專利名稱：用于藥用胰腺酶制劑中的病毒滅活的β-丙內(nèi)酯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有減少的病毒感染性(viral infectivity)的胰腺酶制劑,特別涉及此種用β_丙內(nèi)酯(BPL)處理過的制劑，含有它們的藥用組合物，以及制備它們的方法。
背景技術(shù)：
胰外分泌功能不全是胰腺疾病(例如，慢性胰腺炎、囊性纖維病、嚴重的急性壞死性胰腺炎和胰腺癌)，胰腺外疾病(例如腹腔疾病和克羅恩氏病)以及胃腸和胰腺的外科切除術(shù)的一個主要后果。胰外分泌功能的置換(replacement)對于消除與營養(yǎng)不良有關(guān)的發(fā)病率和死亡率是重要的。一種胰外分泌功能不全的治療是口服胰腺酶以在胃排空營養(yǎng)物質(zhì)的時候為十二指腸腔提供充足的活性脂肪酶。在過去的70年，已經(jīng)以各種形式使用從動物源獲得的胰腺酶制劑(PEP)，以部分地治療病人的酶缺乏癥，這些病人患有各種胰腺酶缺乏癥和消化障礙。PEP典型地含有至少三類酶(包括脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶)的一個組合，它們對于消化脂肪、蛋白和糖是重要的。一種被稱為胰脂肪酶的PEP以結(jié)合在膠囊內(nèi)的腸溶顆粒的形式市售，它含有高達35，000USP單位/膠囊的胰脂肪酶(例如，PANCRECARB4 (消化治療公司(Digestive Care, Inc. )) >ULTRASE* (艾肯斯制藥公司(Axcan Scandipharm Inc.))、PANCREAZE (麥克尼爾制藥公司(McNeil Pharmaceutical)) ,COTAZYME (美國研究公司(Organon USA, Inc.)) >ZENPEPR (尤蘭德制藥公司(EurandPharmaceuticals))以及CREONr'(蘇威制藥公司(Solvay Pharmaceuticals, Inc.)))。由于這些酶是從動物源分離的，它們很容易被病毒污染，對于來自豬的材料，例如無包膜病毒(例如，豬細小病毒(PPV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)、豬腦心肌炎病毒(EMCV))，以及有包膜病毒(例如，水皰性口炎病毒(VSV)、和A型流感病毒(IFA))。見于2008年12月召開的美國食品和藥物管理局(FDA)抗病毒藥物咨詢委員會大會(Antiviral Drugs AdvisoryCommittee Meeting)的信息，這些信息可以在萬維網(wǎng) WorldWideWebfda. gov/ohrms/dockets/ac/cder08.html#AntiviralDrugs 網(wǎng)址上找到。參見，例如Mayr，從減毒的痘病毒開發(fā)非免疫性的類特異性的疫苗一種新的疫苗類型(Development of non-immunizing, paraspecificvaccine from attenuated poxviruses:a new type of vaccine), Berl Munch Tierarztlffochenschr. 2001, 114:184-7;Argiiello Villares,兔病毒性出血性疾病接種和免疫應(yīng)答(Viral haemorrhagic diseaseof rabbits: vaccination and immuneresponse), Rev Sci Tech. 1991，10:459-80;發(fā)現(xiàn)的使用血衆(zhòng)蛋白的病毒滅活Horowitz, (Inactivation of viruses found with plasmaproteins),生物工程(Biotechnology) 1991，19:417-30;Epstein and Frickej 目前的凝血因子濃縮物的安全性(Current safety of clotting factor concentrates), Arch PatholLab Med. 1990，114:335-40; Stephan，通過用β _丙內(nèi)酯處理和UV照射來滅活血漿和血楽■衍生物中的肝炎病毒和 HIV(Inactivation of hepatitis viruses and HIV inplasmaand plasma derivatives by treatment with beta-propiolactone/UVirradiation),Curr Stud Hematol Blood Transfus. 