專利名稱：濃縮人免疫球蛋白組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于療法的人免疫球蛋白G劑型。
背景技術(shù)：
大量病理狀況目前用免疫球蛋白G (IgG)組合物治療。可以提到的是例如具有抗體生產(chǎn)缺陷的原發(fā)性免疫缺陷、川崎病、兒童和成人免疫血小板減少性紫癜、具有抗體生產(chǎn)缺陷的繼發(fā)性免疫缺陷特別是慢性淋巴細(xì)胞白血病或與復(fù)發(fā)性感染相關(guān)的骨髓瘤、伴有細(xì)菌感染的兒童HIV感染、多灶性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)病、吉蘭-巴雷綜合征、慢性或嚴(yán)重急性細(xì)小病毒B19感染、獲得性或組成性免疫缺陷、皮質(zhì)留類耐受性皮肌炎、急性肌無力、慢性特發(fā)性多神經(jīng)根神經(jīng)炎、與例如HIV感染相關(guān)的免疫血小板減少性紫癜、僵人綜合征、自體免疫性中性粒細(xì)胞減少癥、耐藥性自體免疫性幼紅細(xì)胞減少癥、自身抗體誘導(dǎo)的獲得性抗凝劑綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、眼色素層炎等。使用免疫球蛋白治療的病理狀況涉及特別高的劑量，其表現(xiàn)為每個(gè)月以患者的體重計(jì)約0.4至2克的劑量。就此而言，目前銷售的大多數(shù)免疫球蛋白G為靜脈內(nèi)給藥設(shè)計(jì)，其允許以每3或4周給藥一次的頻率在幾百毫升的制劑中輸注幾十克IgG。靜脈內(nèi)給藥需要護(hù)理人員在場(chǎng)；它最通常在醫(yī)院中執(zhí)行。在年幼兒童和老年人中，由于靜脈通路不良，可能難以進(jìn)行靜脈內(nèi)給藥，其在某些情況下阻止治療的進(jìn)行。存在為皮下給藥設(shè)計(jì)的IgG(SCIg)。這種給藥途徑為患者提供更高靈活性和更大獨(dú)立性，提高患者的生活質(zhì)量。此外，使用皮下免疫球蛋白(SCIg)還降低了與靜脈內(nèi)輸注有關(guān)的某些副作用，特別是系統(tǒng)性反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。通過皮下途徑避免了使用靜脈內(nèi)途徑所觀察到的循環(huán)滴度的大的變化性，允許在輸注之間將血清滴度更好地調(diào)節(jié)在生理范圍內(nèi)。使用SCIg的主要限制之一是待給藥的劑量:它需要以每?jī)芍芑蛎恐芤淮位蛏踔撩恐軒状蔚谋菼VIg更高的頻率，在一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)中注射大體積。使用商業(yè)化SCIg進(jìn)行大體積注射可能引起局部不耐受反應(yīng)例如浮腫或紅斑(M.Delire等，^Experienceclinique de I' administration d' immunoglobulines par voie sous-cutanee dans Ietraitement des immunodeficiences primaires〃[在原發(fā)性免疫缺陷的治療中免疫球蛋白皮下給藥的臨床經(jīng)驗(yàn)(Clinical experience of the subcutaneous administrationof immunoglobulins in the treatment of primary immunodeficiencies) ], Rev MedLi6ge2010;65:2; 103-108)。SCIg濃度是調(diào)節(jié)注射體積和注射位點(diǎn)數(shù)量的決定性特征。指定注射劑量和每個(gè)位點(diǎn)的最大可注射體積后，SCIg濃度決定了注射位點(diǎn)數(shù)量，并因此決定了給藥頻率。已知存在可以皮下給藥的濃度為200g/l或20%的濃縮IgG溶液:來自于Hizentra的 IgPiO20 ο此外，還存在可以皮下給藥的濃度為160g/l或16%的其他濃縮IgG溶液，例如特別是來自于 Baxter 的 Vivaglobulin 或來自于 Octapharma 的Gammanorm 。穩(wěn)定且皮下給藥耐受性良好的高度濃縮的IgG組合物的獲得，需要考慮相當(dāng)多的技術(shù)限制。事實(shí)上，具體來說已知當(dāng)IgG組合物的免疫球蛋白濃度增加時(shí)，在所述組合物中可以形成低聚物和多聚物。低聚物和多聚物能夠激活補(bǔ)體系統(tǒng)，并具有過敏反應(yīng)的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)。這些低聚物和多聚物也能在被治療的患者中誘導(dǎo)低血壓現(xiàn)象。從管控的觀點(diǎn)來看，這是不合乎需要并且被嚴(yán)格控制的。此外，還已知道，高度濃縮的蛋白質(zhì)溶液也產(chǎn)生由團(tuán)聚引起的不穩(wěn)定性問題。與一般不依賴于濃度的化學(xué)反應(yīng)相反，涉及生物分子碰撞的團(tuán)聚直接依賴于濃度。對(duì)熱、機(jī)械或化學(xué)脅迫的任何暴露都可能誘導(dǎo)團(tuán)聚。例如，已知水-空氣界面處的相互作用、超濾過程的機(jī)械脅迫(微空化作用)以及離子強(qiáng)度的改變，都誘導(dǎo)蛋白質(zhì)團(tuán)聚。另一個(gè)相當(dāng)大的技術(shù)限制與IgG制造方法中通常使用的切向超濾過程相關(guān):在高IgG濃度下，IgG在膜處的局部過度濃縮可能破壞極化層，從而使切向超濾效率降低，或者可能引起膜的完全堵塞，阻斷切向超濾。