專利名稱：攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域，涉及人體內(nèi)各種惡性腫瘤所致管腔狹窄局部治療中使用的支架，具體是一種攜帶治療有效劑量的短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架。
背景技術(shù)：
腫瘤是目前威脅人類健康的主要疾病，惡性腫瘤引起的人體腔道狹窄是高發(fā)病癥。除了外科手術(shù)切除、放療和化療方法外，常用的介入手段主要有支架置入。對于中晚期腫瘤患者，支架置入是相當(dāng)重要的姑息治療手段，能有效提高中晚期腫瘤患者的生存質(zhì)量， 延長生存時間。但傳統(tǒng)金屬支架及覆膜支架至少存在兩點不足(1)金屬支架不具備真正的局部治療作用，只起到機械支撐及短期減癥的姑息作用，對防止腫瘤生長所致的再狹窄無能為力；覆膜支架雖可在一定程度上防止腫瘤的內(nèi)生長，但仍不能防止腫瘤縱向過度生長和壓迫性再狹窄。(2)金屬支架植入后仍需配合全身給藥治療，但一來全身給藥后癌組織血藥濃度低，難以達到有效的治療濃度，若想達到一定的抑瘤效果，就必須進行大劑量長期化療， 但大多數(shù)抗癌藥物毒副作用大。同時，現(xiàn)有的化療方案對腫瘤梗阻引起的腔道治療效果并不理想，腫瘤進展、轉(zhuǎn)移及導(dǎo)致腔道再次梗阻的現(xiàn)象比比皆是。為解決此問題，通過更有效的藥物方案以各種方式載于支架上達到局部給藥治療，以較少的毒副作用，產(chǎn)生更好的梗阻解除和抑瘤效果。雖然國內(nèi)外大部分醫(yī)用管腔支架只起到擴張作用，僅僅解除管腔的狹窄和梗阻， 對腫瘤并無治療效果，但也已經(jīng)有一些專利也提到了支架對腫瘤的化療作用。經(jīng)對現(xiàn)有技術(shù)文獻的檢索發(fā)現(xiàn)，在中國專利公開號為“CN179238A”，名稱為“抗癌藥物粒子消化道支架” 的專利文獻中記載了一種藥物支架，該專利自述為“攜帶抗腫瘤藥物尤指以下幾類烷化劑、抗代謝藥、抗腫瘤抗生素類、植物提取物及其衍生物類、二氧哌嗪類、鉬類、抗體治癌藥物、基因治療藥物?！钡@種支架的不足之處在于一是僅將專利局限應(yīng)用于在消化道，不適用于尿道、前列腺道和氣道等其他自然腔道；二是該支架的抗癌藥物僅局限于上述幾類。神經(jīng)酰胺(ceramide，Cer)是由細胞膜神經(jīng)鞘磷脂(sphingomyelin)水解產(chǎn)生的一種長鏈的多碳脂質(zhì)分子，是一個重要的第二信使，介導(dǎo)了多種細胞生物學(xué)效應(yīng)，包括細胞凋亡等。作為第二信使，神經(jīng)酰胺參與了 JNK、AKT、p53、bcl-2、p21等抑癌基因的活化表達調(diào)控，介導(dǎo)細胞凋亡。最近研究表明，包括紫杉醇，多柔比星、柔紅霉素在內(nèi)的多種化療藥物以及放射線，紫外線等刺激能激活細胞內(nèi)神經(jīng)酰胺合成信號通路，增加細胞內(nèi)神經(jīng)酰胺的含量，從而參與腫瘤細胞凋亡。但目前研究認為，細胞受刺激而合成的神經(jīng)酰胺很快被細胞自身的酶代謝，其體內(nèi)聚集水平達不到有效誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的目的?，F(xiàn)有研究表明將外源性的具有細胞通透性短鏈神經(jīng)酰胺(C2、C4、C6和C8)直接加入腫瘤細胞內(nèi)，從而達到抑制腫瘤細胞增殖并誘導(dǎo)細胞凋亡的效果。盡管如此，單加外源性的短鏈神經(jīng)酰胺并不能有效的誘導(dǎo)大多數(shù)的腫瘤細胞凋亡。添加外源性的短鏈神經(jīng)酰胺作為抗微管類化療藥物的增敏劑，從而有效的增加化療藥物有效性，其有效率顯著高于目CN 102363052 A
說明書