1989, 56:122-7; Stephan,關(guān)于不穩(wěn)定的血衆(zhòng)制品的病毒安全性的德國的觀點(Virus safety of labile plasmaproducts from theGerman viewpoint), Beitr Infusionsther. 1989, 24:40-5; Anderson 等人特異性 IgE 和β-丙內(nèi)酯在由加強劑量的人二倍體細胞狂犬疫苗導(dǎo)致的反應(yīng)中的作用(The role ofspecific IgE and beta-propiolactone inreactions resulting from booster doses ofhuman diploid cell rabies vaccine), JAllergy Clin Immunol. 1987，80:861-8;Prince等人，β -丙內(nèi)酯/紫外線照射用于滅活血液衍生物中的病毒的效力的綜述(Beta-propiolactone/ultravioletirradiation:a review of its effectiveness forinactivation of viruses in bloodderivatives), Rev Infect Dis. 1983，5:92-107;美國公開號 2006/0115376。目前，需要無病毒的或病毒感染性減少的口服PEP，它們含有多個劑量的活性酶補充劑。
發(fā)明概述本發(fā)明的諸位發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了可以通過用一種化學劑(β -丙內(nèi)酯，BPL)處理胰腺酶制劑(PEP)來有效地使該PEP中的病毒滅活，而不消除該PEP的酶活性。不希望受任何理論的限制，通過BPL使病毒滅活是基于該病毒的基因組的烷基化作用。諸位發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)了除了這些病毒以外的PEP組分，例如胰腺酶或者核酸類，它們可能減少BPL的烷基化活性，不干擾PEP中的病毒的滅活。本發(fā)明的一個實施方案是一種具有減少的病毒感染性的PEP。該制劑包括(i) 一種或多種經(jīng)BPL處理過的胰腺酶以及(ii)3-羥基丙酸(即BPL的水解產(chǎn)物)、BPL、或它們的一種混合物。優(yōu)選地，該PEP具有小于約103FFID5(l/g PEP的PPV病毒感染性，如通過美國公開號2009/0226414中所描述的PPV FFID感染性分析所測量的，該申請通過引用結(jié)合在此。優(yōu)選地，該PEP的病毒感染性比末用BPL處理過的相似制劑的病毒感染性要低至少llog，其中病毒感染性是無包膜病毒、有包膜病毒、PPV、EMCV、或它們的組合的病毒感染性。另一個實施方案是一種具有減少的病毒感染性的藥用組合物，該藥用組合物包含(i) 一種或多種經(jīng)BPL處理過的胰腺酶(或一種PEP)以及(ii)3-羥基丙酸、BPL、或它們的一種混合物。又另一個實施方案是一種對需要治療的病人進行胰功能不全的治療的方法，該方法是向該病人給予一個治療有效量的本發(fā)明的該PEP或藥用組合物。又另一個實施方案是一種制備PEP的方法，該方法包括以下步驟(a)使BPL與含有一種或多種胰腺酶的一種制劑反應(yīng)足夠的時間，以減少該制劑中的病毒感染性。在一個實施方案中，步驟(a)中的反應(yīng)通過以下步驟進行(i)將BPL加到含有一種或多種胰腺酶的制劑的一種溶液或懸浮液中，并且(ii)在步驟(a)中使BPL在該溶液中孵育足夠的時間，以減少該溶液中的病毒感染性。該方法可以進一步包括以下步驟(b)在步驟(a)的反應(yīng)后使該BPL滅活?？梢酝ㄟ^在一種水溶液中孵育，通過加入一種滅活劑(例如硫代硫酸鈉)，或者通過冷凍步驟(a)形成的該溶液然后將它凍干而使該BPL滅活。本發(fā)明的任何實施方案中的這些胰腺酶可以是重組形成的或者來自一種動物源(豬、羊和牛)。合適的胰腺酶包括，但不限于，脂肪酶類、蛋白酶類、淀粉酶類、以及上述任何項的任何組合。一種優(yōu)選的胰腺酶的混合物是豬源的胰脂肪酶。
