專利名稱：：一種白芍總苷的新用途及其藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種白芍總苷的新用途及其藥物組合物。屬于藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：腸易激綜合征(IrritableBowelSyndrome,IBS)最早于1820年由Powell報(bào)道，屬于胃腸功能紊亂性疾病，指一組包括腹痛、腹脹、排便習(xí)慣和大便性狀異常，持續(xù)存在或間歇發(fā)作，而無(wú)形態(tài)學(xué)和生化異常改變的癥候群，是臨床上最為常見的功能性胃腸病之一。目前IBS診斷主要以癥狀學(xué)為依據(jù)并建立在排除器質(zhì)性疾病的基礎(chǔ)上。近年來(lái)許多研究顯示胃腸動(dòng)力障礙和內(nèi)臟感覺異常是本病癥狀的主要病理生理基礎(chǔ)，而其發(fā)病明顯受到心理社會(huì)因素的影響。各地研究報(bào)道顯示IBS是一種世界范圍內(nèi)的常見病、多發(fā)病，其發(fā)病率相當(dāng)高。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，西方國(guó)家的人群患病率約9%_22%，以女性較男性多見，比例約21-31。在我國(guó)所進(jìn)行的調(diào)查顯示，北京地區(qū)IBS的人群患病率是(羅馬標(biāo)準(zhǔn))-7%(Manning標(biāo)準(zhǔn))，廣東地區(qū)用羅馬Π標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查的IBS人群患病率為5.67%，中國(guó)人群患病率估計(jì)在20%。IBS的病因與發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，盡管人們不斷提出各種假說(shuō)試圖闡明其發(fā)病機(jī)制及病理生理，但都不能以一種單一的發(fā)病機(jī)制來(lái)完全解釋所有IBS的臨床表現(xiàn)，而且各種可能的發(fā)病機(jī)制間又有著相互的聯(lián)系。其發(fā)病機(jī)制包括動(dòng)力異常、內(nèi)臟感覺異常、腦-腸軸異常、炎癥、內(nèi)分泌異常、神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)調(diào)控異常及心理社會(huì)因素等。由于臨床上IBS的病因病機(jī)以肝郁脾虛型最為常見，因此多數(shù)醫(yī)家在治療腹瀉型IBS時(shí)均采用疏肝健脾法為基礎(chǔ)隨證加減。常用的基礎(chǔ)方主要有四逆散、痛瀉要方、柴胡疏肝散、參苓白術(shù)散、逍遙散、芍藥甘草湯等。目前對(duì)芍藥甘草湯的某些有效部位進(jìn)行了研究，例如，專利號(hào)02156681.x，該專利中公開了芍藥甘草提取物可用于神經(jīng)、肌肉和內(nèi)臟的急慢性攣急疼痛的解痙止痛和養(yǎng)血護(hù)肝、解毒止痛，降酶退黃，治療急慢性病毒肝炎。芍藥甘草提取物中，白芍總苷、甘草三萜酸和甘草總黃酮的總含量大于50%；通過(guò)其實(shí)施例1、2可知，該提取物中含有白芍提取物約為32-35%，該白芍提取物中含有白芍總苷50%以上。其中，該專利還公開了白芍總苷、甘草三萜酸的制備方法，其中，白芍總苷的制備方法為將白芍用40-80%乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加蒸餾水，去除沉淀，濾液上大孔樹脂，先用水洗，再用20-95%乙醇洗脫，所得提取物中，白芍總苷含量高于50%。專利申請(qǐng)?zhí)?00610144333.7，該申請(qǐng)使用了前述專利(02156681.χ)中的芍藥甘草提取物，通過(guò)藥理學(xué)試驗(yàn)證明，芍藥甘草提取物可用于制備治療腸易激綜合征的藥物。該專利中還指出，芍藥甘草提取物給藥200mg/Kg時(shí)才具有顯著的藥效，將其換算成人用劑量為22.20mg/kg，即1.33g/人；結(jié)合專利號(hào):02156681.χ中的相關(guān)內(nèi)容可以推知，200mg的芍藥甘草提取物中含有白芍提取物約64-70mg，將其換算為成人用計(jì)量為7.1-7.8mg/Kg,即0.43-0.47g/人。白芍為芍藥甘草湯的組成藥物之一，為毛茛科植物芍藥I^aeonialactifloraPall.的根，具有養(yǎng)血斂陰、平抑肝陽(yáng)的功效，它主要含有單萜苷類化合物、三萜類化合物以及鞣質(zhì)等。