與IgG濃縮相伴的粘度增加也是主要的技術(shù)限制。通過降低濃縮IgG的流動(dòng)，粘度事實(shí)上可能在用于配制和無菌分配步驟的工藝方面，以及對(duì)IgG組合物的可注射性而言在最終應(yīng)用方面，都產(chǎn)生問題。就此而言，對(duì)于從例如人類血漿生產(chǎn)具有高度升高的濃度以便減少其注射體積的IgG組合物，存在著不斷增長(zhǎng)的需求，所述組合物可以被容易地給藥并對(duì)皮下給藥耐受性良好，使其能夠提高患者的舒適性并減少副作用。發(fā)明概述為了克服由高度濃縮的IgG的獲得所產(chǎn)生的問題，本申請(qǐng)人開發(fā)了用于獲得高度濃縮的IgG組合物的新方法，所述IgG組合物濃度為至少230g/l，更通常在230至350g/l之間，并易于皮下給藥。優(yōu)選情況下，所述新方法能夠獲得至少250g/l、優(yōu)選約250g/l至約300g/l的濃縮IgG組合物。更具體來說，所述包含人免疫球蛋白G (IgG)的藥物組合物的制備方法包括下列步驟:a)提供IgG制備物；b)向所述制備物添加至少一種表面活性劑和/或至少一種氨基酸；c)通過超濾對(duì)所述IgG進(jìn)行濃縮；d)然后添加表面活性劑，所述表面活性劑可以與步驟b)的表面活性劑相同或不同。在步驟b)中還可以添加選自糖、糖衍生物和鹽類的一種或多種化合物。優(yōu)選情況下，所述制備包含人免疫球蛋白G (IgG)的藥物組合物的新方法包括下列步驟:a)提供從人類血液的血漿級(jí)份純化的IgG制備物；b)向所述制備物添加至少一種表面活性劑和/或至少一種氨基酸，并任選添加選自糖、糖衍生物和鹽類的一種或多種化合物，所述表面活性劑優(yōu)選以低于所述表面活性劑的臨界膠粒濃度的濃度添加；c)通過超濾對(duì)所述IgG進(jìn)行濃縮 ；d)然后添加可以與在步驟b)中添加的表面活性劑相同或不同的表面活性劑，以便獲得所需液體藥物組合物。在通過超濾進(jìn)行濃縮的步驟之前，添加本發(fā)明方法的步驟b)的賦形劑(氨基酸、糖、糖衍生物、鹽類和/或濃度低于所述表面活性劑的臨界膠粒濃度的表面活性劑)。有利情況下，在液體藥物組合物的制備方法的步驟b)中添加至少一種氨基酸，其可以是親水性氨基酸或具有帶正電側(cè)鏈的氨基酸。具體來說，在液體藥物組合物的制備方法的步驟b)中添加至少一種氨基酸，所述氨基酸是親水性氨基酸或是帶有正電側(cè)鏈的氨基酸與至少一種疏水性氨基酸的組合。有利情況下，在液體藥物組合物的制備方法的步驟b)中添加至少一種糖或一種糖衍生物，其選自蔗糖、二糖和三糖、多糖，例如葡萄糖、乳糖、麥芽糖、海藻糖、環(huán)糊精、麥芽糖糊精和葡聚糖、還原糖或多元醇。有利情況下，在步驟b)中添加選自無機(jī)鹽和有機(jī)鹽的鹽。有利情況下，在步驟b)和/或d)中添加的表面活性劑優(yōu)選為非離子型去污劑。本發(fā)明的另一 個(gè)主題涉及利用所述方法獲得的包含人免疫球蛋白G (IgG)的藥物組合物，其特征在于所述IgG濃度為至少230g/l組合物。優(yōu)選情況下，所述IgG濃度為至少250g/l組合物。有利情況下，本發(fā)明的組合物采取液體形式。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的組合物包含氨基酸和表面活性劑。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的組合物包含氨基酸、鹽和表面活性劑。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的組合物包含糖或糖衍生物和表面活性劑。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的組合物包含氨基酸、糖或糖衍生物以及表面活性劑。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的組合物包含氨基酸、糖或糖衍生物、鹽以及表面活性劑。利用本文描述的方法獲得或能夠獲得的組合物，也是本發(fā)明的一部分。有利情況下，這些組合物采取適合于皮下或肌肉內(nèi)給藥、優(yōu)選皮下給藥的形式。詳細(xì)描述定義在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語“人免疫球蛋白G”或“人IgG”是指多價(jià)免疫球蛋白，其基本上是IgG，任選包括IgM。它們可以是完整免疫球蛋白或片段例如F(ab’)2或F(ab)，以及在多價(jià)免疫球蛋白的制造方法期間獲得的任何中間級(jí)份。術(shù)語“穩(wěn)定性”對(duì)應(yīng)于IgG的物理和/或化學(xué)穩(wěn)定性。術(shù)語“物理穩(wěn)定性”是指Ig的二聚、低聚或多聚形式的不溶性或可溶性聚集體形成的減少或不存在，并且也指分子的任何結(jié)構(gòu)變性的減少或不存在。術(shù)語“化學(xué)穩(wěn)定性”是指在以固體狀態(tài)或溶解形式在加速條件下儲(chǔ)存期間，IgG的任何化學(xué)修飾的減少或不存在。例如，水解、脫氨基和/或氧化現(xiàn)象被阻止或延遲。含硫氨基酸的氧化受到限制。制造方法:更具體來說，本文中描述了包含人免疫球蛋白G (IgG)的藥物組合物的制備方法，所述方法包括下列步驟:
