專利名稱：一組新的抗菌肽及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一組抗菌肽、其制備方法及在制備治療細(xì)菌、真菌、病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
抗菌肽是生物體經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽，一般由20-60個氨基酸組成，分子量在2000-7000D左右。隨著醫(yī)學(xué)免疫學(xué)和分子生物學(xué)的迅速發(fā)展，抗菌肽的研究越來越成為生物技術(shù)與生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的熱門課題。至今為止，在許多動物(尤其是昆蟲)、植物、微生物和人體上已發(fā)現(xiàn)了超過200多種抗菌肽，這類短肽不僅對細(xì)菌、真菌有廣譜的殺菌作用，而且對病毒、原蟲及癌細(xì)胞也有攻擊作用。臨床試驗(yàn)也表明，在機(jī)體感染病菌或可能導(dǎo)致病菌感染的情況下，抗菌肽能快速殺滅已侵入的病菌，并且能阻止病菌的繼續(xù)侵染。隨著對抗菌肽一級結(jié)構(gòu)和高級結(jié)構(gòu)研究的不斷深入，已有許多研究者對這些抗菌肽的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在模擬膜的疏水環(huán)境下，分子中的α “螺旋度與其殺菌活性密切相關(guān)。另外研究結(jié)果表明抗菌肽是通過破壞膜的完整性使得細(xì)菌細(xì)胞膜滲漏而殺死細(xì)菌(NakajimaY. etal.，J. Biol. Chem, 262 1665-1669 ；ZasloffM. Nature,2002,415 389-395)。因此有人試圖通過增加分子中α-螺旋結(jié)構(gòu)或提高多肽中含正電荷氨基酸的比 歹舌個生白勺$月太(Broth W. B. etal. ,Antimicrobial Agents Chemotherapy, 2001,45 1894-1895 ；HongS. Y. etal.，P印tides，2001，22 :1669_1674)。美國專利6，316，594公開了天然抗菌肽parasinl，它是一種新的從鯰魚中分離出來的，是由鯰魚在表皮損傷時為防止微生物的入侵其上皮粘膜層產(chǎn)生出一種具有很強(qiáng)抗菌作用的多肽，屬于α “螺旋抗菌肽，分子量為2000. 4Da,由19個氨基酸殘基組成，序列為 Lys Gly Arg Gly Lys Gln Gly Gly Lys Val Arg Ala Lys Ala Lys Thr Arg Ser Ser0盡管專利文獻(xiàn)中的Parasin I對微生物表現(xiàn)出非常有效的廣譜抗菌活性，包括革蘭陽性和革蘭陰性細(xì)菌以及真菌，而且沒有任何溶血性。它合成的衍生物也具有有效的活性。但是在我們實(shí)驗(yàn)中卻發(fā)現(xiàn)其殺菌活性較低，天然序列很難應(yīng)用于臨床，但是Parasin I基本沒有溶血性，它的一些相關(guān)的序列改造和功能應(yīng)用方面的開發(fā)還進(jìn)行的較少。所以本發(fā)明想通過對Parasin I序列的改造，得到殺菌活性更強(qiáng)的有藥用開發(fā)價值的抗菌肽，即可以形成新的專利技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之一是提供一組抗菌肽。本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之二是提供一組抗菌肽的制備方法。
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題之三是公開所述抗菌肽的應(yīng)用。本發(fā)明的發(fā)明構(gòu)思是這樣的我們在經(jīng)過多次試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)在Parasin I序列中間隔插入疏水性氨基酸和帶正電荷的氨基酸后，形成兩個疏水氨基酸和兩個正電荷氨基酸交替排布的序列，這樣的結(jié)構(gòu)減低毒性并提高殺菌活性。經(jīng)過改造后篩選到以下12條序列， 抑殺菌試驗(yàn)證明其殺菌活性有較大的提高。而溶血毒性基本沒有變化，非常有希望用于治療細(xì)菌感染的新藥的開發(fā)。本發(fā)明提供的抗菌肽是在對天然抗菌肽的序列、結(jié)構(gòu)分析的基礎(chǔ)上設(shè)計合成的， 它們的這一系列序列被命名為GKV，序列如下