其中，單萜苷類化合物主要有芍藥苷、白芍苷、氧化芍藥苷和苯甲酰芍藥苷等。目前，還未見將白芍總苷用于治療腸易激綜合征的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種白芍總苷的新用途。本發(fā)明的另一目的在于提供一種藥物組合物及其用途。本發(fā)明提供了白芍總苷在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。進(jìn)一步地，所述藥物是治療內(nèi)臟高敏感性腸易激綜合征的藥物。、進(jìn)一步地，所述藥物是治療腹痛、結(jié)腸功能紊亂的藥物。其中，所述白芍總苷中，單萜苷類成分的含量以苯甲酸計(jì)不得低于50%W/W。進(jìn)一步地，所述白芍總苷是由如下方法制備得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，濾液濃縮至無(wú)醇味后，加水溶解，取上清液備用；B、將步驟A所得上清液通過(guò)大孔吸附樹脂柱，先以水洗至無(wú)molish反應(yīng)，再用50-70%V/V乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，干燥，即得白芍總苷。更進(jìn)一步地，步驟A中，乙醇濃度為70%V/V；步驟B中，采用非極性或中極性的大孔吸附樹脂柱，以60%V/V乙醇洗脫。進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟B中，采用AB-8型大孔吸附樹脂柱。其中，所述藥物是以白芍總苷為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑；其中，每日用制劑中有效成分的含量以白芍總苷計(jì)為0.25g/人。本發(fā)明還提供了一種治療腸易激綜合征的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑白芍總苷1-3份、甘草總皂苷1-3份。進(jìn)一步地，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑白芍總苷1份、甘草總皂苷1份。其中，所述白芍總苷中，單萜苷類成分的含量以苯甲酸計(jì)不得低于50%W/W;所述甘草總皂苷中，含有皂苷的含量以甘草酸單銨鹽計(jì)不得低于50%W/W。進(jìn)一步地，所述白芍總苷是由如下方法制備得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，濾液濃縮至無(wú)醇味后，加水溶解，取上清液備用；B、將步驟A所得上清液通過(guò)大孔吸附樹脂柱，先以水洗至無(wú)molish反應(yīng)，再用50-70%V/V乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，干燥，即得白芍總苷；所述甘草總皂苷是由如下方法制備得到的(1)取甘草粗粉，先用80-95%V/V乙醇提取，提取液回收乙醇后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇萃取液備用；(2)步驟(1)的藥渣再用10-30%V/V乙醇提取，所得的提取液回收乙醇后，用正丁醇萃取，所得萃取液與步驟(1)所得正丁醇萃取液合并，回收正丁醇后，加水溶解，將上清液過(guò)大孔吸附樹脂柱，先用水洗至無(wú)molish反應(yīng)后，再用30-50%V/V乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，干燥，即得甘草總皂苷。進(jìn)一步地，步驟A中，乙醇濃度為70%V/V；步驟B中，采用非極性或中極性的大孔吸附樹脂柱，以60%V/V乙醇洗脫；步驟(1)中，選用95%V/V乙醇進(jìn)行提取；步驟O)中，用20%V/V乙醇提取，再選用非極性或中極性大孔吸附樹脂，以40%V/V乙醇洗脫。進(jìn)一步優(yōu)選地，步驟B中，采用AB-8型大孔吸附樹脂柱；步驟(3)中，選用DlOl型大孔吸附樹脂。其中，所述藥物組合物是以白芍總苷甘草總皂苷=11為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑；其中，每日用制劑中有效成分的含量以白芍總苷和甘草總皂苷的總質(zhì)量計(jì)為0.28g/人。本發(fā)明還提供了上述藥物組合物在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。進(jìn)一步地，所述藥物是治療內(nèi)臟高敏感性腸易激綜合征的藥物。