專利名稱：丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒及其制備方法。
背景技術(shù)：
隨著生命科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和生物工程的發(fā)展，核酸及核酸衍生物以其獨(dú)特的藥理作用而廣泛用于一些大疾病如癌癥、心血管病、白血病、艾滋病等的治療。核酸藥物治療的核心是將核酸藥物導(dǎo)入特定的細(xì)胞中，并能穩(wěn)定地維持其功能，但由于細(xì)胞膜的阻隔，核酸藥物分子很難被直接轉(zhuǎn)移導(dǎo)入細(xì)胞。即使核酸藥物被轉(zhuǎn)移導(dǎo)入細(xì)胞，也存在病毒重組、致癌、免疫等多方面的問題，其安全性得不到保證；同時反義核酸、核酶、RNA干擾等核酸藥物易被體內(nèi)核酸酶降解，造成藥物在體內(nèi)不穩(wěn)定，半衰期短。因此，發(fā)展新型、高效、安全的核酸藥物轉(zhuǎn)移載體成為核酸藥物治療的關(guān)鍵。目前，在基因治療中采用的載體有兩種類型病毒載體和非病毒載體，其中病毒載體高效但易引起免疫反應(yīng)，安全性較差，非病毒載體毒性低，效率相對較低，因而研究如何改善非病毒載體的效率已成為當(dāng)今基因治療載體的研究方向。脂質(zhì)體已成為研究最為廣泛的非病毒載體，其具有廣譜、毒性較低和效率較高等特。脂質(zhì)體的化學(xué)結(jié)構(gòu)、尺寸大小、電荷比等是影響其基因轉(zhuǎn)染效率的關(guān)鍵因素。以環(huán)氧氯丙烷為原料，通過酸催化開環(huán)反應(yīng)、叔胺反應(yīng)、醚化和季銨鹽化反應(yīng)，合成疏水鏈長度不同、親水端部不同和不同物理結(jié)構(gòu)的丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)，利用其帶正電荷的季銨鹽頭部可通過靜電作用結(jié)合核酸藥物，利用帶長鏈的疏水端可與細(xì)胞壁膦脂雙分子層結(jié)合的特征，可望通過融合內(nèi)吞作用實現(xiàn)核酸藥物從胞外到胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于是提供一種丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒及其制備方法，以期該丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒能夠?qū)崿F(xiàn)核酸藥物從胞外到胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)。本發(fā)明所述的丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒，為碘化2，3-二烷氧基-1-0V，U-三甲基)丙銨或溴化2，3-二烷氧基-1-次#-二甲基-#-(2-羥乙基))丙銨，所述烷氧基為正辛基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基、正十八烷基。所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，包括如下步驟
(1)以環(huán)氧氯丙烷為原料，以一水合對甲基苯磺酸為催化劑，水為溶劑及反應(yīng)物，回流水解開環(huán)，經(jīng)柱層析分離純化得到無色液體3-氯-1，2-丙二醇；
(2)在氫氧化鈉存在下，步驟(1)所獲得的無色液體3-氯-1，2-丙二醇與#，#_二甲胺鹽酸鹽進(jìn)行叔胺化反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到黃色液體3-0V，#-二甲基胺基)-1，2_丙二醇；
(3)以四氫呋喃為溶劑，以氫化鈉為催化劑，3-0V，#-二甲基胺基)_1，2-丙二醇與烷基溴回流反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到2，3- 二烷氧基-1-0V，#- 二甲基)丙胺；(4)步驟C3)得到的2，3-二烷氧基-1-次#-二甲基)丙胺與碘甲烷進(jìn)行季銨鹽化反應(yīng)，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶純化處理得白色固體，經(jīng)超聲波振蕩水分散后得到相應(yīng)的丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體TMA- Apd納米顆粒。所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟
(1)以環(huán)氧氯丙烷為原料，以一水合對甲基苯磺酸為催化劑，水為溶劑及反應(yīng)物，回流水解開環(huán)，經(jīng)柱層析分離純化得到無色液體3-氯-1，2-丙二醇；
(2)在氫氧化鈉存在下，步驟(1)所獲得的無色液體3-氯-1，2-丙二醇與#，#-二甲胺鹽酸鹽進(jìn)行叔胺化反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到黃色液體3-0V，#-二甲基胺基)-1，2_丙二醇；
(3)以四氫呋喃為溶劑，以氫化鈉為催化劑，3-0V，#-二甲基胺基)_1，2-丙二醇與烷基溴回流反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到2，3- 二烷氧基-1-0V，#- 二甲基)丙胺；