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前臨床所用的化療藥物，從而達到治療多種腫瘤的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，該支架上攜帶的藥物——短鏈神經(jīng)酰胺可直接釋放于腫瘤組織或其他病變組織， 通過直接局部增敏化療作用，配合全身運用紫杉醇(Taxol)等抗微管細胞毒性藥物，既解決惡性腫瘤引起的人體腔道梗阻，又直接作用于腫瘤病灶，起到對腫瘤引起的腔道狹窄進行靶向、緩慢及長期的治療作用。按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，包括支架本體，其特征在于所述支架本體上攜帶治療有效劑量的短鏈神經(jīng)酰胺。作為本發(fā)明的進一步改進，所述短鏈神經(jīng)酰胺為C2神經(jīng)酰胺、C4神經(jīng)酰胺、C6神經(jīng)酰胺或C8神經(jīng)酰胺。作為本發(fā)明的進一步改進，所述短鏈神經(jīng)酰胺以藥物膜層的形式結(jié)合固定在支架本體表面上。作為本發(fā)明的進一步改進，所述藥物膜層的形成方式為將含有短鏈神經(jīng)酰胺的溶液直接噴涂或浸涂在支架本體表面，再將帶有涂層的支架本體真空干燥，固化，即獲得本發(fā)明的藥物支架。作為本發(fā)明的進一步改進，所述短鏈神經(jīng)酰胺通過物理、化學(xué)或機械的結(jié)合方式結(jié)合固定在支架本體上。作為本發(fā)明的進一步改進，所述支架本體上裹覆有支架包膜，所述短鏈神經(jīng)酰胺通過物理、化學(xué)或機械的結(jié)合方式結(jié)合固定在支架包膜上。作為本發(fā)明的進一步改進，所述的物理結(jié)合方式包括電鍍方式和焊接方式，所述化學(xué)結(jié)合方式為化學(xué)鍵合方式，所述機械結(jié)合方式包括粘貼方式、纏繞方式和涂抹方式。作為本發(fā)明的進一步改進，所述支架本體采用高分子聚合材料制成，其植入人體后自動降解，能夠在設(shè)定的時間內(nèi)降解成二氧化碳和水。所述高分子聚合材料可加入可降解聚合物助劑，以提高支架本體的韌性、可塑性和可加工性，并可根據(jù)臨床需要調(diào)控支架的降解速度和藥物釋放速度，使其符合臨床需求， 增加可控性。所述助劑選自成核劑、增韌劑、增塑劑等中的一種或幾種。作為本發(fā)明的進一步改進，所述高分子聚合材料是聚己酸丙酯、聚乳糖、聚羥基乙酸、聚己內(nèi)酯、可降解聚氨酯、聚乙二醇和聚羥基丁酸戊酸酯可降解聚合物材料中的一種或是幾種可降解聚合物材料的共聚物或共混物，高分子聚合材料的分子量為0.1-100萬。作為本發(fā)明的進一步改進，所述支架本體上還攜帶有控制藥物釋放行為的阻滯劑、致孔劑及其它填充物；所述阻滯劑指以下一種或幾種的混合物高級硬脂酸、高級脂肪醇、硬脂酸甘油醇、硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣；所述的致孔劑指以下一種或幾種物質(zhì)的混合物聚乙烯、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇、甲基纖維素、羥丙甲纖維素；所述其他填充物指其他一切可改變藥物釋放行為的生物相容性物質(zhì)。作為本發(fā)明的進一步改進，所述藥物膜層外設(shè)有緩釋層，緩釋層由不可降解材料組成，所述的不可降解材料指以下一種或幾種物質(zhì)的混合物派瑞林(聚對二甲苯的商品名。Parylene)或其衍生物、聚四氟乙烯(PTFE)、聚乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡膠、聚苯乙烯-異丁烯共聚物、聚氨酯、聚丙烯酸酯及其衍生物。藥物支架起始階段的爆釋現(xiàn)象，會影響治療效果，為防止藥物在起始階段的爆釋， 更有效地控制藥物釋放速度，本發(fā)明可在藥物膜層外設(shè)置一層致密的緩釋層，緩釋層的厚度在0. 01 20 μ m之間。作為本發(fā)明的進一步改進，所述支架本體的直徑為0. l_50mm，長度為10_250mm。作為本發(fā)明的進一步改進，所述支架本體為網(wǎng)狀或中空管狀，網(wǎng)狀的支架本體由可降解細絲編織而成，可降解細絲的直徑為0. l-5mm。