、進(jìn)一步地，所述藥物是治療腹痛、結(jié)腸功能紊亂的藥物。白芍總苷、以及它與甘草總皂苷的混合物，可通過(guò)改善腸敏感性，降低結(jié)腸頻率、峰電位、峰峰值及峰面積，降低血漿中升高的CCK含量，升高血清中降低的GAS含量，顯著升高患者低水平的血清DA含量及降低結(jié)腸中增多的肥大細(xì)胞數(shù)，從而在對(duì)腸易激綜合征的治療中發(fā)揮顯著療效。同時(shí)，將白芍總苷和甘草總皂苷混合使用后，僅在低劑量下就能發(fā)揮顯著藥效，能夠用于腸易激綜合征的治療。白芍總苷、以及它和甘草總皂苷的混合物，能夠抑制腸易激綜合征所致的腹痛，改善結(jié)腸功能紊亂的現(xiàn)象，為臨床用藥提供了一種新的選擇。以下通過(guò)具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1白芍總苷的制備取白芍粗粉，以70%V/V乙醇為提取溶媒，溶媒用量為8倍量w/v，回流提取1.5h，共提取3次。過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮至無(wú)醇味，加適量水溶解，離心，取上清液，調(diào)節(jié)其濃度至lg/ml(每Iml藥液中含白芍藥材Ig)，藥液通過(guò)徑高比為120的AB-8大孔吸附樹脂柱(藥液與大孔吸附樹脂體積比為12)，藥液在樹脂柱上吸附30min后，以4BV蒸餾水洗去雜質(zhì)，收集6BV60%V/V乙醇洗脫液，流速為!3BV/h，減壓回收乙醇，濃縮液干燥后即得白芍總苷。白芍總苷中有效成分的含量測(cè)定以苯甲酸作為對(duì)照品，采用分光光度法，在230nm波長(zhǎng)處制定了標(biāo)準(zhǔn)曲線，并對(duì)白芍總苷進(jìn)行了含量測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果白芍總苷中單萜苷類成分的含量以苯甲酸計(jì)為50.12%W/W。實(shí)施例2甘草總皂苷的制備方法(1)取甘草粗粉，用20倍量95%乙醇滲漉，滲漉液過(guò)濾后，70°C減壓濃縮成稠膏狀，加熱水?dāng)嚢枞芙夂?，依次用石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，乙酸乙酯所得部分為總黃酮，正丁醇萃取液部分備用。(2)取步驟(1)所得濾渣，用20倍量20%V/V乙醇滲漉，滲漉液過(guò)濾后，提取液在60-70°C減壓濃縮至無(wú)醇味，再用水飽和正丁醇萃取，所得萃取液與步驟(1)所得正丁醇萃取液合并，減壓回收正丁醇后，殘?jiān)铀芙?，離心，取上清液，調(diào)節(jié)至一定濃度后，通過(guò)徑高比為120的DlOl大孔吸附樹脂柱，吸附流速1.5ml/min,以3BV蒸餾水洗去雜質(zhì)，收集5BV40%V/V乙醇洗脫液，流速為1.5ml/min，減壓回收乙醇，濃縮液干燥后即得甘草總皂苷。甘草總皂苷中有效成分的含量測(cè)定以甘草酸單銨鹽作為對(duì)照品，以5%香草醛-冰醋酸溶液及高氯酸作為顯色劑，采用分光光度法，在589nm波長(zhǎng)處制定了標(biāo)準(zhǔn)曲線，并對(duì)甘草總皂苷提取物進(jìn)行了含量測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果甘草總皂苷中皂苷的含量以甘草酸單銨鹽計(jì)為50.2%W/W。實(shí)施例3本發(fā)明藥物組合物的制備取實(shí)施例1制備的白芍總苷IOOg和實(shí)施例2制備的甘草總皂苷300g，再加入適量微晶纖維素，混勻后，裝膠囊，即得。實(shí)施例4本發(fā)明藥物組合物的制備取實(shí)施例1制備的白芍總苷300g和實(shí)施例2制備的甘草總皂苷100g，再加入適量可溶性淀粉和糊精，以乙醇為粘合劑，制粒，即得。以下通過(guò)藥效學(xué)試驗(yàn)進(jìn)一步證明本發(fā)明的有益效果。本發(fā)明的藥效實(shí)驗(yàn)中，均采用冰醋酸、芥末油制作腸易激綜合征(IBS)模型，對(duì)目標(biāo)藥物進(jìn)行藥效研究。本發(fā)明所用具體造模方法，是采用朱力陽(yáng)等報(bào)道的內(nèi)臟高敏感性模型建立的(朱力陽(yáng)，等，《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》，2010年沈卷2期，267-269頁(yè))。