(4)步驟(3)得到的2，3-二烷氧基-1-0V，#- 二甲基)丙胺與1-溴乙醇進(jìn)行季銨鹽化反應(yīng)，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶純化處理得白色固體，經(jīng)超聲波振蕩水分散后得到丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體HEDMA- Apd納米顆粒。所述步驟(1)的投料比為摩爾比1 :0. 002 4. 3的環(huán)氧氯丙烷一水合對甲基苯磺酸水；100°C回流反應(yīng)6h，濃縮，柱層析分離洗脫劑為體積比2 1的石油醚乙酸乙酯，制得3-氯-1，2-丙二醇。所述步驟⑵的投料比為摩爾比1 :5.5 :5.5的3-氯-1，2-丙二醇二甲胺鹽酸鹽氫氧化鈉；常溫攪拌反應(yīng)12h，柱層析分離洗脫劑為體積比10 1的乙酸乙酯甲醇，純化得到黃色液體3-0V，#- 二甲基胺基)-1，2-丙二醇。所述步驟(3)的投料比為摩爾比1 :2 :4的3-0V，#-二甲基胺基)-1，2-丙二醇 氫化鈉烷基溴；以四氫呋喃為溶劑，65°C回流M h，柱層析分離洗脫劑為體積比1 :1的乙酸乙酯石油醚，得黃色液體2，3-二烷氧基-1-伙，#-二甲基)丙胺，所述烷基溴為正辛基溴、正十二烷基溴、正十四烷基溴、正十六烷基溴、正十八烷基溴。所述步驟(4)的投料比為摩爾比1:10的2，3_ 二烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺碘甲烷；以乙腈為溶劑，81°C回流15h，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體碘化2，3-二烷氧基-1-(#，取#-三甲基)丙銨，超聲波振蕩水分散后得到陽離子脂質(zhì)體TMA- Apd納米顆粒。所述步驟(4)的投料比為摩爾比1 :5的2，3-二烷氧基-1-(#，#-二甲基)丙胺 1-溴乙醇；以乙腈為溶劑，81°c回流12h，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體溴化2，3-二烷氧基-1- {N,N- 二甲基tV- (2-羥乙基))丙銨，超聲波振蕩水分散后得到陽離子脂質(zhì)體HEDMA-Apd納米顆粒。所述乙腈用量為lg2，3_ 二烷氧基-1-0ν，Λ/_ 二甲基)丙胺使用20ml乙腈，不足 Ig按Ig計°本發(fā)明所述的主要優(yōu)點(diǎn)丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性好、粒度尺寸適中、粒徑分布窄、表面電荷適中、制備成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，能滿足DNA轉(zhuǎn)運(yùn)載體應(yīng)具備的基本要求。且原料成本低廉、合成操作簡易，能高效制備不同結(jié)構(gòu)的丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體。各種陽離子脂質(zhì)體經(jīng)水超聲分散后，所得陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的平均粒徑、PDI分布、Zeta表面電勢以及pH值見表1。表中數(shù)據(jù)表明，所得陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的平均粒徑為60-220nm ；PDI值小，粒徑分布相對集中；多數(shù)陽離子脂質(zhì)體納米顆粒具有較高的表面電勢G0-60 mv)和適中的pH值。上述各物理參數(shù)表明，所得的氨基酸陽離子脂質(zhì)體納米顆粒具有通過靜電作用結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)基因類藥物的潛力。表1水分散后陽離子脂質(zhì)體的平均粒徑、PDI分布、Zeta表面電勢以及pH值
Zeta表II電
+. 平均粒徑
PB離子脂Λ+丨$PD!勢pH.
nm
rnv
TMA-Apd-CS 105.10.416+5135.4
HEDm-Apd-CS 162.60.456+5/.45.4
TMA-Apd-Cll 60.640.426+53.45.8
HEDMA-Apd-C 12 97.880.360+49.95.4
TMA-Apd-CM 82.260.392+46.75.4
HEDMA-Apd-C M 137,40.397+44,65,8
TOA-Apd-C16 227.10.277+42,45.8
HEDMA-Apd-C M 203.50.411+5L85.4
TMA-Apcl-Cl 8 170.60.39S+57,55.4
HEDMA-Apci-Cig 215.90.320+40.15.

圖1為本發(fā)明的合成路線示意圖。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明的內(nèi)容，各丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體的代號與相應(yīng)的化學(xué)結(jié)構(gòu)分別在表2中列出。各丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體水分散后陽離子脂質(zhì)體的平均粒徑、PDI分布、Zeta表面電勢以及pH值在表2中列出。實施例1.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體TMA -Apd-C12納米顆粒的制備
向100 mL圓底燒瓶中依次加入環(huán)氧氯丙烷Q3.6 g, 260.0 mmol)、一水合對甲基苯磺酸(0. 10 g，0. 58 mmol)和水(20 mL)，回流反應(yīng)。TLC(石油醚乙酸乙酯=1 1)檢測，反應(yīng)6 h后，反應(yīng)無明顯變化，停止反應(yīng)，冷卻至室溫，反應(yīng)液變?yōu)榱咙S色，濃縮。經(jīng)柱層析(洗脫劑石油醚乙酸乙酯=2:1)分離，得無色液體3-氯-1，2-丙二醇
6(216g. 2KM)rrnriol, 80,8%) lHNMRiiWMHz, CDCl3J,4.M
ilir, 2 H, 2 -OMl , 3.91-3.89 ι, 1 H, -OTOHh J.71idcl. 1 H, J = J.5lte, J = 11 5 Hz. -CJtl IOH), 3,64-3,55 (m. 3 II. (Ii2CI aminC MMR
(125 MHz, CDCl3),靜m》U C, - *)Η), 65i> Cl C, -ClIjOH). 45.7 (1 C, -OijCI).
