專利名稱：一種吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種吉西他濱或其鹽新型制劑及其制備方法，具體來講是涉及吉西他濱或其鹽的脂質(zhì)體及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
吉西他濱是一種破壞細胞復制的二氟核苷類抗代謝物抗癌藥，是去氧胞苷的水溶性類似物，對核糖核苷酸還原酶是一種抑制性的酶作用物的替代物，這種酶在DNA合成和修復過程中，對所需要的脫氧核苷酸的生成是至關(guān)重要的。具有抗瘤譜廣、作用機制獨特、與其他化療藥物無交叉耐藥且毒性反應無疊加等特點。吉西他濱作為一種前藥在細胞內(nèi)是脫氧胸苷激酶磷酸化的良好底物，在酶的作用下轉(zhuǎn)化成下列代謝物吉西他濱一磷酸鹽(dFdCMP)、吉西他濱二磷酸鹽(dFd⑶P)和吉西他濱三磷酸鹽(dFdCTP)其中dFd⑶P和dFdCTP為活性產(chǎn)物。dFd⑶P抑制核糖核苷酸還原酶，從而減少了 DNA合成的修復所需的脫氧核苷酸的量(尤其是dCTP)，低水平的dCTP逆轉(zhuǎn)了脫氧苷激酶正常的負反饋抑制，導致dFdCTP更多的積聚。同時dFdCDP抑制了 dCTP誘導的脫氧胞氨酶對dFdCMP的脫氨作用，且dFdCTP直接抑制脫氧胞苷脫酶，從而使更多的dFdCMP轉(zhuǎn)化成活性代謝物dFdCMP的脫氨作用，且dFdCTP直接抑制脫氧胞苷脫氨酶，從而使更多的dFdCMP轉(zhuǎn)化成活性代謝物dFdCDP，dFd-CTP而dFdCTP則與dCTP競爭結(jié)合進入DNA鏈，插入至DNA鏈中脫氧胞苷的位點，并允許鳥苷與其配對，吉西他濱分子就被此鳥苷“掩蔽”使其免受核糖核酸外切酶的移除修復，然后DNA鏈合成停止，進而DNA斷裂、細胞死亡。現(xiàn)已證實，吉西他濱對多種實體瘤治療效果顯著，尤其是對非小細胞肺癌、胰腺癌和乳腺癌，單一用藥或聯(lián)合其它抗癌藥物都取得很高的療效。吉西他濱在細胞內(nèi)的半衰期較短(介于32 94min)，必須大劑量(推薦劑量為1000mg/m2)、持續(xù)靜脈給藥來維持其有效的藥用濃度和對癌細胞的毒性，但這種毒性同時對正常組織也起作用，這種劑量限制性毒性影響臨床療效。此外，吉西他濱缺乏組織特異性，全身毒副作用大；體內(nèi)代謝迅速，血漿半衰期短；腫瘤耐藥性等缺點。因此，尋找一種能夠使藥物靶向性更強，毒副作用更小的給藥方法是當前研究的重點與難點。含有有效藥物的載藥納米粒子是一種新型的緩釋系統(tǒng)，可改變常規(guī)的給藥方式，有極廣闊的前景，是近年來醫(yī)藥學領(lǐng)域的研究熱點，納米藥在進入體內(nèi)后，藥物在靶區(qū)內(nèi)緩慢釋放，以減輕藥物的不良反應。黃樂松，王春霞，陳志良等“吉西他濱聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒在小鼠腦內(nèi)的靶向分布”(中國醫(yī)院藥學雜志，2008,28(16) :1332)，及黃樂松，王春霞，陳志良等“吉西他濱聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒對小鼠腦移植膠質(zhì)瘤的影響研究”(中國藥房，2009，20 (19)1457)中介紹了一種吉西他濱的納米粒及其對動物的影響。黃君勤，孔俐文“鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體的制備及含量和包封率的測定學性質(zhì)”(中國抗生素雜志，2010，35(1) 30)介紹了一種吉西他濱脂質(zhì)體的制備和含量測定方法。CN101444485B公開了一種吉西他濱脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體包括吉西他濱、磷脂、膽固醇，但該脂質(zhì)體的包封率及分散性均表現(xiàn)不佳，對藥物的穩(wěn)定性及生物利用度均有不利影響。CN101926779A公開了一種吉西他濱固體脂質(zhì)納米粒及其制備方法，該制劑仍存在藥物包封率不高，且穩(wěn)定性不佳的問題，儲藏3個月左右藥品即發(fā)生部分降解。雖然部分藥物的脂質(zhì)體或納米藥的研究已經(jīng)獲得較大進展甚至在臨床中得到了應用。但由于藥物理化性質(zhì)及藥理作用的差別，吉西他濱領(lǐng)域應用脂質(zhì)體或納米藥的技術(shù)仍未獲得突破。