a)提供IgG制備物；b)向制備物添加選自氨基酸、糖、糖衍生物、鹽類和表面活性劑的一種或多種化合物，所述表面活性劑以低于所述表面活性劑的臨界膠粒濃度的濃度添加；c)通過超濾濃縮IgG ；d)然后添加表面活性劑，所述表面活性劑可以與步驟b)的表面活性劑相同或不同。更具體來說，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在超濾之前添加表面活性劑，并優(yōu)選在步驟b)與步驟d)之間分步添加表面活性劑，能夠避免免疫球蛋白降解。在本發(fā)明的上下文中，液體IgG組合物是指通過人類血漿的分級(jí)直接獲得的IgG組合物的水性溶液。水性介質(zhì)由注射用水(WFI)構(gòu)成，其可以含有與IgG相容的可藥用賦形劑。IgG組合物可以預(yù)先經(jīng)歷特定的病毒失活/消除步驟，例如去污劑溶劑處理、巴氏消毒和/或納濾。本發(fā)明的組合物包含的IgG可以是多克隆或單克隆的。IgG可以從人類或動(dòng)物血液分離，或通過其他方式，例如通過分子生物學(xué)技術(shù)，例如在本技術(shù)領(lǐng)域的專業(yè)人員公知的細(xì)胞系統(tǒng)中生產(chǎn)。本發(fā)明的組合物特別適合于高度純化的IgG。有利情況下，本發(fā)明的IgG通過人類血楽；的分級(jí)來獲得。用于人類血衆(zhòng)分級(jí)的優(yōu)選方法由Cohn等(J.Am.Chem.Soc., 68, 459, 1946)、Kistler 等(Vox Sang., 7, 1962, 414-424)>Steinbuch 等(Rev.Franc.Et.Clin, et Biol.，XIV，1054, 1969)以及在專利申請(qǐng)W094/9334中描述，這些文獻(xiàn)以其全文引為參考。制備免疫球蛋白G組合物的方法也描述在專利申請(qǐng)W002/092632中，在此以其全文引為參考。一般來說，通過切向超濾對(duì)IgG濃縮物進(jìn)行隨后的濃縮步驟，然后進(jìn)行除菌過濾，并可以將其包裝在瓶中，并優(yōu)選儲(chǔ)存在4°C左右的溫度下。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的IgG可以被剝奪抗A抗體和抗B抗體，正如在專利申請(qǐng)W02007/077365中指出的。

根據(jù)本發(fā)明，通過切向超濾進(jìn)行濃縮的步驟能夠獲得至少230g/l、優(yōu)選至少250g/l的免疫球蛋白濃度，而不引起膜的堵塞，免疫球蛋白的完整性得以維持，并在同時(shí)避免界面處的團(tuán)聚和流動(dòng)或剪切效應(yīng)應(yīng)力下的變性。賦形劑的選擇是基于它們的穩(wěn)定化能力以及它們?cè)谇邢虺瑸V步驟期間允許IgG濃縮的能力。賦形劑以下列方式添加:向從人類血液的血漿級(jí)份純化的人免疫球蛋白G制備物添加賦形劑，其是至少一種氨基酸和/或至少一種表面活性劑。優(yōu)選情況下，表面活性劑以低于所述表面活性劑的臨界膠粒濃度的濃度添加；在超濾后，添加可以與步驟b)中添加的表面活性劑相同或不同的表面活性劑，以便獲得所需藥物組合物，這種方法能夠優(yōu)化免疫球蛋白G濃度。優(yōu)選情況下，超濾步驟是在例如截止閾值低于150kD的膜上的切向超濾步驟。有利情況下，在超濾之前向IgG制備物添加的賦形劑包含一種或多種氨基酸和/或一種或多種表面活性劑和任選的一種或多種鹽類，或由它們構(gòu)成。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，在超濾之前向IgG制備物添加的賦形劑包含一種或多種氨基酸和表面活性劑，或由它們構(gòu)成。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，在超濾之前還向IgG制備物添加包含一種或多種糖或糖衍生物、或由它們構(gòu)成的賦形劑。有利情況下，在超濾之前向IgG制備物添加的賦形劑包含一種或多種氨基酸和一種或多種糖或糖衍生物和表面活性劑，或由它們構(gòu)成。在另一個(gè)有利實(shí)施方案中，在超濾之前向IgG制備物添加的賦形劑包含一種或多種氨基酸和一種或多種糖或糖衍生物和一種或多種鹽類，或由它們構(gòu)成。在另一個(gè)有利實(shí)施方案中，在超濾之前向IgG制備物添加的賦形劑包含一種或多種氨基酸和一種或多種糖或糖衍生物、一種或多種鹽類和表面活性劑，或由它們構(gòu)成。本申請(qǐng)人令人吃驚地顯示，在通過超濾進(jìn)行IgG濃縮步驟之前，通過添加氨基酸和/或濃度典型地低于所述表面活性劑的臨界膠粒濃度的表面活性劑來配制IgG，可以獲得高度濃縮的IgG，以便首先確保獲得直接具有所需IgG制劑的制備物，其次確保藥物組合物的穩(wěn)定性、相容性和良好的耐受性，另外避免了超濾膜處的堵塞現(xiàn)象?？梢栽诒景l(fā)明的方法的步驟b)期間添加的氨基酸選自下列組:親水性氨基酸或帶有正電側(cè)鏈的氨基酸，以及任選至少一種疏水性氨基酸。親水性(或極性)氨基酸或帶有正電側(cè)鏈的氨基酸包括賴氨酸、精氨酸、組氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺。 在親水性氨基酸或帶有正電側(cè)鏈的氨基酸中，可以優(yōu)選使用甘氨酸或組氨酸。親水性氨基酸或帶有正電側(cè)鏈的氨基酸例如精氨酸，以及適合時(shí)疏水性氨基酸或甚至堿金屬鹽或堿土金屬鹽或過渡金屬鹽的添加，促進(jìn)人IgG的穩(wěn)定化作用。疏水性氨基酸(具有非極性側(cè)鏈)具體來說包括下列氨基酸:丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，異亮氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，脯氨酸等。