發(fā)明詳細說明 定義根據(jù)本發(fā)明，可以存在在本領(lǐng)域的技術(shù)范圍內(nèi)的大量的工具和技術(shù)，例如那些常用于分子免疫學、細胞免疫學、藥理學、和微生物學的工具和技術(shù)。見，例如，Samtoook等人(2001)分子克隆實驗手冊(MolecularCloning: A Laboratory Manual.)第三版，冷泉港實驗室出版社冷泉港，紐約(Cold Spring Harbor Laboratory Press:ColdSpring Harbor, New York) ；Ausubel等人編輯(2005)目前的分子生物學的協(xié)議(Current Protocols inMolecular Biology).約翰·威利父子出版公司(John Wileyand Sons, Inc.) Hoboken, NJ; Bonifacino等人編輯(2005)目前的細胞生物學的協(xié)議(CurrentProtocoIs in Cell Biology).約翰 威利父子出版公司:Hoboken, NJ; Coligan等人編輯(2005)目前的免疫學的協(xié)議(Current Protocols in Immunology),約翰 威利父子出版公司Hoboken, NJ;Coico等人編輯(2005)目前的微生物學的協(xié)議(Current Protocols in Microbiology),約翰 威利父子出版公司Hoboken, NJ; Coligan 等人編輯(2005)目前的蛋白科學的協(xié)議(CurrentProtocols in Protein Science),約翰 威利父子出版公司Hoboken, NJ;andEnna等人編輯(2005)目前的藥物學的協(xié)議(CurrentProtocols inPharmacology),約翰 威利父子出版公司Hoboken, NJ.，以及動物細胞培養(yǎng)(Animal Cell Culture) (Freshney,編輯1986)?！安∪恕笔侵溉嘶蚱渌麆游?。對應(yīng)度量單位、技術(shù)、特性或化合物的常用的縮寫如下“min”意思是分鐘，“h”或“hr”意思是小時，“ μ L”或“ μ I”意思是微升，“mL”或“ml”意思是毫升，“mM”意思是毫摩爾的，“M”意思是摩爾的，并且“mmole”意思是毫摩爾。術(shù)語“USP單位”是指用來測量一種維生素或藥物的效能(即，它的預(yù)期的生物效應(yīng))的單位。對于應(yīng)用這種單位的每種物質(zhì)，美國食品和藥品管理局(U. S. Food and DrugAdministration)已經(jīng)確定了與IUSP單位的劑量相關(guān)的生物效應(yīng)。然后,可以用這個標準單位來表示該物質(zhì)的其他量值。.在大多數(shù)情況下，該USP單位等于國際單位(IU)。一個USP單位的淀粉酶活性包含在以下胰脂肪酶的量值中，該胰脂肪酶以初始的速度分解淀粉，這樣使得在通過引用結(jié)合在此的、胰脂肪酶的官方論著(OfficialMonograph for Pancrelipase,美國藥典 2009 32/ 國家處方集 27 (The 2009 UnitedStates Pharmacopia 32/National Formulary 27))的淀粉酶活性分析(Assay foramylase activity)的條件下,每分鐘水解0. 16 μ Eq的糖苷鍵。一個USP單位的脂肪酶活性包含在以下胰脂肪酶的量值中，在pH為9. O和37°C溫度下以及在通過引用結(jié)合與此的、胰脂肪酶的官方論著(美國藥典2009 32/國家處方集27)的淀粉酶活性分析的條件下，該胰脂肪酶每分鐘釋放I. O μ Eq的酸。一個USP單位的蛋白酶活性包含在以下胰脂肪酶的量值中，在通過引用結(jié)合與此的、胰脂肪酶的官方論著(美國藥典2009 32/國家處方集27)的蛋白酶活性分析的條件下，該胰脂肪酶以初始的速度水解酪蛋白，這樣使得每分鐘釋放一定量的肽類，這些肽類沒有被三氯乙酸沉淀，三氯乙酸具有與15nmol的酪氨酸相同的280nm處的吸光度。