從目前研究的成果中來看，現(xiàn)有方法制備的吉西他濱脂質(zhì)體或納米微球存在穩(wěn)定性差、水溶液中易發(fā)生聚集、整體溶蝕或表面降解等問題，無法在臨床中得到實際應用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決上述技術(shù)問題，提供一種能夠提高藥物的包封率和穩(wěn)定性、減少吉西他濱或其鹽在臨床應用中的副作用，且適于臨床廣泛應用的吉西他濱或其鹽納米乳劑注射液。本發(fā)明的目的在于提供一種吉西他濱或其鹽的脂質(zhì)體，包括吉西他濱或其鹽、注 射用油、磷脂和膽固醇，其特征在于，所述吉西他濱或其鹽、注射用油、磷脂和膽固醇的重量比為 I 1-20 50-70 5-30。所述吉西他濱或其鹽的平均粒徑為10-200nm。優(yōu)選的，所述吉西他濱或其鹽、注射用油、磷脂和膽固醇的重量比為I 10-20 60-70 5-10，所述吉西他濱或其鹽的平均粒徑為50-100nm。所述注射用油是指可藥用的選自礦物油、植物油、動物油或合成油中的一種或幾種；所述植物油選自大豆油、花生油、玉米油、芝麻油、紅花油、蓖麻油、棕櫚油、棉籽油、椰子油、中鏈脂肪酸甘油三脂中的一種或多種，優(yōu)選大豆油、花生油、芝麻油或中鏈脂肪酸甘油三脂中的一種或多種；所述動物油選自魚油、鯨蠟油或其混合物。所述磷脂選自卵磷脂、豆磷脂或其混合物，優(yōu)選卵磷脂或豆磷脂。任選的，本發(fā)明的脂質(zhì)體可以經(jīng)過凍干工藝被制備成固體凍干制劑，因此，任選的，本發(fā)明的脂質(zhì)體中還可以包括凍干保護劑。所述凍干保護劑選自甘露醇、聚乙二醇、蔗糖、乳糖、麥芽糖或白蛋白中的一種或多種，優(yōu)選甘露醇、乳糖或麥芽糖中的一種或多種。所述凍干保護劑占所述脂質(zhì)體重量的1% -10%，優(yōu)選1% _5%。優(yōu)選的，所述吉西他濱或其鹽選自鹽酸吉西他濱。本發(fā)明的另一目的還在于，提供一種制備所述吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體的方法，包括如下步驟a)在惰性氣體保護下，將所述吉西他濱或其鹽與所述注射用油混合后高速攪拌，轉(zhuǎn)移到高壓勻質(zhì)機中繼續(xù)勻化得到吉西他濱或其鹽的納米級油溶液；b)制備磷脂與膽固醇的空白脂質(zhì)體；c)將所述吉西他濱或其鹽的納米級油溶液與所述空白脂質(zhì)體混合均勻即得吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體；d)任選地，還包括凍干工藝，最終制得吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體的固體凍干制劑。本發(fā)明的另一目的還在于，提供一種所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體用于制備抗腫瘤藥物的用途。尤其是可以應用于制備治療晚期胰腺癌、中、晚期非小細胞肺癌、晚期復發(fā)乳腺癌、難治復發(fā)卵巢癌等疾病藥物。上述制劑開辟了吉西他濱或其鹽給藥的新途徑，通過處方研究，確立了穩(wěn)定的制劑處方，提高了藥物的包封率和穩(wěn)定性，降低了藥物在使用中的毒副作用，減輕了患者的用
藥痛苦。
具體實施例方式為了更具體地描述該發(fā)明，下面將結(jié)合具體實施例來進一步說明該發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于具體實施例。實施例I 鹽酸吉西他濱 IOg 火豆油150g
大豆磷脂600g
膽固醇IOOg制備方法步驟I、鹽酸吉西他濱油溶液的制備。在惰性氣體保護下，將鹽酸吉西他濱IOg加入到注射用大豆油150g中，在40°C恒溫水浴中高速攪拌20min，將混合溶液轉(zhuǎn)移到高壓勻質(zhì)機中勻化15min,至平均粒徑在IOOnm以下。步驟2、空白脂質(zhì)體的制備。稱取大豆磷脂600g與膽固醇IOOg溶于適量乙醚當中，攪拌下將適量濃度為200mmol/L的硫酸銨溶液加入上述脂質(zhì)溶液中，在攪拌狀態(tài)下水浴超聲，直至形成穩(wěn)定的W/0型乳劑后轉(zhuǎn)入圓底燒瓶內(nèi)，50°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去部分乙醚，達到膠態(tài)后，另加入適量濃度為200mmol/L的硫酸銨溶液，50°C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除盡乙醚。