碼基因克隆到載體上，然后在宿主細(xì)胞中表達(dá)后獲得。其中表達(dá)載體可以是質(zhì)?；虿《局械囊环N，宿主細(xì)胞可以是原核細(xì)胞，包括大腸桿菌、枯草芽孢桿菌等，宿主細(xì)胞也可以是真核細(xì)胞、包括酵母細(xì)胞、植物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞等。制備的抗菌肽可通過質(zhì)譜鑒定。為了深入研究本發(fā)明這類生物學(xué)活性抗菌肽的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系，利用美國應(yīng)用系統(tǒng)生物公司生產(chǎn)的Pioneer多肽合成儀制備本發(fā)明公開的一組抗菌肽和作為對照的抗菌肽，以進(jìn)行研究。利用96孔板法檢測多肽的殺菌活性(In Yup Park etc ；FEBS Letters ； 437(1998)258-262)以預(yù)先合成的天然抗菌肽 GramicidinS，parasinl, magaininll 為對照，進(jìn)行殺菌活性檢測。結(jié)果表明本發(fā)明抗菌肽的殺菌活性強(qiáng)于所述三種天然抗菌肽的殺菌活性?？咕脑诟咝⒕耐瑫r也有可能作用于高等有機(jī)體包括人體細(xì)胞，因?yàn)榭咕牡淖饔梅绞蕉际窃诩?xì)胞膜上穿孔使得細(xì)胞發(fā)生滲漏死亡。所以把抗菌肽能否使紅細(xì)胞發(fā)生滲漏作為其是否有毒性的一個標(biāo)準(zhǔn)，如果抗菌肽能使紅細(xì)胞中的血紅蛋白發(fā)生滲漏，就可以通過檢測OD49tl值確定毒性的大小。因此本發(fā)明還檢測了抗菌肽對人體紅細(xì)胞的溶血活性，實(shí)驗(yàn)表明，抗菌肽溶血率值很低，證實(shí)本發(fā)明抗菌肽的溶血毒性極小。此外，又對本發(fā)明抗菌肽進(jìn)行動物體內(nèi)急性毒性試驗(yàn)，證明抗菌肽無毒性作用。又進(jìn)行抗菌肽對小白鼠急性感染金黃色葡萄球菌的抑制作用的試驗(yàn)，表明抗菌肽對金黃色葡萄球菌感染有顯著的抑制作用。本發(fā)明提供一組新的人工設(shè)計合成的抗菌肽?？煞奖愕夭捎霉滔嗷瘜W(xué)法制備或?qū)⒕幋a抗菌肽的基因克隆到載體上，然后進(jìn)入宿主細(xì)胞中表達(dá)后獲得。該抗菌肽對革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、真菌、病毒具有廣譜殺傷活性，并較天然抗菌肽有更強(qiáng)的殺菌活性，但對動、植物細(xì)胞無任何毒害作用。并通過抗菌肽對金黃色葡萄球菌急性感染殺菌活性的小鼠試驗(yàn)顯示抗菌肽給予0. 25mg/kg劑量，就能達(dá)到100%殺菌抑制率，而作為殺滅金黃色葡萄球菌特效藥的萬古霉素要給予4. Omg/kg劑量才能達(dá)到100%的殺菌抑制率，表明本發(fā)明抗菌肽對金黃色葡萄球菌急性感染有很顯著的殺菌效果，因此本發(fā)明抗菌肽可應(yīng)用于制備治療革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌或真菌感染引起的疾病的藥物。


圖1是抗菌肽GKV-4的質(zhì)譜圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1抗菌肽的固相化學(xué)合成制備及分離純化按上述序列制備GKV-I到GKV-12,同時制備Gramicidins, parasinl和 magaininll作為對照。GramicidinS 的序列Val Orn Leu Phe Pro Val Orn Leu Phe ProParasinl 的序列Lys Gly Arg Gly Lys Gln Gly Gly Lys Val Arg Ala Lys Ala Lys Thr Arg Ser Sermagaininll 的序列Gly lie Gly Lys Phe Leu His Ser Ala Lys Lys Phe Gly Lys Ala Phe Val Gly Glulie Met Ash Ser本實(shí)施例采用固相化學(xué)法合成，所用儀器為美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司生產(chǎn)的 Pioneer多肽合成儀。合成的多肽經(jīng)過高濃度的TFA剪切后，用反向柱純化，純化后的多肽通過質(zhì)譜鑒定。具體試驗(yàn)步驟如下1、抗菌肽的制備(以制備0. Immol量的GKV-I為例)以下所有制備抗菌肽的試劑均購于美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司。
