專利名稱：使用釕絡(luò)合物的聯(lián)合療法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明大體涉及治療癌癥的方法，特別是一種使用反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕
(III)]或藥學上可接受的鹽來治療癌癥的方法。
背景技術(shù)：
一些釕絡(luò)合物在本領(lǐng)域中是已知有用的抗腫瘤化合物。參見例如美國專利號4843069、PCT公開號W09736595和美國專利申請公開號2005032801。特別是，反式_[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]吲哚鹽(KP1099)和反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽(KP1339)這些釕絡(luò)合物已在臨床前研究中被證明能有效地在結(jié)腸癌細胞中誘導(dǎo)細胞凋亡。參見例如 Kapitza et al., J.CancerRes.Clin.0ncol., 131 (2): 101-10 (2005)。此外，化合物反式_[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]吲哚鹽(KP1019)在I期臨床試驗中表現(xiàn)出一定的抗癌活性。發(fā)明概述現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，使用反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽，聯(lián)合幾種其它的抗癌化合物治療癌癥產(chǎn)生顯著的協(xié)同作用。因此，在第一方面，本發(fā)明提供了一種治療癌癥的方法，包括在需要這種治療的患者中，同時或有序地給患者攝入有效治療劑量的反式-[四氯雙 (1H-噴唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽和選自鉬類藥物(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬 和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西紫杉醇、紫杉醇)、蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)、5_FU和其藥物前體(例如，卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔單抗、panumutimab)、mT0R抑制劑(例如,依維莫司(everolimus)、坦羅莫司(temsirolimus)、ridaforolimus和西羅莫司(sirolimus))、索拉非尼、瑞格菲尼(regorafenib)和舒尼替尼組成的藥物組的一種或多種抗癌劑。本發(fā)明進一步提供了使用反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽來制備用于和選自包含鉬類藥物(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西他賽)、蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)、5-FU和其藥物前體(例如，卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔單抗、panumutimab)、mTOR抑制劑(如依維莫司、西羅莫司脂化物、ridaforolimus、西羅莫司等)、索拉非尼、瑞格菲尼和舒尼替尼的藥物組中一種或多種藥物聯(lián)合治療、預(yù)防癌癥或延緩癌癥的發(fā)病的藥物。換而言之，本發(fā)明進一步提供了使用一種或多種選自鉬類藥物(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西紫杉醇)、蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)5-FU和其前體藥物(如卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如，吉非替尼、厄洛替尼、西妥昔單抗、panumutimab) > mTOR抑制劑(例如，依維莫司、西羅莫司脂化物、ridaforolimus、西羅莫司等)、索拉非尼、瑞格菲尼和舒尼替尼藥物組中的藥物來制備用于和反式_[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽聯(lián)合治療、預(yù)防癌癥或延緩癌癥的發(fā)病的藥物。再一方面，提供了一種藥物組合，包括在一個分成隔室的容器內(nèi):第一個單位劑型包含反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其在藥學上可接受的鹽，以及第二個單位劑型包含選自鉬類藥物(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西他賽及紫杉醇)、蒽環(huán)類抗生素(例如，多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)、5_FU和其藥物前體(例如，卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔單抗、panumutimab)、mT0R抑制劑(例如,依維莫司、西羅莫司酯化物、ridafOTolimus和西羅莫司)、索拉非尼、瑞格菲尼和舒尼替尼組成的藥物組中的一個或多個藥物。在藥物組合里也可以還包括使用說明書。本發(fā)明的·以上所述及其它優(yōu)點和特征以及實現(xiàn)這些特征和優(yōu)勢的方式，在考慮下面有關(guān)本發(fā)明的詳細描述以及所附的表現(xiàn)優(yōu)選范例性實施方案的例子之后將會更加明了。附圖概述