向50 mL圓底燒瓶中加入3-氯-1，2-丙二醇g，24. O mmol)和水(15 mL)。反應(yīng)混合液用冰水浴冷卻至0° C，攪拌下緩慢加入氫氧化鈉(5.0 g，120.0 mmol)。加畢后，待反應(yīng)混合液溫度升至常溫后，撤除冰水浴。加入二甲胺鹽酸鹽(10.0 g，123.4 mmol)，用橡膠塞密封，常溫攪拌12 h。TLC(乙酸乙酯甲醇=5 1)檢測，原料基本反應(yīng)完全。向反應(yīng)體系中加水(10 mL)，用三氯甲烷GO mL/次)萃取3次，合并有機(jī)相，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘留物經(jīng)柱層析(洗脫劑乙酸乙酯甲醇=10 :1)分離，得黃色液體 3- OV, N- 二甲基胺基)-1，2-丙二醇
(1,1 g- 9,7 mmd. 40/ %), 1HNMRtfCWMIiz. CrDCl2), Ijjpmlr 4.J Ibr. 2 H. 2-Oifh 371-3,68 I H. -CWOHit 3.55-J.i (m. 2 H. 2.42-2.15 Im, 8 H. -CHMCHA >d N(Cft):-J15C NMR(1.25 MHz., CDC'i/ ； CiS.J (1 C. -€ 0Η , ft乂 1 (1 C. - ,;ΟΗι, 62-1 tl C.45￡
ac. -Ntmu
向50 mL圓底燒瓶中加入見二甲基胺基-1，2-丙二醇(2.0 g，17. O mmol )和四氫呋喃QO mL)。反應(yīng)混合液用冰水浴冷卻至0° C，攪拌下分批緩慢加入氫化鈉(1. 6 g，68. O mmol)，加畢后，待反應(yīng)混合液溫度升至常溫，撤除冰水浴。緩慢滴加正十二烷基溴(8. 5 g， 34.0 mmol)，回流M h。TLC(乙酸乙酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，用水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘留物經(jīng)柱層析(洗脫劑石油醚乙酸乙酯 =1 1)分離，得亮黃色液體2，3_ 二正十二烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺
(2.6 g. 5 Jmiiwl, 33.5% 1U NMRCSOO MHz, €D€1；}. (ppmh 3.5T-3.-40 (m, 7 H, -CMH3^(Cili)i), 2 -C)C//iCH:iCH>},rH, ami 2.40-2.3 tin. H, -CiljNiCHsl2S. 2.25 (s% 6 H, -CII2HiCiZjli). L55-1.5 )im, 4 H, 2 -C)CH;C/#;ICH:),JCHJ} i .25-1.20 Im. 36 H, 2 -0€Ι^Μ2(βΗ:)(Γ ·^ 0.8 <t. 6 H, J — 7J) ili. 7 .OCHiCHj(CHj)9CI3Ii); 15C NMR (125 MHz, CDClih 82,73 CI C. -CHCHjN(CH,Sj), 724 (I C. -CH,CHCH;MCH:i),) 71 J. 70.5 12 C, 2 -OrH2CH1(CHi)ilCHj), 61.4 0 C. - CH2CHCH2NfCHb), 46.6(2 C. -ai2CHCH-NcO-I )>l, 32.2, 30.5, 30.0. 29 9. 29,8. 29.6. 26, ClS C- some signals were overlapped. 2 -OCH3C^H2ICH2J.,CtiiI. 22 9 12 C. 2 -OClliCHiCCHv).;CHsK 14,4 <2 C. 2 -CCH3CftiCH^Ciy,
向50 1^圓底燒瓶中加入2，3-二正十二烷氧基-1-(見#-二甲基)丙胺(1.0 g，2. 2 mmol)和乙腈QO mL)。攪拌下滴加碘甲烷(3. 1 g，21.8 mmol)，回流15 h。TLC (乙酸乙酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得黃色固體，用乙酸乙酯溶解，冷卻至室溫，有白色固體析出，過濾，得白色固體碘化2，3- 二正十二烷氧基-1-(見N, 三甲基)丙銨Ι Ι.6 g, t J)mmol, 45Λ%). 1H NMR(5I)0 MHi, CDCIj)^ (ppm) 4,08-4(m. 2 H. -CtfCH,N*iCH;.;h and -CHCWHK*(CH.,)；,). 3.69-3.39 (m, 7 H. ^ncmmicihh , and 2 -OCTI2CH^CIii kCllj) , 1.56 (s . 9 H . .CH5CHCHiN1ICM=JjJ. 1.56-1.52 Uii, 4 H. S-OCH2Ci^CHbkCHi), 1.2-5-1.18 (ra. 36 H. 2 ^OCU,CiMCHihClU. 0J7 <i. 6 H, J - T.l) Hz. 2 -OCHjCHi(CH2)iCHvK 15C NMRf 125MHz, CDCI1): 73,7(1 C, -CHCH^4CCH5I1J, 72.2HC, -CHiCHCHiH+(CH1)j). 69,4. 6S.2 (2 C. 2 -Offl2CHj(CHi)^CHi). 61,2 ft C, -CH;jN+f€H;s)3j. 55,4 Q C, -Nt(Oij)3I. 32,1, 30,1, 29.S, 29,7, 29J , 29.5 , 26—4. 26.2 (IS C, some signals were overlapped , 2 -οα ,^αI；J4CH5CH-J. 22. J. 21.S O C. I-OCHj(CH2)pClliCej), t-13 <2 C, 2 -OCIIjCI'WCHjjcrii ,,
取碘化2，3-二正十二烷氧基-1-(見見#-三甲基)丙銨(6.0 mg,0. Ol mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體TMA-Apd-C12納米顆粒，用ktasizer Nano ZS儀測得平均粒徑60. 64 nm, PDI分布0. 426，表面電勢+53. 4 mv, pH = 5. 8。
實施例2.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體HEDMA -Apd_C12納米顆粒的制備
向50 11^圓底燒瓶中加入2，3-二正十二烷氧基-1-伙，#-二甲基)丙胺(0.3 g，0. 7 mmol)和乙腈QO mL)，攪拌下滴加溴乙醇(0. 4 g，3. 5 mmol)，回流12 h。TLC(乙酸乙酯) 檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得黃色固體，用乙酸乙酯溶解，冷卻至室溫，有白色固體析出，過濾，得白色固體溴化2，3- 二正十二烷氧基-1-0V，#- 二甲基tV-(2-羥乙基))丙銨 10Jg, 0J4 nimol. 4SJ%), 1H HKIRl500 MHz, CDCliJ- (ppm) 5,01 ftr.
