專利名稱：一種用于治療心血管疾病的響鈴草提取物、制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物及其在制藥領(lǐng)域的應(yīng)用更具體的說涉及一種用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物、制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
流行病學(xué)研究表明，血脂異常是動脈粥樣硬化極為重要的致病危險因素。以往我國人群血中有致動脈粥樣硬化作用的膽固醇和甘油三酯水平較西方人低，而有抗動脈粥樣硬化作用的高密度脂蛋白膽固醇水平較高，被認(rèn)為是患動脈粥樣硬化和冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)較少的主要原因之一。但近年對我國健康人群血脂水平的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，男女人群的血總膽固醇和甘油三酯水平都較以前上升，致動脈粥樣硬化的危險性相應(yīng)增加。因此，尋找天然、安全有效的調(diào)節(jié)血脂生物資源對防治心腦血管疾病具有重要意義。 這些疾病病因復(fù)雜，但與脂質(zhì)代謝異常均有一定的關(guān)系。高脂血癥作為導(dǎo)致心腦血管疾病的主要獨立危險因素越來越受到人們的關(guān)注。研究證明，正確地調(diào)整血脂水平能有效地降低心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率。臨床上絕大多數(shù)降低血膽固醇水平的方法需要嚴(yán)格控制飲食并依賴于藥物，而降血脂藥物的副作用使其應(yīng)用受到了一定程度的限制。目前響鈴草及其提取物的相關(guān)研究主要集中在抗菌消炎方面，中國專利(200710077676.0)公開了一種從響鈴草中提取的天然抗菌組合物及其提取方法；吳貞建等報道了關(guān)于響鈴草黃酮提取物體外抗菌活性研究。

發(fā)明內(nèi)容
響鈴草味苦、微酸、性寒，民間用于治療久咳痰血、慢性腎炎、扁桃體炎、淋巴腺炎、 療毒惡瘡、月經(jīng)不調(diào)等；通過研究發(fā)現(xiàn)，響鈴草中富含留體類研究發(fā)現(xiàn)不同劑量的響鈴草中富含的留醇能不同程度地改善高脂血癥小鼠的血脂水平，降低血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和動脈硬化指數(shù)，升高血清高密度脂蛋白膽固醇水平；另外，其富含的齊墩果酸具有降低肝硬化大鼠腦勻漿酷氨酸水平，故有利于肝性腦病的防治。本發(fā)明在上述研究的基礎(chǔ)上提供了一種用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物、制備方法及應(yīng)用具體內(nèi)容為
用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物的制備方法，包括以下步驟
1)粉碎響鈴草原藥材，裝柱，用60-95%乙醇滲漉，合并回收提取液回收乙醇制干，得到乙醇提取液；
2)減壓回收乙醇提取液中的乙醇，至無醇味，在回收乙醇的過程中不斷加入水，使回收乙醇過程中的析出物質(zhì)呈混懸狀態(tài)，得到提取物水溶液；
3)用石油醚、乙醚、汽油、正丁醇、正戊醇或苯中任意一種或兩種以上的混合物反復(fù)萃取洗滌提取物水溶液，至母液中無懸浮物質(zhì)及皂化泡沫為止，合并回收有機(jī)相，得到響鈴草提取物。步驟1)所述的滲漉的條件為滲漉溶媒采用75-90%乙醇，滲漉量為藥材的8-10倍體積。步驟3)所述合并回收有機(jī)相得到響鈴草提取物還經(jīng)過純化，具體步驟為
I.加熱有機(jī)相至低于沸點1_2°C，回收至有物質(zhì)析出，得到析晶母液；
II.將析晶母液置于水浴或油浴中，以每小時3_5°C的速度降溫，至室溫，過濾得到粗提取物；
III.用無水乙醇洗滌粗提取物，至析出物表面無油脂類物質(zhì)，得到響鈴草提取物。根據(jù)上述步驟所述的方法制備得到用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物；其中，響鈴草提取物中包含留體成分和齊墩果酸。所述的用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物在制備治療心腦血管疾病中的應(yīng)用。本發(fā)明的有益技術(shù)效果是本發(fā)明提供了一種用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物能有效改善高脂血癥小鼠的血脂水平，降低血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇，預(yù)防和治療心血管疾??；而且本發(fā)明所提供的提取物制備方法工藝簡單，環(huán)境污染小，適合大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)。
具體實施例方式實施例1用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物的制備
稱量響鈴草原藥材5. 0kg，粉碎，用90%乙醇的溶媒IL浸潤，裝滲漉柱，加入溶媒浸泡 12h,開始滲漉，滲漉量為藥材的8-10倍體積，以滲漉液中留醇量為滲漉體積的判斷依據(jù)， 得到滲漉濾液；
對于滲漉溶媒的選擇可以選擇60-95%，在這一范圍內(nèi)的溶媒，均可以實現(xiàn)對響鈴草中有效部位的提取；但最優(yōu)的溶媒濃度為75-90%乙醇；
合并滲漉濾液，減壓回收乙醇提取液中的乙醇，至無醇味，在回收乙醇的過程中不斷加入水，使回收乙醇過程中的析出物質(zhì)呈混懸狀態(tài)，得到提取物水溶液；
