專利名稱:一種復方鹽酸表柔比星plga納米粒及其制備方法
技術領域:
本發(fā)明涉及一種復方抗腫瘤納米粒制劑及其生產(chǎn)技術,尤其涉及一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒及其制備方法。
背景技術:
近年來,全球肝癌發(fā)病率明顯升高,據(jù)估計每年全世界新增病例超過100萬人。肝癌的死亡率僅次于胃癌、食道癌而居于第三位。由于乙肝病毒感染等問題仍沒有得到有效控制,肝癌發(fā)病率仍呈上升勢頭。肝癌也是我國常見的惡性腫瘤之一,我國年發(fā)病率高于10/10萬,每年死于肝癌約11萬人,占全世界肝癌死亡人數(shù)的45%。為此,我國制定了 《2006-2010年全國乙型病毒性肝炎防治規(guī)劃》,目的是降低由乙肝引發(fā)的肝硬化和肝癌的死亡,但是肝癌的防治工作仍十分繁重。表柔比星(又稱表阿霉素)是臨床常用的抗腫瘤藥物,其單藥反應率可高達10 15%,但其水溶性差,且心臟毒性和骨髓抑制較明顯。為了增加其水溶性,生產(chǎn)中科研人員合成了鹽酸表柔比星(Epirubicin Hydrochloride,又稱鹽酸表阿霉素),使其水溶性大大增加,但依然存在半衰期短、心臟毒性和骨髓抑制等副作用。鹽酸表柔比星為一抗生素類抗腫瘤藥,具為阿霉素的同分異構體,作用機制是直接嵌入DNA核堿對之間,干擾轉錄過程, 阻止mRNA的形成,從而抑制DNA和RNA的合成。此外,表柔比星對拓樸異構酶II也有抑制作用。與阿霉素相比,療效相等或略高,但對心臟的毒性較小。臨床應用于乳腺癌、惡性淋巴瘤、卵巢癌、消化道癌、肺癌、白血病、頭頸部癌、軟組織肉瘤、膀胱癌、腎癌、惡性黑色素瘤等的治療。不良反應有心臟毒性反應、脫發(fā)、粘膜炎,一般不良反應表現(xiàn)為胃炎伴糜爛,舌兩側及舌下腺炎,胃腸功能紊亂,惡心、嘔吐、腹瀉、高熱,偶爾發(fā)生發(fā)熱、寒戰(zhàn)及蕁麻疹,與阿霉素相同,但毒副作用一般較輕,尤其是心臟毒性、骨髓抑制。臨床使用為靜脈注射,70 90mg/m2,每3周1次??偭?00 1000 mg。成人單一使用劑量為60 90mg/m2,靜脈注射。根據(jù)病人骨髓象的情況,上述劑量可間隔21天后重復使用。早期化療、放療、老人或骨髓新生物浸潤而造成骨髓造血功能不良者應使用小劑量60 75mg/m2,每療程的總劑量可分為2 3個節(jié)段。釓噴酸葡胺是一種用于磁共振成像的順磁性造影劑,進入體內(nèi)后能縮短組織中質子的Tl及T2馳豫時間,從而增強圖像的清晰度和對比度??捎糜谥袠猩窠?jīng)(腦及脊髓)、 腹、胸、盆腔、四肢等人體臟器和組織的磁共振成像,也用于腎功能評估,常用注射液的形式,為無色或幾乎無色澄明液體。經(jīng)靜脈注射后迅速分布于細胞外液,約1分鐘血和組織中濃度已達到高峰,消除半衰期約20 100分鐘,24小時內(nèi)約90%以原形由尿排出,血液透析可將本品從體內(nèi)排出。用法用量靜脈注射。成人及2歲以上兒童,按體重一次O.aiil/ kg (或0. lmmol/kg),最大用量為按體重一次0. %il/kg。最佳強化時間一般在注射后45分鐘之內(nèi)。為排除成人病變或腫瘤復發(fā),可將用量增至按體重一次0. 6ml/kg,以增加診斷的可信度。不良反應磁共振造影劑不良反應極少,個別患者給藥后可出現(xiàn)面部潮紅,蕁麻疹,惡心,嘔吐,味覺異常,注射部位輕度熱、痛感,支氣管痙攣,心悸,頭暈,頭痛,寒顫,驚厥,低血壓等不良反應,個別患者有過敏、喉頭水腫、休克等反應。亦有重癥肌無力急劇惡化的報道。一般抗腫瘤藥物在發(fā)揮抗腫瘤細胞的同時,亦可損傷正常細胞藥物。治療的一個關鍵問題是如何把藥物定向輸送到癌癥細胞而又以不損傷正常細胞為前提,如脂質體、微膠囊等。而納米粒子,因其超微小體積,日益受到人們的關注。載藥納米控釋系統(tǒng)用于抗腫瘤藥物的轉運有望通過延緩藥物釋放速度,減慢其轉化為代謝物,從而減輕其毒性作用, 是一種很有前途抗腫瘤藥物的載體。