表5配方配制；
以上各實(shí)施例1-20均按照如下方法制備按表中所例的量稱取取濃度為lmM-200mM的緩沖液體系；穩(wěn)定劑按表中所例的量量取；等滲劑按按表中所例的量量取；依次用無(wú)菌無(wú)熱源注射用水溶解、配制，除菌過(guò)濾后按表中所例的量加入濃度為0. 25-20mg/ml rhIL-11 原液，注射用水稀釋至0. 4ml，再次過(guò)濾，混勻；所述的除菌過(guò)濾器用0. 2 μ m孔徑濾膜無(wú)菌濾器，分裝前取樣檢測(cè)無(wú)菌、內(nèi)毒素。分裝在無(wú)菌灌封室層流罩內(nèi)(A級(jí)區(qū))進(jìn)行，分裝于容量為2ml的西林瓶中，單劑量裝每瓶0. 5ml，得到各實(shí)施例制備的穩(wěn)定的重組人白介素-11 水溶液。試驗(yàn)方案一
實(shí)驗(yàn)例1-20均放置在45°C加速培養(yǎng)箱中考察，比較實(shí)驗(yàn)例1-20在0天與加速10天的不溶性微粒和純度(HPLC-RP)檢測(cè)結(jié)果，不溶性微粒按照《歐洲藥典》第7版《不溶性微粒檢查法》進(jìn)行，使用激光注射液微粒分析儀檢測(cè)；純度(HPLC-RP)參考《中國(guó)藥典》2010年版三部《高效液相色譜法》，使用WATERS公司生產(chǎn)的高效液相色譜儀檢測(cè)。比較實(shí)驗(yàn)例1-17 在0天與加速10天的純度(SDS-PAGE法)檢測(cè)結(jié)果，純度(SDS-PAGE法)參考《中國(guó)藥典》2010年版三部《SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法》，使用穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀檢測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果
1、實(shí)施例1-20在45°C加速考察10天不溶性微粒比較結(jié)果見(jiàn)表6，結(jié)論為實(shí)施例17 在45°C加速考察10天不溶性微粒有明顯升高，其它實(shí)施例加速10天均無(wú)顯著變化。說(shuō)明增加聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯能減少不溶性微粒增加，因此對(duì)水溶液外觀有明顯改善作用。2、實(shí)施例1-20在45°C考察10天rhIL-11純度(HPLC-RP)結(jié)果見(jiàn)表7。結(jié)論為 實(shí)施例1-20在45°C考察10天純度(HPLC-RP)均略有降低，其中實(shí)施例1、2、7、11、12、15比其它實(shí)施例純度(HPLC-RP)降低稍明顯。3、實(shí)施例1-17在45°C考察10天rhIL-11純度(SDS-PAGE)結(jié)果見(jiàn)圖1和圖2。結(jié)論為實(shí)施例1-17在45°C考察10天均發(fā)現(xiàn)rhIL-11有少量降解物產(chǎn)生，降解物的大小與緩沖液PH值有關(guān)，pH值過(guò)高或過(guò)低時(shí)降解物均會(huì)增加。試驗(yàn)方案二
綜合試驗(yàn)方案一的不溶性微粒、純度(HPLC-RP)和純度(SDS-PAGE)的考察結(jié)果可知rhIL-11水溶液外觀、不溶性微粒與緩沖液pH值有關(guān)，本發(fā)明內(nèi)容范圍內(nèi)的pH值能使 rhIL-11水溶液外觀澄清，且pH值過(guò)高或過(guò)低時(shí)降解物均會(huì)增加；氨基酸對(duì)rhIL-11水溶液有保護(hù)作用，不加氨基酸的實(shí)施例會(huì)產(chǎn)生更多雜質(zhì)；聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯能減少不溶性微粒增加，因此對(duì)水溶液外觀有明顯改善作用。因此我們將優(yōu)選PH范圍的實(shí)施例 2-6、不含氨基酸的實(shí)施例15、不含聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯的實(shí)施例17進(jìn)行進(jìn)一步加速和長(zhǎng)期試驗(yàn)，確定優(yōu)選PH值的rhIL-11水溶液在長(zhǎng)期貯存中穩(wěn)定，同時(shí)將不含氨基酸和不含聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯的水溶液進(jìn)行對(duì)比，進(jìn)一步確定這兩種穩(wěn)定劑的必要性。