該造模方法，在一段時(shí)間內(nèi)連續(xù)給予化學(xué)刺激后，出現(xiàn)了明顯的IBS臨床表現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)表明，該方法重復(fù)性良好。實(shí)驗(yàn)例1白芍總苷治療冰醋酸內(nèi)臟高敏感性IBS疾病模型的實(shí)驗(yàn)研究1.1材料和方法L1.1藥物1.1.1.1受試藥物白芍總苷(由實(shí)施例1制備得到)。1.1.1.2陽(yáng)性藥物曲美布丁片，天津田邊制藥有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)0905005，規(guī)格0.Ig/片X20片/盒。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成濃度為2%(每毫升含曲美布丁0.02g)的藥液，備用。1.1.1.3主要試劑0.5%冰醋酸(體積分?jǐn)?shù))，1.5%戊巴比妥鈉，生理鹽水，液體石蠟。1.1.2動(dòng)物SD大鼠，雌雄兼有，體重200士20g，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，許可證號(hào)SCXK(川)2008-11，檢疫后備用。1.1.3器材電子天平PA2003(上海天平儀器廠生產(chǎn))8F導(dǎo)尿管(湛江市事達(dá)實(shí)業(yè)有限公司)BL-420E生理機(jī)能儀(成都泰盟科技有限公司生產(chǎn))秒表、溫度計(jì)、卷尺、注射器1.1.4實(shí)驗(yàn)方法SD大鼠雌雄兼有，隨機(jī)分為空白組，模型組，自然恢復(fù)組，陽(yáng)性藥組，白芍總苷高、中、低劑量組。所有需造模大鼠禁食24h后，在清醒狀態(tài)下用鈍針頭經(jīng)肛門插入直腸灌注0.5%冰醋酸(體積分?jǐn)?shù))，5ml/kg,首劑劑量濃度加倍，連續(xù)6天，灌注后使大鼠頭部朝下，肛門朝上托10秒。從第7天開始，除空白組、模型組外，各組分別灌胃生理鹽水，2%曲美布丁，各組分高、中、低劑量藥液，IOmlAg01次/天，連續(xù)3天。末次給藥/造模前禁食Mh，末次給藥/造模后Ih經(jīng)肛門直腸擴(kuò)張(CRD)后，觀察動(dòng)物腹部撤離反射(AWR)，評(píng)價(jià)動(dòng)物的內(nèi)臟敏感性。腸敏感性測(cè)定結(jié)束后，立即用1.5%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉動(dòng)物，按外科常規(guī)手術(shù)行下腹正中切口，將自制針灸針銀電極埋置于結(jié)腸漿膜面，距回盲部約2cm，雙極的間距5mm，用BL-420E生理記錄儀同步描記胃腸電，時(shí)間常數(shù)^，高頻濾波0.3Hz0待波形穩(wěn)定后，記錄5分鐘內(nèi)的電生理活動(dòng)，計(jì)算頻率、峰電位、峰峰值、峰面積。1.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1、2。表1白芍總苷對(duì)冰醋酸所致IBS模型大鼠腸敏感性的影響(I±SD)il生藥給藥量~~提取物給藥量有效成分給藥組別抬腹閾值(ml)拱背閾值(ml)_(只)(g/kg)(mg/kg)量(mg/kg)__空白對(duì)照組8OMiO.Of0.78+0.08**~上BS模型組9-------0.56±0.040.62±0.04自然恢復(fù)組10——————0.62±0.110.68±0.12曲美布丁組10020.69+0.10**0.74+0.11~白芍總苷高劑量組9512562.650.65±0.160.72±0.17~白芍總苷中劑量組102.562.531.32~0.73±0.10"0.79±0.10*~白芍總苷低劑量組101.2531.2515.66~0.64+0.090.69+0.10~注與模型組比較*P<0.05，**P<0.01。表2白芍總苷對(duì)冰醋酸所致IBS模型大鼠結(jié)腸肌電的影響(f±SD)8權(quán)利要求1.白芍總苷在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述藥物是治療內(nèi)臟高敏感性腸易激綜合征的藥物。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述藥物是治療腹痛、結(jié)腸功能紊亂的藥物。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于所述白芍總苷中，單萜苷類成分的含量以苯甲酸計(jì)不得低于50%W/W。