本發(fā)明所述的藥物支架為任何一種適合腔道內(nèi)放置的支架，包括食道、胃竇、十二指腸、結(jié)腸、直腸、膽道、尿道、前列腺道、氣道內(nèi)運用的任何一種類型的支架，既包括裸金屬支架也包括包膜支架。短鏈神經(jīng)酰胺酰胺可為任何分布方式，最大面積為膨脹時支架或包膜的總表面積。神經(jīng)酰胺是脂溶性物質(zhì)，呈粉末狀，不溶于水，不能直接靜脈使用。而通過將神經(jīng)酰胺攜載在支架上，支架植入后，神經(jīng)酰胺藥物與癌組織密切接觸、滲透，神經(jīng)酰胺藥物在腫瘤病變部位緩慢釋放，再配合全身用紫杉醇類抗微管細胞毒性藥物化療，可明顯抑制腫瘤的生長，促進腫瘤細胞凋亡，對中晚期腫瘤較好的治療效果。藥物是緩慢釋放的，緩釋藥物是神經(jīng)酰胺與聚乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡膠、聚氨酯、聚苯乙烯-異丁烯共聚物、聚丙烯酸酯及其衍生物的一種或兩種以及兩種以上形成的藥物緩釋劑。另外，除了紫杉醇外，所述抗微管類藥物還包括伊沙匹隆、埃博霉素、長春新堿、泰素帝、長春堿和諾維本。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，優(yōu)點在于本發(fā)明與傳統(tǒng)的支架相比，支架本體上攜帶的神經(jīng)酰胺藥物可直接接觸腫瘤組織，再配合全身用紫杉醇類抗微管細胞毒性藥物化療，可明顯抑制腫瘤的生長，促進腫瘤細胞凋亡，降低管腔的再狹窄率，支架本體采用高分子聚合材料制成，具有良好的組織相容性，對管腔壁完成一定時間的機械支持后可自行降解，降解產(chǎn)物對組織無毒副作用，無需二次手術(shù)取出；而且支架本體加入可降解聚合物助劑，可提高支架本體的韌性、可塑性和可加工性，并可根據(jù)臨床需要調(diào)控支架的降解速度和藥物釋放速度，使其符合臨床需求，增加可控性。


圖1為本發(fā)明實施例1和2的結(jié)構(gòu)示意圖。圖2為本發(fā)明實施例3和4的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是實施例5中MTT法測得的不同濃度的紫杉醇、不同濃度的紫杉醇+C6神經(jīng)酰胺(10yg/ml)對L3. 6胰腺癌細胞株的細胞存活率的影響情況曲線圖。圖4是實施例5中MTT法測得的不同濃度的C6神經(jīng)酰胺、不同濃度的C6神經(jīng)酰胺+紫杉醇(1.5yg/ml)對L3. 6胰腺癌細胞株的細胞存活率的影響情況曲線圖。圖5是實施例5中MTT法測得的C6神經(jīng)酰胺(10 μ g/ml)、紫杉醇(3 μ g/ml)、C6 神經(jīng)酰胺( ο μ g/ml)+紫杉醇(3 μ g/ml)對PANC-I胰腺癌細胞株的細胞存活率的影響情況柱形圖。圖6是實施例5中MTT法測得的C6神經(jīng)酰胺(10 μ g/ml)、紫杉醇(3 μ g/ml)、C6 神經(jīng)酰胺( ο μ g/ml) +紫杉醇(3 μ g/ml)對MIA PaCa-2胰腺癌細胞株的細胞存活率的影響情況柱形圖。
圖7是實施例5中MTT法測得的C6神經(jīng)酰胺(10 μ g/ml)、紫杉醇(3 μ g/ml)、C6 神經(jīng)酰胺( ο μ g/ml) +紫杉醇(3 μ g/ml)對L3. 6胰腺癌細胞株的組蛋白-DNA ELISA值 (凋亡指數(shù))的影響情況柱形圖。圖8是實施例5中MTT法測得的C6神經(jīng)酰胺(10 μ g/ml)、紫杉醇(3 μ g/ml)、C6 神經(jīng)酰胺( ο μ g/ml)+紫杉醇(3 μ g/ml)對L3. 6胰腺癌細胞株的凋亡率的影響情況柱形圖。圖9是實施例6中C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg)、紫杉醇(3mg/kg)、C6神經(jīng)酰胺(IOmg/ kg) +紫杉醇(3mg/kg)給藥后對接種胰腺癌細胞的裸鼠的存活率的影響情況曲線圖。圖10是實施例6中C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg)、紫杉醇(3mg/kg)、C6神經(jīng)酰胺(IOmg/ kg)+紫杉醇(3mg/kg)給藥后對接種胰腺癌細胞的裸鼠的平均存活時間的影響情況曲線圖。