專利名稱：以有機酸聚合物作為有效成分的克羅恩病的預防或治療劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及有機酸聚合物，特別涉及3-氧鍺丙酸聚合物的新型醫(yī)療用途。
背景技術：
克羅恩病(Crohn’ s disease,⑶)是ー種原因不明的難治性疾病，其主要在從ロ腔到肛門的整個消化管區(qū)域中非連續(xù)地出現(xiàn)狹窄或瘺管等病變。除此之外，有時還伴隨有關節(jié)炎、虹膜炎、壞疽性膿皮癥或結(jié)節(jié)性紅斑等腸管外并發(fā)癥。在日本，克羅恩病被指定為難治性疾病克服研究事業(yè)的對象疾病(特定疾病)之一，是與胃潰瘍和十二指腸潰瘍不同的難治性疾病。還沒有根治性的治療方法，治療目標是通過藥物療法等來抑制活動期癥狀、誘導至緩解和維持緩解狀態(tài)。在日本，ロ服藥物療法的基本成分為5-氨基水楊酸(5-ASA)制劑的美沙拉秦或柳氮磺吡啶和腎上腺皮質(zhì)固醇類(潑尼松龍)，除此之外，有時還會給予 抗菌劑(甲硝唑)、免疫抑制劑(硫唑嘌呤)等。另ー方面，在美國，基本成分為腎上腺皮質(zhì)固醇類和免疫抑制劑。但是，特別是對于腎上腺皮質(zhì)固醇類來說，在以維持緩解為目的的長期給藥中并沒有顯示出有效性，并且其副作用和固醇類依存性、抵抗性等問題點也多。另外，對于5-ASA制劑的美沙拉秦或柳氮磺吡啶，僅在日本被許可適用于克羅恩病，在美國并未得到許可。實際上，有報告指出5-ASA制劑的美沙拉秦對克羅恩病是沒有效果的。即使如此，在美國多以適應癥外使用的方式來使用，并且實際情況是，因為沒有安全的ロ服劑而沒有辦法地使用。另ー方面，在日本和美國被許可使用的硫唑嘌呤等免疫抑制劑雖然顯示出了一定的效果，但有報告對其指出白血球減少和淋巴瘤的產(chǎn)生等副作用，無法說其是安全的藥劑。如此，從有效性和安全性的觀點出發(fā)，目前狀況下還沒有ー種充分的針對克羅恩病的ロ服治療藥。然而，對于有機酸聚合物、特別是3-氧鍺丙酸聚合物進行了許多的關于醫(yī)療用途的研究。例如，報告有針對高血壓心臟血管疾病的用途(日本特開昭55-167222號)、干擾素產(chǎn)生增強作用(日本特開平2-134818號)、美拉德反應阻礙作用(日本特開平8-059485號)、IL-10產(chǎn)生增強作用(日本特開平11-049683號)、針對動脈硬化性疾病的用途(日本特開2000-229856號)、MCP-I抵抗作用(日本特開2000-136139號)、針對2型糖尿病性腎病的用途(日本特開2003-81843號)，等等。需要說明的是，在現(xiàn)有文獻中列舉出了許多有機酸聚合物的推測的醫(yī)療用途，作為其中之一，記載有消化管系統(tǒng)潰瘍的恢復修繕作用、大腸功能的控制作用等(日本特開昭54-115324號、日本特開昭54-116100號)、針對胃、十二指腸和大腸的潰瘍的用途等(日本特開昭52-51327號)。如此，對于有機酸聚合物，雖然報告有許多的醫(yī)療用途，但并沒有關于針對克羅恩病的用途的報告。專利文獻I:日本特開昭55-167222號公報專利文獻2:日本特開平2-134818號公報專利文獻3:日本特開平8-059485號公報專利文獻4:日本特開平11-049683號公報
專利文獻5:日本特開2000-229856號公報專利文獻6:日本特開2003-81843號公報專利文獻7:日本特開2000-136139號公報專利文獻8:日本特開昭54-115324號公報專利文獻9:日本特開昭54-116100號公報專利文獻10:日本特開昭52-51327號公報