步驟3、鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體的制備。將步驟I所制得的鹽酸吉西他濱油溶液與步驟2所得的空白脂質(zhì)體在攪拌狀態(tài)下混合，超聲，得鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體。實施例2處方組成及各組分含量、制備方法與實施例一相同，不同點在于，鹽酸吉西他濱油溶液的制備過程中，在40°C恒溫水浴中高速攪拌lOmin，將混合溶液轉(zhuǎn)移到高壓勻質(zhì)機中勻化15min,至平均粒徑在120nm以下。實施例3處方組成及各組分含量、制備方法與實施例一相同，不同點在于，鹽酸吉西他濱油溶液的制備過程中，在40°C恒溫水浴中高速攪拌45min，將混合溶液轉(zhuǎn)移到高壓勻質(zhì)機中勻化20min,至平均粒徑在50nm以下。實施例4處方組成及各組分含量、制備方法與實施例一相同，不同點在于，鹽酸吉西他濱油溶液的制備過程中，在40°C恒溫水浴中高速攪拌50min，將混合溶液轉(zhuǎn)移到高壓勻質(zhì)機中勻化30min，至平均粒徑在20nm以下。實施例5制備方法與實施例一相同，不同點在于，將大豆油替換為花生油，其余組分及用量與實施例一相同。實施例6制備方法與實施例一相同，不同點在于，將大豆油替換為芝麻油，其余組分及用量與實施例一相同。實施例7
鹽酸吉西他濱IOg
大豆油150g
大豆磷脂500g
膽固醇IOOg制備方法同實施例一，不同點在于，處方量不同。實施例8
鹽酸吉西他濱IOg
大豆油150g
火豆磷脂700g
膽固醇IOOg制備方法同實施例一，不同點在于，處方量不同。實施例9
鹽酸吉西他濱IOg
大豆油50g
大豆磷脂600g
膽固醇IOOg制備方法同實施例一，不同點在于，處方量不同。實施例10
鹽酸吉西他濱IOg
大豆油IOOg
大豆磷脂600g
膽固醇IOOg制備方法同實施例一，不同點在于，處方量不同。實施例11鹽酸吉西他濱IOg
大豆油150g
大豆磷脂700g
膽固醇IOOg
甘露醇40g制備方法同實施例一，不同點在于，在步驟I鹽酸吉西他濱油溶液制備過程中還加入了 40g甘露醇，此外，還包括了凍干步驟，將最后所獲得的鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體經(jīng)過常規(guī)冷凍干燥過程，制得鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體的凍干粉針。實驗例I :包封率的測定
采用透析法測定鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體的包封率。取鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體Iml置于已處理的透析袋中，將透析袋浸入濃度為200mmol/L的硫酸銨透析液IOOml中，置于磁力攪拌器上攪拌，定時更換透析液，12小時后將透析袋中內(nèi)容物取出置于IOml量瓶中，加入5%乳化劑OP的乙醇溶液Iml破乳，用水定容至刻度。分別取上述溶液各20 ill，進樣分析，計算出鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體中包裹吉西他濱的量W41和W&，根據(jù)公式包封率=(W41/ff,6) *100%
計算鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體的包封率，計算結(jié)果如下表所示
I、、升吣、^I藥物與磷I磷脂與膽固
—_脂重量比醇重量比
實施例一人豆油IOOnm^1^15^6:1 97.1%
實施例二:大豆油120nm1^1590.6%
實施例三大豆油50^1^596.7%
實施例四火豆油20nm1:156;1 87.9%
實施例五花生油IOOnm1^1591.6%
實施例六芝麻油IOOnm^1592.3%
實施例七大豆油IOOnm1^155^1 95.7%
實施例八大豆油IOOnm1157:1 91.2%
實施例九大豆油IOOnm1:56:1 89.3%