圖1是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和順鉬在肺癌細胞株A549中的協(xié)同效應(yīng)。圖2是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和順鉬在結(jié)直腸癌細胞株HCT-116中的協(xié)同效應(yīng)。圖3是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和順鉬在胃癌細胞株N87中的順協(xié)同效應(yīng)。圖4是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和奧沙利鉬在結(jié)直腸腺癌細胞株LoVo中的協(xié)同效應(yīng)。圖5是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和多西他賽在前列腺癌細胞株LNCap-1中的協(xié)同效應(yīng)。圖6顯示了反式-[四氯雙(1Η-Π引唑)釕(III)]的鈉鹽和順鉬在胃癌細胞株N87中的協(xié)同作用的等效應(yīng)圖。Y軸是“劑量A”，X軸是“劑量B”。圖7是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽和5-FU在結(jié)直腸癌細胞株HCT-116中的協(xié)同效應(yīng)。圖8是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽和5-FU在大腸腺癌細胞株LoVo中的協(xié)同效應(yīng)。圖9是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽和5-FU在乳腺癌細胞株ZR-75-1中的協(xié)同效應(yīng)。圖10是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和吉西他濱在肺癌細胞株A549中的協(xié)同效應(yīng)。圖11是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和吉西他濱在胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1中的協(xié)同效應(yīng)。圖12是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在肝癌細胞株Hep3B2.1-7中的協(xié)同效應(yīng)。圖13是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在肺癌細胞株A549中的協(xié)同效應(yīng)。圖14是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和阿霉素在肝癌細胞株Hep3B2.1-7中的協(xié)同效應(yīng)。圖15是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和厄洛替尼在肺癌細胞株A549中的協(xié)同效應(yīng)。圖16是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和厄洛替尼在宮頸癌細胞 株KB-3-1中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]鈉的濃度(μ M)，Y軸:0.D.(光密度)E:厄洛替尼)。圖17是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和厄洛替尼在肝癌細胞株Hep3B中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]鈉的濃度(μ M)，Y軸:0.D.(光密度)Ε:厄洛替尼)。圖18是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和BCNU在肝癌細胞株Hep3B中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μΜ)，Y軸:0.D.(光密度))。圖19是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-Β引唑)釕(III)]的鈉鹽和BCNU在宮頸癌細胞株KB-3-1中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μΜ)，Y軸:0.D.(光密度))。圖20是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和舒尼替尼在肝癌細胞株Hep3B中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μ M)，Y軸:0.D.(光密度))。圖21是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和替莫唑胺在肝癌細胞株H印3Β中的之間的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μ Μ)，Y軸:0.D.(光密度))。圖22是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和替莫唑胺在宮頸癌細胞株KB-3-1中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μ M)，Y軸:0.D.(光密度))。圖23是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在肝癌細胞株Hep3B中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μ M)，Y軸:0.D.(光密度))。圖24是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在肝癌細胞株H印G2中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μ Μ)，Y軸:0.D.(光密度))。圖25是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在肺癌細胞株VL-8中的協(xié)同效應(yīng)(X軸:反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μΜ)，Y軸:0.D.(光密度))。圖26是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在肺癌細胞株Α549中的協(xié)同作用(X軸:反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μΜ)，Y軸:0.D.(光密度))。圖27是一個曲線圖，顯示反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在間皮瘤株Ρ31中的協(xié)同作用(X軸:反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μΜ)，Y軸:0.D.(光密度))。圖28是一個曲線圖，顯示了反式_[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在黑色素瘤細胞株VM-1中的協(xié)同作用(X軸:反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μ Μ)，Y軸:0.D.