專利名稱：用于角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變的治療劑和/或預(yù)防劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及諸如角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變等眼病的治療和預(yù)防，所述角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變是由下列因素引起的:由于干眼、隱形眼鏡和眼瞼內(nèi)倒長睫毛產(chǎn)生的刺激、結(jié)膜結(jié)石、病毒性結(jié)膜炎和過敏性結(jié)膜炎。
背景技術(shù)：
隨著個人電腦、手機(jī)等的普及，患眼疲勞或感覺眼睛有某種不適的人數(shù)正在增加。特別是，對于隱形眼鏡的使用者，因凝視屏幕而造成不適(如眼干和砂礫感)的主訴病例越來越多。眼干(也就是干眼病)作為所述癥狀的原因引起了人們的關(guān)注。干眼病是由于淚液減少或性質(zhì)改變而在眼睛表面上產(chǎn)生病變的疾病，因此由于淚量的降低而造成·眼睛發(fā)干并容易損傷，并且使得隱形眼鏡使用困難。根據(jù)2006年干眼病協(xié)會(Dry Eye Society)對于干眼病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)確認(rèn)存在如下全部三項癥狀時，則診斷為干眼病:自覺癥狀(通過VAS測試對疼痛和干燥進(jìn)行評價)；淚液異常(通過淚液膜破壞時間或Schirmer試驗進(jìn)行評價)；以及角膜和結(jié)膜病變(通過熒光素染色或孟加拉玫瑰紅染色進(jìn)行評價)，當(dāng)確認(rèn)存在其中兩項癥狀時，則懷疑為干眼病。生理鹽水滴眼液和粘性滴眼液(例如硫酸軟骨素)被用作干眼病的對癥治療。此夕卜，一種治療涉及到封閉淚液排出口，以便讓淚液盡可能長時間地留在眼睛表面上。除了干眼病之外，由于隱形眼鏡和眼瞼內(nèi)倒長睫毛產(chǎn)生的刺激、結(jié)膜結(jié)石、病毒性結(jié)膜炎、過敏性結(jié)膜炎等還可能會導(dǎo)致在角膜上皮和/或結(jié)膜上皮上產(chǎn)生細(xì)小的傷痕。專利文獻(xiàn)I中描述了用于干眼病的營養(yǎng)補(bǔ)充劑，其包括合并使用富含GLA的亞麻籽油、二十碳五烯酸(以下稱為EPA)和/或二十二碳六烯酸(以下稱為DHA)。非專利文獻(xiàn)I描述了必需脂肪酸對于干眼病的效果。
背景技術(shù)：
文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1:日本未審查專利申請公開(PCT申請的翻譯)N0.2005-535733非專利文獻(xiàn)非專利文獻(xiàn)I 干眼病治療中的必需脂肪酸(Essential Fatty Acids in theTreatment of Dry Eye)”，The Ocular Surface, 8 (I), 18-28 頁，2010。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的問題干眼病即使在不嚴(yán)重時也會損害日常生活的舒適度。本發(fā)明的目標(biāo)是研究導(dǎo)致干眼病的原因并提供一種安全的治療方法，而不用擔(dān)心不是對癥治療的副作用。解決問題的手段在對n-3脂肪酸缺乏小鼠的深入研究中，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)n-3脂肪酸缺乏小鼠的眼淚量減少，推測n-3脂肪酸與眼淚量有關(guān)。此外，本發(fā)明的發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，通過給n-3脂肪酸缺乏小鼠施用具有高含量EPA和DHA (其為n-3脂肪酸)的精制魚油，可以使眼淚量恢復(fù)到正常水平，從而完成了本發(fā)明。本發(fā)明概括為(I)至(7)所述的用于角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變的治療劑和/或預(yù)防劑以及(8)至(13)所述的眼淚量恢復(fù)劑。(I) 一種用于角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變的治療劑和/或預(yù)防劑，包含EPA和/或DHA或其酯作為活性成分。(2) (I)所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其中所述角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變是由以下因素構(gòu)成的組中的任意一者所引起的病變:由于干眼病、隱形眼鏡和眼瞼內(nèi)倒長睫毛產(chǎn)生的刺激、結(jié)膜結(jié)石、病毒性結(jié)膜炎和過敏性結(jié)膜炎。