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于所述白芍總苷是由如下方法制備得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，濾液濃縮至無(wú)醇味后，加水溶解，取上清液備用；B、將步驟A所得上清液通過(guò)大孔吸附樹脂柱，先以水洗至無(wú)molish反應(yīng)，再用50-70%V/V乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，干燥，即得白芍總苷。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于所述藥物是以白芍總苷為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑；其中，每日用制劑中有效成分的含量以白芍總苷計(jì)為0.25g/人。7.一種治療腸易激綜合征的藥物組合物，其特征在于它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑白芍總苷1-3份、甘草總皂苷1-3份；優(yōu)選為，白芍總苷1份、甘草總皂苷1份。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于所述白芍總苷中，單萜苷類成分的含量以苯甲酸計(jì)不得低于50%W/W;所述甘草總皂苷中，含有皂苷的含量以甘草酸單銨鹽計(jì)不得低于50%W/W。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于所述白芍總苷是由如下方法制備得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，濾液濃縮至無(wú)醇味后，加水溶解，取上清液備用；B、將步驟A所得上清液通過(guò)大孔吸附樹脂柱，先以水洗至無(wú)molish反應(yīng)，再用50-70%V/V乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，干燥，即得白芍總苷；所述甘草總皂苷是由如下方法制備得到的(1)取甘草粗粉，先用80-95%V/V乙醇提取，提取液回收乙醇后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇萃取液備用；(2)步驟(1)的藥渣再用10-30%V/V乙醇提取，所得的提取液回收乙醇后，用正丁醇萃取，所得萃取液與步驟(1)所得正丁醇萃取液合并，回收正丁醇后，加水溶解，將上清液過(guò)大孔吸附樹脂柱，先用水洗至無(wú)molish反應(yīng)后，再用30-50%V/V乙醇洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，干燥，即得甘草總皂苷。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于步驟A中，乙醇濃度為70%V/V；步驟B中，采用非極性或中極性的大孔吸附樹脂柱，以60%V/V乙醇洗脫；步驟(1)中，選用95%V/V乙醇進(jìn)行提??；步驟O)中，用20%V/V乙醇提取，再選用非極性或中極性大孔吸附樹脂，以40%V/V乙醇洗脫。11.權(quán)利要求7-10任意一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明公開了白芍總苷在制備治療腸易激綜合征的藥物中的用途。本發(fā)明還公開了一種藥物組合物及其用途。本發(fā)明中白芍總苷、以及它與甘草總皂苷的混合物，可通過(guò)改善腸敏感性，降低結(jié)腸頻率、峰電位、峰峰值及峰面積，降低血漿中升高的CCK含量，升高血清中降低的GAS含量，顯著升高患者低水平的血清DA含量及降低結(jié)腸中增多的肥大細(xì)胞數(shù)，從而在對(duì)腸易激綜合征的治療中發(fā)揮顯著療效。同時(shí)，將白芍總苷和甘草總皂苷混合使用后，僅在低劑量下就能發(fā)揮顯著藥效，能夠用于腸易激綜合征的治療。白芍總苷、以及它和甘草總皂苷的混合物，能夠抑制腸易激綜合征所致的腹痛，改善結(jié)腸功能紊亂的現(xiàn)象，為臨床用藥提供了一種新的選擇。文檔編號(hào)A61K36/71GK102416048SQ201110401688公開日2012年4月18日申請(qǐng)日期2011年12月6日優(yōu)先權(quán)日2010年12月6日發(fā)明者彭成,朱力陽(yáng),李瑜,郭力申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)