專利名稱：小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)療動(dòng)物模型技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及ー種小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的不斷提高，心腦血管病的發(fā)病率正在不斷升高，其發(fā)病率和死亡率已超過腫瘤性疾病而躍居第一，而造成心血管病的重要原因是由于血栓的形成，血栓模型是人類研究血栓性疾病、開發(fā)抗凝、溶栓藥物的重要工具。因此，理想的動(dòng)物血栓模型是掲示其發(fā)病機(jī)制，探討治療方法以及進(jìn)行新藥開發(fā)等必不可少的實(shí)驗(yàn)工具。目前，常用的動(dòng)物動(dòng)脈血栓模型制備方法為注入凝血酶法或損傷動(dòng)脈內(nèi)膜法(包 括機(jī)械損傷、物理損傷及化學(xué)損傷)。注入凝血酶法、機(jī)械損傷法及物理損傷法均可誘發(fā)動(dòng)脈血栓形成，但是造成的冠狀血栓形成的病理過程相距較遠(yuǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供ー種操作簡單、迅速、成功率高、價(jià)格低廉的小鼠頸動(dòng)脈損傷模型制備方法，本發(fā)明的小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備方法，包括下列步驟I.選取出生8-12周、體重20_25g的雄性C57BL/6小鼠；2.對小鼠用水合氯醛以300mg/kg的藥劑量腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻酔，麻醉后仰臥綁定小鼠四肢；3.用75%酒精對小鼠頸動(dòng)脈處皮膚進(jìn)行消毒；4.沿小鼠頸中線做ー長Icm的縱行切ロ，充分暴露頸內(nèi)結(jié)構(gòu)后，分離出ー側(cè)頸動(dòng)脈；5.用彎頭鑷子夾起ー側(cè)頸動(dòng)脈,將浸泡有10%雙氧水的濾紙包裹頸動(dòng)脈,停留3分鐘；6.取下濾紙，用O. 01mol/L PBS清洗刀ロ處三次后縫合；7.待小鼠蘇醒后送回動(dòng)物房，保證食物和飲水供應(yīng)，完成小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備，隨時(shí)待用。通過本發(fā)明的方法制備的小鼠頸動(dòng)脈損傷模型，可應(yīng)用于心血管疾病藥物開發(fā)和新的治療方案的探索。本發(fā)明采用化學(xué)損傷——雙氧水(H2O2)誘導(dǎo)的血栓模型，其血栓結(jié)構(gòu)致密，更接近于臨床自發(fā)性血栓形成的組織學(xué)形態(tài)特征，有助于提高血栓癥診斷與治療實(shí)驗(yàn)研究的科學(xué)性和可信性。經(jīng)對頸動(dòng)脈損傷后小鼠的病理學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)損傷后血管病理變化明顯，易于形成動(dòng)脈粥樣化血栓，與人類頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷后形成血栓塊的病理過程相似。采用本發(fā)明制備的小鼠頸動(dòng)脈損傷模型，能滿足人們對頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷后血栓塊形成和發(fā)展機(jī)制研究的需求，在實(shí)際應(yīng)用中既能真實(shí)地模擬頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷后血栓塊形成的病理過程，更能為系統(tǒng)研究心血管疾病的發(fā)病機(jī)制，尤其是動(dòng)脈粥樣化血栓形成，進(jìn)ー步開發(fā)心血管疾病藥物、開展實(shí)驗(yàn)性治療等奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，本發(fā)明獲取小鼠頸動(dòng)脈損傷模型操作簡單、制模周期短、成功率高、重復(fù)性好、價(jià)格低廉，利于推廣應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備方法，包括下列步驟I.選取出生8-12周、體重20_25g的雄性C57BL/6小鼠；2.對小鼠用水合氯醛以300mg/kg的藥劑量腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻酔，麻酔后仰臥綁定小鼠四肢；3.用75%酒精對小鼠頸動(dòng)脈處皮膚進(jìn)行消毒；
4.沿小鼠頸中線做ー長Icm的縱行切ロ，充分暴露頸內(nèi)結(jié)構(gòu)后，分離出ー側(cè)頸動(dòng)脈；5.用彎頭鑷子夾起ー側(cè)頸動(dòng)脈,將浸泡有10%雙氧水的濾紙包裹頸動(dòng)脈,停留3分鐘，(目的是對小鼠一側(cè)頸動(dòng)脈進(jìn)行損傷)；6.取下濾紙，用O. OImoI/LPBS清洗刀ロ處三次后縫合；7.待小鼠蘇醒后送回動(dòng)物房，保證食物和飲水供應(yīng)，完成小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的 制備，隨時(shí)待用。本發(fā)明的方法制備的小鼠頸動(dòng)脈損傷模型可應(yīng)用于心血管疾病的藥物開發(fā)和新治療方案的探索。
權(quán)利要求
1.ー種小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備方法，其特征在于包括下列步驟 (1)選取出生8-12周、體重20-25g的雄性C57BL/6小鼠； (2)對小鼠用水合氯醛以300mg/kg的藥劑量腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻酔，麻酔后仰臥綁定小鼠四肢； (3)用75%酒精對小鼠頸動(dòng)脈處皮膚進(jìn)行消毒； (4)沿小鼠頸中線做ー長Icm的縱行切ロ，充分暴露頸內(nèi)結(jié)構(gòu)后，分離出ー側(cè)頸動(dòng)脈； (5)用彎頭鑷子夾起ー側(cè)頸動(dòng)脈，將浸泡有10%雙氧水的濾紙包裹頸動(dòng)脈，停留3分鐘； (6)取下濾紙，用O.Olmol/LPBS清洗刀ロ處三次后縫合； (7)待小鼠蘇醒后送回動(dòng)物房，保證食物和飲水供應(yīng)，完成小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備。
2.按權(quán)利要求I所述方法制備的小鼠頸動(dòng)脈損傷模型在心血管疾病的藥物開發(fā)和新治療方案探索中的應(yīng)用。
全文摘要
小鼠頸動(dòng)脈損傷模型的制備方法和應(yīng)用屬醫(yī)療動(dòng)物模型技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明用水合氯醛以300mg/kg的藥劑量對雄性C57BL/6小鼠腹腔內(nèi)注射麻醉，沿小鼠頸中線做一長1cm的縱行切口，將浸泡有10％雙氧水的濾紙包裹一側(cè)頸動(dòng)脈，對其進(jìn)行損傷，制備出小鼠頸動(dòng)脈損傷模型；該模型能滿足人們對頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷后血栓塊形成和發(fā)展機(jī)制研究的需求，在實(shí)際應(yīng)用中既能真實(shí)地模擬頸動(dòng)脈內(nèi)膜損傷后血栓塊形成的病理過程，更能為系統(tǒng)研究心血管疾病的發(fā)病機(jī)制，尤其是動(dòng)脈粥樣化血栓形成，進(jìn)一步開發(fā)心血管疾病藥物、探索治療方案等奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，本發(fā)明獲取小鼠頸動(dòng)脈損傷模型操作簡單、制模周期短、成功率高、重復(fù)性好、價(jià)格低廉，利于推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K33/40GK102670651SQ20121016503
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月25日
發(fā)明者丁瑜, 任文陟, 孫紅, 張嘉保, 張學(xué)鋒 申請人:吉林大學(xué)