(3) (I)或(2)所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其中以甘油酯、低級醇酯、磷酸酯或精制魚油的形式包含EPA和/或DHA的酯。(4)⑴至(3)中的任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其目的為每日攝取總計至少約50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(5)⑴至(3) 中任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其目的為每日攝取總計至少約30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(6)⑴至(3)中任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其目的為每日攝取總計至少約1，OOOmg至2，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(7) (I)至(6)中任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，還包含生育酚作為抗氧化劑。(8) 一種眼淚量恢復(fù)劑，包含EPA和/或DHA或其酯作為活性成分。(9)⑶所述的眼淚量恢復(fù)劑，其中以甘油酯、低級醇酯、磷酸酯或精制魚油的形式包含EPA和/或DHA的酯。(10)(8)或(9)所述的眼淚量恢復(fù)劑，其目的為每日攝取總計至少約50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(11)(8)或(9)所述的眼淚量恢復(fù)劑，其目的為每日攝取總計至少約30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(12)⑶或(9)所述的眼淚量恢復(fù)劑，其目的為每日攝取總計至少約l，000mg至2，IOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸或其酯。(13)⑶至(12)中任一項所述的眼淚量恢復(fù)劑，還包含生育酚作為抗氧化劑。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)可以通過施用EPA和DHA (其為n_3脂肪酸)來治療或預(yù)防由下列因素引起的角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變:由于干眼、隱形眼鏡和眼瞼內(nèi)倒長睫毛產(chǎn)生的刺激、結(jié)膜結(jié)石、病毒性結(jié)膜炎和過敏性結(jié)膜炎。EPA和DHA能夠增加眼淚量，從而緩解所述癥狀。因此，可以提供能夠減輕上述癥狀(如干眼病)的、為精制魚油形式的藥劑、補(bǔ)充劑等，這種精制魚油形式的藥劑、增補(bǔ)劑等食用歷史長并且不用擔(dān)心其副作用。附圖簡要說明

圖1示出了利用VAS測試評價的眼睛疼痛的自覺評估的結(jié)果。在該圖中，根據(jù)Mann-Whitney U檢驗，*P〈0.05、#P<0.1表明存在顯著差異。圖2為示出了利用VAS測試評價眼睛干燥的結(jié)果的圖。
圖3為示出了測量淚液膜破壞時間的結(jié)果的圖。n=24或30。在該圖中，根據(jù)Mann-Whitney U檢驗，*P〈0.05、#P<0.1表明存在顯著差異。圖4為示出了利用熒光素染色評價眼睛傷痕的結(jié)果的圖。n=24或30。圖5為示出了圖4的變化量的圖。圖6為示出了利用孟加拉玫瑰紅染色評價眼睛傷痕的結(jié)果的圖。n=24或30。圖7為示出了圖6的變化量的圖。在該圖中，根據(jù)Mann-Whitney U檢驗，*P〈0.05表明存在顯著差異。在該圖中，根據(jù)雙因素ANOVA，**P〈0.05表明存在顯著差異。圖8為示出了利用Schirmer試驗評價眼淚量的結(jié)果的圖。n=24或30。本發(fā)明的實施方式本發(fā)明涉及用于角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變的預(yù)防劑和/或治療劑，包含EPA和/或DHA或其酯作為活性成分。雖然有幾項報告中將亞麻籽油等n-6型脂肪酸用作干眼病的治療，但是單獨(dú)攝入n-3脂肪酸(尤其是EPA和DHA)會如何影響角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變?nèi)允俏粗摹１景l(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，缺乏n-3脂肪酸會使眼淚量顯著減少，并證實通過攝入包含EPA和DHA的精制魚油會使所述的眼淚量恢復(fù)。