1H -CHiCH2OW, 4J 7-4,16 11, 2 H, -O^CH2OH). 4,08-1,06 (m. IH. -OTCH jH' (CH ihCH .("H2OH) . 3.91·3,8 {ιιι , 2 H , -OiiCHCH2N^ (CHs)2C IIiCHiOlI) ,1JCK169 _ .2 H . -CifjN'CCH^jCHiCHjOH), 3,56-3,53 Iill. 2.H, -CHiCW2OHl, 3.50-3,33 frtl. 10 H, .HtICHsJ2CHiCH2OH. 2 .OCjHjCHj(CHi)^CH J. 1.55-1.53 (in. 4 H,
2-OCHiCmCIIikCIIj), 1.25 -1.24 (in, 36 iL 2 -OcnjCHiiCJli^CHjJ, OJ; (t, 6 H J = 7.0 Hz, 2 .OCH2CCH:),CH:Cft}； "C NMRCl25 MHl CDCI.J； 73.6 (1 C , - CH2CHHijKICHjh CHiCHjOll) . 2J (1 C . -CHCH;:NnCHihCH;,CH;OH). 69.6 (1 C, -CHjH^CHjhCHjCHiOH), 6SJ (1 C, -CHiCH3OHJ. 67.6 ij C, - :.ΓΗ€Η,Η ΓΗ>1< :ΓΗ/)Η), 613. 67.3 (2 C, 2 -OCTl,CHi(CIIi)iiCHjJ. 56.2 {I C, -OIiCHiOHl, 54.0. 53.5 (2 C, -N1(CH5)2CHjCHiOm5 32,1. 30.2. 29.9, 29J, 29,7. 29,6, 26,4, 26.3 (18 Γ, some signals were overlapped. 2 -OCH^ifH>) (； ；( ,} 22.9, {2 C, 2 -OCHjCCHJIeCIIjCIIV . 14,3 12 C, 2 -OCHrfCHjliCHiCH:.:)^
取溴化2，3-二正十二烷氧基-1-伙，#-二甲基_#-(2-羥乙基))丙銨(5.8 mg,0.01 mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體HEDMA-Apd_C12納米顆粒，用Zetasizer Nano ZS 儀測得平均粒徑 97. 88 nm, PDI 分布 0. 360，表面電勢 +49. 9 mv, pH = 5. 4。實施例3.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體TMA -Apd-CS納米顆粒的制備
向50 mL圓底燒瓶中加入見二甲基胺基-1，2-丙二醇O. 3 g,20. 4 mmol )和四氫呋喃GO mL)。反應(yīng)混合液用冰水浴冷卻至0° C，攪拌下分批緩慢加入氫化鈉O. 0 g， 81.6 mmol)，加畢后，待反應(yīng)混合液溫度升至常溫，撤除冰水浴。緩慢滴加正辛烷基溴(7.9 g，40.8 mmol)，回流M h。TLC(乙酸乙酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，用水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘留物經(jīng)柱層析(洗脫劑石油醚乙酸乙酯=1 1)分離，得亮黃色液體2，3_ 二正辛烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺
il.Sg. 5,2 ιιιιιιοΙ 25,5%), ' NMRl500MHz, CDCliI (pprri)； 3.57-3,40 (m, 7 H, .CHCH,M(CH:ib). 2 .OOTCHi(CHj),CH; and -CT:CHCH; NiCH；),>, 2—40.2.32 2 H.山2M(s. 6 H, -CUMCH3')^. L55-l.53(m,
4 H, 2 -OCH,Cii-CCH2kCTI3). 1.344,17 (πι, 20 H, 2 -OCH..CH2iCI/iI5CH) 0J6 <t, 6 H, J = 7.0 H/. 2 -OCHiCHiiCHilsCWj) liiC NMR 1125 MHz, CDCI/h 82.73 (J C. -OlCH>N(CH3S2N C. -C-H2CHCIIjM(CHj)i). 71.6. 71,5 O C. 2 -OC CH;.iCHjI5CHiJ. Li Il C. - CHjCHCH2HCCH,)2), 46,J i2 C. -CH3CHCH2NfCH5JjJ. 3LS. 3CJ.I. 29.6. 29,4, 29.3. 26J (If) C. scene signals were overlapped , 2 -OCH；(CH21·ΓΗ^CHjJ , 22,6 (2 C . 2. -OCH2(CHACHiCH5). 14.0 <2 C, 7 -OCH2CHv(CH2)-CH3).
向50 11^圓底燒瓶中加入2，3-二正辛烷氧基-1-伙，#-二甲基)丙胺(1.1 g，3. 2 mmol)和乙腈QO mL)。攪拌下滴加碘甲烷5 g，32. O mmol)，回流15 h。TLC (乙酸乙
酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得橘黃色液體。經(jīng)柱層析(洗脫劑乙酸乙酯甲醇= 5 1)分離，得白色固體碘化2，3_ 二正辛烷氧基-I-OVjj-三甲基)丙銨
I1IH, 2 H, -OTCH5N'ICHjI3and -CHC/fflN' CHjhJ, 3,67-3,39 Cm, 16 H, -CHCHIiHt-(CHi)i , .C/ZiCHCHi+mCHikl . -CH2CllCH,N'lCtf3Js) and 2 -OcJI2CH2(CH2)SCH3)- 1.54-L50 Cm, 4 H, S-OCHiC^(CH2)5CH3I. 1.25-L23 (m. 20 H, 2 -OCH2CHj(CFi2)SCH3h I).斜 < , 6 H. J = 7.0 H^, 2 -OcilCH2(CILJnCIJl); 11C NMRll25 MHz, CDCl4 <1 C. -C11CH^T*{C H,)3) , 722 il C , -CHjCHCH2Ni(CHi)1:) , 69—4, 68.2 O C , 2 -OCH2CIIi^CHJtrHi). 61.2 (1 €, -CHiN^CHi),!, 55.3 O C, -MICH/ 31,9, 31,S. 30.] 29.5, 29,4. 29.3, 29,2, 26,2. 26,1 (IOC. some-sigiwb were overlapped , 2 -OCH2ICH^J;,CHiCH.} . 22.S . 22." (2 C . 2 ■0€Ηι( 1,);￡ €Η^, 14.2, 142 (2 C, 2 -OCHiCHiI5 CHiCH,).