胰腺酶制劑(PEP)
合適的胰腺酶制劑(PEP)可以含有消化酶(例如脂肪酶類、蛋白酶類、和淀粉酶類)的混合物。PEP可以來自動物源。動物源的PEP可以被至少一種或多種病毒污染，例如PPV、PCV-2、EMCV, VSVjP A型流感病毒，以及核酸類。PEP還可以含有殘余量的異丙醇(IPA)?？梢源嬖谟赑EP中的活性酶類包括，但不限于，胰腺酶，例如胰脂肪酶(脂肪酶類、蛋白酶類、和淀粉酶類的混合物)或者胰酶?？梢源嬖谟赑EP中的其他活性酶類包括
(i)活性蛋白酶類，包括，但不限于胰蛋白酶，E. C.(酶學委員會編號)3. 4. 4. 4 ;糜蛋白酶，E. C. 3,4, 4,5 ;糜蛋白酶 B，E. C. 3,4, 5,6 ;胰肽酶 E，E. C. 3. 4. 4.7 ;羧肽酶 A，E. C. 3. 4. 2. I ；和羧肽酶B，E. C. 3. 4.2.2； (ii)活性脂肪酶類，包括，但不限于甘油酯水解酶(Lipase)，E. C. 3. I. I. 3 ;磷脂酶 A2，E. C. 3. I. I. 4 ;和甾醇酯水解酶，E. C. 3. I. I. 13 ； (iii)核酸酶類，例如，但不限于核糖核苷酸酶，E. C. 2. 7. 7. 16和脫氧核糖核酸酶，E. C. 3. I. 4. 5 ;以及(iv)活性淀粉酶類，例如α -淀粉酶，Ε. C. 3. 2. I. I。在一個優(yōu)選實施方案中，該PEP包括胰腺酶的混合物，這些胰腺酶包括脂肪酶類、 蛋白酶類、和淀粉酶類、以及任選的核酸酶類(例如核糖核苷酸酶)。這些酶類可以來自動物源，例如狗、羊和牛。該PEP中還可以包括共脂肪酶。應(yīng)該理解的是，如在此所使用的，術(shù)語“酶”不僅包括已經(jīng)活化的形式還有酶原前體，該酶原前體能夠在哺乳動物的腸液中被轉(zhuǎn)化為活化的形式。在一個實施方案中，該PEP是胰脂肪酶，該胰脂肪酶具有從約69到約120U USP/mg的脂肪酶活性，大于或等于約216U USP/mg的淀粉酶活性,大于或等于約264U USP/mg的蛋白酶活性，以及大于或等于約264UUSP/mg的總蛋白酶活性。該PEP中的脂肪酶活性的范圍(BPL處理之前或之后)可以是從約1，000到約150，000國際單位(U)。該PEP中的淀粉酶活性的范圍(BPL處理之前或之后)可以是從約3，000到約500，000U。該PEP中的蛋白酶活性的范圍(BPL處理之前或之后)可以是從約3，000到約500，000U。在另一個實施方案中，該PEP包含從約2，000到約75，000USP單位的脂肪酶，從約8，000到約250，000U的蛋白酶類，以及從約8，000到約250，000U的淀粉酶類。在又另一個實施方案中，該PEP包含從約2，000到約40，000USP單位的脂肪酶，從約8，000到約160，000U的蛋白酶類，以及從約8，000到約160，000U的淀粉酶類。該PEP中的脂肪酶活性(BPL處理之前或之后)可以是從約3000到約25，000IU，從約4500到約25，000IU,例如，從約4500到約5500IU,從約9000到約11，000IU,從約13，500到約16，500IU,以及從約18，000到約22，OOOIU0該PEP中的淀粉酶活性(BPL處理之前或之后)可以是從約8100到約180，000IU，例如從約8000到約45，000IU，從約17，000到約90，000IU，從約26，000到約135，000IU，從約35，000到約180，OOOIUo該PEP中的蛋白酶活性(BPL處理之前或之后)可以是從約8000到約134，000IU,例如從約8000到約34，000IU,從約 17，000 到約 67，000IU,從約 26，000 到約 100，000IU,從約 35，000 到約 134，OOOIUo 在一個實施方案中，該脂肪酶活性的范圍是從約4500到約5500IU，該淀粉酶活性的范圍是從約8000到約45，000IU,并且該蛋白酶活性的范圍是從約8000到約34，OOOIU0在另一個實施方案中，該脂肪酶活性的范圍是從約9000到約11，000IU，該淀粉酶活性的范圍是從約17，000到約90，000IU,并且該蛋白酶活性的范圍是從約17，000到約67，OOOIU0在又一個實施方案中，該脂肪酶活性的范圍是從約13，500到約16，500IU，該淀粉酶活性的范圍是從約26，OOO到約135，000IU,并且該蛋白酶活性的范圍是從約26，000到約100，OOOIU0在還一個實施方案中，該脂肪酶活性的范圍是從約18，000到約22，000IU，該淀粉酶活性的范圍是從約35，000到約180，000IU，并且該蛋白酶活性的范圍是從約35，000到約134，OOOIU0在還一個實施方案中，該脂肪酶活性可以是約5，000到約30，000脂肪酶PhEur。