圖11是實施例6中C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg)、紫杉醇(3mg/kg)、C6神經(jīng)酰胺(IOmg/ kg) +紫杉醇C3mg/kg)給藥后對接種胰腺癌細胞的裸鼠移植瘤的平均腫瘤體積的影響情況曲線圖。圖12是實施例6中C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg)、紫杉醇(3mg/kg)、C6神經(jīng)酰胺(IOmg/ kg) +紫杉醇C3mg/kg)給藥后對接種胰腺癌細胞的裸鼠移植瘤的平均腫瘤發(fā)展率的影響情況曲線圖。圖13是實施例6中C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg)、紫杉醇(3mg/kg)、C6神經(jīng)酰胺(IOmg/ kg) +紫杉醇(3mg/kg)給藥后對接種胰腺癌細胞的裸鼠移植瘤的最終大小的影響情況曲線圖。圖14是實施例6中C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg)、紫杉醇(3mg/kg)、C6神經(jīng)酰胺(IOmg/ kg) +紫杉醇(3mg/kg)給藥后對接種胰腺癌細胞的裸鼠平均體重的影響情況曲線圖。
具體實施例方式下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明的實施例做詳細的說明。實施例在以本技術(shù)方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和過程，但本發(fā)明的保護范圍并不限于下述的實施例。實施例1所述的短鏈神經(jīng)酰胺為植入劑型，所用載體為己交酯/丙交酯共聚物，短鏈神經(jīng)酰胺直接攜帶在支架上，攜帶方法是先用一種可快速降解材料如聚己酸丙酯做成小膠囊， 并黏貼在支架本體1上，小膠囊腔內(nèi)裝載治療有效劑量的短鏈神經(jīng)酰胺。實施例2所述的短鏈神經(jīng)酰胺為植入劑型，所用載體為聚乳酸，通過聚乳酸類壓敏膠粘于可生物降解性包膜上。必要時為防止藥物在起始階段的爆釋，更有效的控制釋放速度，在藥物涂層外再設(shè)置一層致密的控制釋放層。這種涂層由不可降解材料聚四氟乙烯(PTFE)構(gòu)成。實施例3將短鏈神經(jīng)酰胺、高分子材料聚己內(nèi)酯與溶劑氯仿充分拌勻制成藥物高分子溶液，其中短鏈神經(jīng)酰胺和高分子材料聚己內(nèi)酯在溶劑中的質(zhì)量體積濃度分別為0. 1 μ g/ml和0. 5 μ g/ml ；將藥物高分子溶液通過噴涂和浸漬的方法涂覆在支架本體1表面上，再將支架本體1置于30°C的真空烘箱內(nèi)，抽真空烘干M小時。為防止藥物在起始階段的爆釋，所述藥物膜層表面上還以氣相沉積法形成有一層厚度為0. 1 μ m的緩釋層，在20-90°C下干燥 1-5天，即可制成具有藥物緩釋性能的支架，緩釋層的成分是派瑞林的衍生物。實施例4取短鏈神經(jīng)酰胺和高分子材料聚氨酯，按1 1的質(zhì)量比投料，在50-290°C的溫度范圍內(nèi)進行混勻操作，然后在熱壓設(shè)備中壓制成含短鏈神經(jīng)酰胺的藥物膜，將該藥物膜緊密裹覆在支架本體1上形成藥物膜層。必要時為防止藥物起始階段的爆釋，更有效的控制釋放速度，所述藥物膜層外可再設(shè)置一層致密的緩釋層，這種涂層由不可降解材料派瑞林 (聚對二甲苯的商品名。Parylene)構(gòu)成，派瑞林在熱壓設(shè)備中壓制成膜后再包覆在支架本體1上的藥物膜層之上。所述C6神經(jīng)酰胺與聚羥基乙酸的質(zhì)量比并不限于上述的1 1，而是可以在 0.01-100 1的比例范圍內(nèi)任意選取。實施例5 :C6神經(jīng)酰胺對體外培養(yǎng)的人胰腺癌細胞的增殖抑制試驗。試驗細胞人PANC-I胰腺癌細胞株、MIAPaCa-2和多重耐藥的L3. 6胰腺癌細胞株，它們均得自美國模式培養(yǎng)物集存庫(ATCC)。