取碘化2，3-二正辛烷氧基-1-(見見#-三甲基)丙銨mg,0.01 mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體TMA -Apd_C8納米顆粒，用ktasizer Nano ZS 儀測得平均粒徑105. 1 nm, PDI分布0. 416，表面電勢+51. 3 mv, pH = 5. 4。實施例4.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體HEDMA -Apd-CS納米顆粒的制備CN 102525926 A向50 mL圓底燒瓶中加入2，3_ 二正辛烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺(1. 1 g，3. 2 mmol)和乙腈QO mL)，攪拌下滴加溴乙醇O. 0 g，16. 0 mmol),回流12 h。TLC(乙酸乙
酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得黃褐色液體。經(jīng)柱層析(洗脫劑乙酸乙酯甲醇= 2 1)分離，得白色固體溴化2，3_ 二正辛烷氧基-1-0V，#-二甲基tV-(2_羥乙基))丙銨
KUg, l.Smmoi, -·16,9%| iH NMW500 MHh CDCl3). t[jpm ； 5,03 fbr,
1H, -CH3CH2OJ ), 4J7-L16tm. 2 H, -CHiCH2OH), 4J)g 10f> (m, 1 H, -CHCHiN-(CH3)2CHjCH^OHJ, 3.91-3J7 Im, 2 H. .CiTr1CHCHiNt(CHj)2 CH2CHiOIfI. 3Jr)-3,f,9 Sm, 2 H, -CH}WICH5I:CH2CH;OH>, .156-3,53 irrn
2H,. 3.5W-3JB (in, 10 H. -NlCWiIiCHjCH^OH. 2 -OC//>CllitCH,J5CH5J. 1,55-1.531m, 4 H, I-Ocii3CfIi(ClIi)5CHv). 1,25 -1,2-1 tin, 2 H, 2 -OCH-CHftCH2JjCHJ. 0.S7 (i, f> H. J = 2—5 Hz. %OCmClUeCH3) °C NMRl 125 MHz . CDCI3) ；(1 C , -CW^mmACHjCH2OH). 69.6 f 1 C. -CHjN4ICHJiCH2CH2OHh 2,3 Cl C, ^CHCHiN-(CHi)2CH1CHiiOHJ, 6S.9 It C. -CH^CHiOHj, 6^.6 Il C, .ΓΗ^ΙΚΗ,Η Χ^Η Ι^ΓΗ,ΓΗιΟΗ). 67.3, 6 J (2 C, S-OCHi(CHi)6CHiI. 56.2 <1 C, -C!-I;:CH,OH|, 5-10 53,5 (2 C, -K^(CH3)iCH2CHzOif), 32,1 30,2, 29—9, 29.S, 29.7. 29.6. 26.4. 26.3, 22.9 112 C. 2 -OCHI5CH3). 14J. l-il S2C, 2-OCH^CH2ΜΓ —,Ι.
取溴化2，3-二正辛烷氧基-1-0V，#-二甲基-U2-羥乙基))丙銨(4.7 mg，0.01 mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體HEDMA-Apd-CS納米顆粒，用 Zetasizer Nano ZS 儀測得平均粒徑 162. 6 nm, PDI 分布 0. 456，表面電勢 +57. 4 mv, pH = 5. 4。 實施例5.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體TMA -Apd-CH納米顆粒的制備
向50 mL圓底燒瓶中加入見二甲基胺基-1，2-丙二醇(1.8 g，15.9 mmol )和四氫呋喃QO mL)。反應(yīng)混合液用冰水浴冷卻至0° C，攪拌下分批緩慢加入氫化鈉(1. 5 g，63. 6 mmol)，加畢后，待反應(yīng)混合液溫度升至常溫，撤除冰水浴。緩慢滴加正十四烷基溴(8.8 g， 31.8 mmol)，回流M h。TLC (乙酸乙酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，用水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘留物經(jīng)柱層析(洗脫劑石油醚乙酸乙酯 =1 1)分離，得淡黃色固體2，3_ 二正十四烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺II,9 g, 3" iiiimil, 1H KrMR(SfK) MHz, CDClj), (ppmj:3.57-3.40 lm, ”H, -CHCH;NICHiI2). 2 -00# CH2 CH;.Pi:CH;! ami -CHjCHCH2N(CH3):!, 2.411-2Jl iin 2 H.2.23《s, 6 H, .CH2NiCiijh}, 1.55-1.50
im , 4 II, 2 -OCHiCWi(CHauCHs) , 1.37-1 Jf3 (m , 44 H, 2 .OCH2CH2(CHi)nCH3). OMl {t, f. H. J=-/.O Hz, 2.0CH2CH:(CH;4i,CJ ;i}； ijC MMR 1115 MHi, CDCl3): "2.3, 2.3 (2 C, 2 OCH2CH2ICHjllCHiS, 71.7(1 C. -OiiCHCHiNlCH,.h5. 70,--1 (! C, -CHCH5NiCH3IjJ. 61.3(1 C, -CH2CH CH3MiCH,),), 46.5 ￠2 C, -CH2CHCHiM(CHi)iJ, 32.1, 30.4, 29.9, 29.S, 29." . 29.6 26J . (22 C . sonic signals were overlapped . 2 OCHiiCHiluCHiCH}}. 22,9 (2 C, 2-OCH^CHxhiCH.CH, , HJ，WJOC:, 2 .(Χ ,ΓΗ^Ι Ιι η ,Ι
向50 mL圓底燒瓶中加入2，3-二正十四烷氧基-1-(見#-二甲基)丙胺(0. 8g，1.7 mmol)和乙腈QO mL)。攪拌下滴加碘甲烷g，17. O mmol)，回流15 h。TLC(乙酸乙酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得黃色固體，用乙酸乙酯溶解，冷卻至室溫，有白色固體析出，過濾，得白色固體碘化2，3_ 二正十四烷氧基-1-0V，見三甲基)丙銨