納米技術是將宏觀物體細分成超微顆粒,在納米尺寸范圍內(nèi),通過直接操縱單個原子、分子束組裝和創(chuàng)造具有特定功能的新物質,使其物理、化學及生物活性產(chǎn)生意想不到的巨變??缮锝到饩酆衔镏瞥傻募{米級微粒的研究日益受到生物醫(yī)藥學領域的重視,這種聚合物包括天然和合成類聚合物,前者主要有葡聚糖、白蛋白、甲殼素及其衍生物、卵磷脂、膽固醇等,后者主要有聚酯類如聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸 (PGA)、聚酸酐類、半固態(tài)聚原酸酯類等。近年來,將可生物降解的聚合物制成納米粒,這種聚合物的納米??煽蒯屗幬铮苊馑幬锝到饣蛐孤?,改變可降解單體的比例和聚合反應條件來調節(jié)聚合物在體內(nèi)降解,提高療效,降低不良反應;將這種聚合物進行表面修飾可以使藥物在體內(nèi)靶向分布,促進藥物通過血腦屏障(BBB)。這種聚合物納米粒已成功用于DNA基因治療,作為蛋白質、疫苗口服給藥載體。在藥劑學研究中,可生物降解聚合物納米粒粒徑并不限定在1 IOOmm范圍,已發(fā)表的文獻大多在10到數(shù)百納米之間。納米載藥系統(tǒng)的特點(1)靶向性和緩釋性載藥納米??勺鳛楫愇锒痪奘杉毎淌?,到達網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)分布集中的肝、脾等靶部位和連接有配基、抗體、酶底物所在的靶部位。到達靶部位的載藥納米粒,可由載體材料的種類或配比不同而具有不同的釋藥速率。通過調整載體材料種類或配比,可控制藥物的釋放速率,從而制備出具有緩釋特性的載藥納米粒。(2)增加藥物的吸收納米粒高度分散,表面積巨大,這有利于增加藥物與吸收部位生物膜接觸面積。納米粒特殊的表面性能,使其在小腸中的滯留時間大大延長。納米粒對藥物還具有保護作用,以上綜合作用的結果是明顯提高藥物的吸收和生物利用度。(3)增加生物膜的通透性與一般藥物的跨膜轉運機制不同,納米粒通過內(nèi)吞等機制進入細胞,因此可以增加藥物對生物膜的透過性,有利于藥物透皮吸收與細胞內(nèi)藥效發(fā)揮。(4)降低藥物的毒副作用載藥納米粒的靶向性在增加局部藥物濃度的同時降低了全身其他部位的濃度, 從而大大降低了藥物的全身性毒性。聚乳酸(polylactic acid,PLA)和乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)是美國FDA批準用于臨床試驗的可生物降解高分子聚合物,由兩種單體一乳酸和羥基乙酸隨機聚合而成, 是一種可降解的功能高分子有機化合物,具有良好的生物相容性、無毒、良好的成囊和成膜的性能,被廣泛應用于制藥、醫(yī)用工程材料和現(xiàn)代化工業(yè)領域。在體內(nèi)代謝終產(chǎn)物為C02和 H20,對人體無毒副作用。所形成的兩親多糖衍生物可有效避免藥物載體本身可能的毒副作用,體外細胞毒性實驗證實,該基于葡聚糖改性修飾的聚乳酸微粒對HepG2細胞的生長無抑制作用。乳酸-羥基乙酸共聚物可用作醫(yī)用手術防粘連膜,注射用微膠囊、微球、納米粒及埋植劑等緩釋制劑的輔料,同時可用作組織工程細胞培養(yǎng)的多孔支架,孔隙率、孔徑和降解速率可調??缮锝到饩酆衔锛{米粒的制備方法一般采用聚合物分散法,包括(1)溶劑揮發(fā)法將聚合物溶于二氯甲烷、醋酸乙酯等有機溶劑中,藥物則溶解或分散于聚合物溶液中, 此溶液再在乳化劑如明膠、聚乙烯醇(PVA)、聚山梨酯一 80、泊洛沙姆(poloxamer ) 188等存在下,加入到水相乳化形成0/M型乳劑,再通過升高溫度、降低壓力或攪拌揮散有機溶劑而得到穩(wěn)定的納米膠體分散系。W / 0/M型復乳制備技術可用于水溶性藥物(如胰島素)納米粒的制備。上述2法均需高速勻化及超聲,只適用于實驗室小量試制,而工業(yè)化大生產(chǎn),還需用耗能量小的乳化方法。