試驗藥品及試劑C6神經(jīng)酰胺(Avanti，USA)，3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT) (sigma, USA)；胰蛋白酶(sigma，USA) ；二甲亞砜(DMSO) (sigma, USA)； DMEM 細胞培養(yǎng)基(GIBCO, Invitragen, USA) ；RPMIIMO 細胞培養(yǎng)液(GIBCO，Invitragen, USA)；胎牛血清(GIBCO, Invitragen, USA)；特級胎牛血清 Fetal Bovine Serum(Hyclone)。儀器超低溫冰箱(Nature，USA)，倒置顯微鏡(NIKON，Japan)，酶標儀(Bio-Tek Instruments, USA)；細胞培養(yǎng)箱(SANYO，Japan)，超凈工作臺(FLC-哈爾濱東聯(lián)儀器廠)， PH 計(Thermo orion, USA)。實驗方法按常規(guī)采用MTT法將三種胰腺癌細胞株按常規(guī)方法傳代培養(yǎng)，收集對數(shù)生長期的細胞，調(diào)節(jié)細胞懸液濃度為5*104個/ml左右。將細胞懸液加入96孔培養(yǎng)板中，每個孔加入180 μ 1 ；置于37°C恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng) 24h。將C6神經(jīng)酰胺用DMEM細胞培養(yǎng)液配成梯度濃度(0. 1 μ g/mlU μ g/ml,2. 5 μ g/ ml、5 μ g/ml、10 μ g/ml、25 μ g/ml、50 μ g/ml 禾口 100 μ g/ml)的溶液，將紫杉醇用 DMEM細胞培養(yǎng)液配成梯度濃度(0. 1μ g/ml、0. 5μ g/ml、ly g/ml、l. 5μ g/ml、3y g/ml、6y g/ml、12y g/ ml和Μμ g/ml)的溶液。實驗組加入各濃度的C6神經(jīng)酰胺溶液、各濃度的紫杉醇溶液、C6 神經(jīng)酰胺+紫杉醇混合溶液(它們按上述濃度同時加入)，每孔加入20 μ 1，每組各設(shè)4個平行孔，并設(shè)空白孔(只加入DMEM細胞培養(yǎng)液)以調(diào)零。在37°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，用移液槍將96孔培養(yǎng)板中的液體吸凈，然后每孔加入 30 μ 1濃度為lmg/ml的MTT溶液，置37°C ,5% CO2的培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)4h。棄上清，每孔加入二甲亞砜(DMSO) 150 μ 1，置搖床搖勻30min，用酶標儀在492nm 下檢測每孔吸光度(A)值，然后用SPSS軟件統(tǒng)計實驗結(jié)果，具體如圖3 圖8所示所述多重耐藥L3. 6胰腺癌細胞株是由體外DMEM細胞培養(yǎng)基加10%小牛血清(FBS)培養(yǎng)出來的。由圖3、圖4可以看出，L3. 6胰腺癌細胞株單加入外源性的不同濃度的紫杉醇溶液或不同濃度的C6神經(jīng)酰胺溶液48小時，細胞存活幾乎不受影響(細胞存活用通用的MTT 方法檢測)，但是聯(lián)合或者組合給予紫杉醇和C6神經(jīng)酰胺，卻大幅降低了 L3. 6胰腺癌細胞的細胞存活率，導(dǎo)致L3. 6胰腺癌細胞株大幅死亡。由圖5、圖6可以看出，PANC-I胰腺癌細胞株和MIA PaCa-2胰腺癌細胞株單加入外源性的紫杉醇溶液或C6神經(jīng)酰胺溶液48小時，細胞存活幾乎不受影響，但是聯(lián)合或者組合給予紫杉醇和C6神經(jīng)酰胺，卻大幅降低了 PANC-I胰腺癌細胞株和MIA PaCa-2胰腺癌細胞株的細胞存活率，導(dǎo)致PANC-I胰腺癌細胞株和MIA PaCa-2胰腺癌細胞株大幅死亡。由圖7、圖8可以看出，體外紫杉醇和C6神經(jīng)酰胺聯(lián)合用藥可大幅增加胰腺癌細胞的凋亡。