0,6mitwl, 35,3 !.. :HNMRC500 MHl, CDClij , (ppm)； -4.06-1,00 im. 2 H. -CZICHjN-(CH3)7 and .CIICiiHK-(CH3)2), 3.6,-3.3樹m. 16 H. -CHCMWH4(CIIj)3 , -C1 2CHCII2N*<CHj) > . -ClhCliCim1 (CHi)iI and 2 .OCWjCHjirH2JuCHi), L57-I.54 (in, <1 H, Z-OrH2CHJCH2JuCH3), 1.34-1.13 (in, 44 11, 2 -OCIl,CHjC/ii ,,CIIj>. 0,S" It, 6 11’ J = 7.0 Hz. 2 -OCH3CH^(CH2)ιiCft) 15C NMR(125 Mlfe , CD(Ii) ； 73.6 <C , -CHCH.K^CHjhi, 72.2 Il C, -CHCHCHjHi(CH3)3). 69.4, 6S.2 (2 C. 2 -OCHiCH2ICH;,)nCH ). 61.2 Π C -CTiUN'lCH ) ), 55,4 t3 C. -N'fCIi；!；). 32.1, 30.1， 29.S, 29.6 29.5, 26.4, 26.2 (22 C, some signals were overlapped, 2 .OCH2CCHjInCfK-Hjh 22—S, 22.8 (2 C, 2 -OCHiCHJl3tCH2CH,>, 14.3, MJ (2 C. 2 -OaijCHiCCII^HCIIj),
取碘化2，3-二正十四烷氧基-1-0V，見三甲基)丙銨(6. 5 mg,0.01 mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體TMA-Apd-C14納米顆粒，用ktasizer Nano ZS儀測得平均粒徑82. 26 nm, PDI分布0. 392，表面電勢+46. 7 mv, pH = 5. 4。
實施例6.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體HEDMA -Apd-CH納米顆粒的制備
向50 mL圓底燒瓶中加入2，3-二正十四烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺(1.0 g，1. 9 mmol)和乙腈QO mL)，攪拌下滴加溴乙醇(1.2 g，9. 5 mmol),回流12 h。TLC(乙酸乙酯) 檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得黃色固體，用乙酸乙酯溶解，冷卻至室溫，有白色固體析出，過濾，得白色固體溴化2，3-二正十四烷氧基-I-OVj-二甲基-ΛΗ2-羥乙基))丙銨(iJJg, I .J mmol, 68.4%), 'H MMR<5W) MHz. CDCU’5.Wl Iht,
1 il, -ClLClIiCWK 4.21-4,06 fm, 2 II, -OI:CH,Ollh 4KM,O (m, I H. -CflrHiNt(CH^CHjCH2OH), 3.93-3.S5 Cm 2 H, -C*場CTICH+Ν CH3I2CH2 CIlOH 1, 3.S5-3.78im, 2 H, -Ο/νΝ 'ΟΗUiCH2CH,OHJ, 3.614.51 iui, 2 H, -CHjCHJOH) 3.51-3,4910 H, -N-(CJis)iCHjCIi2OH, 2
-OCW2CHiiC^I2JllCHjK L56-1.54 Cm, 4 H, 2 .OCH:CW2iCH2l CH-sl. 1.32 -i 16 1111, 44 H. 2 -OCHiCHiICll2)uCHO.S (I, 6 H, J = J Hz, 2 -OCH3(CHi)I1CHiCftK 1iC NMW125 MHz · CDCI ) ； 73.5 CI C . -CI-ICH,NtCCH Sh-CHjCHjOH 1, /2.2 <1 C, .CMClIiNMCH IjCHj-CHiOHJ, 69.5
C, -O-I2NlCftihCH2CHjOH), 6S.7 (1 C. -CHiCIi2Olil. 67,5 Il C, -C:H2(^HCH:K'C(H:j)3CHiCHiOH1. 67.5， (,1.2 f2 C, 2 -Of(CMj) CH；,), 56.1 (1 C, -CHCH2OH), 53—9, 53^4 (2 C. .N4(CHihCHiCHiOK), 32.1, 30’ 29 9. 29,S, 29J, 29.6. 26,4, 26,3. 22,9, {22 C. sonic signals were overlapped , 2 .0(: 比 Ji!CHjCH:,、, 22J , 2L1 <2 C , 2 -OCH2ClIA1OiiCH ), 14J. 14.1 (2 C, 2 -OCII2ICH2) ；CH3).
取溴化2，3-二正十四烷氧基-1-伙，#-二甲基-#42-羥乙基))丙銨(6.4 mg，0.01 mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體HEDMA-Apd_C14納米顆粒，用 Zetasizer Nano ZS 儀測得平均粒徑 137. 4 nm, PDI 分布 0. 397，表面電勢 +44. 6 mv, pH = 5. 8。 實施例7.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體TMA -Apd-C16納米顆粒的制備
向50 mL圓底燒瓶中加入見二甲基胺基-1，2-丙二醇(1.9 g，16.8 mmol )和四氫呋喃QO mL)。反應(yīng)混合液用冰水浴冷卻至0° C，攪拌下分批緩慢加入氫化鈉(1. 6 g，67. 2 mmol)，加畢后，待反應(yīng)混合液溫度升至常溫，撤除冰水浴。緩慢滴加正十六烷基溴(10. 3 g， 33.6 mmol)，回流M h。TLC(乙酸乙酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，用水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘留物經(jīng)柱層析(洗脫劑石油醚乙酸乙酯 =1 1)分離，得白色固體2，3_ 二正十六烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺(2.4 e. 4.2 mmol, 25.0%). iH NMR(5C ) MHz, CDCI1I, (ppmh 3J7-3.4<1 |m. "H. -C/fCHjNtCH.h), 2 OCJi3CHiCCHjJ:,CH>and-CHiCHCHjNlCH,)；), 2.42-2.34 fill. 2 H, -OT^iCHiIiI, 2:5 ts, 6 H, -CHMCIhh), 1.55-1.50 tm , 4 Ii , 2 -OCH3CIi ,IlTl2):,CH3) , 1.31-1,20 <m , 52 H, 2 -OCHCH;<CH2Ij3CH=), 0.17 If, 6 H, J = 7,0 Hz, 2 -OCH^CB^CH^nCftK ! Γ NMR 1125 MHz, CDCly) -. 85.9 (I C. ^a-IcHiNCCIIVl21. 72.J (重 C, -CH2CHCHjNiCHsJiI., 7! j，704 |2 C. 2 -OCHiCH3ICH；J1 ,CH31, 61,3 O C, -CHiCHCH2NCCTHi),). 46.5. 46.5 (2 C. .Cl^CHCHiNlClIiy, 32.1, 30.4, JO.2. 29,9 29,7. 19,6, 263, 26.2. (26 C. sonic signals were overlapped. 2-_1抑2》卜,CH3J. 22.912 C. 2 -OCHjiCHiJr= CH3^Hjt' 14J. 14.3- (2 (，. 2 -OCH. (CH2ShCIIjL