(2)溶劑擴散法該法是溶劑揮發(fā)法的進一步改進。將親水溶劑如丙酮或甲醇與疏水溶劑二氯甲烷混合,由于擴散作用,兩相接觸的界面能降低而發(fā)生界面騷動,形成更為細小的納米級乳液。此法可用于制備乳酸/羥基乙酸共聚物(PLGA)納米粒。(3)鹽析/乳化一擴散法上述2法不可避免地要使用到有機溶劑,這樣會對環(huán)境造成一些不良的影響,且服用殘留有機溶劑的制劑也將傷害機體。Allemana等研究表明鹽析法和乳化、擴散法可最大限度的減小這些有害的影響。(4)超臨界流體技術超臨界流體法因其不造成環(huán)境污染,制得的納米粒不含微量的有機溶劑,且純度高而逐步得到重視。超臨界流體法制備微球及納米粒的研究早期已有文獻報道。超臨界流體法可分為超臨界流體快速膨脹技術(rapid expansion of supercritical solution, RESS)和超臨界反溶劑法 (supercritical anti - solvent, SAS)。超臨界流體快速膨脹法是將聚合物溶于一種超臨界流體中,該溶液經(jīng)導管引入并由一噴嘴快速噴出,聚合物因超臨界流體溶解本領急劇降低而沉降,沉降的聚合物中將不會殘留溶劑。這種技術被用于制備聚乳酸(PLA)納米粒, 20世紀80年代末到90年代初一度受到普遍關注。對于小分子聚合物(< 10000)來說,這種方法制備的納米粒,藥物可以均勻分散于聚合物基質中,然而,對于相對分子量較大的聚合物因其在超臨界流體中的溶解度小甚至不溶而限制了這項技術的推廣。超臨界反溶劑法是將聚合物溶解在一種合適的溶劑中,這種溶液通過導管快速引入一種超臨界流體中,此超臨界流體可完全提取溶解聚合物的溶劑而使聚合物沉降,形成極細微粒,該技術也稱作氣體反溶劑技術(gas anti — solvent,GAS),并成功用于微球及納米粒的制備。(5)單體聚合法單體聚合反應法通過單體的聚合反應可制備納米粒。Couveur等將甲基氰基丙烯酸的水溶液在表面活性劑聚山梨酯一 20的存在下發(fā)生聚合反應制成粒徑約200mm的納米粒。這種納米粒一般是在親核引發(fā)劑如OH—,CH30—及CH3C00—的存在下快速反應而形成的,此聚合物相對分子量小,體內(nèi)降解迅速。為制備聚合物相對分子量大的更為穩(wěn)定的納米粒,可將聚合反應在酸性介質(pHl. 0 3. 5)中進行,先將單體分散到含有表面活性劑及穩(wěn)定劑的介質中,聚合反應持續(xù)3 4h,改變介質的pH以獲得所需的產(chǎn)品。納米粒的大小決定于介質的PH,所用穩(wěn)定劑及表面活性劑的類型和濃度。當大于PH3. 0時,微粒自身聚集,難以得到理想的納米膠體制劑。此外,影響納米粒形成的因素還包括單體的濃度及攪拌速度。聚氰基丙烯酸酯納米球因制備過程介質PH過低及其細胞毒性,應用受到限制。這就導致了新單體二烷基一次甲基丙二酸酯(dialkyl —methylidene malonic acid ester)的合成。試圖在其衍生物乙基一 2 — (乙氧羰基)乙基亞甲基丙二酸一氧乙烯共聚物 [ethyl — 2 — (ethoxyearbonyl) ethyl methylene malonate — co — ethylene oxide] 單體上連上具有親水基團和疏水基團的雙親性材料可以制得長循環(huán)納米粒,但合成可降解聚合物一般較天然脂質的毒性大,需要注意。親水性聚合物納米粒的制備將甲殼素和含乙氧基的嵌段共聚物的溶液與三聚磷酸鈉(TPP)的溶液混合,可制成納米膠體溶液。調整甲殼素的濃度及嵌段共聚物的量,可得到粒徑在200 1000 mm, Zeta電位在20 60 mV的納米粒。這種納米??蓪⒁葝u素、寡聚核苷酸、DNA等載入其中。Mar等采用復合共凝聚法 (Complex coacervation tech nique)制成了 DNA—甲殼素納米粒,用于基因口服給藥。此項技術也可用于制備DNA明膠納米球,已證明甲殼素納米粒在免疫及抗腫瘤轉移方面優(yōu)于明膠納米球。短鏈的聚內(nèi)酯連接到PVA或磺丁基一聚乙烯醇上而形成的新的可生物降解的聚酯類,這種聚合物可因自身聚集而形成納米粒,可與一些蛋白質如人血清白蛋白、細胞色素C形成穩(wěn)定的復合物,這種聚合物納米粒的制備具有不需要用到有機溶劑或表面活性劑等優(yōu)點。實現(xiàn)納米粒靶向的關鍵因素是納米粒的粒徑及分布、表面性質,較好的包封率和載藥量。這三者也是納米粒處方設計和制備工藝研究中的重點和難點。