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的問題 本發(fā)明的目的為提供一種克羅恩病的治療藥劑。用于解決問題的手段本發(fā)明人對于有機酸聚合物、特別是3-氧鍺丙酸聚合物，以小鼠· 2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)誘發(fā)克羅恩病模型進行了藥效藥理評價。小鼠TNBS誘發(fā)克羅恩病模型是所謂的與人類·克羅恩病類似的一般的實驗性動物模型。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該化合物具有顯著的藥效藥理效果，從而完成了本發(fā)明。S卩，本申請發(fā)明為克羅恩病的預防或治療劑，其中，該預防或治療劑以由下式表示的有機酸聚合物作為有效成分。[(Ol72)3Ge-A-CO2HJn(式中，η為100 1000，A為低級烷基)此處，A優(yōu)選是碳原子數(shù)為I至3的低級烷基。作為這種有機酸聚合物，優(yōu)選的是A為亞こ基的3-氧鍺丙酸聚合物。對于所述3-氧鍺丙酸聚合物，聚合度η優(yōu)選為200 900。這種3_氧鍺丙酸聚合物可以由如下的物性來進行特定。即，所述3-氧鍺丙酸聚合物顯示下述特征性的粉末X射線衍射光譜大的衍射峰在6. 5°附近，較大的衍射峰分別在11. 6°、13. 8° ,18. 4°、21.2°和22. 4°的附近。所述3-氧鍺丙酸聚合物在IR光譜中顯示以下特征性的吸收大的吸收帶分別在800CHT1 AOOcnT1和1700CHT1的附近，較大的吸收帶分別在560011^705011'760cm_1,780cm_1,1250cm_1,1350cm_1 和 HOOcnT1 的附近(其中，HOOcnT1 附近的吸收帶為雙峰)。所述3-氧鍺丙酸聚合物在DSC中顯示以下特征性的圖表峰開始點在237°C附近、峰頂點在256°C附近、峰結(jié)束點在276°C附近和熱量Λ H約為59mcal/mg。另外，所述3-氧鍺丙酸聚合物顯不分子式為(C3H5Ge03.5)n、重量平均聚合度為n=548±337、和重均分子量的平均值土標準誤差為9. 29 X IO4±5. 72 X IO4。發(fā)明效果本發(fā)明的有機酸聚合物作為克羅恩病的治療劑是有效的。


圖I表示丙帕鍺的粉末X射線衍射光譜。圖2表示丙帕鍺的IR光譜。圖3表示丙帕鍺的DSC。圖4表示小鼠TNBS誘發(fā)克羅恩病模型中的基于丙帕鍺、柳氮磺吡啶、潑尼松龍的給予的病理評分(TNBS引發(fā)第I天的效果)。圖5表示小鼠TNBS誘發(fā)克羅恩病模型中的基于丙帕鍺、柳氮磺吡啶、潑尼松龍的給予的病理評分(TNBS引發(fā)第2天的效果)。圖6表示小鼠TNBS誘發(fā)克羅恩病模型中的基于丙帕鍺、柳氮磺吡啶、潑尼松龍的給予的病理評分(TNBS引發(fā)第3天的效果)。圖7表示小鼠TNBS誘發(fā)克羅恩病模型中的基于丙帕鍺、柳氮磺吡啶、潑尼松龍的 給予的腸管病變評分。
具體實施例方式本發(fā)明中所使用的有機酸聚合物為公知的化合物，由以下的化學式表示。[(Ol72)3Ge-A-CO2HJn(式中，η為100 1000，A為低級烷基)此處，作為A的低級烷基，優(yōu)選的是碳原子為I至3的低級烷基。特別優(yōu)選的是A為亞こ基的3-氧鍺丙酸聚合物。對于所述3-氧鍺丙酸聚合物，眾所周知的是聚合度η為200 900的丙帕鍺。據(jù)推測，其立體結(jié)構(gòu)為由下式所示的8元環(huán)結(jié)構(gòu)體。
Z\
IRR I
T■
Z 0 Ge Ge ^ i \
OO
r
O 一一 ^一-
▲
RR
\ノ m[式中，R表示-CH2CH2COOH,m表示由丙帕鍺丙酯的重均分子量換算得到的重量平均聚合度，為137±84(平均值土標準誤差3σ)。最小結(jié)構(gòu)元(O1Z2)3GeCH2CH2COOH經(jīng)驗式 IC6H10Ge2O7]對于丙帕鍺，可以通過日本特開2003-81843號等所述的方法來制造。另外，該文獻等中還記載有，丙帕鍺為顯示出下述表1、2的物性值的化合物。表I表示基于光散亂法得到的分子量的測定結(jié)果，表2表示由粉末X射線解析求出的晶格常數(shù)。