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，步驟b)的氨基酸是甘氨酸，其濃度優(yōu)選為200至300mM?？梢栽诒景l(fā)明方法的步驟b)期間添加的糖或糖衍生物選自下列組:蔗糖，二糖和三糖，以及多糖，例如葡萄糖、乳糖、麥芽糖、海藻糖、環(huán)糊精、麥芽糖糊精和葡聚糖、還原糖或多元醇。作為還原糖，可以特別提到的是葡萄糖或果糖。作為多元醇，可以特別提到的是甘露糖醇、山梨糖醇和木糖醇。術(shù)語“鹽”打算是指堿或堿土金屬或過渡金屬的鹽?？梢栽诒景l(fā)明方法的步驟b)期間添加的鹽類選自下列組:無機(jī)鹽，有機(jī)鹽或幾種鹽類的混合物。作為無機(jī)鹽，可以特別提到的是:磷酸鈉，氯化鈉，氯化鈣或氯化鋅。作為有機(jī)鹽，可以特別提到的是:檸檬酸鈉，琥珀酸鈉，乙酸鈉或硫氰酸鈉。優(yōu)選情況下，所使用的鹽是有機(jī)鹽，優(yōu)選為乙酸鈉。有利情況下，在步驟b)中添加O至IOOmM的乙酸鈉。本發(fā)明方法的步驟b)可以包括添加一種或多種表面活性劑，例如非離子型去污劑類型的表面活性劑，在該步驟期間所述表面活性劑以低于臨界膠粒濃度的濃度添加。有利情況下，在本發(fā)明的組合物 中使用的適合的表面活性劑選自聚山梨醇酯80O^Tween 80，其是聚氧化乙烯失水山梨糖醇單油酸酯)、聚山梨醇酯20 (或Tween 20，其是聚氧化乙烯失水山梨糖醇單月桂酸酯)、Triton XlOO (辛苯昔醇10)、泊洛沙姆、聚氧化乙烯烷基醚、乙烯/丙烯的嵌段共聚物和Pluronic F68 (聚乙烯聚丙二醇)。優(yōu)選情況下，使用Tween 80、Tween 20和泊洛沙姆188。非離子型去污劑也可以彼此組合。
在本發(fā)明方法的步驟b)期間對(duì)藥物組合物的pH進(jìn)行調(diào)整。優(yōu)選情況下，pH被調(diào)整到4.0至8.0之間，有利情況下在4.2至5.5或6.8至7.8之間。具體來說，液體藥物組合物的pH在6.9至7.6之間，優(yōu)選在7.0至7.6之間，優(yōu)選在7.1至7.5之間，優(yōu)選在7.2至7.4之間，并且優(yōu)選為7.3。本發(fā)明方法的步驟d)可以包含一種或多種表面活性劑，例如非離子型去污劑類型的表面活性劑。在本發(fā)明的組合物中使用的適合的表面活性劑優(yōu)選選自聚山梨醇酯80(或Tween 80，其是聚氧化乙烯失水山梨糖醇單油酸酯)、聚山梨醇酯20(或Tween 20，其是聚氧化乙烯失水山梨糖醇單月桂酸酯)、Triton XlOO (辛苯昔醇10)、泊洛沙姆、聚氧化乙烯烷基醚、乙烯/丙烯的嵌段共聚物和Pluronic F68 (聚乙烯聚丙二醇)。優(yōu)選情況下，使用Tween 80、Tween 20和泊洛沙姆188。非離子型去污劑也可以彼此組合。足以使本發(fā)明的組合物穩(wěn)定的非離子型去污劑的濃度優(yōu)選在O至IOOOppm之間，優(yōu)選在O至300ppm之間，優(yōu)選在O至50ppm之間。在步驟d中表面活性劑的添加能夠避免組合物的團(tuán)聚現(xiàn)象。根據(jù)一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案,表面活性劑是聚山梨醇酯,優(yōu)選為聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。優(yōu)選情況下，在步驟b)和/或d)中以50至300ppm的總濃度添加表面活性劑。有利情況下，在步驟b)中添加的表面活性劑濃度低于75ppm、優(yōu)選低于50ppm、優(yōu)選低于40ppm。令人吃驚的是，恰恰相反，本發(fā)明人證實(shí)高溫不是必需的。已經(jīng)在低于30°C的溫度下獲得了出色結(jié)果。因此，步驟c)的超濾可以在低于30°C、優(yōu)選低于25°C的溫度下執(zhí)行。優(yōu)選情況下，步驟c)的超濾在15°C至25°C之間、優(yōu)選在約20°C的溫度下執(zhí)行。本發(fā)明的方法能 夠獲得液體藥物組合物，其特征在于在所述組合物中，IgG濃度為至少230g/l，優(yōu)選為至少250g/l，典型在230g/l至350g/l之間。劑型:本發(fā)明的液體藥物組合物包含至少230g/l的免疫球蛋白G，它優(yōu)選包含250g/l的免疫球蛋白G。有利情況下，液體藥物組合物還可以包含氨基酸和表面活性劑。具體來說，液體藥物組合物可以包含一種或多種親水性氨基酸或帶有正電側(cè)鏈的氨基酸和任選至少一種疏水性氨基酸，以及表面活性劑。有利情況下，液體藥物組合物還可以包含氨基酸、鹽和表面活性劑。有利情況下，液體藥物組合物還可以包含糖或糖衍生物和表面活性劑。有利情況下，液體藥物組合物還可以包含氨基酸、糖或糖衍生物和表面活性劑。有利情況下，液體藥物組合物還可以包含氨基酸、糖或糖衍生物、鹽和表面活性劑。根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，本發(fā)明提供了一種免疫球蛋白G組合物，其包含至少一種氨基酸、至少一種表面活性劑和任選至少一種鹽，其特征在于免疫球蛋白G濃度為至少230g/l。優(yōu)選情況下，組合物包含氨基酸、鹽和表面活性劑。在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，組合物包含:-230g/l IgG ；