用石油醚、乙醚、汽油、正丁醇、正戊醇或苯中任意一種或兩種以上的混合物反復(fù)萃取洗滌提取物水溶液，至母液中無懸浮物質(zhì)及皂化泡沫為止，合并回收有機(jī)相，得到響鈴草提取物，其中響鈴草提取物的中應(yīng)當(dāng)含有留體類物質(zhì)和齊墩果酸。如果在上述提取物水溶液中脂類物質(zhì)含量較高，導(dǎo)致萃取后的響鈴草提取物含有較多的脂類物質(zhì)和萜類物質(zhì)，則需要在萃取后添加一步純化工藝；其中純化工藝的步驟為
I.加熱有機(jī)相至低于沸點1-2°C，回收至有物質(zhì)析出，得到析晶母液；
II.將析晶母液置于水浴或油浴中，以每小時3-5°C的速度降溫，至室溫，過濾得到粗提取物；
III.用無水乙醇洗滌粗提取物，至析出物表面無油脂類物質(zhì)，得到響鈴草提取物。在上述工藝的每個步驟中都應(yīng)當(dāng)檢測提取部位中有效成分的含量，其中各有效成分的檢測方法為
齊墩果酸的檢測條件為色譜柱為mmX150. 0mm, 5 m);流動相為甲醇一水 (V:V=90:10)；檢測波長為220 nm ；進(jìn)樣量為10 μ 1 ；流速為1. 0 mL/min ；柱溫為25°C。留體的檢測條件為A、提取各工藝階段提取物，干燥至物溶劑，殘渣加Iml冰醋酸溶解，再加Iml醋配，于溶液邊沿滴加濃硫酸一滴，顯紫紅色；B、提取各工藝階段提取物，干燥至物溶劑，用Iml氯仿溶解，加Iml濃硫酸，氯仿層顯紅色，濃硫酸層有淡黃綠色。以上試驗表明該植物含甾體。實施例2響鈴草提取物對高脂模型大鼠降血脂作用的實驗研究試驗動物雄性SD大鼠，60只，體重150 200g，清潔級。SPF實驗動物房環(huán)境溫度20°C ，相對濕度40% 70%，晝夜交替12h/12h。高脂飼料78. 95%基礎(chǔ)飼料、1%膽固醇、10%蛋黃粉、10%豬油、0. 05%牛膽鹽； 按衛(wèi)生部保健食品功能檢測與評價技術(shù)規(guī)范大鼠適應(yīng)環(huán)境3d后，喂飼基礎(chǔ)飼料5d，
禁食過夜采尾血，離心(3000 rpm)，取血清，測血清TC、TG、HDL_C，根據(jù)TC水平隨機(jī)分為5組，即三個劑量組(0. 33,0. 66和2. 00g/kg)、一個高脂飼料對照組和一個基礎(chǔ)飼料對照組。試驗期內(nèi)三個劑量組給予高脂飼料和不同劑量的受試物，高脂飼料對照組給予高脂飼料和蒸餾水，基礎(chǔ)飼料對照組給予基礎(chǔ)飼料和蒸餾水。于試驗的第30d稱重，禁食IMi 后取尾血，測血清TC、TG、HDL-C0
統(tǒng)計分析采用SPSS10. 0統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析，顯著性水準(zhǔn)定為α =0. 05 響鈴草提取物對大鼠血清TC的的影響表權(quán)利要求
1.一種用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟1)粉碎響鈴草原藥材，裝柱，用60-95%乙醇滲漉，合并回收提取液回收乙醇制干，得到乙醇提取液；2)減壓回收乙醇提取液中的乙醇，至無醇味，在回收乙醇的過程中不斷加入水，使回收乙醇過程中的析出物質(zhì)呈混懸狀態(tài)，得到提取物水溶液；3)用石油醚、乙醚、汽油、正丁醇、正戊醇或苯中任意一種或兩種以上的混合物反復(fù)萃取洗滌提取物水溶液，至母液中無懸浮物質(zhì)及皂化泡沫為止，合并回收有機(jī)相，得到響鈴草提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物的制備方法，其特征在于步驟1)所述的滲漉的條件為滲漉溶媒采用75-90%乙醇，滲漉量為藥材的8-10倍體積。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物的制備方法，其特征在于步驟3)所述合并回收有機(jī)相得到響鈴草提取物還經(jīng)過純化，具體步驟為I.加熱有機(jī)相至低于沸點1_2°C，回收至有物質(zhì)析出，得到析晶母液；II.將析晶母液置于水浴或油浴中，以每小時3-5°C的速度降溫，至室溫，過濾得到粗提取物；III.用無水乙醇洗滌粗提取物，至析出物表面無油脂類物質(zhì)，得到響鈴草提取物。
4.一種用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物，其特征在于根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的方法制備得到用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物；其中，響鈴草提取物中包含甾體成分和齊墩果酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4之一所述的用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物在制備治療心腦血管疾病中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于治療心腦血管疾病的響鈴草提取物、制備方法及用途,其中，響鈴草提取物中包含甾體成分和齊墩果酸,能有效改善高脂血癥小鼠的血脂水平，降低血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇，預(yù)防和治療心血管疾?。欢冶景l(fā)明所提供的提取物制備方法工藝簡單，環(huán)境污染小，適合大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)。
文檔編號A61K36/48GK102335225SQ20111031448
公開日2012年2月1日 申請日期2011年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月17日
發(fā)明者劉筱琴, 唐倩, 張雪, 揭芳芳, 楊憲, 池雨芮, 王黎, 賀小蘭, 高小麗 申請人:重慶化工職業(yè)學(xué)院