實施例十大豆油IOOnm1:106:1 97.6%結(jié)論，從實驗結(jié)果可以看出，本發(fā)明的鹽酸吉西他濱脂質(zhì)體包封率效果表現(xiàn)優(yōu)異，適合于臨床應用。
權(quán)利要求
1.一種吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，包括吉西他濱或其鹽、注射用油、磷脂和膽固醇，其特征在于，所述吉西他濱或其鹽、注射用油、磷脂和膽固醇的重量比為I 1-20 50-70 5-30。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，所述吉西他濱或其鹽的平均粒徑為10-200nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任意一項所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，所述吉西他濱或其鹽、注射用油、磷脂和膽固醇的重量比為I : 10-20 60-70 5-10，所述吉西他濱或其鹽的平均粒徑為50-100nm。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，所述注射用油選自礦物油、植物油、動物油或合成油中的一種或幾種；所述植物油選自大豆油、花生油、玉米油、芝麻油、紅花油、蓖麻油、棕櫚油、棉籽油、椰子油、中鏈脂肪酸甘油三脂中的一種或多種，優(yōu)選大豆油、花生油、芝麻油或中鏈脂肪酸甘油三脂中的一種或多種；所述動物油選自魚油、鯨蠟油或其混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，所述磷脂選自卵磷脂、豆磷脂或其混合物，優(yōu)選卵磷脂或豆磷脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，還包括凍干保護劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，所述凍干保護劑選自甘露醇、聚乙二醇、蔗糖、乳糖、麥芽糖或白蛋白中的一種或多種，優(yōu)選甘露醇、乳糖或麥芽糖中的一種或多種。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，所述凍干保護劑占所述脂質(zhì)體重量的1% -10%,優(yōu)選1% -5%。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體，其特征在于，所述吉西他濱或其鹽選自鹽酸吉西他濱。
10.一種制備權(quán)利要求1-9任意一項所述吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體的方法，包括如下步驟 a)在惰性氣體保護下，將所述吉西他濱或其鹽與所述注射用油混合后高速攪拌，轉(zhuǎn)移到高壓勻質(zhì)機中繼續(xù)勻化得到吉西他濱或其鹽的納米級油溶液； b)制備磷脂與膽固醇的空白脂質(zhì)體； c)將所述吉西他濱或其鹽的納米級油溶液與所述空白脂質(zhì)體混合均勻即得吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體； d)任選地，還包括凍干工藝，最終制得吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體的固體凍干制劑。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-9任意一項所述的吉西他濱或其鹽脂質(zhì)體用于制備抗腫瘤藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種吉西他濱或其鹽納脂質(zhì)體及其制備方法和用途，所述脂質(zhì)體包括吉西他濱或其鹽、注射用油、磷脂和膽固醇，所述吉西他濱或其鹽、注射用油、磷脂和膽固醇的重量比為1∶1-20∶50-70∶5-30。該注射液包封率、穩(wěn)定性更好，副作用更低。
文檔編號A61K31/7068GK102784107SQ20121015437
公開日2012年11月21日 申請日期2012年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月17日
發(fā)明者呂愛鋒, 宋陽, 張春紅 申請人:江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司