發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題,本發(fā)明提供一種使藥物既能在腫瘤部位長時間停留釋放,又能對抗腫瘤效果進行實時檢測的,且配方簡單、合理,加工制造容易、使用方便,產(chǎn)品質量可靠的,產(chǎn)量較高,載藥量、包封率較高,藥物釋放持久的復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒及其制備方法。為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明主要通過以下技術方案得以解決一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒,其特征在于,各組分和組分之間的重量百分比如下
鹽酸表柔比星0. 05% 10% ; 釓噴葡胺 0. 1% 20% ; 高分子聚合物PLGA 3 20% ; 表面活性劑0. 01% 10% ; 凍干保護劑10 90%。作為優(yōu)選,上述的高分子聚合物PLGA的分子量為0. 5 50000萬,其乳酸羥基乙酸的比例為75 25,50 50,25 75中的一種或幾種材料混合。作為優(yōu)選,上述的表面活性劑為吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60、吐溫_80、吐溫-85、 泊洛沙姆 188、司盤-80、PEG-200、PEG-400、PEG-600、PEG-800、PEG-1000 中的一種或幾種材料混合。作為優(yōu)選,上述的凍干保護劑可為乳糖、海藻糖、泊洛沙姆188中的一種或幾種材料混合。一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒的制備方法包括以下步驟稱取廣100 mg 鹽酸表柔比星、2(T2500 mg釓噴酸葡胺混合后溶解于1(T100 ml的蒸餾水中作為水相,稱取1(T3000 mgPLGA溶于丙酮氯仿的混合液中作為有機相。將有機相加入水相中并加處方量的表面活性劑用手振搖纊10 min、50 ^120 w超聲0. 5、min后得初乳(W/0);將制得的初乳通過廣50 ml注射器中緩慢滴加至水相中1(T500 rpm磁力攪拌后形成復乳(W/0/ W);將復乳快速倒至100 2000 ml蒸餾水中100 1000 rpm攪拌分散稀釋,在(T40°C下攪拌 5^48 h至有機溶劑揮發(fā)完全后即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液,然后在旋轉蒸發(fā)中用2(T80°C減壓至20(Γ0帕斯卡來濃縮納米粒膠體溶液,加入0.3 50 g凍干保護劑,真空冷凍干燥即得。作為優(yōu)選,上述的丙酮氯仿比例為1 0. 5 1 :99,溶劑體積為廣300 ml。本發(fā)明由于采用上述方案,將鹽酸表柔比星和釓噴葡胺共同包裹在同一納米粒中,達到了給藥后既能在腫瘤部位停留,達到長效抗腫瘤效果,又具有能實時檢測腫瘤變化的效果;且配方簡單,制造容易,操作簡便,可達到規(guī)模化批量生產(chǎn),起到治療相關疾病的作用。
具體實施例方式下面對發(fā)明的技術方案的具體實施方式
作進一步具體的說明。實施例1 一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒配方及其制備如下配方