向50 1^圓底燒瓶中加入2，3-二正十六烷氧基-1-(見#-二甲基)丙胺(0.7 g，1.2 mmol)和乙腈QO mL)。攪拌下滴加碘甲烷(1.7 g，12 mmol)，回流15 h。TLC (乙酸乙酯)
檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得黃色固體，用乙酸乙酯溶解，冷卻至室溫，有白色固體析出，過濾，得白色固體碘化2，3- 二正十六烷氧基-1-(見N, 三甲基)丙銨
(OJg. l.Ommof, 83,3%), 1H NMRl500 MHz, CDCl1J , Ippiiih 4,09-41)4 <πι. 2 H. -OICHiN+ICHjh;and -CHClfflNlCH^bJ, 3.6S-3.38 (m. 16 H, -CHCHHN'lCHxJ, , -CiijCTICHiNtCH5y , -C1IiiCHCHjN4(0 5 ami 2 .OCH2CH2IrHihiCH3), L5~4.52 fm, 4 H, I-OCH2Ctf2(CHi)rsCH,). 1J3-L21 Tl. 52 H. 2 OCH2CH2(CmsiCH3). OM (I. 6 H. J : .0 Hi, 2 -OCH2CTMCH^iCtf3K "C NMRt 125 MHz . CDCb) ，3,6 (1 C；. -CHCHjNlCHilj), ηΛ . "2.2. 69.3 C, .ΓH3CHCH^TtCHand 2 -OCHiCHiCCHiHfClI5If 68^2 (1 C. -OiHN^CHihh 55,413 C. 32,U 3fU, 29.9, 29J. 29.7, 29-6, 29.5 26—4, 26 2 {26 C, scsine signals were tweriapped . 2IuCH^CHiI , 22 8 (2 C . 2
-OCH2CCHiIl,CH2CHjJ, 14.3. 14.3!2 C. 2 -OCH^fCH2SijCHCllj).
取碘化2，3-二正十六烷氧基-1-(見見#-三甲基)丙銨(7.1 mg,0.01 mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體TMA-Apd-C16納米顆粒，用ktasizer Nano ZS儀測得平均粒徑227. 1 nm, PDI分布0. 277，表面電勢+42. 4 mv, pH = 5. 8。
實施例8.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體HEDMA -Apd_C16納米顆粒的制備
向50 11^圓底燒瓶中加入2，3-二正十六烷氧基-1-伙，#-二甲基)丙胺(0.9 g，1.6 mmol)和乙腈QO mL)，攪拌下滴加溴乙醇(1.0 g，8.0 mmol),回流12 h。TLC(乙酸乙酯) 檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，得黃色固體，用乙酸乙酯溶解，冷卻至室溫，有白色固體析出，過濾，得白色固體溴化2，3- 二正十六烷氧基-1-0V，#- 二甲基tV-(2-羥乙基))丙銨(CLi g, 1.2 mitwl, 75.0%). iH NMW500 MHz. CI>Ct.), fppmh 5.00 tbr, I H. -CHCHiCW), 4.13-4.09(111, 2 H, -CIZ2CH1OHl. 4.W-4.03 (in, 1 H, -0/CH N”CH).bCH:ai/)H> 3.92-3,82 (m, 2 H, -CfZ3CHCH.(CH3)jCHj CHiOHl, 3 J2-3.74 {m, 2 H, -CMM'(CH^3CHiCH2OH). 3.56-3.53 2 H, -Cll2CIiiOII) 3,19-3.35 |m , 10 Il , -N+(OT)^CHiCIl2OlI , 2 -OOTjCH5(CHi): >CH-·；}. 1.58.1,42 (m, 4 H. 2 -OCH>(7f,(CH2)i3CH>). 1.31 -1.12 lm, 52 H, 2 -OchjCHi(CW2IbCHj), 0.85 it, 6 H. J = 13 Hz, 2 -CiCHj(CHiIi3CHiCft): D(: NMRf 125 MHz CDCijJ ； :3.5 (1 C , -CHCHiN' (CH ,J3CHiCH2OM) "72.2(1 C, -CliCH2N 'ICH3 ):CH:CH20H), 69.5 il C. ^aijK^CIIjhClliCIIiOlIl, 6SJ {1 C, -CHrCllvOHl· 67.5 il C, -CHiCΗΓΗ2Ν α >,€Η;€Η ΟΗ}. 6"J, €7.2 O C. 2 -OCHiClI2(CH^i3CIIi). 56.2 (1 C, -CHjCH.OHJ, 53.9- 53.5 <2 C^ -N'CCHjJJCHJCH^OH , K,I. 30.1, 293, 29.S, 29- , 29J. 26.4, 26.3, 22—9, (26 C, some sigrats were overlapped. 2 -OCII2(CH2J12CHjC113). 22.8 Ω C. 2 -OQIi(CHi)^aiiCII1). 14.2, 14.212 C. I-OCHiCCHyissCH1),
取溴化2，3-二正十六烷氧基-1-伙，#-二甲基-#-(2-羥乙基))丙銨(6.9 mg，0.01 mmol)，用二次蒸餾水(10 mL)經(jīng)超聲波分散得陽離子脂質(zhì)體HEDMA-Apd_C16納米顆粒，用 Zetasizer Nano ZS 儀測得平均粒徑 203. 5 nm, PDI 分布 0. 411，表面電勢 +51. 8 mv, pH = 5. 4。 實施例9.丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體TMA -Apd-ClS納米顆粒的制備
向50 mL圓底燒瓶中加入見二甲基胺基-1，2-丙二醇(2.8 g，24.8 mmol )和四氫呋喃(50 mL)。反應(yīng)混合液用冰水浴冷卻至0° C，攪拌下分批緩慢加入氫化鈉(2. 4 g，99. 2 mmol)，加畢后，待反應(yīng)混合液溫度升至常溫，撤除冰水浴。緩慢滴加正十八烷基溴(16. 5 g， 49.6 mmol)，回流M h。TLC(乙酸乙酯)檢測，原料基本反應(yīng)完全。濃縮，用水和乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮。殘留物經(jīng)柱層析(洗脫劑石油醚乙酸乙酯 =1 1)分離，得白色固體2，3_ 二正十八烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺
權(quán)利要求