需要再次強調(diào)的是，單加紫杉醇或C6神經(jīng)酰胺的體外抗胰腺癌作用很有限，必須聯(lián)合加二者。此外體外的細胞分子機制研究發(fā)現(xiàn)，紫杉醇和C6神經(jīng)酰胺聯(lián)合用藥大幅抑制細胞存活通路AKT/mTOR。以上的實驗研究表明，短鏈神經(jīng)酰胺對體外培養(yǎng)的多種人胰腺癌細胞株(PANC-1、 MIA Paca2、L3. 6)均具有增殖抑制作用。盡管如此，我們的研究認為單加外源性的短鏈神經(jīng)酰胺并不能有效的誘導(dǎo)胰腺癌細胞凋亡。短鏈神經(jīng)酰胺及其藥物制劑需要聯(lián)合紫杉醇后才具有很好的抗胰腺癌作用，表現(xiàn)在對體外人胰腺癌細胞具有顯著的抑瘤活性(達到80% )， 其抑癌活性明顯優(yōu)于單用紫杉醇20%抑癌效果。同時也優(yōu)于目前市面上胰腺癌經(jīng)典藥物吉西他濱的化療作用，單用吉西他濱的化療作用低于30 %。實施例6 :C6神經(jīng)酰胺對胰腺癌細胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用。實驗動物2個月齡的BALB/c雄性裸鼠(購自上海斯克萊實驗動物公司)，共20
P試驗方法按以下方法建立在體裸鼠胰腺癌模型裸鼠靠近右大腿皮下注射IX IO6的L3. 6 胰腺癌細胞株，2周后，待可見50mm3實體腫瘤后，根據(jù)腹腔內(nèi)給藥量的不同，將裸鼠按每組 5只分成4組，分別為不給藥的對照、C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg)、紫杉醇(3mg/kg)、C6神經(jīng)酰胺(10mg/kg) +紫杉醇(3mg/kg)。按前6天每天給藥一次，后6天每2天給藥一次的方式進行給藥，共進行12天。每周2次記錄裸鼠存活率、體重及腫瘤大小，共記錄6周，記錄結(jié)果見圖9 圖14。由圖中可以看出外源性單加紫杉醇或C6神經(jīng)酰胺，裸鼠存活率(圖9)、腫瘤大小(圖1 和不給藥的對照組沒有明顯區(qū)別；但是聯(lián)合或者組合給予紫杉醇和C6神經(jīng)酰胺，卻能夠大幅抑制腫瘤生長(圖12)，減少腫瘤體積(圖11、圖13)，延長裸鼠存活時間，增加裸鼠存活率(圖10)。此外該聯(lián)合療法對裸鼠體重影響不大，說明其對正常組織和細胞毒性作用有限 (圖14)。給藥后不同時間裸鼠存活率和平均腫瘤體積見圖9和圖11。以上的實驗研究表明，短鏈神經(jīng)酰胺和紫杉醇對接種胰腺癌細胞的裸鼠移植瘤均具有一定的抑瘤活性，但是單加外源性的短鏈神經(jīng)酰胺或紫杉醇的抑瘤效果有限。短鏈神經(jīng)酰胺及其藥物制劑需要聯(lián)合紫杉醇后才對接種胰腺癌細胞的裸鼠移植瘤具有顯著的抑瘤活性。 綜上所述，從上述的離體試驗(實施例5)及在體試驗(實施例6)可以看出，外源性的C6神經(jīng)酰胺及其藥物制劑可作為紫杉醇類抗微管藥物的增敏劑，有效提高胰腺癌化療的效果，且無明顯毒副作用，可見短鏈神經(jīng)酰胺是一種很有前景的抗胰腺癌藥物。
權(quán)利要求
1.攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，包括支架本體(1)，其特征在于所述支架本體(1) 上攜帶治療有效劑量的短鏈神經(jīng)酰胺。
2.如權(quán)利要求1所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述短鏈神經(jīng)酰胺為C2神經(jīng)酰胺、C4神經(jīng)酰胺、C6神經(jīng)酰胺或C8神經(jīng)酰胺。
3.如權(quán)利要求1所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述短鏈神經(jīng)酰胺以藥物膜層的形式結(jié)合固定在支架本體(1)表面上。
4.如權(quán)利要求3所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述藥物膜層的形成方式為將含有短鏈神經(jīng)酰胺的溶液直接噴涂或浸涂在支架本體(1)表面，再將帶有涂層的支架本體(1)真空干燥，固化，即獲得本發(fā)明的藥物支架。