鹽酸表柔比星40 mg釓噴酸葡胺1.5 gPLGA2.0 g司盤-800. 04ml吐溫-800. 04ml泊洛沙姆1880.3 g乳糖I-Og
所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為先將40 mg的鹽酸表柔比星、1.5 g釓噴酸葡胺混合后溶解于1 ml蒸餾水中作為水相,稱取適量PLGA(50 :50,分子量1. 5萬)溶于丙酮氯仿(3:1)的混合液中配制成濃度為60 mg/mL的溶液作為有機相。將有機相加入水相中并加40 μ 1司盤-80,振搖2 min后,超聲60 s (100 W)即得初乳(W/0);將制得的初乳吸入到2 ml注射器中緩慢滴加至含20.0 ml蒸餾水的小燒杯中(含有乳化劑泊洛沙姆 188 1.5%,吐溫-80 0.2%),200 rpm攪拌后形成復乳(W/0/W);將復乳快速注入到含蒸餾水 100.0 ml的大燒杯中分散均勻,室溫25°C下攪拌M h至有機溶劑揮發(fā)完全即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液。50°C減壓旋轉蒸發(fā)濃縮溶液至20 ml,加入乳糖,真空冷凍干燥制得復方鹽酸表柔比星納米粒。實驗結果復方鹽酸表柔比星納米粒中鹽酸表柔比星的藥物含量為2. 3%,釓噴酸葡胺的藥物含量為14. 6%,初步實驗顯示,家兔體內(nèi)的卵巢癌的抑制率為68. 73 %,本復方納米粒制劑延長了藥物的作用時間,在體內(nèi)長時間有效抑制腫瘤的生長速度,具有較好的抑瘤效果,降低了藥物的毒副作用。實施例2 —種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒配方及其制備如下 配方
鹽酸表柔比星60 mg
釓噴酸葡胺1. 5 g
PLGA3.0 g
司盤-800. 5 ml
吐溫-800. 6 ml
泊洛沙姆188l.Og
乳糖1. Og
所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為先將60 mg的鹽酸表柔比星、1.5 g釓噴酸葡胺混合后溶解于2 ml蒸餾水中作為水相,稱取適量PLGA (75:25,分子量2.0萬)溶于丙酮氯仿(3 :1)的混合液中配制成濃
7度為40 mg/ml的溶液作為有機相。將有機相加入水相中并加50 μ 1司盤-80,振搖2 min 后,超聲60 s (100 W)即得初乳(W/0);將制得的初乳吸入到2 ml注射器中緩慢滴加至含 30.0 ml蒸餾水的小燒杯中(含有乳化劑泊洛沙姆188 0. 33%,吐溫-80 0.2%),600 rpm攪拌后形成復乳(W/0/W);將復乳快速注入到含蒸餾水150.0 ml的大燒杯中分散均勻,室溫下攪拌36 h至有機溶劑揮發(fā)完全即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液。40°C減壓旋轉蒸發(fā)濃縮溶液至20 ml,加入乳糖,真空冷凍干燥制得復方鹽酸表柔比星納米粒。實驗結果復方鹽酸表柔比星納米粒中鹽酸表柔比星的藥物含量為3. 7%,釓噴酸葡胺的藥物含量為17. 8%,初步7實驗顯示,家兔體內(nèi)的卵巢癌的抑制率為78. 25 %,本復方納米粒制劑延長了藥物的作用時間,在體內(nèi)長時間有效抑制腫瘤的生長速度,具有較好的抑瘤效果,降低了藥物的毒副作用。實施例3 —種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒配方及其制備如下