-甘氨酸；-乙酸鈉緩沖液；-以及聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80或20或泊洛沙姆，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，本發(fā)明提供了一種免疫球蛋白G組合物，其包含至少一種氨基酸、至少一種鹽和至少一種表面活性劑，其特征在于免疫球蛋白G濃度為至少230g/I。優(yōu)選情況下，免疫球蛋白G濃度為至少約250g/l，并且所述組合物包含氨基酸、鹽和表面活性劑。在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，組合物包含:-約250g/l IgG ；-甘氨酸；-任選的乙酸鈉緩沖液；-以及聚山梨醇酯，優(yōu)選為聚山梨醇酯80或20或泊洛沙姆，所述組合物的pH優(yōu)選 在4.2至5.5之間。更具體來說，組合物可以包含:-約250g/l IgG ；-約50至300mM甘氨酸；-約25至150mM乙酸鹽緩沖液；-以及約100至300ppm的聚山梨醇酯80或泊洛沙姆，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。根據(jù)一個(gè)特定實(shí)例，所述組合物包含:-約250g/l IgG ；-約200mM 甘氨酸；-約50mM乙酸鈉緩沖液(即25mM乙酸鈉+25mM乙酸)；-以及約200ppm的聚山梨醇酯80，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)例中，組合物包含:-約250g/l IgG ；-約200mM 或 150mM 甘氨酸；-約50mM乙酸鹽緩沖液(即25mM乙酸鈉+25mM乙酸)；-以及約200ppm的聚山梨醇酯80，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。根據(jù)另一個(gè)具體實(shí)例，組合物包含:-約250g/l IgG ；-約200mM 甘氨酸；-約50mM乙酸鹽緩沖液(即25mM乙酸鈉+25mM乙酸)；-以及約200ppm泊洛沙姆188。所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，本發(fā)明提供了一種免疫球蛋白G，其包含至少一種氨基酸和至少一種表面活性劑，其特征在于免疫球蛋白G的濃度為至少230g/l。優(yōu)選情況下，免疫球蛋白G濃度為至少約250g/l，并且組合物包含氨基酸和表面活性劑。本發(fā)明的優(yōu)選液體藥物組合物包含:-濃縮的人免疫球蛋白G，其濃度在230至350g/l之間，優(yōu)選為約250g/l；-甘氨酸；-任選的乙酸鈉緩沖液；-聚山梨醇酯，優(yōu)選為聚山梨醇酯80或泊洛沙姆，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。更具體來說，優(yōu)選的組合物包含:-濃縮的人免疫球蛋白G，其濃度在230至350g/l之間，優(yōu)選為約250g/l；-200 至 300mM 的甘氨酸；-O至IOOmM的乙酸鈉緩沖液；-以及50至300ppm的聚山梨醇酯，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。具體來說，優(yōu)選的組合物包含:-濃度為約250g/l的濃縮人免疫球蛋白G；_200mM 的甘氨酸；-50mM的乙酸鈉緩沖液；-以及200ppm的聚山梨醇酯，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。另一種優(yōu)選的組合物包含:-濃度為約250g/l的濃縮人免疫球蛋白G；-250mM 的甘氨酸；-以及200ppm的聚山梨醇酯，所述組合物的pH優(yōu)選在4.2至5.5之間。在另一個(gè)特定實(shí)例中，組合物包含:-約250g/l IgG ；-約200 至 250mM 組氨酸；-以及適合時(shí)，100至300ppm的聚山梨醇酯80或泊洛沙姆，所述溶液的pH在6.8至7.8之間。根據(jù)另一個(gè)特定實(shí)例，組合物包含:-約250g/l IgG ；-約200 至 250mM 精氨酸；-以及適合時(shí)，約100至300ppm的聚山梨醇酯80或泊洛沙姆，所述溶液的pH在6.8至7.8之間。根據(jù)另一個(gè)特定實(shí)施方案，本發(fā)明提供了一種免疫球蛋白G組合物，其包含至少一種氨基酸、至少一種糖或一種糖衍生物和至少一種表面活性劑，其特征在于免疫球蛋白G濃度為至少230g/l。優(yōu)選情況下，免疫球蛋白G濃度為至少約250g/l，并且組合物包含氨基酸、糖和表面活性劑， 溶液的pH在4.2至5.5之間。
本文還描述了一種免疫球蛋白G組合物，其包含至少一種糖或一種糖衍生物和至少一種表面活性劑，其特征在于免疫球蛋白G濃度為至少230g/l。優(yōu)選情況下，免疫球蛋白G濃度為至少250g/l，并且組合物包含糖和表面活性劑。在一個(gè)特定實(shí)例中，本文所述的組合物包含:-約250g/l IgG ；-約40_50g/l 甘露糖醇；-以及適合時(shí)，約100至300ppm的聚山梨醇酯80或泊洛沙姆，溶液的pH在4.2至5.5之間。根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，本發(fā)明提供了一種免疫球蛋白G組合物，其包含至少一種氨基酸、至少一種鹽和至少一種表面活性劑，其特征在于免疫球蛋白G濃度為至少230g/
I。優(yōu)選情況下，免疫球蛋白G濃度為270g/l，并且組合物包含氨基酸、鹽和表面活性劑。在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，組合物包含:-約270g/l IgG ；