5.如權(quán)利要求1所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述短鏈神經(jīng)酰胺通過物理、化學(xué)或機械的結(jié)合方式結(jié)合固定在支架本體(1)上。
6.如權(quán)利要求1所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述支架本體(1) 上裹覆有支架包膜，所述短鏈神經(jīng)酰胺通過物理、化學(xué)或機械的結(jié)合方式結(jié)合固定在支架包膜上。
7.如權(quán)利要求5或6所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述的物理結(jié)合方式包括電鍍方式和焊接方式，所述化學(xué)結(jié)合方式為化學(xué)鍵合方式，所述機械結(jié)合方式包括粘貼方式、纏繞方式和涂抹方式。
8.如權(quán)利要求1所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述支架本體(1) 采用高分子聚合材料制成，所述高分子聚合材料是聚己酸丙酯、聚乳糖、聚羥基乙酸、聚己內(nèi)酯、可降解聚氨酯、聚乙二醇和聚羥基丁酸戊酸酯可降解聚合物材料中的一種或是幾種可降解聚合物材料的共聚物或共混物，高分子聚合材料的分子量為0. 1-100萬。
9.如權(quán)利要求1所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述支架本體(1) 上還攜帶有控制藥物釋放行為的阻滯劑、致孔劑及其它填充物；所述阻滯劑指以下一種或幾種的混合物高級硬脂酸、高級脂肪醇、硬脂酸甘油醇、硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣；所述的致孔劑指以下一種或幾種物質(zhì)的混合物聚乙烯、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇、甲基纖維素、羥丙甲纖維素；所述其他填充物指其他一切可改變藥物釋放行為的生物相容性物質(zhì)。
10.如權(quán)利要求3所述的攜帶短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架，其特征在于所述藥物膜層外設(shè)有緩釋層，緩釋層由不可降解材料組成，所述的不可降解材料指以下一種或幾種物質(zhì)的混合物派瑞林(聚對二甲苯的商品名.Parylene)或其衍生物、聚四氟乙烯(PTFE)、聚乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡膠、聚苯乙烯-異丁烯共聚物、聚氨酯、聚丙烯酸酯及其衍生物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種攜帶治療有效劑量的短鏈神經(jīng)酰胺的藥物支架。包括支架本體，其特征在于所述支架本體上攜帶治療有效劑量的短鏈神經(jīng)酰胺。本發(fā)明的支架本體上攜帶的神經(jīng)酰胺藥物可直接接觸腫瘤組織，再配合全身用紫杉醇類抗微管細胞毒性藥物化療，可明顯抑制腫瘤的生長，促進腫瘤細胞凋亡，降低管腔的再狹窄率，支架本體采用高分子聚合材料制成，具有良好的組織相容性，對管腔壁完成一定時間的機械支持后可自行降解，降解產(chǎn)物對組織無毒副作用，無需二次手術(shù)取出；而且支架本體加入可降解聚合物助劑，可提高支架本體的韌性、可塑性和可加工性，并可根據(jù)臨床需要調(diào)控支架的降解速度和藥物釋放速度，使其符合臨床需求，增加可控性。
文檔編號A61L31/10GK102363052SQ201110344708
公開日2012年2月29日 申請日期2011年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月3日
發(fā)明者劉超英, 湯韻, 沈偉, 王彤, 許雋穎, 郭繼中, 陸培華, 陳敏斌 申請人:陸培華, 陳敏斌