丙帕鍺可以由圖I 3(引用自日本特開昭54-115324)特定為顯示如下的物性值的化合物。顯示出下述特征性的粉末X射線衍射光譜大的衍射峰在6. 5°附近，較大的衍射峰分別在11. 6° ,13. 8° ,18. 4° ,21. 2°和22. 4°的附近。在IR光譜中顯示以下特征性的吸收大的吸收帶分別在SOOcnT1 AOOcnT1和HOOcnT1的附近，較大的吸收帶分別在560cm \705cm \760cm \780cm \ 1250cm \ 1350cm 1 和 1400cm 1 的附近(其中，1400cm 1 附近的吸收帶為雙峰)。在DSC中顯示以下特征性的圖表峰開始點在237°C附近、峰頂點在256°C附近、峰結(jié)束點在276°C附近和熱量Λ H約為59mcal/mg。表I
丙帕鍺的重均分子量
丙帕鍺丙酯丙帕鍺(換算值)
1. 16X I O-9.29X IO4直(X)
標準誤差(3σ)±0.71 XIO5±5.72xl04
分子式 (C6HnGeC>3.5)n (CsHjGeOsj)n 重景平均聚合度(η)* _548±337 _ 548士337 _*是以丙帕鍺的最小結(jié)構(gòu)單元為(01/2) 3GeCH2CH2C00H時的數(shù)值
表2丙帕鍺的晶格常數(shù)
化學式*1(C3H5GeO35)n
式量*1169.66
晶類單斜晶
空間群一-晶胞參數(shù)巧)13·35；；
b(A)5.03M
c(A)7.55*1
p(deg.)94.3H
VOl(As)505.4"2
z 4*3 密度(_gcm_3)_2.23*4_* I將丙帕鍺的重復單元表示為(CV2)3GeCH2CH2COOH。* 2由晶格常數(shù)算出女3由晶格常數(shù)和測定得到的密度算出* 4利用浮游法進行測定在實際向人給予本發(fā)明所使用的3-氧鍺丙酸聚合物、進ー步為丙帕鍺的情況下，優(yōu)選以下述組合物的方式來使用，該組合物是按照相對于該化合物O. 005質(zhì)量份 5質(zhì)量份，含有O. 005質(zhì)量份 50質(zhì)量份的賦形劑的方式來制備的。作為賦形劑，可以使用乳糖、蔗糖、葡聚糖類等糖類；羥丙基纖維素等纖維素系高分子性物質(zhì)；清蛋白等天然性高分子物質(zhì)。另外，該化合物通常是作為ロ服制劑而使用的，但也可以以栓劑、鼻腔制劑、注射制劑等的方式利用。向人給予該化合物的給予量依存于劑型和患者的年齡等，但平均一天在Img 1500mg的范圍內(nèi)，在對于體重為50kg的成人的ロ服給予的情況下,優(yōu)選平均一天為IOmg 120mg。另外，該化合物的制劑化可以根據(jù)日本特開2003-81843號等制劑例的記載來實施?？肆_恩病是ー種原因不明的特發(fā)性慢性疾病，其主要在從口腔到肛門的整個消化管區(qū)域中非連續(xù)地出現(xiàn)非特異性的病變。臨床癥狀為腹痛、全身倦怠、腹瀉、便血、發(fā)熱、體重減少、貧血、腸梗阻癥狀、腹部腫瘤、惡心、嘔吐、腹膜炎癥狀等。克羅恩病除了引起營養(yǎng)障害之外，同時還會引起各種各樣的消化器官和腸管外癥狀，例如腸管狹窄、腸堵塞、內(nèi)瘺、外瘺、腸穿孔、腹部腫瘤、大出血等嚴重的癥狀。除此之外，有時還伴隨有關節(jié)炎、虹膜炎、壞疽性膿皮癥或結(jié)節(jié)性紅斑等腸管外并發(fā)癥。治療方法主要采用營養(yǎng)療法或藥物療法，還無法期望根治的手術療法。實施例以下表示本發(fā)明物質(zhì)的制造例。制造例I在濃鹽酸(5. O倍摩爾)的存在下，使ニ氧化鍺和50%次磷酸(I. I倍摩爾)于60°C 80°C反應4小時，追加濃鹽酸(5. O倍摩爾)后，在40°C以下滴加丙烯酸(I. I倍摩爾)。將析出結(jié)晶過濾，利用濃鹽酸來進行清洗，得到3-三氯鍺基丙酸(收率為98%)。接 著，使得到的3-三氯鍺基丙酸溶解于丙酮(17倍摩爾)中，進行過濾后，在攪拌下，于(TC滴加水(70倍摩爾)，進ー步攪拌6小時，靜置16小吋。