(光密度)，S:索拉菲尼)。圖29是一個曲線圖，顯示反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼在大腸癌細胞株SW480中的協(xié)同作用(X軸:反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽的濃度(μ Μ)，Y軸:0.D.(光密度)，S:索拉菲尼)。圖30是一個曲線圖，顯示反式-[四氯雙(1Η-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和索拉菲尼聯(lián)合治療在肝癌Hep3B異種移植模型中導(dǎo) 致長期存活(Y軸:％存活，X軸:天數(shù))。圖31是一個聯(lián)合指數(shù)圖顯示了反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和依維莫司在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤細胞株MKL-1中的協(xié)同效應(yīng)。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了通過聯(lián)合治療癌癥的方法。該方法包括給需要治療的癌癥患者攝入有效治療劑量的反式_[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽，以及選自包括鉬類藥物(例如順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西他賽(Docetaxel)及紫杉醇)、蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)、5-FU和它的前體藥物(例如，卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)、鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺，表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼，吉非替尼，西妥昔單抗，帕尼單抗(panumutimab)), mTOR抑制劑(例如，依維莫司(everolimus)、坦羅莫司(temsirolimus)、ridaforolimus和西羅莫司(sirolimus))、索拉非尼、瑞格菲尼(regorafenib)和舒尼替尼組成的藥物組中的一種或多種抗癌劑聯(lián)合治療癌癥。此處用到的術(shù)語“藥學上可接受的鹽”是指活性化合物的相對無毒的、有機或無機鹽，包括有機或無機鹽的化合物。示例性的反式_[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]鹽包括吲哚鹽(例如反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]吲哚鹽)和堿金屬鹽(例如反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽)等。此處用到的短語“用……治療……”，意思是給患者攝入一種化合物或引起患者體內(nèi)一種化合物的形成。在一些實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者，同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)藥學上可接受的鹽的反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)](例如，堿金屬鹽如鈉鹽)和⑵選自鉬類藥物(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西他賽(Docetaxel)及紫杉醇)、蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)、5_FU和其前體藥物(例如，卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔單抗、panumutimab)、mTOR抑制劑(例如,西羅莫司酯化物、依維莫司、ridaforolimus、西羅莫司等)、索拉非尼、瑞格菲尼和舒尼替尼的藥物組中的一個或多個抗癌劑。換而言之，按照本實施方案，該方法包括給一個正在接受上述一個或多個其它的抗癌劑治療的癌癥病人攝入有效治療劑量的反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如，堿金屬鹽如鈉鹽)，或者給正在接受反式_[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽的治療地癌癥患者攝入有效治療劑量的上述一個或多個其它的抗癌劑。用本發(fā)明的方法可以治療各種癌癥，包括但不限于，腦腫瘤(例如，星形細胞瘤，如成膠質(zhì)細胞瘤)、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、胃癌、食道癌、肺癌(非小細胞肺癌、小細胞肺癌)、結(jié)直腸癌、肝癌(例如，肝細胞癌)、黑色素瘤、胰腺癌、神經(jīng)內(nèi)分泌瘤、前列腺癌、腎癌、子宮內(nèi)膜癌和肉瘤。在一個實施方案中，使用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療結(jié)直腸癌例如直腸癌。在另一個實施方案中，使用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療肝癌例如肝細胞癌。在另一個實施方案中，使用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療黑色素瘤。在另一個實施方案中，用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療肺癌(例如非小細胞肺癌和小細胞肺癌)。在另一個實施方案中，用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療胃食管癌(例如胃癌、食管癌)。在另一個實施方案中，用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療乳腺癌或卵巢癌。在另一個實施方案中，用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療前列腺癌。在另一個實施方案中，本發(fā)明的聯(lián)合療法被應(yīng)用于宮頸癌或子宮內(nèi)膜癌。