制備的GKV-I多肽序列為N-Lys Gly Val Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Cys Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala Leu Lys-C制備從C端到N端逐個進(jìn)行，由合成儀自動控制。首先稱量0. Immol的結(jié)合了第一個氨基酸即Arg的樹脂(購于美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司)，裝柱，再用20%哌啶二甲基甲酰胺溶液脫保護(hù)，二甲基甲酰胺清洗，9-笏甲氧羰基(Fmoc)保護(hù)的游離氨基酸溶解于碳二亞胺(DCC)，羥基苯并三唑(HOBt)/二異丙基乙基胺(DIPEA)，溶解后的溶液在柱上循環(huán)偶合反應(yīng)30分鐘，二甲基甲酰胺清洗重復(fù)以上脫保護(hù)到偶合反應(yīng)步驟直到制備結(jié)束(具體操作步驟見pioneer多肽合成儀操作指南)。制備后的多肽經(jīng)如下步驟剪切取下反應(yīng)后的樹脂，加入B型剪切液(88%三氟乙酸，5%苯酚，5%水，2%三異丙基硅烷)，室溫反應(yīng)2小時，過濾，濾出液中加入10倍體積的預(yù)冷無水乙醚，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，收集沉淀并室溫干燥。2、抗菌肽純化稱量一定量干燥后的多肽，溶于0. 三氟乙酸，樣品處理后經(jīng)反向柱分離(洗脫液為含80%乙氰的0. 1 %三氟乙酸)，收集洗脫峰。實(shí)施例2抗菌肽GKV-4基因在大腸桿菌中的表達(dá)首先設(shè)計合成編碼抗菌肽的GKV-4基因，將其克隆到PGEX-4T1載體上(購自 Amersham Pharmcia Biotech公司)，然后轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)GST-GKV-4 融合蛋白，再經(jīng)凝血酶切割后，得抗菌肽GKV-4。實(shí)施例中使用的ATP，IPTG，T4多聚核苷酸激酶、T4DNA連接酶，Klenow酶、限制性內(nèi)切酶除特別指明外均為BIOLAB公司產(chǎn)品，割膠回收試劑盒為上海生工公司產(chǎn)品，寡聚核苷酸為上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。凝血酶剪切試劑盒購于SIGMA公司。有關(guān)DNA的分離、純化、PCR擴(kuò)增、酶解、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化宿主菌、片段回收、連接等分子克隆操作均按照J(rèn).沙姆布魯克等編著的《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》進(jìn)行。大腸桿菌JM109培養(yǎng)在液體或固體的LB培養(yǎng)基中。采用大腸桿菌偏愛的密碼子設(shè)計編碼優(yōu)選抗菌肽GKV-4基因的DNA序列，序列如下。在抗菌肽GKV-4基因的5’端引入酶切位點(diǎn)BamHI (GGATCC)，在3’端加上終止密碼子 (TAG)，所得構(gòu)建基因的長度為72bp。通過DNA合成儀直接合成該核苷酸片斷。首先用PCR方法對基因進(jìn)行擴(kuò)增。設(shè)計一對引物5，-CCTAGGTTTCCACA-3，和 5，-GATGAAGTTTCG-3，。PCR 反應(yīng)條件如下94°C，30 秒；45 °C，45秒；72 °C，30秒；反應(yīng)30個循環(huán)。