將析出結(jié)晶過濾，利用丙酮來進行清洗，得到3-氧鍺丙酸聚合物(收率為92%)。對于得到的3-氧鍺丙酸聚合物、即丙帕鍺，進ー步將其誘導為丙酯物，然后利用光散亂法來測定分子量，并且利用粉末X射線衍射法來測定晶格常數(shù)。結(jié)果分別如表I和表2所示。接著，示出丙帕鍺的藥效藥理試驗例。在該藥效藥理試驗中，使用小鼠TNBS誘發(fā)克羅恩病模型來評價丙帕鍺。該模型中產(chǎn)生了體重減少、腹瀉性血便、腸管病變，因此其是所謂的與人類克羅恩病類似的一般的病理動物模型。作為陽性對照藥，使用了潑尼松龍、柳氮磺吡啶這兩種陽性對照藥。潑尼松龍作為腎上腺皮質(zhì)固醇類藥是治療克羅恩病的主要藥劑之一。柳氮磺吡啶為5-ASA制劑的前藥，在大腸內(nèi)轉(zhuǎn)化為5-ASA，因此從在動物試驗中，作為作用部位的腸管內(nèi)的藥物濃度的觀點出發(fā)，其是比5-ASA制劑更優(yōu)選的陽性對照藥。需要說明的是，在本藥效藥理試驗中，使用由所述制造例I所制造的丙帕鍺。藥效藥理試驗例II.實驗方法由日本SLC購入7周的雄性BALB/c Cr Slc小鼠。馴化飼養(yǎng)5天后，按照體重不存在差異的方式將各小鼠分成5組，供于實驗。對于小鼠腹部，在四邊為2cm的正方形將毛剃除，將1%TNBS涂布于皮膚上。TNBS涂布7天后，在氟烷吸入麻醉下將小鼠固定，由直腸注入100 μ L的2. 0%TNBS，引發(fā)克羅恩病
腸管病變。在丙帕鍺給藥組中，將O. 015%的丙帕鍺混合于小鼠標準飼料CRF-I (OrientalYeast Co. , Ltd.)中，從TNBS注入后不久到引發(fā)3天后，通過自由攝食來進行給藥。對于丙帕鍺給藥期間中的平均給藥量，由體重和攝食量，計算出平均I天的丙帕鍺給藥量，計算出的平均給藥量約為7. 5mg/kg/天。在陽性對照的潑尼松龍給藥組中，從TNBS注入后不久到引發(fā)3天后，I天I次利用小鼠用ロ服飼管來給予10mL/kg的作為O. 5%CMC懸濁液的潑尼松龍。用量設定為臨床通常用量(30 40mg/天/人)的最大量lmg/kg/天。在陽性對照的柳氮磺吡啶給藥組中，從TNBS注入后不久到引發(fā)3天后，在3天里，I天2次利用小鼠用ロ服飼管來給予10mL/kg的作為O. 5%CMC懸濁液的柳氮磺吡啶。設定了兩個用量組從臨床通常用量考慮為最大量的低用量組(133mg/kg/天)和在小鼠TNBS模型中有效的高用量組(400mg/kg/天)。2.評價項目(I)病理評分在TNBS引發(fā)I天、2天和3天后，根據(jù)以下基準對病理評分(體重減少、腹瀉·便溏和隱血·出血評分的合計)進行評價。⑷體重減少(以TNBS引發(fā)前作為100%)評分O:沒有減少I:減少在5%以內(nèi)2:減少在 5%_10%3:減少在 10%_20%4:減少超過20%(B)腹瀉·便溏評分O正常。保持為固形。2:便溏半固形。濕潤且若碰觸則容易坍塌。4:腹瀉、有流動性。(C)隱血·出血評分O:正常。糞便中并沒有血液混入。2:隱血。糞便中混入有血液。肛門周圍的污潰少。4:便血。糞便中混入有血液。肛門周圍被血液污染。(2)腸管病變評分在TNBS引發(fā)3天后，在靜脈內(nèi)給予Evans Blue。給藥30分鐘后，使小鼠頸椎脫臼，摘除結(jié)腸到肛門部分，利用生理食鹽水對內(nèi)腔進行清洗，切開腔管，對病變程度進行評分化。腸管病變評分是使用實體顯微鏡，對結(jié)腸進行觀察并根據(jù)以下基準來進行評價的。O:沒有傷害。I:充血