-甘氨酸；-乙酸鹽緩沖液(乙酸鈉/乙酸)；-以及適合時(shí)，聚山梨醇酯80或泊洛沙姆。優(yōu)選情況下，本發(fā)明的IgG組合物的僅有賦形劑是所述氨基酸、鹽和表面活性劑(優(yōu)選為非離子型去污劑類型的)。完全由這些賦形劑構(gòu)成(除了 IgG之外)的這樣的IgG組合物具有為IgG組合物提供良好穩(wěn)定性、良好相容性和良好的局部耐受性，以及由于存在最小的賦形劑有效數(shù)目和存在最小的賦形劑有效量而減少工業(yè)規(guī)模制備時(shí)間和成本的優(yōu)點(diǎn)。給藥途徑:本發(fā)明的IgG組合物可用于治療，特別是采取不僅可以通過靜脈內(nèi)，而且更有利的是可以通過皮下或肌肉內(nèi)注射的形式。皮下途徑對(duì)于慢性自體免疫疾病的治療來說具有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)，例如提高患者的舒適性和減少副作用。皮下給藥不需靜脈進(jìn)入，從而在某些情況下，當(dāng)靜脈通路的缺乏阻斷了治療的進(jìn)入時(shí)，特別是對(duì)于年幼兒童來說，構(gòu)成了決定性優(yōu)勢(shì)。通過皮下途徑使用免疫球蛋白還降低了與靜脈內(nèi)輸注相關(guān)的某些副作用，特別是系統(tǒng)性反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。避免了使用靜脈內(nèi)途徑所觀察到的循環(huán)滴度的大的變化性，允許在輸注之間將血清滴度更好地調(diào)節(jié)在生理范圍內(nèi)。盡管通過皮下途徑具有天然較低的生物可利用性，但皮下給藥的免疫球蛋白具有至少等同于靜脈內(nèi)給藥的免疫球蛋白(IVIg)的效能。最后，SCIg對(duì)于在家治療的可行性，對(duì)于某些治療來說如果不是決定性的優(yōu)點(diǎn)，也是相當(dāng)重要的。它為患者提供了更大的靈活性和獨(dú)立性，提高了患者的生活質(zhì)量。濃度的增加通過減少注射頻率，有助于患者的舒適性。SCIg濃度是調(diào)整注射體積和注射位點(diǎn)數(shù)量以及因此給藥頻率的決定性特征。采取液體形式的本發(fā)明的IgG組合物，在25°C下儲(chǔ)存6個(gè)月時(shí)間段后，其聚合物水平良好地低于歐洲藥典(European Pharmacopoeia)設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)(3%),有利情況下低于約1%。
本發(fā)明的組合物可以是藥物組合物，即適合于治療性應(yīng)用的組合物。因此，本發(fā)明的藥物組合物可用作藥物，特別是用于治療具有抗體生產(chǎn)缺陷的原發(fā)性免疫缺陷、川崎病、兒童和成人免疫血小板減少性紫癜、具有抗體生產(chǎn)缺陷的繼發(fā)性免疫缺陷特別是慢性淋巴細(xì)胞白血病或與復(fù)發(fā)性感染相關(guān)的骨髓瘤、伴有細(xì)菌感染的兒童HIV感染、多灶性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)病、吉蘭-巴雷綜合征、慢性或嚴(yán)重急性細(xì)小病毒B19感染、獲得性或組成性免疫缺陷、皮質(zhì)留類耐受性皮肌炎、急性肌無力、慢性特發(fā)性多神經(jīng)根神經(jīng)炎、與例如HIV感染相關(guān)的免疫血小板減少性紫癜、僵人綜合征、自體免疫性中性粒細(xì)胞減少癥、耐藥性自體免疫性幼紅細(xì)胞減少癥、自身抗體誘導(dǎo)的獲得性抗凝劑綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、眼色素層炎。下面的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行說明，但不限制其范圍。
實(shí)施例:實(shí)施例1:25%IgG纟目合物的制各1.1組合物Fl 的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入150mM甘氨酸和50mM NaCl，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.2組合物F2的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入200mM脯氨酸，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.3組合物F3的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入200mM脯氨酸，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入200ppm的Tween80,由此獲得配制好的250g/I的濃縮IgG組合物。1.4組合物F4的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入150mM甘氨酸和50mM乙酸鹽緩沖液(25mM乙酸鈉和25mM乙酸)，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入200ppm的Tween80，由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.5組合物F5的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入150mM甘氨酸和50mM乙酸鹽緩沖液(25mM乙酸鈉和25mM乙酸)，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入200ppm泊洛沙姆，由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.6組合物F6的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。