PCR反應(yīng)后將該片斷經(jīng)過Klenow酶補(bǔ)平后用 BamHI酶切，酶切片斷經(jīng)過割膠回收后(割膠回收操作參照試劑盒操作說明)與pGEX_4Tl 載體的BamHI和SmaI的雙酶切片斷連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109，轉(zhuǎn)化子通過SmaI酶切鑒定、篩選。轉(zhuǎn)化子經(jīng)過IPTG誘導(dǎo)表達(dá)GST-GKV-4融合蛋白。融合蛋白用GST親合柱純化后經(jīng)凝血酶切割后得到抗菌肽GKV-4，具體操作參照試劑盒操作說明。GKV-4蛋白序列Lys Gly Val Arg Lys Gly Ala Lys Arg Gln Gly Cys Lys Lys Leu Ala Arg Lys Ala Leu Lys
6
編碼GKV-4的核苷酸序列AAAGGTGGTTCGTAAAGGCGCCAAACGCCAGGGTTGCAAGAAACTTGCCCGTAAGGCTTTGAAG實(shí)施例3抗菌肽GKV-4基因在酵母細(xì)胞中的表達(dá)本實(shí)施例中使用的ATP，IPTG，T4多聚核苷酸激酶、T4DNA連接酶，Klenow酶、限制性內(nèi)切酶除特別指明外均為BIOLAB公司產(chǎn)品，割膠回收試劑盒為上海生工公司產(chǎn)品，寡聚核苷酸為上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。凝血酶剪切試劑盒購于SIGMA公司。設(shè)計合成編碼抗菌肽的GKV-4基因，經(jīng)過BamHI酶切與編碼GST的DNA序列連接，后將其連接到質(zhì)粒pBluescriptSKII (購自美國Mratagene公司)中，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5ci (購自武漢大學(xué)菌種保藏中心)，提取質(zhì)粒經(jīng)過測序證明序列正確后，質(zhì)粒經(jīng)過 EcoRI, XhoI酶切后連接到pPIC9載體(購自美國^witrogen公司)中，后轉(zhuǎn)化畢氏酵母菌株KM71 (購自美國hvitrogen公司)，甲醇誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白GST-GKV-4。有關(guān)DNA的分離、純化、PCR擴(kuò)增、酶解、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化宿主菌、片段回收、連接等分子克隆操作均按照J(rèn).沙姆布魯克等編著的《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》進(jìn)行。畢氏酵母菌株KM71培養(yǎng)在液體或固體的BMGY培養(yǎng)基中，甲醇誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白GST-GKV-4時酵母菌株培養(yǎng)在BMMY 培養(yǎng)基中，每隔M小時補(bǔ)加甲醇至終濃度為1%。采用酵母菌偏愛的密碼子設(shè)計編碼優(yōu)選抗菌肽GKV-4及GST的DNA序列。在抗菌肽GKV-4基因的5’端引入酶切位點(diǎn)BamHI (GGATCC)，在3’端加上終止密碼子(TAG)及 EcoRI酶切位點(diǎn)(GAATCC)，所得構(gòu)建基因的長度為78bp，同時在GKV-4基因前段接編碼GST 的DNA序列，同時在GST的DNA序列的5，端加了一個BioI酶切位點(diǎn)。GKV-4核苷酸片斷的制備通過DNA合成儀直接合成編碼GKV-4核苷酸片斷。然后用PCR方法對基因進(jìn)行擴(kuò)增。設(shè)計一對引物5 ’ -CCTAGGTTTCCACA-3 ’和 5，-CTTAAGGATGAAGTTTCG-3，。PCR 反應(yīng)條件如下:94 V，30 秒；45°C，45 秒；72°C，30 秒；反應(yīng)35個循環(huán)。編碼GST的DNA序列的的制備設(shè)計一對弓|物5’ -CTCGAGATGTCCCCTATACTAGGTT-3’5， -CAGTGCTACGCCGGCGAG-3，用以上引物擴(kuò)增pGEX-4Tl載體。PCR反應(yīng)條件如下94°C，30秒；45°C，45秒； 72°C，60秒；反應(yīng)30個循環(huán)。