加速試驗(yàn)在25°C 士2°C考察30天，主要考察項(xiàng)目有外觀、不溶性微粒。長(zhǎng)期試驗(yàn)主要是在藥品貯存條件2-8°C實(shí)時(shí)考察，考察30個(gè)月，主要考察項(xiàng)目有外觀、不溶性微粒、生物學(xué)活性、異常毒性等。試驗(yàn)結(jié)果
1、實(shí)施例2-6、實(shí)施例15和實(shí)施例17在25°C 士 2 °C加速考察穩(wěn)定性情況 a)外觀外觀均為澄明液體，未見(jiàn)蛋白質(zhì)聚集。b)不溶性微粒不溶性微粒均合格，實(shí)施例2-6和實(shí)施例15的不溶性微粒無(wú)明顯變化，實(shí)施例17的不溶性微粒有顯著增加，加速結(jié)果說(shuō)明聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯能有效減少不溶性微粒增加。> IOym不溶性微粒測(cè)定結(jié)果(粒/支)見(jiàn)表8。>25μπι不溶性微粒測(cè)定結(jié)果(粒/支)，見(jiàn)表9。2、實(shí)施例2-6、實(shí)施例15和實(shí)施例17在2_8°C存放30個(gè)月穩(wěn)定性情況
a) 外觀實(shí)施例2-6、實(shí)施例15和實(shí)施例17在2_8°C存放30個(gè)月外觀均為澄明液體，未見(jiàn)蛋白質(zhì)聚集。b) 實(shí)施例4在2_8°C存放30個(gè)月生物學(xué)活性合格。c) 實(shí)施例4在2_8°C存放30個(gè)月異常毒性檢測(cè)合格。d) 實(shí)施例3-5在2_8°C存放30個(gè)月不溶性微粒檢測(cè)合格，實(shí)施例17在2_8°C 存放3個(gè)月不溶性微粒有顯著增加，說(shuō)明長(zhǎng)期貯存過(guò)程中聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯也能有效減少不溶性微粒增加?！?0 μ m不溶性微粒測(cè)定結(jié)果(粒/支)，見(jiàn)表10 ；>25μπι不溶性微粒測(cè)定結(jié)果(粒/支)，見(jiàn)表11。
表 權(quán)利要求
1.一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于包括如下組分1)濃度為 0. 25-20mg/ml的重組人白介素_11 ；2)維持pH在4. 5-8. 5范圍內(nèi)的濃度為lmM-200mM的緩沖液體系；3)穩(wěn)定重組人白介素11的穩(wěn)定劑；4)等滲劑；5)注射用水。
2.如權(quán)利要求1所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的水溶液中各組分，每0. 4ml中按如下配方配制濃度為0. 25-20mg/ml的重組人白介素_11 :2mg ； 2)維持pH在4. 5-8. 5范圍內(nèi)的濃度為lmM-200mM的緩沖液體系0. 3-1. Img ；3)穩(wěn)定重組人白介素11的穩(wěn)定劑按總體積的0. 001%-1%加入；4)等滲劑按總體積的0. 1-5%加入；5) 注射用水加至0. 4ml。
3.如權(quán)利要求2所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的水溶液中各組分，每0. 4ml中按如下配方配制濃度為0. 25-20mg/ml的重組人白介素_11 :2mg ； 2)維持pH在4. 5-8. 5范圍內(nèi)的濃度為lmM-200mM的緩沖液體系0. 4-0. 6mg ；3)穩(wěn)定重組人白介素11的穩(wěn)定劑按總體積的0. 01%-0. 05%加入；4)等滲劑按總體積的0. 1-5%加入； 5)注射用水加至0. 4ml。