所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為先將20 mg的鹽酸表柔比星、1.8 g釓噴酸葡胺混合后溶解于2 ml蒸餾水中作為水相,稱取適量制備工藝PLGA (50:50,分子量 1. 5萬)溶于丙酮氯仿(3 1)的混合液中配制成濃度為40 mg/ml的溶液作為有機相。將有機相加入水相中并加40 μ 1司盤-80,振搖2 min后,超聲60 s (100 W)即得初乳(W/ 0);將制得的初乳吸入到2 ml注射器中緩慢滴加至含20.0 ml蒸餾水的小燒杯中(含有乳化劑泊洛沙姆188 0.6%,吐溫-80 0. 25%), 1000 rpm攪拌后形成復乳(W/0/W);將復乳快速注入到含蒸餾水140. 0 ml的大燒杯中分散均勻,室溫25°C下攪拌至有機溶劑揮發(fā)完全即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液。55°C減壓旋轉蒸發(fā)濃縮溶液至20 ml,加入乳糖,真空冷凍干燥制得復方鹽酸表柔比星納米粒。實驗結果復方鹽酸表柔比星納米粒中鹽酸表柔比星的藥物含量為1. 6%,釓噴酸葡胺的藥物含量為13.5%。初步實驗顯示,家兔體內(nèi)的卵巢癌的抑制率為57. 33%,本復方納米粒制劑延長了藥物的作用時間,在體內(nèi)長時間有效抑制腫瘤的生長速度,具有較好的抑瘤效果,降低了藥物的毒副作用。實施例4 一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒配方及其制備如下
配方
鹽酸表柔比星釓噴酸葡胺 PLGA 司盤-80 吐溫-80 泊洛沙姆188 乳糖
20 mg 1.8 g 0 g
1.2 g I-Og
0. 5 ml 0. 5 ml
配方
鹽酸表柔比星釓噴酸葡胺 PLGA
21 mg 1.2 g 1.6 g
吐溫-80 泊洛沙姆188
0. 04 g 1.0 g所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為先將21 mg的鹽酸表柔比星、1.2 g釓噴酸葡胺混合后溶解于1. 5 ml蒸餾水中作為水相,稱取適量PLGA(50:50,分子量2.0萬) 溶于丙酮氯仿(3 1)的混合液中配制成鹽酸表柔比星濃度為14 mg/ml的溶液作為有機相。將有機相加入水相中并加入0.04 g吐溫-80,振搖2 min后,超聲60 s (100 W)即得初乳(W/0);將制得的初乳吸入到2 ml注射器中緩慢滴加至含30.0 ml蒸餾水的小燒杯中 (含有乳化劑泊洛沙姆188 1%),600 rpm攪拌后形成復乳(W/0/W);將復乳快速注入到含泊洛沙姆188的蒸餾水150. 0 ml的大燒杯中分散均勻,室溫下攪拌36 h至有機溶劑揮發(fā)完全即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液。40°C減壓旋轉蒸發(fā)濃縮溶液至20 ml,加入泊洛沙姆188,真空冷凍干燥制得復方鹽酸表柔比星納米粒。實驗結果復方鹽酸表柔比星納米粒中鹽酸表柔比星的藥物含量為2. 5%,釓噴酸葡胺的藥物含量為16.9%。初步實驗顯示,家兔體內(nèi)的卵巢癌的抑制率為69. 35%,本復方納米粒制劑延長了藥物的作用時間,在體內(nèi)長時間有效抑制腫瘤的生長速度,具有較好的抑瘤效果,降低了藥物的毒副作用。實施例5 —種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒配方及其制備如下
所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為先將30 mg的鹽酸表柔比星、1.3 g釓噴酸葡胺混合后溶解于1. 5 ml蒸餾水中作為水相,稱取適量PLGA(75 :25,分子量1. 5萬) 溶于丙酮氯仿(3 :1)的混合液中配制成濃度為20 mg/ml的溶液作為有機相。將有機相加入水相中并加司盤-80,振搖2 min后,超聲60 s (100 W)即得初乳(W/0);將制得的初乳吸入到2 ml注射器中緩慢滴加至含30.0 ml蒸餾水的小燒杯中,600 rpm攪拌后形成復乳 (W/0/W);將復乳快速注入到含蒸餾水150. 