擴(kuò)增片段與質(zhì)粒的連接將GKV-4的PCR擴(kuò)增片斷經(jīng)過Klenow酶補(bǔ)平后用BamHI 和EcoRI酶切，酶切片斷經(jīng)過割膠回收后(割膠回收操作參照試劑盒操作說明)與編碼GST 的DNA擴(kuò)增序列的BamHI和XhoI酶切回收片段連接后與pBluescriptSKII的XhoI和EcoRI 酶切回收片段連接。連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a，轉(zhuǎn)化子經(jīng)過抗性、藍(lán)白斑、酶切鑒定后，進(jìn)一步經(jīng)過測序確定表達(dá)序列正確。提取質(zhì)粒經(jīng)》ιοΙ和EcoRI酶切回收小片段，與pPIC9的 XhoI和EcoRI酶切連接構(gòu)建成表達(dá)質(zhì)粒pPIC9-gst-GKV-4，轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a后經(jīng)氨芐青霉素抗性篩選轉(zhuǎn)化子。按文獻(xiàn)報道的方法(Clare JJ, etc.，Gene，1991，105 :205-212)制備畢氏酵母KM71的感受態(tài)細(xì)胞，并將Mel單酶切的線性化重組質(zhì)粒pPIC9-gst-GKV-4經(jīng)電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞，電轉(zhuǎn)化的條件為1. 5KV，22. 5uF。將電轉(zhuǎn)化的酵母細(xì)胞涂板于YPD 平板，30°C培養(yǎng)兩天后，篩選表達(dá)融合蛋白的陽性克隆。轉(zhuǎn)化子經(jīng)過甲醇誘導(dǎo)表達(dá)GST-GKV-4融合蛋白。融合蛋白用GST親合柱純化后經(jīng)CN 102391364 A
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凝血酶切割后得到抗菌肽GKV-4，具體操作參照試劑盒操作說明, Thr Arg Lys Trp Val Lys Pro Lys lie Ala Met Phe Leu Tyr Cys Phe
Trp Pro
Arg Gly Ala Leu
GST--GKV--4融合蛋白序列LeuGluMetSerProlieLeuGlyTyrTrpLyslieLysGlyLeuValGlnLeuLeuLeuGluTyrLeuGluGluLysTyrGluGluHisLeuTyrGluArgAspGluGlyArgAsnLysLysPheGluLeuGlyLeuGluPheProAsnLeuProTyrTyrlieAspGlyLeuTheGlnSerMetAlalielieArgTyrlieAlaAspLysHisAsnMetLeuGlyGlyGluArgAlaGlulieSerMetLeuGluGlyAlaValLeuAsplieArgTyrGlyValSerTyrSerLysAspPheGluTheLeuLysValAspPheLeuSerLysLeuProGluMetLeuGluAspArgLeuCysHisLysTheTyrLeuAsnGlyAspHisValTheHisProAspPheAspAlaLeuAspValValLeuTyrMetAspProMetCysLeuAspAlaPheProLysLeuLysLysArglieGluAlalieProGlnlieAspLysTyrLeuLysSerSerLysTyrlieLeuGlnGlyTrpGlnAlaThePheGlyGlyGlyAspHisProProLysSerAspLeuValSerLysGlyValArgLysGlyAlaLysArgGlnGlyCysLysLysLeuAlaArgLysGST--GK V-4 核苷·陵序列
CTCGAGATGTCCCCTATACTAGGTTATTGGAAAATTAAGGGCCTTGTGC
AACCCACTCGACTTCTTTTGGAATATCTTGAAGAAAAATATGAAGAGC
ATTTGTATGAGCGCGATGAAGGTGATAAATGGCGAAACAAAAAGTTTG
AATTGGGTTTGGAGTTTCCCAATCTTCCTTATTATATTGATGGTGATGTT