在另一個實施方案中，使用本發(fā)明的聯(lián)合療法治療腎癌。在另一個實施方案中，所述聯(lián)合療法被應(yīng)用于胰腺癌。在另一個實施方案中，所述聯(lián)合療法被應(yīng)用于神經(jīng)內(nèi)分泌癌。因此，在這些不同的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明，首先診斷和確診癌癥患者，并且用有效治療劑量的反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(I`II)]或藥學上可接受的鹽，以及上文提到的有效治療劑量的一個或多個抗癌劑治療該患者。在一個實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)鉬劑如順鉬、卡鉬和奧沙利鉬。在具體的實施方案中，該方法被用于治療結(jié)直腸癌、肺癌或胃食管癌(例如胃癌或食道癌)。在另一個特定的實施方案中，該方法被用于治療卵巢癌、小細胞肺癌、睪丸癌、膀胱癌。在另一個特定的實施方案中，該方法被用于治療頭頸部癌和腦腫瘤。在一個特定的實施方案中，(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)奧沙利鉬的組合用于治療結(jié)直腸癌。在一個特定的實施方案中，⑴反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)鉬劑(例如順鉬、卡鉬和奧沙利鉬)的組合用于治療肺癌。在另一個特定的實施方案中，(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)鉬劑(例如順鉬、卡鉬和奧沙利鉬)的組合用于治療胃癌。在另一個實施方案中，治療癌癥的方法，包括給需要治療的癌癥患者同時有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)紫杉烷(例如多西他賽、紫杉醇)。在一些特定的實施方案中，該方法被用于治療前列腺癌、胃食管癌(例如胃癌)和肺癌(例如非小細胞肺癌)。在一些特定的實施方案中，該方法包括給患者同時或依有序地攝入(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽和(2)多西他賽來治療乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胃食管癌或頭頸部癌。在一些特定的實施方案中，該方法包括給患者攝入(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽和(2)紫杉醇來治療乳腺癌、卵巢癌、肺癌、頭頸部癌、胃癌、食道癌、膀胱癌、子宮內(nèi)膜癌或?qū)m頸癌。在另一些實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)蒽環(huán)類(例如阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星、尤其是多柔比星)。在一些實施方案中，用(I)反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和⑵多柔比星的組合用于治療肝癌(肝細胞癌)。在又一些實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2) 5-氟尿嘧啶或其前體藥物(例如卡培他濱、喃氟啶和SI)。在特定的實施方案中，該方法用于治療結(jié)直腸癌、乳腺癌或胰腺癌。在又一實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)吉西他濱。在一些特定的實施方案中，所治療的癌癥是胰腺癌、肺癌、膀胱癌或乳腺癌。在又一實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)EGFR抑制劑。在一些特定的實施方案中，該方法被用于治療肺癌(例如非小細胞癌)、胰腺癌、宮頸癌、結(jié)直腸癌或肝癌(特別是肝細胞癌)。EGFR抑制劑在本領(lǐng)域中眾所周知，包括但不限于小分子EGFR抑制劑(例如吉非替尼、厄洛替尼、阿法替尼(afatinib))和EGFR抗體(西妥昔單抗、帕尼單抗、尼妥珠單抗(nimotuzumab)、necitumumab 等)。在又一實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)索拉非尼或瑞格菲尼(regorafenib)。在具體的實施方案中，治療的癌癥是肝癌(例如肝細胞癌)、肺癌(例如非小細胞肺癌)、結(jié)直腸癌或黑色素瘤。在另一實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)舒尼替尼。在具體的實施方案中，該組合用于治療肝癌(例如肝細胞癌)。在其它的具體實施方案中，該組合用于治療腎細胞癌、胃腸道間質(zhì)瘤和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤。在又一些實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)替莫唑胺。在特定的實施方案中，該組合用于治療肝癌、腦腫瘤(例如惡性膠質(zhì)瘤)或黑色素瘤。在又一些實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I) 反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)BCNU。在特定的實施方案中，該組合是用于治療肝癌、宮頸癌或腦癌。在又一實施方案中，治療癌癥的方法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和⑵一個或多個mTOR抑制劑。mTOR抑制劑的例子包括但不限于依維莫司(everolimus)、坦羅莫司(temsirolimus)、ridaforolimus、西羅莫司等。在一些具體的實施方案中，藥物組合被用于治療神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(NET)、腎腫瘤、星形細胞瘤、乳腺癌、胃癌或肝癌。在一些具體的實施方案中，聯(lián)合療法包括給需要治療的癌癥患者同時或有序地攝入有效治療劑量的(I)反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽(例如堿金屬鹽如鈉鹽)和(2)依維莫司用于治療神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(NET)。反式-[四氯雙(1Η-Π引唑)釕(III)]的堿金屬鹽在本領(lǐng)域中是已知的，例如，在歐洲專利號EP0835112B1里有公布，并且可以用本領(lǐng)域內(nèi)任何已知的方法合成。