2:充血且壁肥厚。沒有潰瘍。3:有潰瘍但并不肥厚。4:存在2個以上的病變部位。5:廣泛的病變部位(合計為Icm以上)6:廣泛的病變部位(合計為I. 5cm以上)7:廣泛的病變部位(合計為2cm以上)8:廣泛的病變部位(合計為2. 5cm以上)9:廣泛的病變部位(合計為3cm以上)10:廣泛的病變部位(合計為3. 5cm以上)3.結(jié)果和考察(I)對于病理評分的效果在丙帕鍺為7. 5mg/kg的給藥組中，在引發(fā)2天后、3天后確認到了顯著的病理評分改善作用。另ー方面，在柳氮磺卩比唳為133mg/kg的給藥組中，并未確認到顯著的改善效果。在柳氮磺吡啶為400mg/kg的給藥組中，在引發(fā)2天、3天后得到了改善效果，但與丙帕鍺群相比，改善效果弱。另ー方面，在針對克羅恩病的緩解導入效果的方面信賴度最高的潑尼松龍為Img/kg的給藥組中，在引發(fā)2天后并未發(fā)現(xiàn)效果，僅在引發(fā)3天后確認到效果，但是與丙帕鍺為7. 5mg/kg的給藥組相比,其改善效果弱。(2)腸管病變評分與柳氮磺卩比唳為133mg/kg的給藥組、柳氮磺卩比唳為400mg/kg的給藥組和潑尼松龍為lmg/kg的給藥組相比，丙帕鍺為7. 5mg/kg的給藥組的腸管病 變評分的改善效果最優(yōu)
巳升。S卩，與病變控制群(評分為8. I)相比，丙帕鍺群中，評分減少至4. 9;在柳氮磺吡唳為133mg/kg的群中為6. I,在柳氮磺卩比唳為400mg/kg的群中為6. 8,減少效果弱；在潑尼松龍為lmg/kg的群中，為5. 2的減少效果；丙帕鍺群最優(yōu)異。根據(jù)這些結(jié)果，與潑尼松龍和柳氮磺吡啶相比，丙帕鍺顯示出更優(yōu)異的效果，因此可以期待在克羅恩病的緩解導入和緩解維持這兩個發(fā)面中的效果。
權利要求
1.一種克羅恩病的預防或治療劑，其中，該預防或治療劑以由下式表示的有機酸聚合物為有效成分，[(Ol72)3Ge-A-CO2HJn 式中，η為100 1000，A為低級烷基。
2.如權利要求I所述的預防或治療劑，其中，A是碳原子數(shù)為I至3的低級烷基。
3.如權利要求I所述的預防或治療劑，其中，有機酸聚合物是A為亞こ基的3-氧鍺丙酸聚合物。
4.如權利要求3所述的預防或治療劑，其中，3-氧鍺丙酸聚合物的聚合度η為200 900。
5.如權利要求3所述的預防或治療劑，其中，3-氧鍺丙酸聚合物是顯示以下特征性粉末X射線衍射光譜的化合物， 大的衍射峰6. 5°附近， 較大的衍射峰分別在11.6°、13. 8°、18. 4° ,21. 2°和22. 4°的附近。
6.如權利要求3所述的預防或治療劑，其中，3-氧鍺丙酸聚合物是在IR光譜中顯示以下特征性的吸收的化合物， 大的吸收帶分別在SOOcnT1、ΘΟΟαιΓ1和UOOcnT1的附近， 較大的吸收帶分別在560cm \705cm \760cm \780cm \ 1250cm \ 1350cm 1 和 1400cm 1的附近，其中，HOOcnT1附近的吸收帶為雙峰。
7.如權利要求3所述的預防或治療劑，其中，3-氧鍺丙酸聚合物是在DSC中顯示以下特征性的圖線的化合物， 峰開始點237°C附近， 峰頂點256°C附近， 峰結(jié)束點276°C附近， 熱量 ΔΗ=約 59mcal/mg。
8.如權利要求3所述的預防或治療劑，其中，3-氧鍺丙酸聚合物是下述化合物分子式(C3H5GeO3Jn、重量平均聚合度n=548±337以及重均分子量平均值土標準誤差=9. 29Χ104±5· 72Χ104。
全文摘要
本發(fā)明的目的為提供一種克羅恩病的治療藥劑，其中，克羅恩病是原因不明且沒有根治性治療藥的疾病。本發(fā)明提供一種克羅恩病的預防或治療劑，該預防或治療劑以由[(O1/2)3Ge-A-CO2H]n表示的有機酸聚合物作為有效成分，其中，n為100～1000，A為低級烷基。作為有機酸聚合物，優(yōu)選的是，A是碳原子數(shù)為1至3的低級烷基，聚合度n為200～900。本發(fā)明的有機酸聚合物作為克羅恩病的治療劑是有效的。
文檔編號A61P1/00GK102695515SQ201180005529
公開日2012年9月26日 申請日期2011年1月26日 優(yōu)先權日2010年1月28日
發(fā)明者城森孝仁, 日比千尋, 橋本洋幸, 武田基宏, 水野邦治, 熊澤俊彥 申請人:株式會社三和化學研究所