該PEP中的淀粉酶/脂肪酶(以USP單位計)的比率的范圍(BPL處理之前或之后)可以是從約I. 8到約8. 2，例如從約I. 9到約8. 2，以及約2. O到約8. 2。該PEP中的蛋白酶/脂肪酶的比率的范圍(BPL處理之前或之后)可以是從約I. 8到約6. 2，例如從約I. 9到約6. 1，以及約2. O到約6. I。在一個實施方案中，該PEP中的淀粉酶脂肪酶的比率(BPL處理之前或之后)可以在從約I到約10，例如從約2. 38到約8. 75的范圍內(nèi)(其中淀粉酶分析是根據(jù)USP進行的)。該PEP中的蛋白酶脂肪酶的比率(BPL處理之前或之后)可以在從約I. 00到約8. 00，例如從約I. 86到約5. 13的范圍內(nèi)(其中蛋白酶分析是根據(jù)USP進行的)。
在一個實施方案中，該PEP含有脂肪酶類、蛋白酶類、以及淀粉酶類，其中⑴該PEP中的淀粉酶與脂肪酶的比率的范圍是從約3:1到約6:1并且(ii)蛋白酶與脂肪酶的比率的范圍是從約3:1到約6:1 (如USP單位所測量的)。下表提供了另外的合適的胰腺酶混合物，其中脂肪酶類、蛋白酶類、以及淀粉酶類的量是以USP單位計。
I混合物D的混合物E ^混合物F—^I—^混合物G^ 法性〖USP單的法性(USP 的話性(USP單的法性 _I 位>單位)位)(USP單位)
m最大最小最大n: I— α — φ最大
-----M--
脂肪酶約 約約 約約19 I約45 約約60 類 2500 6500 12500 1750 500 000 丨 000 000
m ...約 10 約約 30 約——....................................................I-J....................................................I-J約 360
類 000 3500 000 80 50 160 3000 000 _O000 000 000
I..約 I O 約約 30 約 """"".........................................................I.................................約 360
類 000 3500 000 80 50 160 3000 000
_I O000 000 I 000 I _在另一個實施方案中，脂肪酶、蛋白酶、和淀粉酶的活性可以是以下表A和B中所描述的那些
表A
權(quán)利要求
1.一種具有減少的病毒感染性的胰腺酶制劑(PEP)，該胰腺酶制劑包含(i) 一種或多種胰腺酶以及(ii)3-羥基丙酸、β-丙內(nèi)酯(BPL)、或它們的一種混合物。
2.如權(quán)利要求I所述的胰腺酶制劑，包含(i)一種或多種胰腺酶以及(ii)3-羥基丙酸。
3.如權(quán)利要求I所述的胰腺酶制劑，其中該制劑已經(jīng)用丙內(nèi)酯(BPL)預(yù)處理過并且所具有的豬細小病毒(PPV)的病毒感染性比末用BPL處理過的制劑的病毒感染性要低至少 llog。
4.如權(quán)利要求I所述的胰腺酶制劑，其中該制劑已經(jīng)用丙內(nèi)酯(BPL)預(yù)處理過并且所具有的無包膜病毒的病毒感染性比末用BPL處理過的制劑的病毒感染性要低至少Ilog0
5.如權(quán)利要求I所述的胰腺酶制劑，其中該制劑已經(jīng)用丙內(nèi)酯(BPL)預(yù)處理過并且所具有的有包膜病毒的病毒感染性比末用BPL處理過的制劑的病毒感染性要低至少Ilog0
6.如權(quán)利要求I所述的胰腺酶制劑，其中該制劑已經(jīng)用丙內(nèi)酯(BPL)預(yù)處理過并且所具有的豬腦心肌炎病毒(EMCV)的病毒感染性比末用BPL處理過的制劑的病毒感染性要低至少llog。
7.如權(quán)利要求I所述的胰腺酶制劑，其中該制劑具有小于約103FFID50/gPEP的豬細小病毒(PPV)的病毒感染性。