向獲得的IgG組合物加入150mM甘氨酸和50mM乙酸鹽緩沖液(25mM乙酸鈉和25mM乙酸)，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.7組合物F7的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入150mM脯氨酸和50mM乙酸鹽緩沖液(25mM乙酸鈉和25mM乙酸)，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入200ppm的Tween80，由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.8組合物F8的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入250mM脯氨酸和5ppm的Tween80,并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.6至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入195ppm的Tween80,由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.9組合物F9的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入200mM組氨酸和5ppm的Tween80,并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在6.8至7.8之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入195ppm的Tween80,由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.10組合物FlO 的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入250mM精氨酸和5ppm的Tween80,并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在6.8至7.8之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入195ppm的Tween80,由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.11組合物F11的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入200mM甘氨酸和50mM乙酸鹽緩沖液(25mM乙酸鈉和25mM乙酸)，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在4.5至5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入200ppm的Tween80，由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。1.12組合物Fl2的制備按照本申請(qǐng)人在國(guó)際專利申請(qǐng)W02007/077365中開發(fā)的方法，獲得IgG組合物。向獲得的IgG組合物加入250mM甘氨酸，并將所述預(yù)制的IgG溶液在超濾盒上，在
4.5至5.5之間的pH下進(jìn)行切向超濾。然后加入200ppm的Tween80,由此獲得配制好的250g/l的濃縮IgG組合物。結(jié)果在下面的表I中給出。表1:測(cè)試的組合物
權(quán)利要求
1.用于制備包含人免疫球蛋白G(IgG)的液體藥物組合物的方法，所述方法包括下列步驟: a)提供IgG制備物； b)向所述制備物添加至少一種表面活性劑和/或至少一種氨基酸； c)通過超濾濃縮所述IgG； d)然后添加表面活性劑，所述表面活性劑可以與步驟b)的表面活性劑相同或不同。
2.權(quán)利要求1的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于在步驟b)中添加至少一種氨基酸，所述氨基酸是親水性氨基酸或者是帶有正電側(cè)鏈的氨基酸。
3.權(quán)利要求2的方法，其特征在于所述氨基酸甘氨酸，優(yōu)選，其濃度為200至300mM。
4.權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于在步驟b)中還添加選自糖、糖衍生物和鹽類的一種或多種化合物。
5.權(quán)利要求4的用于 制備液體藥物組合物的方法，其特征在于在步驟b)中還添加選自無機(jī)鹽和有機(jī)鹽的堿金屬鹽或堿土金屬鹽或過渡金屬鹽。
6.權(quán)利要求5的方法，其特征在于添加O至IOOmM的乙酸鈉。
7.權(quán)利要求4至6的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于在步驟b)中還添加選自蔗糖、二糖和三糖以及多糖的糖。
8.權(quán)利要求1至7的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于在步驟d)中添加的表面活性劑優(yōu)選為非離子型去污劑。