4.如權(quán)利要求3所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的緩沖體系采用磷酸鹽緩沖液，醋酸鹽緩沖液，枸櫞酸鹽緩沖液，丁二酸鹽緩沖液，Tris緩沖液中的一種；其中磷酸鹽緩沖液，其組成為磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉或者是磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀；所述的醋酸鹽緩沖液，其組成為醋酸和醋酸鈉或者是醋酸和醋酸鉀；所述的枸櫞酸緩沖液，其組成為枸櫞酸和磷酸氫二鈉或者是枸櫞酸和磷酸氫二鉀；丁二酸緩沖液，其組成為丁二酸和丁二酸鈉；Tris緩沖液，其組成為T(mén)ris堿和鹽酸。
5.如權(quán)利要求4所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的緩沖體系采用磷酸鹽緩沖液。
6.如權(quán)利要求3所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的穩(wěn)定劑采用聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇單月桂酸酯中的一種。
7.如權(quán)利要求6所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的穩(wěn)定劑采用聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。
8.如權(quán)利要求3所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的等滲劑采用氨基酸、氯化鈉溶液中的一種；且所述的氨基酸加入量為總體積的0. 5-5% ；氯化鈉溶液的加入量為總體積的0. 1-2. 0%。
9.如權(quán)利要求8所述的一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液，其特征在于所述的氨基酸采用甘氨酸，且其加入量為總體積的2. 3%。
10.一種如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液的制備方法，其特征在于包括如下步驟稱取濃度為lmM-200mM的緩沖液體系0. 3-1. Img ；穩(wěn)定劑按總體積的0. 01%-0. 05%量??；等滲劑按總體積的0. 1-5%量取；依次用無(wú)菌無(wú)熱源注射用水溶解、 配制，除菌過(guò)濾后加入濃度為0. 25-20mg/ml重組人白介素11原液2mg ；注射用水稀釋至 0. 4ml，再次過(guò)濾，混勻；所述的除菌過(guò)濾器用0. 2 μ m孔徑濾膜無(wú)菌濾器，分裝前取樣檢測(cè)無(wú)菌、內(nèi)毒素；分裝在無(wú)菌灌封室層流罩內(nèi)進(jìn)行，分裝于容量為2ml的西林瓶中，單劑量裝每瓶0. 5ml，得到各實(shí)施例制備的穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種穩(wěn)定的重組人白介素-11水溶液及其制備方法，其特征在于包括如下組分1)濃度為0.25-20mg/ml的重組人白介素-11；2)維持pH在4.5-8.5范圍內(nèi)的濃度為1mM-200mM的緩沖液體系；3)足以穩(wěn)定重組人白介素11的穩(wěn)定劑；4)等滲劑；5)注射用水。本發(fā)明創(chuàng)造性地發(fā)明了一種適合rhIL-11的水溶液配方，其中適宜的穩(wěn)定劑和緩沖體系是rhIL-11在溶液狀態(tài)下保持穩(wěn)定的關(guān)鍵因素。本發(fā)明改善了rhIL-11凍干粉針重建溶液外觀不佳、不溶性微粒偏高、可見(jiàn)異物超標(biāo)等問(wèn)題，而且產(chǎn)品質(zhì)量比粉針劑型有明顯提高。
文檔編號(hào)A61K9/08GK102319206SQ201110298750
公開(kāi)日2012年1月18日 申請(qǐng)日期2011年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月28日
發(fā)明者劉斌, 劉滿榮, 孫黎, 張子民, 張林忠, 楊美花, 林輝煌, 游一玉, 王秋紅, 胡斌, 雷利芳 申請(qǐng)人:廈門(mén)特寶生物工程股份有限公司