1.一種丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒，其特征在于該納米顆粒為碘化 2，3- 二烷氧基-1- {N, Λ； 三甲基)丙銨或溴化2，3- 二烷氧基-1- 0V，二甲基-N- (2-羥乙基))丙銨，所述烷氧基為正辛基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基、正十八烷基。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟(1)以環(huán)氧氯丙烷為原料，以一水合對甲基苯磺酸為催化劑，水為溶劑及反應(yīng)物，回流水解開環(huán)，經(jīng)柱層析分離純化得到無色液體3-氯-1，2-丙二醇；(2)在氫氧化鈉存在下，步驟(1)所獲得的無色液體3-氯-1，2-丙二醇與#，#-二甲胺鹽酸鹽進(jìn)行叔胺化反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到黃色液體3-0V，#-二甲基胺基)-1，2_丙二醇；(3)以四氫呋喃為溶劑，以氫化鈉為催化劑，3-0V，#-二甲基胺基)_1，2-丙二醇與烷基溴回流反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到2，3-二烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺；(4)步驟C3)得到的2，3-二烷氧基-1-次#-二甲基)丙胺與碘甲烷進(jìn)行季銨鹽化反應(yīng)，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶純化處理得白色固體，經(jīng)超聲波振蕩水分散后得到相應(yīng)的丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體TMA- Apd納米顆粒。
3.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟(1)以環(huán)氧氯丙烷為原料，以一水合對甲基苯磺酸為催化劑，水為溶劑及反應(yīng)物，回流水解開環(huán)，經(jīng)柱層析分離純化得到無色液體3-氯-1，2-丙二醇；(2)在氫氧化鈉存在下，步驟(1)所獲得的無色液體3-氯-1，2-丙二醇與#，#-二甲胺鹽酸鹽進(jìn)行叔胺化反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到黃色液體3-0V，#-二甲基胺基)-1，2_丙二醇；(3)以四氫呋喃為溶劑，以氫化鈉為催化劑，3-0V，#-二甲基胺基)_1，2-丙二醇與烷基溴回流反應(yīng)，經(jīng)柱層析分離純化處理得到2，3- 二烷氧基-1-0V，#- 二甲基)丙胺；(4)步驟(3)得到的2，3-二烷氧基-1-0V，#- 二甲基)丙胺與1-溴乙醇進(jìn)行季銨鹽化反應(yīng)，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶純化處理得白色固體，經(jīng)超聲波振蕩水分散后得到丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體HEDMA- Apd納米顆粒。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于所述步驟(1)的投料比為摩爾比1 :0. 002 4. 3的環(huán)氧氯丙烷一水合對甲基苯磺酸水；100°C回流反應(yīng)他，濃縮，柱層析分離洗脫劑為體積比2 1的石油醚乙酸乙酯，制得3-氯-1，2-丙二醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于所述步驟O)的投料比為摩爾比1 :5. 5 5. 5的3-氯-1，2-丙二醇二甲胺鹽酸鹽氫氧化鈉；常溫攪拌反應(yīng)12h，柱層析分離洗脫劑為體積比10 1的乙酸乙酯甲醇，純化得到黃色液體3-0V，#- 二甲基胺基)-1，2-丙二醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于所述步驟⑶的投料比為摩爾比1 :2 :4的3-0V，#-二甲基胺基)-1，2_丙二醇?xì)浠c烷基溴；以四氫呋喃為溶劑，65°C回流M h，柱層析分離洗脫劑為體積比1 :1的乙酸乙酯石油醚，得黃色液體2，3-二烷氧基-1-0V，#-二甲基)丙胺，所述烷基溴為正辛基溴、正十二烷基溴、正十四烷基溴、正十六烷基溴、正十八烷基溴。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于所述步驟⑷的投料比為摩爾比1 :10的2，3-二烷氧基-1-(#，#-二甲基)丙胺 碘甲烷；以乙腈為溶劑，81°C回流15h，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體碘化2，3-二烷氧基-1-(#，取#-三甲基)丙銨，超聲波振蕩水分散后得到陽離子脂質(zhì)體TMA- Apd納米顆粒。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于所述步驟⑷的投料比為摩爾比1 :5的2，3-二烷氧基-1-隊#-二甲基)丙胺 1-溴乙醇；以乙腈為溶劑，81°C回流12h，經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶得白色固體溴化2，3-二烷氧基-1- {N,N- 二甲基tV- (2-羥乙基))丙銨，超聲波振蕩水分散后得到陽離子脂質(zhì)體HEDMA-Apd納米顆粒。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒的制備方法，其特征在于所述乙腈用量為lg2，3-二烷氧基-1-0ν，Λ/_ 二甲基)丙胺使用20ml乙腈，不足Ig 按Ig計。
全文摘要
本發(fā)明公開的丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒及其制備方法，該納米顆粒為碘化2,3-二烷氧基-1-(N,N,N-三甲基)丙銨或溴化2,3-二烷氧基-1-(N,N-二甲基-N-(2-羥乙基))丙銨，所述烷氧基為正辛基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基、正十八烷基。該丙二醇胺衍生物陽離子脂質(zhì)體納米顆粒具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性好、粒度尺寸適中、粒徑分布窄、表面電荷適中、制備成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，能滿足DNA轉(zhuǎn)運(yùn)載體應(yīng)具備的基本要求，具有通過靜電作用結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)基因類藥物的潛力。
文檔編號A61K47/18GK102525926SQ201110444269
公開日2012年7月4日 申請日期2011年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月27日
發(fā)明者劉珊, 劉美艷, 向雙林, 張健, 曾佑林, 曾盈, 胡翔, 蘇勝培, 趙春艷 申請人:湖南師范大學(xué)