9.權(quán)利要求1至8的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于所述表面活性劑選自聚山梨醇酯和泊洛沙姆。
10.權(quán)利要求9的方法，其特征在于所述表面活性劑是聚山梨醇酯，優(yōu)選為聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。
11.權(quán)利要求1至10任一項(xiàng)的方法，其特征在于在步驟b)和/或d)中以50至300ppm的總濃度添加所述表面活性劑。
12.權(quán)利要求1至11的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于在步驟b)中，以低于75ppm、優(yōu)選低于50ppm、優(yōu)選低于40ppm的濃度添加所述表面活性劑。
13.權(quán)利要求1至12任一項(xiàng)的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于步驟c)的超濾在低于30°C、優(yōu)選低于25°C的溫度下執(zhí)行。
14.權(quán)利要求13的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于步驟c)的超濾在15°C至25 °C之間、優(yōu)選約20 V的溫度下執(zhí)行。
15.權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的用于制備液體藥物組合物的方法，其特征在于在所述組合物中，所述IgG濃度為至少230g/l，優(yōu)選在230g/l至350g/l之間。
16.液體藥物組合物，其能夠由權(quán)利要求1至15之一的方法獲得，其中所獲得的藥物組合物的pH在4.2至5.5之間。
17.液體藥物組合物，其能夠由權(quán)利要求1至15之一的方法獲得，其中所獲得的藥物組合物的pH在6.8至7.8之間。
18.包含人免疫球蛋白G(IgG)的液體藥物組合物，其特征在于所述IgG的濃度為至少230g/l，優(yōu)選在230至350g/l之間。
19.權(quán)利要求18的液體藥物組合物，其包含:-230至350g/l之間、優(yōu)選約250g/l的濃縮的人免疫球蛋白G ； -甘氨酸； -任選的乙酸鈉緩沖液； -聚山梨醇酯、優(yōu)選為聚山梨醇酯80，或泊洛沙姆。
20.權(quán)利要求19的液體藥物組合物，其包含: -230至350g/l之間、優(yōu)選約250g/l的濃縮的人免疫球蛋白G ； -200至300mM的甘氨酸； -O至IOOmM的乙酸鈉緩沖液； -以及50至300ppm的聚山梨醇酯。
21.權(quán)利要求20的液體藥物組合物，其包含: -約250g/l的濃縮的人免疫球蛋白G ； -200mM的甘氨酸； -50mM的乙酸鈉緩沖液； -以及200ppm的聚山梨醇酯。
22.權(quán)利要求20的液體藥物組合`物，其包含: -約250g/l的濃縮的人免疫球蛋白G ； -250mM的甘氨酸； -以及200ppm的聚山梨醇酯。
23.權(quán)利要求20的液體藥物組合物，其包含:-約 250g/l 的 IgG ； -約150mM的甘氨酸； -約50mM的乙酸鈉緩沖液； -以及約200ppm的聚山梨醇酯80 ； 所述組合物的pH在4.2至5.5之間。
24.包含人免疫球蛋白G(IgG)的液體藥物組合物，其特征在于所述IgG濃度在230至350g/l之間，優(yōu)選為至少230g/l, pH在6.8至7.8之間。
25.包含人免疫球蛋白G(IgG)的液體藥物組合物，其特征在于所述IgG濃度在230至350g/l之間，優(yōu)選為至少230g/l, pH為7.3。
26.權(quán)利要求8至25任一項(xiàng)的液體藥物組合物，其采取適合于皮下或肌肉內(nèi)給藥、優(yōu)選皮下給藥的形式。
27.權(quán)利要求8至26任一項(xiàng)的液體藥物組合物，其包含人免疫球蛋白G(IgG)，用作藥物以治療具有抗體生產(chǎn)缺陷的原發(fā)性免疫缺陷、川崎病、兒童和成人免疫血小板減少性紫癜、具有抗體生產(chǎn)缺陷的繼發(fā)性免疫缺陷特別是慢性淋巴細(xì)胞白血病或與復(fù)發(fā)性感染相關(guān)的骨髓瘤、伴有細(xì)菌感染的兒童HIV感染、多灶性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)病、吉蘭-巴雷綜合征、慢性或嚴(yán)重急性細(xì)小病毒B19感染、獲得性或組成性免疫缺陷、皮質(zhì)留類耐受性皮肌炎、急性肌無力、慢性特發(fā)性多神經(jīng)根神經(jīng)炎、與例如HIV感染相關(guān)的免疫血小板減少性紫癜、僵人綜合征、自體免疫性中性粒細(xì)胞減少癥、耐藥性自體免疫性幼紅細(xì)胞減少癥、自身抗體誘導(dǎo)的獲得性抗凝劑綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、眼色素層炎。
全文摘要
本發(fā)明涉及人免疫球蛋白G組合物，其特征在于所述人免疫球蛋白G濃度為至少230g/l，其對(duì)皮下給藥特別有用。
文檔編號(hào)A61K47/00GK103118705SQ201180035746
公開日2013年5月22日 申請(qǐng)日期2011年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月19日
發(fā)明者西爾萬·于耶, 拉緹蒂亞·科亨-坦諾德吉, 弗洛倫斯·阿維斯, 亞歷山大·派拉德 申請(qǐng)人:分餾及生物技術(shù)法國(guó)實(shí)驗(yàn)室