0 ml的大燒杯中分散均勻,室溫下攪拌36 h至有機溶劑揮發(fā)完全即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液。40°C減壓旋轉蒸發(fā)濃縮溶液至 20 ml,加入海藻糖,真空冷凍干燥制得復方鹽酸表柔比星納米粒。實驗結果復方鹽酸表柔比星納米粒中鹽酸表柔比星的藥物含量為2. 5%,釓噴酸葡胺的藥物含量為12. 3%,初步實驗顯示,家兔體內(nèi)的卵巢癌的抑制率為65. 37 %,本復方納米粒制劑延長了藥物的作用時間,在體內(nèi)長時間有效抑制腫瘤的生長速度,具有較好的抑瘤效果,降低了藥物的毒副作用。實施例6 —種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒配方及其制備如下
配方
鹽酸表柔比星釓噴酸葡胺 PLGA 司盤-80
30 mg 1.3 g 8 g
0. 04 ml
0.5 g
配方
鹽酸表柔比星釓噴酸葡胺 PLGA
泊洛沙姆188 (表面活性劑) 泊洛沙姆188 (凍干保護劑)
2.8 g 0.6 g 2.0 g
80 mg所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為先將80 mg的鹽酸表柔比星、2. 4 g釓噴酸葡胺混合后溶解于4 ml蒸餾水中作為水相,稱取適量PLGA(25:75,分子量2.0萬)溶于丙酮氯仿(3 :1)的混合液中配制成濃度為20 mg/ml的溶液作為有機相。將有機相加入水相中,振搖2 min后,超聲60 s(100 W)即得初乳(W/0);將制得的初乳吸入到2 ml注射器中緩慢滴加至含30.0 ml蒸餾水的小燒杯中(含有乳化劑泊洛沙姆188),600 rpm攪拌后形成復乳(W/0/W);將復乳快速注入到含蒸餾水150.0 ml的大燒杯中分散均勻,室溫下攪拌36 h至有機溶劑揮發(fā)完全即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液。40°C減壓旋轉蒸發(fā)濃縮溶液至20 ml,加入泊洛沙姆188,真空冷凍干燥制得復方鹽酸表柔比星納米粒。實驗結果復方鹽酸表柔比星納米粒中鹽酸表柔比星的藥物含量為4. 3%,釓噴酸葡胺的藥物含量為18. 9%,初步實驗顯示,家兔體內(nèi)的卵巢癌的抑制率為75. 35 %,本復方納米粒制劑延長了藥物的作用時間,在體內(nèi)長時間有效抑制腫瘤的生長速度,具有較好的抑瘤效果,降低了藥物的毒副作用。實施例7 —種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒配方及其制備如下
PEG-600 (表面活性劑)l.Og 乳糖(凍干保護劑) 1.2 g
所述的復方鹽酸表柔比星納米其粒制備工藝為先將50 mg的鹽酸表柔比星、1.8 g釓噴酸葡胺混合后溶解于2 ml蒸餾水中作為水相,稱取適量PLGA (25:75,分子量10萬)溶于丙酮氯仿(3:1)的混合液中配制成濃度為25 mg/ml的溶液作為有機相。將有機相加入水相中并加PEG-600,振搖2 min后,超聲60 s (100 W)即得初乳(W/0);將制得的初乳吸入到2 ml注射器中緩慢滴加至含30.0 ml蒸餾水的小燒杯中,600 rpm攪拌后形成復乳 (W/0/W);將復乳快速注入到含蒸餾水150. 0 ml的大燒杯中分散均勻,室溫下攪拌36 h至有機溶劑揮發(fā)完全即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液。40°C減壓旋轉蒸發(fā)濃縮溶液至 20 ml,加入乳糖,真空冷凍干燥制得復方鹽酸表柔比星納米粒。 實驗結果復方鹽酸表柔比星納米粒中鹽酸表柔比星的藥物含量為2. 7%,釓噴酸葡胺的藥物含量為14. 7%。初步7 d實驗顯示,家兔體內(nèi)的卵巢癌的抑制率為66. 75%,本復方納米粒制劑延長了藥物的作用時間,在體內(nèi)長時間有效抑制腫瘤的生長速度,具有較好的抑瘤效果,降低了藥物的毒副作用。