例如，PCT公布號W0/2008/154553披露了一個高效的制備反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽的方法。反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的吲哚鹽在美國專利號7338946中被公開。反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽和一種或多種其它的抗癌劑可以同時或分別依照各自的給藥時間表攝入，在同時攝入時，可以在同一藥物組合物中，或者反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽以單獨的單位劑量形式攝入。反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽，例如反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和反式_[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]吲哚鹽可以通過靜脈注射或其它任何合適的方式給藥，按患者每千克體重0.1-1OOOmg的劑量一次攝入，或者可以分成一些小劑量在設(shè)定的時間間隔內(nèi)服用，例如，每天一次或每兩天一次。參見Hartinger et al.，].1norg.Biochem.，100:891-904 (2006)。注射劑型在本領(lǐng)域中是熟知的，例如在緩沖溶液或懸浮液中。反式-[四氯雙(1 H-噴唑)釕(III)]鹽與其它抗癌劑的組合，可以按其制造商推薦的或在本領(lǐng)域中已知的給藥途徑和劑量給病人攝入。例如有關(guān)監(jiān)管部門批準的處方說明書或產(chǎn)品包裝說明書，或者是臨床醫(yī)生認為適合特定病人情況的與此相差一個數(shù)量級的劑量。但應(yīng)當明白，上述的劑量范圍設(shè)置僅是示例性的，而不是為了限制本發(fā)明的范圍?；钚曰衔锏挠行е委焺┝靠梢噪S各種因素變化:包括但不限于，使用的化合物的活性，活性化合物在患者體內(nèi)的穩(wěn)定性，需緩解的病癥的嚴重程度，待治療患者的總體重，給藥途徑，機體對有效化合物的吸收、分布、排泄的程度，患者年齡及敏感性，等等，這些對熟練的技術(shù)人員來說是顯而易見的。給藥量可以根據(jù)各種因素隨著時間變化而調(diào)整。依據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供了一種藥物組合，在一個分隔成隔室的容器內(nèi)，包括:(1) 一個單位劑型的反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽，如反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽和反式-[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的吲哚鹽和(2) —個單位劑型的至少一個(一，二，或更多)選自鉬類藥物(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)，紫杉烷(例如，多西他賽、紫杉醇)，蒽環(huán)類抗生素(例如多柔比星、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)、5-FU及其前體藥物(如卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔單抗、panumutimab)、mTOR抑制劑(如依維莫司、坦羅莫司、ridaforolimus、西羅莫司等)、索拉非尼、瑞格菲尼和舒尼替尼的抗癌藥物。對技術(shù)人員來說顯而易見，單元劑型的治療化合物的劑量由本發(fā)明方法中使用于患者的劑量決定的。在藥物組合中，反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽，可以是以凍干的形式，例如每瓶按25mg單位的劑量。用于聯(lián)合治療的包括在藥物組合中的其它抗癌劑可以以任何通常已知的或本領(lǐng)域已使用的劑型，例如，片劑、膠囊、可以重建成注射劑的凍干形式等?？蛇x地，所述藥物組合還包括根據(jù)本發(fā)明的聯(lián)合療法的使用說明書。實施例1細胞培養(yǎng):人類腫瘤細胞株包括A549、HCT-116、！fep3B2.1-7、LNCap clone FGC,LoVo、N87、PANC-l和ZR-75-1從美國ATCC或UNC萊恩伯格綜合癌癥中心獲得。MKL-1人體神經(jīng)內(nèi)分泌皮膚癌的細胞系從ECACC(歐洲細胞培養(yǎng)物收集)獲得。使用標準體外培養(yǎng)方法用供應(yīng)商推薦的培養(yǎng)基和補充品在175cm2 Greiner 或Corning :組織培養(yǎng)處理燒瓶中建立細胞培養(yǎng)。所有的培養(yǎng)細胞在加濕的37°C、5%二氧化碳、95%空氣環(huán)境中培養(yǎng)。這些細胞定期傳代培養(yǎng)以維持對數(shù)期生長。在EC5tl平板接種那天，每一細胞株的細胞被處理后接種到細胞培養(yǎng)處理的96孔板上，一次一個細胞系。用胰蛋白酶溶液從培養(yǎng)瓶中除下細胞，并入一個錐形管中并在室溫下350xg離心5分鐘。對于懸浮中的MKL-1，這些細胞不需要胰蛋白酶酶解。使用完全培養(yǎng)基，根據(jù)先前確定的每個細胞系的用于96孔板72小時分析的接種密度，從而得到最后的懸浮密度(細胞/ml)，將細胞懸浮液稀釋(根據(jù)活細胞計數(shù))。EC50測試的組織培養(yǎng)處理板，按下表I中的指定密度接種，并且在5% C02，95%空氣中37°C下加濕培養(yǎng)過夜使細胞附著。

表1:EC5Q試驗接種密度
^mmm^| m.[= A549 =丨關(guān)2.5HCT-116結(jié) Fl 斷癌8.0 —
"Hep3B2.1-7肝細.癌6.0
LNCaP 前列腺癌 4.0 LoVo 結(jié) ft 癌 12.0 一 N87 I 觀 20.0 理 —PANC-1..............................................1........................................................................函Ii涵...............................................—..............6.0...................................................