用于本發(fā)明中的EPA和/或DHA優(yōu)選為與甘油的酯，即甘油三酯、甘油二酯、單甘油酯；或磷脂，即磷脂酰膽堿、磷脂 酰絲氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、心磷月旨、磷脂酸(全部包含溶菌酶體);或與低級醇(碳數(shù):1至5)的酯，即甲酯、乙酯，等等。優(yōu)選以諸如EPA和DHA等n-3脂肪酸為主要成分并且基本上不含n_6型脂肪酸。特別是，n_6型脂肪酸的總量優(yōu)選為10重量％以下，更優(yōu)選為5重量％以下。具體而言，可將精制魚油、濃縮油(通過酶反應(yīng)或化學(xué)反應(yīng)將精制魚油中的EPA和DHA濃縮的油)等用作甘油三酯。此外，可將磷蝦油等用作磷脂。包含EPA和DHA的n-3多不飽和脂肪酸的來源包括:魚或貝類提取物、動物提取物、蛋黃提取物、植物提取物、菌類提取物等等，優(yōu)選磷蝦油、魚油、魚提取物、魷魚提取物、鰹魚卵巢提取物、基因修飾植物提取物、網(wǎng)黏菌類(Iabyrinthulea)提取物等等。磷奸油、魷魚提取物和鰹魚卵巢提取物是具有高磷脂含量的物質(zhì)。利用包括濃縮、提取和/或精制、混合等技術(shù)領(lǐng)域中常規(guī)已知的技術(shù)，可以根據(jù)需要調(diào)節(jié)所述物質(zhì)的磷脂濃度和純度。已知EPA和/或DHA對于高脂血癥和過敏癥狀是有效的，很多的藥劑和各種補(bǔ)充劑已是可商購的?？蓪⑴c這些藥劑和補(bǔ)充劑類似的膠囊形式用于本發(fā)明的目的。另外，可通過將其添加到各種飲料和食品中來進(jìn)行攝取。具體而言，通常使用的是由油脂加工得到的膠囊，其中精制魚油中添加有抗氧化劑。精制魚油可以是來自于任何魚的魚油，只要所述魚油包含EPA和DHA即可。EPA含量高的魚油的例子包括沙丁魚油、鱈魚肝油等，而DHA含量高的魚油的例子包括金槍魚油、鰹魚油等。濃縮EPA/DHA油是指這樣的脂肪或油，其中通過使用脂肪酶等，由于位置選擇性和脂肪酸選擇性使得精制魚油的甘油三酯中EPA/DHA的濃度增加(參見日本審查的專利申請公開 N0.H4-16519)。對患有干眼病癥狀的患者經(jīng)口施用本發(fā)明的治療劑和/或預(yù)防劑，其中EPA和/或DHA或其酯的每日總劑量為大約50mg至5，OOOmg、優(yōu)選為300mg至3，OOOmg、更優(yōu)選為大約900mg至2，lOOmg、并且最優(yōu)選為1，100至1，900mg，所述劑量一次或分次服用。連續(xù)施
用至少4周后觀察到效果。EPA和/或DHA在其他施用方法中使用歷史悠久，因此相信沒有安全性問題?？蓪⒁呀?jīng)確定為對恢復(fù)眼疲勞有利的花青素、葉黃素、小米草、毛果槭、維生素等添加至本發(fā)明的用于角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變的治療劑和/或預(yù)防劑或眼淚量恢復(fù)劑中?，F(xiàn)在利用實施例對本發(fā)明更詳細(xì)地說明，但是本發(fā)明決不局限于這些實施例。實施例1產(chǎn)生n-3脂肪酸缺乏動物實驗動物用飼料一般包含具有適當(dāng)DHA含量的n-3脂肪酸；因此，為了產(chǎn)生n_3月旨肪酸缺乏動物，必須使用不包含n-3脂肪酸的特殊飼料。此外，正常飼養(yǎng)的動物從出生之前到斷奶期會從胎盤和母獸乳汁中接受到充分的DHA攝入，因此僅在一代之內(nèi)便產(chǎn)生目標(biāo)n-3脂肪酸缺乏動物并不是容易的?？紤]到這些事實，以AIN93G(美國營養(yǎng)研究所(AmericanInstitute of Nutrition)發(fā)表的用于小鼠和大鼠營養(yǎng)研究的標(biāo)準(zhǔn)精制飼料組成)作為基礎(chǔ)飼料來制備包含7%的脂肪和油的n-3脂肪酸缺乏飼料(n-3Def，亞麻酸:14.4% ; α -亞麻酸:0.1%)。將含有α -亞麻酸(18:3，n-3)的n-3脂肪酸(n_3Adq，亞麻酸:14.3% ； α -亞麻酸:2.6%)用作正常飼料。雌性小鼠斷奶之后(3周齡)立即喂食這些飼料，然后飼養(yǎng)；接下來，使所述小鼠在成熟之后進(jìn)行交配，得到第二代小鼠，所述第二代雄性小鼠長到11月齡時用于實驗。另外，為了在實驗進(jìn)行時避免來自母獸的任何影響，這樣設(shè)定試驗，使得各組中的樣本均具有不同的母獸。制各測I試藥將魚油(日本水產(chǎn)株式會社生產(chǎn)的精制魚油EPA_28(含有28%以上的EPA和12%以上的DHA))用作測試藥，并且調(diào)節(jié)劑量，使得DHA含量為5mg/頭，EPA含量為Ilmg/頭。對照組中使用棕櫚油，這樣制備所述棕櫚油，使得其脂肪酸含量與魚油組相當(dāng)。魚油的主要脂肪酸組成顯示在表I中(18:2的n-6型脂肪酸含量為1.1%, 20:4的n_6型脂肪酸含量為
1.3%)ο表I