8.如權(quán)利要求I至7中任一項所述的胰腺酶制劑，其中在該制劑中的至少一種胰腺酶來自一種動物源。
9.如權(quán)利要求I至8中任一項所述的胰腺酶制劑，其中一種或多種酶是選自以下各項脂肪酶類、蛋白酶類、以及淀粉酶類。
10.如權(quán)利要求I至9中任一項所述的胰腺酶制劑，其中該制劑包含胰脂肪酶。
11.一種具有減少的病毒感染性的藥用組合物，該藥用組合物包含如權(quán)利要求I至10中任一項所述的制劑，以及任選的一種藥學上可接受的賦形劑。
12.—種固體口服劑型，包括 一種具有減少的病毒感染性的胰腺酶制劑(PEP)，其中(i)該PEP包括從約1，000到約60，OOOUSP單位的脂肪酶類、從約3，000到約360，000USP單位的蛋白酶類、以及從約3，000到約360，000USP單位的淀粉酶類，并且(ii)該PEP已經(jīng)用β -丙內(nèi)酯(BPL)預(yù)處理過并且具有比沒有用BPL處理的PEP的病毒感染性低至少Ilog的豬細小病毒(PPV)的病毒感染性，以及 任選地，一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
13.如權(quán)利要求12所述的固體口服劑型，其中該劑型是處于一種粉末、片劑、微片劑、微球、球粒、或膠囊的形式。
14.一種固體口服劑型，包括 一種具有減少的病毒感染性的胰腺酶制劑(PEP)，其中(i)該PEP包括從約1，000到約60，000USP單位的脂肪酶類、從約3，000到約360，000USP單位的蛋白酶類、以及從約3，000到約360，000USP單位的淀粉酶類，并且(ii)該PEP具有低于約100FFID5(l/g PEP的PPV感染性，以及任選地，一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
15.一種固體口服劑型，包括 一種具有病毒減少/滅活的胰腺酶制劑(PEP)，其中(i)該PEP包括從約2，500到約.45，000USP單位的脂肪酶類、從約7，500到約270，000USP單位的蛋白酶類、以及從約7，500到約270，000USP單位的淀粉酶類，并且(ii)該PEP已經(jīng)用β -丙內(nèi)酯(BPL)預(yù)處理過并且具有比沒有用BPL處理的PEP的病毒感染性低至少Ilog的豬細小病毒(PPV)的病毒感染性，以及 任選地，一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
16.如權(quán)利要求15所述的固體口服劑型，其中該劑型是處于一種粉末、片劑、微片劑、微球、球粒、或膠囊的形式。
17.—種固體口服劑型，包括 一種具有病毒減少/滅活的胰腺酶制劑(PEP)，其中(i)該PEP包括從約2，500到約.45，000USP單位的脂肪酶類、從約7，500到約270，000USP單位的蛋白酶類、以及從約7，500到約270，000USP單位的淀粉酶類，并且(ii)該PEP具有低于約100FFID5(l/g PEP的PPV感染性，以及 任選地，一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
18.一種固體口服劑型，包括 一種具有減少的病毒感染性的胰腺酶制劑(PEP)，其中(i)該PEP包括從約1，000到約.60，000USP單位的脂肪酶類、從約3，000到約360，000USP單位的蛋白酶類、以及從約3，000到約360，000USP單位的淀粉酶類，并且(ii)該PEP已經(jīng)用β -丙內(nèi)酯(BPL)預(yù)處理過并且具有比沒有用BPL處理的PEP的病毒感染性低至少Ilog的豬細小病毒(PPV)的病毒感染性， 3-羥基丙酸、β -丙內(nèi)酯(BPL)、或它們的混合物，以及 任選地，一種或多種藥學上可接受的賦形劑。其中該劑型是處于一種粉末、片劑、微片劑、微球、球粒、或膠囊的形式。
19.如權(quán)利要求18所述的固體口服劑型，其中該PEP包含從約2，500到約45，000USP單位的脂肪酶類、從約7，500到約270，000USP單位的蛋白酶類、以及從約7，500到約.270，000USP單位的淀粉酶類。