ZR-75-1乳腺癌3.0
~ MKL-1 I夏類皮膚神經(jīng)內(nèi)分泌癌 34 —測試劑制備:對于每一個單藥或藥物組合,在無菌的1.5ml微型離心管中配制最高濃度混合物(2x最終處理濃度)，然后直接轉(zhuǎn)移到處理稀釋板的第一個孔。用500 μ I100%的二甲亞砜(DMSO)配制成一個200mM反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽(“試驗藥物”)的原液。一部分200mM的原液用來在用100% DMSO中配制成40mM的原液(10 μ I 200禮原液+4(^1 DMS0，用于Ν87細胞株)。
5-氟尿嘧啶是由TEVA制造，以50mg/ml (384.4mM)濃度的水溶性溶液裝在瓶中。順鉬是從Sigma-Aldrich獲得的，然后用0.9%的生理鹽水制備4mM的順鉬原液并儲存在-20%下。解凍后，使用完全培養(yǎng)基把4mM的原液稀釋2倍，在96孔稀釋板上的第一個孔中得到一個2mM溶液用于陽性對照試驗板上的孔。然后用完全培養(yǎng)基連續(xù)1: 4稀釋橫跨9個孔共計10個，濃度從2，000-0.008 μ m不等。4mM的原液也被稀釋作為單個標準藥劑使用，以及和反式_[四氯雙(1H-噴唑)釕(III)]的鈉鹽組合。稱出Fluka制造的多西他賽(1.6mg)，添加0.990ml 100% DMSO再間歇性漩渦震蕩1-15秒制成2，000 μ M溶液。用100% DMSO進一步稀釋這溶液成為40 μ m原液(10 μ I的 2，000 μ m 多西他賽 +490 μ I DMS0)。稱出8.2mg的厄洛替尼(來自LC實驗室)，添加0.382ml 100% DMSO再間歇性漩渦震蕩15-30秒制成50mM的混濁白色懸浮液。稱出5.8mg的吉西他濱(由禮來公司生產(chǎn))，添加188 μ I的無菌水制成50mM透明無色的儲備溶液。再用完全培養(yǎng)基進一步稀釋1000倍來得到50 μ m原液(10 μ I的50mM吉西他濱+9.990ml培養(yǎng)基)。索拉非尼是從LC實驗室獲得的，添加0.188ml的100% DMSO到12.0mg索拉非尼制成IOOmM的原液。依維莫司是從LC實驗室獲得的，添加117 μ I的100% DMSO到5.4mg依維莫司制成50mM透明無色原液。EC5tl試驗:使用MTT細 胞增殖測定試劑盒來評價待測藥物的抗增殖活性(ATCC目錄#30-1010K)。MTT法是基于通過代謝活躍細胞還原tetrazolium MTT(3-(4，5-dimethylthiazolyl-2) ~2, 5-diphenyltetrazolium bromide)形成紫色 formazan 晶體。用去垢劑溶解紫色formazan晶體,然后用分光光度法在570nm定量測定。含在0.1ml的完全培養(yǎng)基中的對數(shù)生長期的細胞以上述表I中列出的密度分別接種到細胞培養(yǎng)處理的96孔板中所有孔中，除了留下一列孔只含培養(yǎng)基用作對照。在用待測藥物處理之前細胞(MKL-1細胞除外)培養(yǎng)過夜以使其附著。用完全培養(yǎng)基(在需要時加1% DMS0)系列稀釋待測藥物，然后按每孔0.1ml的量添加達到每孔最終體積為0.2mL (如有DMS0，則終濃度為0.5% )。細胞與待測藥物接觸72小時。之后，從每孔中小心地移除
0.1ml培養(yǎng)物上清液，然后把0.0lml的MTT試劑添加到每個孔。這些板返回到培養(yǎng)箱4小時。保溫培養(yǎng)后，將試劑盒提供的洗滌劑試劑(0.1ml)添加到每一孔中。這些板用保鮮膜包裹以防止蒸發(fā)，并在室溫下靜置在暗處過夜，第二天，用SpectraMAX Plus平板讀數(shù)器(Molecular Devices)在 570nm 測量吸光度。吸光度數(shù)據(jù)分析如下:吸光度值轉(zhuǎn)換為參照百分比并用SoftMaxw Pro (version
5.2,Molecular Devices)繪制其相對待測藥物濃度的曲線圖來計算IC5(I。計算參照百分比之前，從每個孔的數(shù)值中減去平板空白信號均值。參照百分比值是由每個測試孔的吸光度值除以無藥物處理空白對照(細胞加介質(zhì)對照的11組數(shù)值)平均吸光度值再乘以100得來。用4元方程獲得IC5tl值和描述S型劑量反應(yīng)曲線的其他參數(shù)來圖解分析化合物濃度對參照百分比的關(guān)系。使用CompuSynd)軟件分析組合數(shù)據(jù)來計算組合指數(shù)(Cl)評估協(xié)同效應(yīng)。使用公式:1_(對照百分比/100)從對照百分比(來自SoftMax Pro)來計算FractionalAffect(Fa)。將相組合的化合物的用量、Fa和摩爾比率輸入到CompuSyn 軟件來評估是否存在協(xié)同效應(yīng)。CompuSyn”+確定一個組合指數(shù)(Cl)以評價化合物對增殖的影響水平。Cl值低于I意味著存在協(xié)同作用，Cl值高于I表示拮抗作用。Cl值接近I表示了疊加效果。參閱Chou, PHARMACOL.REV.,58(3):621-81 (2006)。下面的表2總結(jié)了具有協(xié)同效應(yīng)的組合的Cl值。表2:組合指數(shù)值