權(quán)利要求
1.一種用于角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變的治療劑和/或預(yù)防劑，包含下列物質(zhì)作為活性成分:二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸、含有所述脂肪酸作為組成脂肪酸的甘油酯或磷脂、或所述脂肪酸的低級醇酯。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其中所述角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變是由以下因素構(gòu)成的組中的任意一者所引起的病變:由于干眼病、隱形眼鏡和眼瞼內(nèi)倒長睫毛產(chǎn)生的刺激；結(jié)膜結(jié)石；病毒性結(jié)膜炎；和過敏性結(jié)膜炎。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其中以精制魚油或精制磷蝦油的形式包含所述的含有所述脂肪酸作為組成脂肪酸的甘油酯或磷脂甘油酯或磷脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其目的為每日攝取總計約50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其目的為每日攝取總計約30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，其目的為每日攝取總計約900mg至2，IOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的治療劑和/或預(yù)防劑，還包含生育酚作為抗氧化劑。
8.一種眼淚量恢復(fù)劑，包含如下物質(zhì)作為活性成分:二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸、含有所述脂肪酸作為組成脂肪酸的甘油酯或磷脂、或所述脂肪酸的低級醇酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的眼淚量恢復(fù)劑，其中以精制魚油或精制磷蝦油的形式包含所述的含有所述脂肪酸作為組成脂肪酸的甘油酯或磷脂。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的眼淚量恢復(fù)劑，其目的為每日攝取總計約50mg至5，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
11.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的眼淚量恢復(fù)劑，其目的為每日攝取總計約30mg至3，OOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
12.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的眼淚量恢復(fù)劑，其目的為每日攝取總計約900mg至2，IOOmg的二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸。
13.根據(jù)權(quán)利要求8至1 2中任一項所述的眼淚量恢復(fù)劑，還包含生育酚作為抗氧化劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了對角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變有效且安全的預(yù)防和治療藥品或補(bǔ)充劑。具體而言，本發(fā)明提供了一種用于角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變的治療劑或預(yù)防劑，其特征在于包含如下物質(zhì)作為活性成分二十碳五烯酸和/或二十二碳六烯酸、含有所述脂肪酸作為組成脂肪酸的甘油酯或磷脂，或所述脂肪酸的低級醇酯。優(yōu)選的是，治療劑或預(yù)防劑以精制魚油或精制磷蝦油的形式包含EPA和/或DHA。當(dāng)以EPA和/或DHA或其酯的總量計，每日攝取約50mg至5,000mg劑量的所述治療劑或預(yù)防劑時，可減輕角膜上皮病變和/或結(jié)膜上皮病變，或者可以恢復(fù)眼淚量。
文檔編號A61K35/60GK103221041SQ20118005577
公開日2013年7月24日 申請日期2011年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月19日
發(fā)明者原馬明子, 川端二功, 守口徹, 川北哲也, 坪田一男 申請人:日本水產(chǎn)株式會社, 學(xué)校法人麻布獸醫(yī)學(xué)園, 學(xué)校法人慶應(yīng)義塾