配方
鹽酸表柔比星釓噴酸葡胺 PLGA
50 mg 1.8 g
權利要求
1.一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒,其特征在于,各組分和組分之間的重量百分比如下鹽酸表柔比星0. 05% 10% ;釓噴葡胺 0. 1% 20% ;高分子聚合物PLGA 3 20% ;表面活性劑0. 01% 10% ;凍干保護劑10 90%。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒,其特征在于,所述的高分子聚合物PLGA的分子量為0. 5 50000萬,其乳酸羥基乙酸的比例為75 :25、50 :50、 25 75中的一種或幾種材料混合。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒,其特征在于,表面活性劑為吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60、吐溫-80、吐溫-85、泊洛沙姆188、司盤-80、PEG-200、 PEG-400、PEG-600、PEG-800、PEG-1000 中的一種或幾種材料混合。
4.根據(jù)權利要求1所述的一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒,其特征在于,凍干保護劑可為乳糖、海藻糖、泊洛沙姆188中的一種或幾種材料混合。
5.一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒的制備方法包括以下步驟稱取廣100 mg鹽酸表柔比星、2(T2500 mg釓噴酸葡胺混合后溶解于1(T100 ml的蒸餾水中作為水相,稱取 10^3000 mgPLGA溶于丙酮氯仿的混合液中作為有機相;將有機相加入水相中并加處方量的表面活性劑用手振搖纊10 min、50 ^120 w超聲0. 5、min后得初乳(W/0);將制得的初乳通過廣50 ml注射器中緩慢滴加至水相中1(T500 rpm磁力攪拌后形成復乳(W/0/W);將復乳快速倒至100 2000 ml蒸餾水中100 1000 rpm攪拌分散稀釋,在(T40°C下攪拌5 48 h至有機溶劑揮發(fā)完全后即得乳光明顯的淡紅色納米粒膠體溶液,然后在旋轉蒸發(fā)中用 2(T80°C減壓至20(Γ0帕斯卡來濃縮納米粒膠體溶液,加入0.3 50 g凍干保護劑,真空冷凍干燥即得。
6.根據(jù)權利要求5所述的一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒的制備方法其特征在于所述的丙酮氯仿比例為1 0. 5 1 :99,溶劑體積為廣300 ml。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種復方抗腫瘤納米粒制劑及其生產(chǎn)技術,尤其涉及一種復方鹽酸表柔比星PLGA納米粒及其制備方法。針對目前鹽酸表柔比星和釓噴葡胺在體內(nèi)停留時間短暫,治療效果觀察不方便的缺陷,我們將兩者進行配伍使用,制備得到了既含鹽酸表柔比星又含釓噴葡胺的復方納米粒制劑,使藥物既能在腫瘤部位長時間停留釋放,又能對抗腫瘤效果進行實時檢測。此種帶檢測功能的治療藥劑,具有廣闊的臨床應用前景。本復方鹽酸表柔比星納米粒為該帶監(jiān)測藥物的納米粒制劑應用于臨床治療肝癌等應用奠定了基礎。
文檔編號A61P35/00GK102525936SQ20121001817
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月20日 優(yōu)先權日2012年1月20日
發(fā)明者傅紅興, 盧陳英, 宋晶晶, 李慧, 紀建松 申請人:麗水市中心醫(yī)院