權(quán)利要求
1.反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽在制備用于與一個或多個選自鉬劑(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西他賽、紫杉醇)、蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、伊達比星)、5-FU和其藥物前體(例如，卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔單抗、帕尼單抗)、mTOR抑制劑(例如,依維莫司(everolimus)、坦羅莫司(temsirolimus)、ridaforolimus和西羅莫司(sirolimus))、索拉非尼、瑞格菲尼(regorafenib)和舒尼替尼組成的藥物組中的抗癌劑聯(lián)合治療癌癥的藥物。
2.權(quán)利要求1所述之應(yīng)用，其中所述反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽為反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的鈉鹽。
3.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述的一個或多個抗癌劑中包括鉬劑。
4.權(quán)利要求1所述之應(yīng)用，其中所述鉬劑是順鉬、卡鉬或奧沙利鉬。
5.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括蒽環(huán)類化合物。
6.權(quán)利要求5所述之應(yīng)用，其中所述蒽環(huán)類化合物是阿霉素。
7.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑物中包括5-FU或其中一個前體藥物。
8.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括亞硝酸脲化合物。
9.權(quán)利要求8所述之應(yīng)用，其中所述亞硝酸脲化合物是BCNU。
10.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括吉西他濱。
11.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括替莫唑胺。
12.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括EGFR抑制劑。
13.權(quán)利要求12所述之應(yīng)用，其中所述EFFR抑制劑為厄洛替尼。
14.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括mTOR抑制劑。
15.權(quán)利要求13所述之應(yīng)用，其中所述mTOR抑制劑為依維莫司。
16.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括索拉非尼或瑞格非尼。
17.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括舒尼替尼。
18.權(quán)利要求1或2所述之應(yīng)用，其中所述一個或多個抗癌劑中包括紫杉烷。
19.權(quán)利要求17所述之應(yīng)用，其中所述紫杉烷是多西他賽或紫杉醇。
20.一個試劑盒，包括在一個分成隔室的容器內(nèi): 反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]的藥學上可接受的鹽的第一個單位劑型；和 選自鉬類藥物(例如，順鉬、卡鉬、奧沙利鉬和吡鉬)、紫杉烷(例如，多西紫杉醇及紫杉醇)、蒽環(huán)類抗生素(例如，阿霉素、柔紅霉素、表柔比星的第二單位劑量形式的伊達比星)、5-FU和其藥物前體(例如，卡培他濱、替加氟和SI)、亞硝基脲化合物(例如，卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、司莫司汀、乙基亞硝基脲(ENU)和鏈脲佐菌素)、吉西他濱、替莫唑胺、表皮生長因子受體抑制劑(如厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔單抗、panumutimab)、mT0R抑制劑(例如，依維莫司、西羅莫司酯化物、 ridaforolimus和西羅莫司)、索拉非尼、瑞格菲尼和舒尼替尼組成的藥物組中的抗癌劑的第二個單位劑型。
全文摘要
本發(fā)明公開了治療癌癥的一個聯(lián)合療法，該方法包括給癌癥患者攝入有效治療劑量的反式-[四氯雙(1H-吲唑)釕(III)]或其藥學上可接受的鹽，并且給患者攝入有效治療劑量的一種或多種其它抗癌藥物。
文檔編號A61K47/48GK103153303SQ201180044856
公開日2013年6月12日 申請日期2011年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月18日
發(fā)明者H·舍巴拉德蘭, W·伯杰, P·海富特爾 申請人:尼基制藥公司