20.一種固體口服劑型，包括 一種具有減少的病毒感染性的胰腺酶制劑(PEP)，其中(i)該PEP包含從約1，000到約.60，000USP單位的脂肪酶類、從約3，000到約360，000USP單位的蛋白酶類、以及從約3，000到約360，000USP單位的淀粉酶類，并且(ii)該PEP具有低于約100FFID5(l/g PEP的PPV感染性， 3-羥基丙酸、β -丙內(nèi)酯(BPL)、或它們的混合物，以及 任選地，一種或多種藥學上可接受的賦形劑。其中該劑型是處于一種粉末、片劑、微片劑、微球、球粒、或膠囊的形式。
21.如權(quán)利要求20所述的固體口服劑型，其中該PEP包含從約2，500到約45，000USP單位的脂肪酶類、從約7，500到約270，000USP單位的蛋白酶類、以及從約7，500到約.270，000USP單位的淀粉酶類。
22.一種用于對需要治療的病人進行胰功能不全的治療的方法，該方法包括向該病人給予一個治療有效量的如權(quán)利要求11所述的藥用組合物。
23.一種制備胰腺酶制劑(PEP)的方法，該方法包括以下步驟(a)使β-丙內(nèi)酯(BPL)與含有一種或多種胰腺酶的一種制劑反應(yīng)足夠的時間，以減少該制劑中的病毒感染性。
24.如權(quán)利要求21所述的方法，其中與BPL反應(yīng)后該制劑中的無包膜病毒的病毒感染性比與BPL反應(yīng)前該制劑中的無包膜病毒的病毒感染性低至少llog。
25.如權(quán)利要求21或22所述的方法，其中與BPL反應(yīng)后該制劑中的有包膜病毒的病毒感染性比與BPL反應(yīng)前該制劑中的有包膜病毒的病毒感染性低至少llog。
26.如權(quán)利要求21至23中任一項所述的方法，其中與BPL反應(yīng)后該制劑中的豬細小病毒(PPV)或豬腦心肌炎病毒(EMCV)的病毒感染性比與BPL反應(yīng)前該制劑的PPV或EMCV的病毒感染性分別低至少llog。
27.如權(quán)利要求21至24中任一項所述的方法，其中步驟(a)包括 (i)將BPL加入一種溶液中，該溶液含有該一種或多種胰腺酶的制劑，并且 (ii)在步驟(i)的溶液中將BPL孵育足夠的時間，以減少該溶液中的病毒感染性。
28.如權(quán)利要求25所述的方法，其中步驟(i)包括加入到一種溶液或懸浮液中，該溶液或懸浮液包含從約100到約200mg PEP/ml、從約O. 004%到約I. 0% (v/v)的BPL0
29.如權(quán)利要求21至26中任一項所述的方法，其中該反應(yīng)進行約30分鐘到約72小時。
30.如權(quán)利要求21至27中任一項所述的方法，其中該反應(yīng)在從約5°C到約50°C的溫度下進行。
31.如權(quán)利要求21至28中任一項所述的方法，進一步包括以下步驟(b):在BPL與該含有這些胰腺酶的制劑進行反應(yīng)后，使該BPL滅活。
32.如權(quán)利要求29所述的方法，其中步驟(b)包括將一種BPL滅活劑加到步驟(a)中形成的該溶液或懸浮液中。
33.如權(quán)利要求29所述的方法，其中步驟(b)包括將步驟(a)中形成的該溶液或懸浮液進行冷凍，然后將它凍干。
34.如權(quán)利要求29所述的方法，其中步驟(b)包括將步驟(a)中形成的該溶液或懸浮液孵育足夠的時間，以將BPL降解為3-羥基丙酸，并且其中該溶液是一種水溶液。
全文摘要
本發(fā)明提供了包含胰腺酶制劑(PEP)的藥用組合物，這些胰腺酶制劑具有減少至低于顯著水平的病毒感染性并且具有高的酶活性。這些PEP可以包含脂肪酶類，蛋白酶類，淀粉酶類，無包膜病毒(例如，豬細小病毒(PPV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)、豬腦心肌炎病毒(EMCV))，以及有包膜病毒(例如，水皰性口炎病毒(VSV)、和A型流感病毒(IF A))。本發(fā)明還包括通過給予這些藥用組合物治療胰功能不全的方法以及通過用β-丙內(nèi)酯(BPL)處理該PEP以減少病毒感染性來制備這些藥用組合物的方法。
文檔編號A61K47/22GK102884181SQ201180022664
公開日2013年1月16日 申請日期2011年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月19日
發(fā)明者彼得·蒂森, 約瑟夫·塞萊伊 申請人:加拿大阿普塔利斯制藥公司