AAATTAACACAGTCTATGGCCATCATACGTTATATAGCTGACAAGCACA
ACATGTTGGGTGGTTGTCCAAAAGAGCGTGCAGAGATTTCAATGCTTG
AAGGAGCGGTTTTGGATATTAGATACGGTGTTTCGAGAATTGCATATAG
TAAAGACTTTGAAACTCTCAAAGTTGATTTTCTTAGCAAGCTACCTGAA
ATGCTGAAAATGTTCGAAGATCGTTTATGTCATAAAACATATTTAAATGG
TGATCATGTAACCCATCCTGACTTCATGTTGTATGACGCTCTTGATGTTG
TTTTATACATGGACCCAATGTGCCTGGATGCGTTCCCAAAATTAGTTTGT
TTTAAAAAACGTATTGAAGCTATCCCACAAATTGATAAGTACTTGAAATC
CAGCAAGTATATAGCATGGCCTTTGCAGGGCTGGCAAGCCACGTTTGGT
GGTGGCGACCAT V CTCCAAAATCGGATCTGGTTCCGCGTAAAGGTGTTC
GTAAAGGCGCCAAACGCCAGGGTTGCAAGAAACTTGCCCGTAAGGCTTTGAAGTAGGAATTC實(shí)施例4抗菌肽的鑒定如圖1所示，制備的抗菌肽GKV-4經(jīng)過質(zhì)譜分析，GKV-4在質(zhì)譜圖中顯示的分子量為23M.0。由多肽序列計算出的理論值為23 . 0。證明制備的多肽即為設(shè)計的GKV-4抗菌肽。鑒定合格的抗菌肽產(chǎn)物備用?？咕腉KV-1，GKV-2及本發(fā)明公開的其它抗菌肽，天然抗菌肽Gramicidins， parasinl和magaininll可以采用GKV-4抗菌肽的制備方法制備。實(shí)施例5抗菌肽的殺菌活性檢測以下實(shí)施例中所使用的各種菌株購于中國生物制品檢定所。采用96孔板法對抗菌肽的殺菌活性進(jìn)行檢測，并用固相化學(xué)法合成的抗菌肽 Gramicidins (S)，parasinl (I)和magaininll (II)作為對照，并用固相化學(xué)合成法合成本發(fā)明中的12條抗菌肽GKV-I到GKV-12，檢測它們的殺菌活性。按以下步驟進(jìn)行測定抗菌肽的殺菌活性菌種復(fù)蘇，接種斜面37°C培養(yǎng)過夜，挑菌于普通LB培養(yǎng)基中，37°C培養(yǎng)過夜，稀釋菌液使菌濃度為104-105CFU/ml，按每孔IOOul菌液接種于96孔板中，將多肽以一定比例稀釋后，每孔中加入10ul，將96孔板置于37°C培養(yǎng)過夜，酶標(biāo)儀檢測OD620值(In Yup Park etc ；FEBS Letters ；437 (1998) 258-262)。檢測結(jié)果見表 1。含有抗菌肽的細(xì)菌的生長濃度(OD62tl)與不加抗菌肽的細(xì)菌的生長濃度的比值大于90%時的抗菌肽濃度即為最小抑菌濃度(最小抑菌濃度(MIC)定義為顯著抑制細(xì)菌生長的最低的濃度)。表1幾種抗菌肽對不同細(xì)菌的抗菌活性最小抑菌濃度(ug/ml)的比較
權(quán)利要求
1.一組抗菌肽，其特征在于，所述抗菌肽的氨基酸序列為序列表中所示的SEQ ID No.9-11。
2.權(quán)利要求1所述抗菌肽的在制備治療革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌或真菌感染的藥物中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一組新的抗菌肽，這些抗菌肽具有比天然抗菌肽更強(qiáng)的殺菌活性，對各種致病菌的殺滅效果都很好。本發(fā)明還公開了該組抗菌肽的制備方法，可以用固相化學(xué)法合成，也可以通過基因工程表達(dá)獲得。本發(fā)明合成抗菌肽可以用于制備治療革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌或真菌感染引起的疾病的藥物。
文檔編號A61P31/10GK102391364SQ20111035971
公開日2012年3月28日 申請日期2004年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月16日
發(fā)明者李國棟, 黃青山 申請人:上海高科聯(lián)合生物技術(shù)研發(fā)有限公司